改善虾健康的材料和方法

专利名称：改善虾健康的材料和方法
改善虾健康的材料和方法与相关申请的交叉参考本申请要 求2008年2月17日提交的美国临时申请系列号No. 61/029，348的权益， 所述临时申请完整引入本文作为参考。
背景技术：
世界人口正在快速增加，导致对海产品需求的同步增加。而且，最近证明有壳的水 生动物之有益特性的研究，使得需求进一步增加(见Takezaki，T.等人，“Diet and lung cancer risk from a 14-year population-based prospective study in Japan :with special reference to fish consumption,，，Nutr Cancer,45(2) 160-7 (2003)；禾口 Su, X. ^Α "0mega-3polyunsaturated fatty acid content in different edible portions of commercial scallop,，，Asia Pac J Clin Nutr. ,12 Suppl :S63(2003))o已经开发了多种方法尝试缩小海产品供应和需求之间的差距。例如，现在在水产 养殖中生产很多不同有壳的水生动物物种。一些物种在完整生活周期培养，而另一些物种 从野生收获的种子进行培养。还有一些物种是在孵卵所中饲养并释放到开放水域用于以后 收获。不幸的是，使用目前的方法生产销售规模的有壳的水生动物在时间和运作上的成本 非常昂贵。对于大多数有壳的水生动物而言生活周期漫长。同样地，疾病和污染的水对任何 有壳的水生动物水产养殖、孵卵所和农场都是威胁。在有壳的水生动物中大多数疾病由机 会致病菌引起，机会致病菌即在衰弱或应激的有壳的水生动物中导致疾病的细菌。微观海 洋生物(如产生被称为蛤贝毒(paralytic shellfish poison, PSP)毒素的单细胞甲藻) 可在暴露的有壳的水生动物中累积并对最终消费者有害。疫苗和抗生素是两种可获得的用于保护有壳的水生动物抵抗疾病的方法。药物 (即抗生素、疫苗等等)的使用很昂贵，在水产养殖中不得不大大减少，以避免环境危害和 发生抗药性的风险。因此，存在持续的增强有壳的水生动物免疫原性的需求。发明简述本发明提供用于改善有壳的水生动物健康的材料和方法。特别地，本发明提供材 料和方法用于加速和/或增加有壳的水生动物生长；改善对疾病和其它污染物的免疫；和 /或增加幼虫产生和存活的成功率。本发明提供用于改善有壳的水生动物(如虾)健康的方法，通过向有壳的水生动 物施用半胱胺化合物进行。特别地，向有壳的水生动物引入有效量的半胱胺化合物以促进 有壳的水生动物的健康、生长和种群数量。例如，向有壳的水生动物施用半胱胺或多种半胱 胺盐。在优选的实施方案中，使用半胱胺促进虾的健康。在本文特别说明的实施方案中， 给虾喂食环糊精制剂中的半胱胺。本文特别说明的是使用Aquanin Plus来改善虾的健康。附图简述


图1的图说明接受不同浓度Aquanin Plus 0、10、20、30、40和50天后，对虾 (Vannamei)的酚氧化酶(分钟/毫克蛋白质)的量。
图2的图说明接受不同浓度Aquanin Plus 0、10、20、30、40和50天后，对虾的血
细胞(X IO6细胞/毫升)的量。图3的图说明接受不同浓度Aquanin Plus 0、10、20、30、40和50天时，对虾进行
外源病原体吞噬的白细胞(吞噬细胞)的百分数。图4的图说明在接受不同浓度Aquanin Plus 0、10、20、30、40和50天时，与对照 组比较对虾血清哈氏弧菌(Vibrio harveyi)浓度的降低。图5的图说明在接受不同浓度的Aquanin Plus 50天后，用WSSV激发后对虾的存 活百分比。图6的图说明在接受不同浓度的Aquanin Plus 60天后，对虾的存活百分比。图7的图说明在接受不同浓度的Aquanin Plus 60天后，对虾重量增加的差别。发明详述本发明提供独特的方法用于改善有壳的水生动物的健康。特别地，本发明提供用 于加速和/或增加有壳的水生动物中的生长；改善对疾病和其它污染物的免疫性；和/或 增加幼虫产生和存活的成功率的材料和方法。特别地，本发明涉及向有壳的水生动物施用有效促进有壳的水生动物健康、生长 和种群数量的量的半胱胺化合物。本发明的一个实施方案涉及改善有壳的水生动物的健康 的组合物的用途，其中组合物包含半胱胺化合物。本文特别示例性说明使用环糊精制剂中 的半胱胺。优选地，使用β-环糊精半胱胺盐酸化物促进虾的健康。如本文所考虑的，有壳的水生动物包括具有可包含在壳内的柔软、未分节躯体的 水生无脊椎动物。