专利名称：蝎尾蕉的组织培养繁殖方法
技术领域：
本发明涉及蝎尾蕉的组织培养繁殖方法和所使用的培养基。
背景技术：
蝎尾蕉原属于旅人蕉科(Strelitziaceae)蝎尾蕉属(Heliconia)，现多数学者将其独立为蝎尾蕉科(Heliconiaceae)。蝎尾蕉为多年生草本植物，本属植物原生种有80多种，变种、园艺栽培种、杂交种等的数量400种以上，主要分布于美洲热带地区和太平洋诸岛，其中许多种类其花序具有鲜艳的色彩和奇特的造型，是观赏价值极高的花卉，是道路、公园、庭院的高档绿化树种，可丛植、列植，也可单株种植；较矮生的蝎尾蕉也可盆栽，一些种类由于它们有较强的耐阴性，又可在室内盆栽观赏；同时，由于蝎尾蕉的花色艳丽、保存时间长，又是不可多得的室内高档切花材料，适合于作花篮、壁瓶、挂篮等，可用来装饰宾馆、舞厅、酒店和商场橱窗等，也可用于家庭观赏。目前我国市场产品数量少，种苗奇缺。
蝎尾蕉的繁殖常采用分株繁殖方法，繁殖系数低，而进行组织培养时外植体去污难，不定芽诱导生长慢，增殖系数不高。本发明专利利用特殊的外植体处理方法对外植体进行处理，并利用独特的培养基进行不定芽的诱导和丛生芽增殖及壮苗生根等，能进行工厂化生产并获得大量试管苗，为满足市场的需要进行推广提供一条有效的途径。
目前国内外仅对少数蝎尾蕉品种进行了组织培养的初步实验研究，未有大规模生产和专利申请的报道。
发明内容
本发明对10多种蝎尾蕉属植物的组织培养和快速繁殖技术进行了系统研究。提供了蝎尾蕉属植物的组织培养繁殖方法和所使用的培养基。其外植体消毒方法、培养基成分独特且简单实惠，应用价值高。蝎尾蕉的组织培养繁殖方法，本发明所提供的蝎尾蕉的组织培养繁殖方法包括下述步骤1.材料此发明已实验的材料有10种蝎尾蕉垂序蝎蕉蕉(Heliconia rostrataRuiz & Pavon)、扇形蝎尾蕉(H.librata Griggs)、红黄蝎尾蕉(H.latispatha Benthamcv.Red-Yellow Gyro)、金火炬蝎尾蕉(H.psittacorum L.f.X H.spathocircinataAristeguieta cv.Golden Torch)、桔红蝎尾蕉(H.psittacorum X H.marginata)、火鸟蝎尾蕉(H.Stricta Huber cv.Fire Bird)、彩虹蝎尾蕉(H.psittacorum L.f.cv.Sassy)、圣温红蝎尾蕉(H.Psittacorum L.f.cv.St.Vincent Red)、多色蝎尾蕉(H.psittacorum L.f.cv.Andromeda)、火红蝎尾蕉(H.Densiflora Verlot cv. Fire Flash)10种材料均取自华南植物园蝎尾蕉园。
2.外植体诱导材料消毒的方法从田间挖取生长旺盛的垂序蝎尾蕉根状茎，除去根与叶，用自来水冲洗干净后，用0.1％的高锰酸钾溶液浸泡5分钟，取出毛巾将根状茎抹干，再放入0.1％的多菌灵溶液浸泡5分钟，带少量药剂用黑色的塑料袋包装好放在30℃左右的恒温箱中暗培养，在茎节处能形成4-6厘米的新芽，以此新芽做为初步灭菌的外植体。将外植体在超净工作台上用酒精浸泡30秒后，再用0.1％升汞浸泡10分钟，无菌水冲洗3次，用解剖刀剥除芽鳞片，每剥一层鳞片，用0.1％升汞浸泡1分钟，无菌水冲洗三次，直至剥至露出生长点为止。剥取的生长点越小，污染率越少，但出芽速度较慢。
3.不定芽诱导切取5立方厘米左右的带生长点的组织块接种到启动培养基MS+6-苄基嘌呤5-10毫克/升+萘乙酸0.5-1.0毫克/升+15％椰子水上诱导不定芽，30天左右有不定芽形成。培养基均含蔗糖30克/升，pH5.5-5.8，琼脂0.7％。培养温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照12小时/天。椰子水由新鲜上市的椰子中的汁水经过滤而来。加入椰子汁能明显提高不定芽的出芽速度和不定芽的生长速度。