例如，提及有壳的水生动物包括甲壳动物如对虾、虾、螯虾、龙虾、蟹、大螯 虾；和软体动物如鲍鱼、青蛤、短齿蛤、牡蛎、扇贝、章鱼、鱿鱼和蜗牛。本文提及有壳的水生 动物也可包括海龟、海胆和海参。在本文使用时，术语“有壳的水生动物的健康”通常是指影响有壳的水生动物的整 体状况的多种参数。有壳的水生动物健康所依据的具体参数包括有壳的水生动物的大小 (或生长)；生活周期时间的长度；对疾病和污染暴露充分应对的免疫系统的能力；和繁殖 后代的能力。如本文所考虑的，改善有壳的水生动物的健康可包括降低有壳的水生动物的 死亡率；增加抗体滴度/淋巴细胞数量；和/或增加细胞因子分泌。在本文使用时，“同时施用”和“同时地施用”包括施用适合与本发明方法(施用半 胱胺化合物)一起使用的化合物或方法以改善有壳的水生动物的健康。例如，可将维生素、 抗生素和/或疫苗与本发明的材料和方法同时施用以改善有壳的水生动物的健康。根据本发明，化合物可与半胱胺化合物混合提供，如在水性乳剂中；或者化合物和 半胱胺作为单独的化合物提供，如例如，连续、同时或在不同时间施用单独的组合物。优选 地，如果用于改善有壳的水生动物健康的半胱胺化合物和已知试剂(或治疗方法)单独施 用，它们相互之间在施用时间上不能间隔太远以致于半胱胺化合物和已知试剂(方法)不 能相互作用。在本文使用时，提及的“半胱胺化合物”包括半胱胺和半胱胺盐。所考虑的半胱胺 盐包括，但不限于，半胱胺盐酸化物、cysteamine chlorohydrate、半胱胺醋酸盐、半胱胺磷 酸盐、半胱胺硝酸盐 、半胱胺溴化物、半胱胺酒石酸氢盐和半胱胺氟化物。还包括在本发明 的范围内的是半胱胺类似物、衍生物、缀合物和代谢产物，其具有本文描述的改善有壳的水生动物健康的能力。多种半胱胺的类似物、衍生物、缀合物和代谢产物是本领域技术人员 熟知的并可被容易地使用，包括例如，如在美国专利6，521，266 ；6, 468，522 ；5, 714，519 ；和 5，554，655所述化合物、组合物和传送方法。在本文使用时，术语“有效量”是指可诱导所需生物应答的必需量。按照本发明， 半胱胺化合物的有效量是改善有壳的水生动物健康的必需量。在优选实施方案中，半胱胺 化合物的有效量是加速和/或增加有壳的水生动物生长；改善对疾病和其它污染物的免疫 应答；增强生育力；和/或增加幼虫产生和存活成功的必需量。例如，有壳的水生动物健康 的改善可以是 1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、 65%,70%,75%,80%,85%,90%,95% ,100 %,150%,200%,250%^； 300%的生长加速和 /或增加；对疾病和/或污染物免疫应答的改善；和/或在生育力的增强。更特别地，改善有 壳的水生动物健康是由于降低有壳的水生动物死亡率；增加的抗体滴度/淋巴细胞数量； 和增加的细胞因子分泌。在一些实施方案中，半胱胺化合物是半胱胺盐酸化物，并且组合物中有效量是组 合物的大约20-40%。在其他实施方案中，半胱胺盐酸化物在组合物中以大于或等于组合物 的 0. 01%,0. 05%、1%、2%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%或 40% 以上的量 存在。在另一些实施方案中，半胱胺盐酸化物在组合物中以大于或等于每千克组合物中15 克、20克、25克或30克的量存在。在其他实施方案中，半胱胺盐酸化物在组合物中以大于 或等于每千克组合物中200克、225克、250克、275克或300克的量存在。在另一些实施方 案中，半胱胺的存在可以是每吨饲料中大约150克至大约1，000克，更优选地在每吨饲料中 大约200克和900克之间，和甚至更优选地在在每吨饲料中250克和500克之间。在另一 些实施方案中，半胱胺盐酸化物在组合物中以每吨饲料中大约270克存在。加速的和/或增加的生长在本发明的一个实施方案中，向有壳的水生动物施用半胱胺化合物以加速和/或 增加生长。如本文所考虑的，“加速和/或增加生长”是指在正常生活周期中缩短发育期和 /或增加有壳的水生动物的总体大小的能力。在优选的实施方案中，向虾施用半胱胺盐酸化 物以加速和/或增加生长。改善免疫应答在另一实施方案中，向有壳的水生动物施用半胱胺化合物以改善对疾病和其它污 染物的免疫应答。如本文所考虑的，“改善免疫”是指促进有壳的水生动物的免疫系统从而 更有效地攻击有害的微生物和/或污染物，并治愈由于暴露于此类微生物和/或污染物而 引起的有壳的水生动物的任何损害。通过改善免疫，本发明也增加幼虫产生和存活成功的 可能性。在优选的实施方案中，向虾施用半胱胺化合物以改善对疾病和其它污染物的免疫 应答。根据本发明，将半胱胺化合物引入至有壳的水生动物(如虾)能够(1)积极增加 有壳的水生动物的免疫从而促进对疾病和/或污染物的抵抗力；和/或(2)治疗和促进从 目前暴露于有害微生物和/或污染物中快速恢复。如本文所考虑的，本发明改善有壳的水生动物对多种微生物和污染物的免疫应 答。例如，本发明改善牡蛎对多种疾病和病原体的免疫应答，多种疾病和病原体包括，但不 限于，牡蛎盘病毒疾病(Oyster Velar Virus Disease, OVVD)；葡萄牙牡蛎的鳃病；牡蛎的血细胞感染病毒(Haemocytic Infection Virus)疾病；牡蛎的疱 疹类型病毒疾病；牡 蛎的细胞外巨大“立克次氏体”;牡蛎的海水伯金斯虫(Perkinsus marinus)病(“Dermo” 疾病)；欧洲扁平牡蛎的伯金斯虫属物种；牡蛎的肾脏球虫目(Kidney Coccidia)；牡 贩的Minchinia armoricana ；牡蛎的马尔太虫病(Marteiliosis) (Aber疾病)；牡蛎的 Marteilioides chungmuensis ；牡贩的Bonamia ostreae ；牡贩的卵细胞疾病；幼牡贩的侵 袭性纤毛虫；牡蛎的Mytilicola intestinalis病(红色蠕虫疾病)；牡蛎的血细胞瘤形 成(Haemocytic Neoplasia)；东方牡蛎的幼年病；牡蛎的病毒性配子母细胞肥大(Viral Gametocytic Hypertrophy)；牡贩的诺卡菌病；牡贩的 Mikrocytos machine 病(Denman Island疾病)；牡蛎的尼氏单孢子虫(Haplosporidium nelsoni) (MSX)；牡蛎的沿岸单 ？包子虫(Haplosporidium costale) (SSO)；牡贩的绞纽伤壳菌(Ostracoblabe impIexa) 病(外壳疾病)；牡蛎吸虫疾病；牡蛎的东方贻贝蚤(Mytilicola orientalis)(红色蠕 虫)；牡蛎鳃上的寄生挠足虫；牡蛎的豆蟹(Pea Crab)；牡蛎的马佩奎蚝(Malpeque)疾 病；珍珠牡蛎的组病毒样病毒(Papova-Like Virus)感染；新西兰牡蛎的顶复门寄生虫 (Apicomplexan Parasite) ；W^M ^ft ； W Marteilia sydneyi ；
牡贩的Marteilioides branchial is ；Bonamia exitiosus(新西兰拖网牡贩的波纳米 欧病(Bonamiasis)) ；Bonamia sp.(澳大利亚牡蛎的波纳米欧病)；牡蛎的Mikrocytos roughleyi (澳大利亚冬季疾病)；拖网牡蛎的微孢子虫病；牡蛎的立克次氏体样和衣原体 样生物；牡蛎的弧菌属物种病(幼虫和幼牡蛎的弧菌病)；幼牡蛎的铰合韧带疾病；幼虫 牡蛎的消化道嵌塞；牡蛎的簇虫寄生；牡蛎的六鞭虫病；牡蛎的裂冠纤毛虫属样纤毛虫； 牡蛎的Sphenophyra样纤毛虫；牡蛎的鳃车轮虫(Trichodinids)；牡蛎的Sirolpidium zoophthorum病(幼虫霉菌病)；牡蛎的鳃涡虫纲；牡蛎的线虫寄生；牡蛎的壳钻孔多毛虫 (Shell-boring Polychaetes)；牡蛎的壳钻孔海绵状动物(Shell-burroing Sponges)和牡 贩的 Pyramidellid Snail。在另一个例子中，本发明能够改善短齿蛤对多种疾病和病原体的免疫应答，多种 疾病和病原体包括，但不限于，短齿蛤的病毒样疾病；短齿蛤的单孢子虫(Haplosporidian) 感染；短齿給的 Marteilia refringens/maurini ；Steinhausia mytiIovum 病(短齿 蛤卵细胞疾病)；短齿蛤外壳的光养Endolity (Phototrophic Endolity)侵入；短齿蛤 的Proctoeces maculates吸虫疾病；短齿蛤鳃涡虫纲(Gill Turbellaria)；短齿蛤 的Mytilicola intestinalis病(红色蠕虫疾病)；短齿蛤的肾脏球虫目；短齿蛤的 Buc印halid吸虫疾病；短齿蛤的东方短齿蛤蚤(Mytilicola orientalis)(红色蠕虫)；短 齿蛤的豆蟹；短齿蛤的血细胞瘤形成；短齿蛤的Mytilicola porrecta(红色蠕虫)；短齿 蛤的立克次氏体样和衣原体样生物；短齿蛤的簇虫寄生；短齿蛤的细胞内纤毛虫；短齿蛤 的Phenophyra样纤毛虫；短齿蛤的Ancistrum mytiIi鳃纤毛虫；短齿蛤的霉菌角质层腐 肉(Mycotic Periostracal Sloughing)形成；短齿蛤的吸虫囊蚴；短齿蛤鳃上的寄生挠足 虫；短齿蛤的壳钻孔多毛虫(Shell-boring Polychaetes)；和短齿蛤的壳钻孔海绵状动物 (Shell-burrowing Sponges)。