4.继代增殖培养40天左右将不定芽转移到MS+6-苄基嘌呤5-10毫克/升+萘乙0.5-1.0毫克/升培养基上继代增殖，一般40天左右为一个继代周期。在增殖过程中去除椰子汁主要是为了降低成本。
5.壮苗培养增殖到一定代数后接种到壮苗培养基MS+6-苄基嘌呤1-2毫克/升+萘乙酸0.1-0.2毫克/升上壮苗。
6.生根培养壮苗后，当苗高2-3厘米高时可用于生根，在生根培养基MS+萘乙酸0.5毫克/升+吲哚丁酸2.0毫克/升+0.5％活性炭上能形成完成植株。加入活性炭根数增多，能防止部分切口褐变。
7.试管苗移栽当试管苗能长至4-5厘米高时，转移到自然光下炼苗10天，当试管苗能长至5-6厘米高时，将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入泥炭加河沙的混合基质中，保持适当通风和足够的湿度，1周左右试管苗可恢复生长，移栽的成活率均可达90％-100％。进行炼苗处理有利于试管苗角质层的形成和对环境的适应能力，移栽成活率增高。
本发明提供的蝎尾蕉的组织培养繁发明具有外植体去污成功率较高，出苗快，稳定性高，苗壮，种苗品质好、抗性强、生长良好等优势。
2.外植体诱导材料消毒的方法从田间挖取生长旺盛的垂序蝎尾蕉根状茎，除去根与叶，用自来水冲洗干净后，用0.1％的高锰酸钾溶液浸泡5分钟，取出毛巾将根状茎抹干，再放入0.1％的多菌灵溶液浸泡5分钟，带少量药剂用黑色的塑料袋包装好放在30℃左右的恒温箱中暗培养，在茎节处能形成4-6厘米的新芽，以此新芽做为初步灭菌的外植体。将外植体在超净工作台上用酒精浸泡30秒后，再用0.1％升汞浸泡10分钟，无菌水冲洗3次，用解剖刀剥除芽鳞片，每剥一层鳞片，用0.1％升汞浸泡1分钟，无菌水冲洗三次，直至剥至露出生长点为止。
3.不定芽诱导切取5立方厘米左右的带生长点的组织块接种到启动培养基MS+6-苄基嘌呤10毫克/升+萘乙酸1.0毫克/升+15％椰子水上诱导不定芽，30天左右有不定芽形成。培养基均含蔗糖30克/升，pH5.5-5.8，琼脂0.7％。培养温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照12小时/天。椰子水由新鲜上市的椰子中的汁水经过滤而来。
4.继代增殖培养40天左右将不定芽转移到MS+6-苄基嘌呤10毫克/升+萘乙酸1.0毫克/升培养基上继代增殖，一般40天左右为一个继代周期。
5.壮苗培养增殖到一定代数后接种到壮苗培养基MS+6-苄基嘌呤2毫克/升+萘乙酸0.2毫克/升上壮苗。
6.生根培养壮苗后，当苗高2-3厘米高时可用于生根，在生根培养基MS+萘乙酸0.5毫克/升+吲哚丁酸2.0毫克/升+0.5％活性炭上能形成完成植株。
7.试管苗移栽当试管苗能长至4-5厘米高时，转移到自然光下炼苗10天，当试管苗能长至5-6厘米高时，将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入泥炭加河沙的混合基质中，保持适当通风和足够的湿度，1周左右试管苗可恢复生长，移栽的成活率均可达90％以上。
权利要求
1.一种蝎尾蕉的组织培养繁殖方法，其特征在于该方法包括如下的步骤1)外植体诱导材料消毒从田间挖取生长旺盛的垂序蝎尾蕉根状茎，除去根与叶，用自来水冲洗干净后，用0.1％的高锰酸钾溶液浸泡5分钟，取出毛巾将根状茎抹干，再放入0.1％的多菌灵溶液浸泡5分钟，带少量药剂用黑色的塑料袋包装好放在30℃-35℃的恒温箱中暗培养，在茎节处能形成4-6厘米的新芽，以此新芽做为初步灭菌的外植体；将外植体在超净工作台上用酒精浸泡30秒后，再用0.1％升汞浸泡10分钟，无菌水冲洗3次，用解剖刀剥除芽鳞片，每剥一层鳞片，用0.1％升汞浸泡1分钟，无菌水冲洗三次，直至剥至露出生长点为止；2)，不定芽诱导切取5立方厘米左右的带生长点的组织块接种到启动培养基MS+6-苄基嘌呤5-10毫克/升+萘乙酸0.5-1.0毫克/升+15％椰子水上诱导不定芽，30天左右有不定芽形成。