在又一个例子中，本发明能够改善青蛤和鸟蛤对多种疾病和病原体的免疫应答， 多种疾病和病原体包括，但不限于，青蛤的病毒感染；马尼拉青蛤的褐色环疾病(Brown Ring Disease)；青蛤和鸟蛤的伯金斯虫属；青蛤的单孢子虫(Haplosporidian)感染；青蛤的微孢子虫(Microsporidiosis)；幼象拔蛘(Larval Geoduck Clam)的阿米巴鞭 毛体(Amoeboflagellate)疾病；青蛤和鸟蛤的Mytilicola intestinalis病(红色蠕 虫疾病)；太平洋缢蛏(Pacific Razor Clam)的核内包涵体X(NIX)；青蛤的肾脏球虫 目；青蛤的QPX(未知的圆青蛤类寄生虫)；青蛤和鸟蛤的东方短齿青蛤蚤(Mytilicola orientalis)(红色蠕虫)；青蛤和鸟蛤中的豆蟹；青蛤的血细胞瘤形成；青蛤的生殖腺瘤 形成；在葡萄牙青蛤的Endonucleobiotic细菌；鸟蛤的支原体样感染；青蛤的隐孢子虫 病；砗磲(Giant Clam)的马特贝属样寄生虫；鸟蛤的阿米巴病；青蛤和鸟蛤的立克次氏 体样和衣原体样生物体；青蛤的弧菌属物种病(幼虫和幼青蛤的弧菌病)；幼青蛤的铰合 韧带疾病；青蛤和鸟蛤的簇虫寄生；青蛤和鸟蛤的Sphenophyra样纤毛虫；青蛤的派氏钩 毛虫(Ancistrocoma pelseneeri)和A.myae纤毛虫；青蛤和鸟蛤的鳃车轮虫属；青蛤的 Sirolpidium zoophthorum病(幼虫霉菌病)；青蛤的涡虫纲；青蛤和鸟蛤的吸虫囊蚴； 青蛤的壳钻孔多毛虫(Shell-boring Polychaetes)；和青蛤和鸟蛤的虹吸蜗牛(Siphon Snails)。在另一个例子中，本发明能够改善扇贝对多种疾病和病原体的免疫应答，多 种疾病和病原体包括，但不限于，在亚洲日本扇贝的伯金斯虫属物种；扇贝单孢子虫 (Haplosporidian)；扇贝的马特贝属物种；扇贝鳃的育囊挠足虫；扇贝中的豆蟹；扇贝的细 胞内细菌疾病；扇贝的细菌脓肿损害；扇贝的Perkinsus qugwadi (SPX)；扇贝的肾脏球虫 目；扇贝的Perdinsus karIssoni ；扇贝原生生物G ；扇贝的微孢子虫(Microsporidiosis)； 扇贝的吸虫囊蚴；扇贝的病毒样感染；扇贝的衣原体病；扇贝的立克次氏体样和衣原 体样生物体；扇贝的弧菌属物种病(幼虫弧菌病)；扇贝的簇虫寄生；扇贝的鳃车轮虫 (Trichodinids)；扇贝的鳃涡虫纲(Turbellaria)；扇贝的的线虫寄生；扇贝的壳钻孔 多毛虫(Shell-boring Polychaetes)；和扇贝的壳钻孔海绵状动物(Shell-borrowing Sponges)。在另一个例子中，本发明能够改善鲍鱼对多种疾病和病原体的免疫应答，多种 疾病和病原体包括，但不限于，鲍鱼的肾脏球虫目；鲍鱼中的帚虫多毛感染(Sabellid Polychaete Infestation)疾病；鲍鱼的鲍盘形虫(Labyrinthuloides haliotidis)；鲍鱼 的肌萎缩；培养鲍鱼的水疱疾病；鲍鱼的萎缩综合征；鲍鱼的Perkinsus olseni ；鲍鱼的单 孢子虫(Haplosporidian)寄生虫；鲍鱼的真菌疾病；鲍鱼的线虫寄生；鲍鱼的细菌疾病； 鲍鱼相关的纤毛虫；鲍鱼的吸虫囊蚴(Trematode Metacercariae)；和鲍鱼的壳钻孔多毛 虫(Shell-borrowing Polychaetes)。在又一个例子中，本发明能够改善海胆对多种疾病和病原体的免疫应答， 多种疾病和病原体包括，但不限于，海胆的线虫(Namatode)寄生；秃头海胆疾病 (Bald-Sea-Urchin Disease)；海胆的Paramoeba invadens ；海胆的斑点生殖腺疾病；黑海 胆瘟疫；海胆的吸虫囊蚴；和海胆的涡虫纲寄生。在又一个例子中，本发明能够大螯虾改善 对多种疾病和病原体的免疫应答，多 种疾病和病原体包括，但不限于，大螯虾的Paramoeba perniciosa(副变形虫病) ’大 螯虾的高夫败血症；大螯虾的Anophryoides haemophila病(纤毛虫疾病)；大螯虾的 Pseudocarcinonemetes homari ；大螯虫下的微抱子虫病(Microsporidosis)；挪威大螯虫下的 血钩虫属物种；大螯虾的Carcinonemertes australiensis ；大螯虾的寄生挠足虫；大螯虾的弧菌属物种病(幼大螯虾弧菌病)；大螯虾的几丁质水解细菌外壳疾病(Chitinolytic Bacterial Shell Disease)；大螯虾的簇虫寄生；大螯虾的链壶菌(Lagenidium)物种 病(真菌疾病)；大螯虾的镰孢菌属物种病(真菌或烧伤斑疾病)；大螯虾的海壶菌 (Haliphthoros)物种病(真菌疾病)；大螯虾中的线虫；大螯虾中的吸虫囊蚴；和大螯虾中 的棘头虫幼虫。 在又一个例子中，本发明能够改善虾和对虾对多种疾病和病原体的免疫应答，多 种疾病和病原体包括，但不限于，长额虾科(Pandalid)虾的立克次氏体样感染；长额虾 科虾的原生生物病原体(SPP)；虾和对虾的Sylon(甲头目动物疾病)；Penaeid虾的对 虾杆状病毒(Baculovirus penaei)病(BP病毒疾病)；Penaeid虾的斑节对虾杆状病毒 (Monodon Baculovirus) (MBV)；Penaeid虫下白勺巾J (Baculoviral Midgut-gland Necrosis) (BMN) ；Penaeid虾的白斑综合征杆状病毒复合体病(White Spot Syndrome Baculovirus Complex)；虫下禾口对虫下的月干姨腺小型病毒(Hepatopancreatic Parvovirus, HPV)疾病；Penaeid虾的传染性皮下和造血系统坏死病毒(Infectious Hypodermal and Haematopoietic Necrosis Virus, IHHNV) ；Penaeid 虾的淋巴器官细小样病毒疾病 (Lymphoidal Parvo-Iike VirusDisease) ；Penaeid ff W E 2S ^ # (Lymphoid Organ Vacuolization Virus, LOW) ；Penaeid 虾的呼肠孤样病毒(Reo-like Virus, REO)疾病；Penaeid虾的桃拉综合征病毒(Taura Syndrome Virus)；美洲Penaeid虾的
(Rhabdovirus Disease) ；Penaeid ff(Yellow-head Virus
Disease,YHD) ；Penaeid虾的立克次氏体感染；Penaeid虾的引起坏死的肝胰(Necrotizing Hepatopancreatic) ；Penaeid虾的分枝杆菌病；培养的Kurama对虾的杀对虾弧菌(Vibrio penaeicida)；淡水虾的幼虫细菌坏死；Penaeid虾的单孢子虫(Haplosporidian)感染； Penaeid虾的簇虫疾病；Penaeid虾的纤毛虫疾病；Penaeid虾的消化道和神经综合征 (GNS)；淡水虾的幼虫中期疾病(MCD) ；Penaeid虾的红色疾病；培养虾的弧菌属物种病(弧 菌病(Vibrio Disease))；虾和对虾的几丁质水解细菌外壳疾病(Chitinolytic Bacterial Shell Disease)；虾和对虾的丝状细菌疾病；虾和对虾的微孢子虫病(Microsporidosis) (棉花虾疾病)；虾和对虾的幼虫霉菌病；虾和对虾的镰孢菌属物种(真菌疾病)；长额虾科 虾的线形动物寄生；和虾和对虾的黑鳃综合征。在又一个例子中，本发明能够改善蟹对多种疾病和病原体的免疫应答，其中 多种疾病和病原体包括，但不限于，蟹的病毒疾病；蟹的立克次氏体和衣原体；蟹的 Haplosporidosis ；恶性热副变形虫(Paramoeba perniciosa)(灰色蟹疾病)；大西洋蟹的 血卵涡鞭虫(Hematodinium perezi)和血钩虫属物种(Hematodinium sp.)；蟹的几丁质水 解真菌疾病(Black Mat综合征)；蟹的大蟹感染纽虫物种(Carcinonemertes spp.)；蟹的 蟹栖异阿脑虫物种(Mesanophrys spp.)病(纤毛虫疾病)；血钩虫属物种(苦蟹病(Bitter Crab Disease))；蟹的甲头目动物寄生虫(Rhizoc印halan Parasites)；在澳大利亚中蟹的 血钩虫属物种；蟹的几丁质水解细菌外壳疾病；蟹的微孢子虫病(Microsporidosis)；蟹的 吸虫囊蚴；蟹的棘头虫寄生；蟹的线形动物寄生；和蟹的链壶菌物种(Lagendium spp.)病 (真菌疾病)。在又一个例子中，本发明能够改善螯虾对多种疾病和病原体的免疫应答，多种疾 病和病原体包括，但不限于，欧洲螯虾的胶孢子虫孢子物种(Psorospermium spp.)(原生动物疾病)；螯虾的Therlohaniasis ；螯虾的烧伤斑疾病(Burn Spot Disease)(真菌疾病)； 螯虾瘟疫(真菌疾病)；蓝色螯虾的杆状病毒；螯虾的立克次氏体；螯虾的诺卡菌属物种 (细菌疾病)；螯虾的变形杆菌属或假单胞菌属细菌败血症；螯虾的几丁质水解细菌外壳疾 病；美洲螯虾的胶孢子虫孢子物种(Psorospermium sp.)