培养基均含蔗糖30克/升，pH 5.5-5.8，琼脂0.7％。培养温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照1 2小时/天。椰子水由新鲜上市的椰子中的汁水经过滤而来。加入椰子汁能明显提高不定芽的出芽速度和不定芽的生长速度。3)，继代增殖培养40天左右将不定芽转移到MS+6-苄基嘌呤5-10毫克/升+萘乙0.5-1.0毫克/升培养基上继代增殖，一个周期；4)，壮苗培养增殖到一定代数后接种到壮苗培养基MS+6-苄基嘌呤1-2毫克/升+萘乙酸0.1-0.2毫克/升上壮苗；5)，生根培养壮苗后，当苗高2-3厘米高时可用于生根，在生根培养基MS+萘乙酸0.5毫克/升+吲哚丁酸2.0毫克/升+0.5％活性炭上能形成完成植株；6)，试管苗移栽当试管苗能长至4-5厘米高时，转移到自然光下炼苗10天，当试管苗能长至5-6厘米高时，将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入泥炭加河沙的混合基质中，保持适当通风和足够的湿度，1周后试管苗可恢复生长；
2.根据权利要求1中所述的蝎尾蕉的组织培养繁殖方法，其特征在于所述的培养基均含蔗糖30克/升，pH5.5-5.8，琼脂0.7％，培养条件为温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照12小时/天，培养基中所含的椰子水由新鲜上市的椰子中的汁组成。
3.根据权利要求1中所述的蝎尾蕉的组织培养繁殖方法，其特征在于所述的材料蝎尾蕉是垂序蝎蕉蕉Heliconia rostrata Ruiz & Pavon、扇形蝎尾蕉H.librata Griggs、红黄蝎尾蕉H.latispatha Bentham cv.Red-Yellow Gyro、金火炬蝎尾蕉H.psittacorum L.f.X H.spathocircinata Aristeguieta cv.Golden Torch、桔红蝎尾蕉H.psittacorum X H.marginata、火鸟蝎尾蕉H.Stricta Huber cv.Fire Bird、彩虹蝎尾蕉H.psittacorum L.f.cv Sassy、圣温红蝎尾蕉H.Psittacorum L.f.cv.St.Vincent Red、多色蝎尾蕉H.psittacorum L.f.cv.Andromeda、火红蝎尾蕉H.Densiflora Verlot cv. FireFlash。
全文摘要
本发明涉及蝎尾蕉的组织培养繁殖方法和所使用的培养基。蝎尾蕉是一种新型的热带高档花卉，其株形美观，花序具有鲜艳的色彩和奇特的造型，观赏价值极高，可做园林绿化、盆栽或切花观赏，应用范围广，市场潜力大，目前市场产品数量少，种苗奇缺。蝎尾蕉的繁殖常采用分株繁殖方法，繁殖系数低，以组织培养法可以加速其繁殖速度获得大量试管苗，为满足种苗市场的需要提供一条有效的途径。目前国内外仅对少数蝎尾蕉品种进行了组织培养的初步实验研究，未有大规模生产和专利申请的报道。本项目对10多种蝎尾蕉属植物的组织培养和快速繁殖技术进行了系统研究。提供了蝎尾蕉属植物的组织培养繁殖方法和所使用的培养。其外植体消毒方法、培养基成分独特且简单实惠，应用价值高。
文档编号A01H4/00GK1442045SQ03114209
公开日2003年9月17日 申请日期2003年4月14日 优先权日2003年4月14日
发明者曾宋君, 吴坤林, 张奕奇, 段俊 申请人:中国科学院华南植物研究所