(原生动物感染)；螯虾的水霉属 物种(Saprolegnia spp.)(真菌疾病)；螯虾中的吸虫；螯虾的涡虫纲感染；和螯虾的蛭蚓 目(Branchiobdellida)环节动物寄生。根据本发明，向有壳的水生动物施用半胱胺化合物可以通过本领域技术人员目前 已知或预期已知的任何适当方法和技术完成。本文具体的示例是单独地或者与其它化合物 或方法同时使用将半胱胺化合物引入至含有待治疗的有壳的水生动物的水中。半胱胺化合 物可以作为组合物被引入，以任何有效的形式包括在液体中(即溶剂、油)，在水性混合物 中，在水性乳剂中，在固体载体或基质中，或其它运载体，只要所述运载体与向含有待治疗 有壳的水生动物的水中所施用的半胱胺化合物相容并且不对有壳的水生动物产生不利影 响。在包含半胱胺化合物的组合物中也可使用多种适当佐剂。例如，乳化剂、除泡剂 (或消泡剂)、抗氧化剂、维生素、矿物、防腐剂、着色剂等等，也包括在本发明的组合物中。 在一个实施方案中，佐剂以较少的量存在于在本发明的组合物中，即按体积计算少于大约 5%，优选地，按体积计算少于1%。在其他实施方案中，在本发明的组合物中存在较大量的 佐剂，即按体积计算至多70%。所有此类佐剂对于正在治疗的有壳的水生动物应该是无害 且无毒的。在一些实施方案中，在本发明的组合物中存在维生素。在优选的实施方案中，存在 于组合物(在任何饲料的添加之前)中的维生素E在大约0. 05%至1. 0%之间。在另一实 施方案中，组合物中的维生素E以大于或等于0. 的量存在。在本发明的又一实施方案 中，组合物中的维生素E以每千克组合物大于或等于0. 1毫克的量存在。在另一实施方案 中，其中1吨的饲料加入到组合物中，组合物中的维生素E以每吨饲料大于或等于10毫克 的量存在。根据本发明，适当的乳化剂(即表面活性剂或分散剂)可以是阳离子、阴离 子、非离子或两性乳化剂。优选的乳化剂包括，例如，广泛可得的食物级乳化剂。在本 发明中使用的适当乳化剂的一些类型的概述包括在G. Charalambous等人编辑，Food Emulsifiers-Chemistry, Technology, Functional Properties and Applications, Elsevier Science Publishing Co. Inc. ,New York,N. Y. (1989)第 1-8 页 A. J.St. Angelo， "A Brief Introduction to Food Emulsion and Emulsifiers” 中所列出的那些。在一个实施方案中，提供了包含半胱胺化合物和载体(如包合化合物宿主材料) 的组合物。据信通过提供载体如包合化合物宿主材料，稳定的半胱胺化合物分子能够被安 全的传送至有壳的水生动物而不会诱发毒性。另外，此类载体材料可包括包衣材料(即肠 包衣)，其允许在碱性环境中如在肠内溶解包衣。根据本发明，所使用的载体材料的例子包 括，但不限于，包合化合物宿主材料、微晶纤维素、淀粉和海藻酸钠。在一些实施方案中，存在于在本发明的组合物中的载体材料包含以大约10-30 重量％存在的微晶纤维素；以大约40-50重量％存在的淀粉；和以大约1-5重量％存在的 海藻酸钠。在有关的实施方案中，组合物中的微晶纤维素以大于或等于20%的量存在，组合物中的淀粉以大于或等于43%的量存在，和组合物中的海藻酸钠以大于或等于3. 5%的量 存在。在又一本发明的有关的实施方案中，组合物(在饲料添加至组合物之前)中的微晶纤 维素以大于或等于每千克组合物20. 0克的量存在；淀粉以大于或等于每千克组合物43. 0 克的量存在；和海藻酸钠以大于或等于每千克组合物3. 5克的量存在。在另一实施方案中， 当一吨的饲料添加至组合物中时，微晶纤维素以大于或等于每吨饲料200克的量存在；组 合物中的淀粉以大于或等于每吨饲料430克的量存在；和海藻酸钠以大于或等于每吨饲料 35克的量存在。 根据本发明，可以使用的包合化合物宿主材料包括在美国专利申请系列号 20040033985中公开的那些，该申请完整引入本发明作为参考。所考虑的包合化合物宿主材 料包括蛋白质(如白蛋白)、冠醚、聚氧化烯、聚硅氧烷、沸石、胆苯烯胺(cholestyramine)、 考来替泊(colestipol)、考来维仑(colesevelam)、2_甲基咪唑和1_氯_2，3_环氧丙烷的 聚合物(colestimide)、司维拉姆(sevelamer)、纤维素衍生物、葡聚糖衍生物、淀粉、淀粉 衍生物及其药学上可接受的盐。所考虑的纤维素衍生物和葡聚糖衍生物包括DEAE-纤维 素、胍基乙基纤维素或DEAE-Sephadex。将包括在本发明组合物的中的有利的淀粉或淀粉 衍生物包括环糊精、回生淀粉(retrograded starch)、降解淀粉、回生淀粉和降解淀粉的组 合、疏水淀粉、淀粉酶、淀粉_ 二乙氨基乙醚和淀粉-2-羟基乙醚。根据本发明，优选的包合化合物宿主材料包括，但不限于，环糊精和/或其衍生 物，即甲基β-环糊精、羟丙基β-环糊精、羟乙基β-环糊精、聚环糊精、乙基β-环糊精 和分枝环糊精。本领域技术人员应当理解，依据本发明，可以利用任何环糊精或环糊精的混 合物、环糊精聚合物或修饰的环糊精。例如，环糊精在药学组合物中被广泛的用作增溶 齐U、稳定剂和惰性赋形剂(见美国专利号6，194, 430 ；6, 194, 395 ；和6，191，137，其中的每 个专利完整引入本文作为参考)。环糊精可以从Wacker Biochem Inc.，Adrian, Mich.或 Cerestar USA, Hammond, Ind.以及其它销售商获得。环糊精的通式是(C605H9)n。β -环糊精是包含七个单元α -(1，4)连接的D-吡喃葡 萄糖单元的环状化合物，作为能形成包合配合物的配合剂起作用并同时具有增溶特性(见 美国专利号 6，194，395 ；也见 Szejtli, J. Cyclodextrin Technol, 1988)。使用环糊精或其 衍生物形成的包合配合物保护成分(即半胱胺化合物)免于蒸发的损失，免于受到氧气、 酸、可见光和紫外线攻击和免于分子内-和分子间的反应。本发明的组合物中包合化合物 宿主材料的含量范围可以为大约1至80重量％。优选地，本发明的组合物中包合化合物宿 主材料的含量范围可以为大约1至60重量％。所用的包合化合物宿主材料的实际量主要 取决于制备本发明组合物所使用的半胱胺化合物和额外治疗剂的实际含量。在本发明的一些实施方案中，包合化合物宿主材料是环糊精，其在饲料的添 加之前以组合物的大约至20%存在。在另一个实施方案中，β-环糊精在组合物中以 大于或等于5%的量存在。在本发明的又一实施方案中，环糊精在组合物中以大于或 等于每千克组合物5. 0克的量存在。在另一实施方案中，当一吨的饲料添加至组合物中时， β -环糊精在组合物中以大于或等于每吨饲料50克的量存在。需要时，在向包含有壳的水生动物的水中引入半胱胺化合物后，可以使用测量或 混合泵或联机混合器(即混合阀、喷嘴或管口)、充气器或其它本领域技术人员已知的装置 完成半胱胺化合物在水中的直接分散。
在一个实施方案中，将包含半胱胺化合物的水性混合物、乳剂或分散物引入含有 待处理有壳的水生动物的水中。本发明的水性混合物、乳剂或分散物可含有大约0. 1 %至大 约95%的半胱胺化合物，其中所有百分数基于组合物的终体积按体积计算。根据本发明，当 将组合物加入到含有待处理有壳的水生动物的水环境时，组合物可进一步稀释。所使用半 胱胺化合物的量可根据待处理有壳的水生动物的健康(即大小、年龄等等)而改变。根据本发明，包含半胱胺化合物的组合物可与有壳的水生动物饲料同时施用。在 一个实施方案中，在喂食有壳的水生动物之前，将包含半胱胺化合物的组合物与有壳的水 生动物的饲料混合。在优选的实施方案中，将包含β-环糊精半胱胺盐酸化物的组合物与 固体饲料(即下沉或漂浮饲料)混合物混合并引入至待处理的虾。本发明的饲料混合物可 含有大约0. 至大约95%的半胱胺化合物，其中所有百分数基于组合物的终体积按体积 计算。所使用半胱胺化合物的量可根据待处理有壳的水生动物的健康(即大小、年龄等等) 而改变。根据本发明，本发明的组合物还包含有壳的水生动物的饲料。在一些实施方案中， 为了处理虾，将包含半胱胺化合物、载体和维生素E的组合物与虾饲料混合。在有关实施方 案中，有壳的水生动物饲料是大约1吨的虾饲料。在另一些实施方案中，组合物包含每吨虾 饲料大约200-400克的半胱胺化合物(如半胱胺盐酸化物)。在本发明的另一些实施方案 中，组合物包含每吨虾饲料大约270克的半胱胺化合物(如半胱胺盐酸化物)。在又一实施 方案中，每天向普通虾施用大约350-450微克的组合物，该组合物包含大约20-30%半胱胺 化合物，大约1-20%环糊精，和大约0. 05-1. 0%维生素Ε，其中普通虾的大小是大约12克。本发明半胱胺化合物可根据用于制备向有壳的水生动物施用的组合物的已知方 法配制。该制剂可存在于单剂量或多剂量容器例如密封的安瓿和小瓶中，可将其贮藏在冷 冻干燥的(低压冻干的)条件中，在使用前仅需要无菌液体载体例如水。可从无菌粉末、颗 粒、片剂等准备临时的溶液和混悬液。应当理解除了上面特别提到的成分，关于所讨论制剂 的类型，本发明的制剂可包括其它本领域常规试剂。在本发明的一些方法中，引入的半胱胺的有效量取决于如水ρΗ、硬度、碱度、温度 等因素。根据本发明的一个实施方案，施用半胱胺的有效量是每天每克有壳的水生动物大 约1-20微克半胱胺盐(如半胱胺盐酸化物)。在有关实施方案中，每天向每克虾施用大约 1-20微克半胱胺盐酸化物。在又一有关的实施方案中，每天向每克虾施用大约3-15微克的 半胱胺盐酸化物。在又一有关的实施方案中，每天向每克虾施用大约5-10微克的半胱胺盐 酸化物。根据本发明，处理的有壳的水生动物包括在有限制的水域如运输容器、贮存罐、水 族馆、水池或小池塘，大片水域和那些在无限制水域如河流或海滩附近的那些。以下是示例性说明实施本发明程序的例子。这些例子不应解释为限制。除非另有 说明，所有百分数按重量计算，所有的溶剂混合物比例按体积计算。实验实施例目前，太平洋白虾，即凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)，原产于中美洲和南美 洲，是泰国、中国台湾和中国大陆培养的主要虾种。自从2001年以来，虾农在养殖的凡纳滨 对虾中经历了与产量下降相关的疾病问题。来自 Walcom Bio—Chemicals Industrial Limited 的 Aquanin Plus (商品名)含
11有至少27%的β-环糊精半胱胺盐酸化物和0.1%的维生素Ε。为了下列实验的目的，在1 千克Aquanin Plus中存在270克的半胱胺。在一个实施方案中，根据本发明，300ppm直至 4000ppm的Aquanin Plus在治疗虾中是有效的。下列实施例提供了对于在虾培养中用于增 加生长、存活和免疫应答的Aquanin Plus浓度的理解。实验1从泰国尖竹汶府(Chantaburi)商业农场获得的凡纳滨对虾(11. 6+0. 5克)实验 前在实验室中顺应两周。为了确定饮食中施用Aquanin Plus的生长促进作用和免疫刺激 效应，在三种处理(六次重复/处理)中进行试验。每次重复由在500升储水池中25只 虾组成。虾每天以3%体重的含有梯度水平的Aquanin Plus(0%,0. 05%和0. 的饲料； 例如，0. 1 % Aquanin Plus 指将 1 千克 Aquanin Plus 添加到 1 吨饲料中，0. 05% Aquanin Plus指将0. 5千克Aquanin Plus添加到1吨饲料中)的压片饲料一天四次喂食，喂食50 天。在实验中，水质量参数维持如下温度在28+l°C，pH在7.8-8.0，盐度在25 丨。对数据 进行单因素方差分析之后进行Duncan' s多范围检验。施用饮食50天后，用0. I^Aquanin Plus喂养的虾在体重百分数增加上显著高于 (P < 0. 05) ffi 0. 05% Aquanin Plus 和对照组喂养的虾(表 1)。
权利要求
1.包含半胱胺或其盐、载体、有壳的水生动物饲料和维生素E的组合物，其中半胱胺或 其盐以组合物的大约0. 01%至10%存在。
2.权利要求1的组合物，其中半胱胺是半胱胺盐酸化物。
3.权利要求1的组合物，其中半胱胺是半胱胺盐酸化物并且其中组合物包含每吨组合 物大约250-500克半胱胺盐酸化物。
4.权利要求1的组合物，包含β-环糊精。
5.改善太平洋白虾(凡纳滨对虾)抗感染的免疫性的方法，其中该方法包含向虾施用 包含有效量半胱胺或其盐的组合物。
6.权利要求5的方法，其中感染选自Penaeid虾的白斑综合征杆状病毒复合体; Penaeid虾的黄头病毒疾病(YHD)；和培养虾的弧菌属物种病(弧菌病)。
7.权利要求5的方法，其中组合物包含半胱胺盐酸化物。
8.权利要求7的方法，其中所施用半胱胺盐酸化物的剂量为每克虾每天大约1-20微克 半胱胺盐酸化物。
9.权利要求7的方法，其中所施用半胱胺盐酸化物的剂量为每克虾每天大约3-15微克 的半胱胺盐酸化物。
10.权利要求5的方法，其中组合物还包含β-环糊精。
11.权利要求5的方法，其中组合物包含Aquaninplus。
12.权利要求11的方法，其中组合物包含至少0.05%的Aquanin plus。
13.权利要求12的方法，其中组合物包含至少0.的Aquanin plus。
全文摘要
本发明提供用于改善有壳的水生动物健康的方法。在具体实施方案中，本发明提供用于加速和/或增加虾生长；改善免疫性；和增强有壳的水生动物生育力的方法。为此，本发明提供了向虾施用半胱胺化合物的材料和方法。
文档编号A23K1/18GK102006785SQ200980113026
公开日2011年4月6日 申请日期2009年2月17日 优先权日2008年2月17日
发明者F·希 申请人:华扩达动物科学(I.P.3)有限公司