专利名称：抑制龋齿形成的甘草棒棒糖的制作方法
技术领域：
本发明涉及牙科和预防医学领域。具体地，在某些实施方案中，本发明提供了一种 抑制龋齿形成的棒棒糖。
背景技术：
甘草属(Glycyrrhiza)由约 30 个种组成(Nomura et al. (2002) Pure App 1. Chem. 74 :1199-1206)，其中一些为人类所用已经有 4000 多年(Wang and Nixon(2001) Nutr. Cancer, 39 :1-11)。甘草(Licorice)这一名称一般指的是甘草属种(豆科 (fabaceae))的根和匍匐茎。甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch. ex DC.)(中文名“甘 草”或中国甘草)是一种在中国大陆和其他国家中最常用的传统药物之一。在过去几十年 里，很多研究小组研究了甘草的化学成分(例如，见Siibano et al. (1997)Heterocycles, 45 :2053-2060 ；Hatano et al. (1998)Phytochemistry 47 :287-293 ；Hatano et al. (2000) Phytochemistry 55 :959-963 ；Fukai et al. (1989)Heterocycles, 29,1369-1378 ；Fukai et al. (1993)Heterocycles,36 ,2565-2576 ；Kiuchi et al. (1990)Heterocycles,31 629-636 ；)及其生物活性(Nomura et al. (2002)Pure Appl. Chem. 74 :1199-1206 ；Fukai et al. (2002)Fitoterapia,73 :536-539 ；Fukai et al. (2004)Planta Med. 70 :685-687 ； Tsukiyama et al. (2002)Antimicrob. Agents Chemother. 46 :1226-1230 ；Hatano et al. (2000) Chem. Pharm. Bull. 48 :1286-1292 ；Hsieh and Wu (2002) Int. J. Oncol. ,20 583-588 ；He et al. (2006) J. Nat. Prod. ,69 :121-124)。各种化学研究已经鉴定得到约100种酚类化合物，其中很多是类异戊二烯取 代的酚(Hatano et al. (1998)Phytochemistry 47 :287-293 ；Hatano et al. (2000) Phytochemistry, 55 =959-963)。这些类异戊二烯取代的类黄酮中大部分是C-5位被氧取代
的异黄烷。有些甘草提取物已经被用来治疗呼吸系统、胃肠系统、心血管系统、泌尿生殖系 统、皮肤、眼等中的各种疾病(例如，见Fiore et al. (2005) J Ethnopharmacol. 99(3) 317-324 ；Shibata(2000)Yakugaku Zasshi. 120(10) :849-862).已经从该草药中鉴定出很 多有各种疗效的值得研究的化学分子。
发明内容
本发明涉及这样的发现，即甘草的某些提取物——特别是被制成糖块、棒棒糖或者其它能够在口腔中提供延缓释放(例如，约4分钟以上)的产品时——显著抑制人受试 者中龋齿的形成。本发明涉及这样的发现，即甘草的某些提取物一特别是被配制成硬糖、棒棒糖 或者其它能够在口腔中提供延缓释放(例如，约4分钟以上)的产品时——显著抑制人受 试者中龋齿的形成。因此，在某些实施方案中，提供了用于降低受试者(如人)中龋齿发生率和/或严 重程度的组合物。在多种实施方案中，所述组合物包括一种棒棒糖或者硬糖，其中所述棒棒 糖或硬糖基本上不含糖(或者基本上不含致龋增甜剂)，并且所述棒棒糖或者硬糖包含甘 草属种根的提取物，其中所述提取物包含glycyrrhizol和/或甘草皂苷。在某些实施方案 中所述棒棒糖或硬糖是棒棒糖。在某些实施方案中所述棒棒糖或硬糖包含淀粉和/或糊精 和/或赤藓糖醇(erythritol)和/或内消旋赤藓糖醇(meso-erythritol)和/或麦芽、调 味剂、增甜剂和所述提取物。在某些实施方案中增甜剂是不致龋的。在某些实施方案中增 甜剂是糖醇。在某些实施方案中增甜剂是人工增甜剂。在某些实施方案中增甜剂选自甜 菊糖(stevia)、阿斯巴甜(aspartame)、糖精、乙酰舒泛钾、三氯蔗糖(sucralose)和纽甜 (neotame)。在某些实施方案中棒棒糖或硬糖包括氢化淀粉水解产物、柠檬酸、调味剂和 乙酰舒泛钾。在某些实施方案中棒棒糖或硬糖还包括着色剂和/或防腐剂。在某些实施方 案中所述提取物包括基本上纯化的glycyrrhizol Α,和/或基本上纯化的glycyrrhizol B 和/或基本上纯化的6，8- 二异戊二烯基-5，7，4’-三羟基异黄酮。在某些实施方案中所述 提取物基本上由基本上纯化的glycyrrhizol A和/或基本上纯化的glycyrrhizol B和/ 或基本上纯化的6，8-二异戊二烯基-5，7，4’ -三羟基异黄酮(例如，它具有基本上纯化的 glycyrrhizol A和/或基本上纯化的glycyrrhizol B和/或基本上纯化的6，8-二异戊二 烯基-5，7，4’_三羟基异黄酮的活性)组成。在某些实施方案中，每个棒棒糖或者硬糖都包 含约ang到约200mg的甘草提取物。在某些实施方案中，每个棒棒糖或者硬糖包含约ang、 5mg或IOmg到约100、50、25、20或15mg的所述提取物。在某些实施方案中每个棒棒糖或者 硬糖均包含约2mg到约50mg、30mg、25mg、20mg或15mg的所述提取物。在某些实施方案中， 棒棒糖或者硬糖被配制为在人的口腔中在约1或anin到约15min内溶解。在某些实施方 案中，棒棒糖或硬糖被配制为在人的口腔中耗时至少约anin、3min、^iin或5min溶解。在 某些实施方案中甘草提取物是通过本说明书和权利要求中描述的方法制备的提取物。本发明还提供了降低人的龋齿发生率和严重程度的方法。所述方法一般包括 给予人一种组合物，所述组合物将能够抑制龋齿形成或恶化的甘草提取物递送入人的口 腔，其中所述递送过程间长为至少约細in。在某些实施方案中，所述甘草提取物包括一种 glycyrrhizol和/或一种甘草皂苷和/或6，8- 二异戊二烯基_5，7，4，-三羟基异黄酮。在 某些实施方案中所述时长为至少lmin。在某些实施方案中所述时长为至少5min。在某些实 施方案中所述时长为约5min到约15min。在某些实施方案中，提取物包括从甘草属种的的 根中提取到的glycyrrhizol.在某些实施方案中，提取物包括基本上纯化的glycyrrhizol A和/或基本上纯化的glycyrrhizol B和/或基本上纯化的6，8- 二异戊二烯基_5，7， 4’ -三羟基异黄酮或基本上由它们组成。在某些实施方案中，单次给药时(例如，食用单 个棒棒糖或硬糖)约ang、5mg或10mg、15mg或者20mg到约100、50、25、20或15mg的所述 提取物被递送入口腔。在某些实施方案中所述组合物包括一种含有glycyrrhizol的棒棒糖.在某些实施方案中所述组合物包括上下文中所描述的棒棒糖或硬糖.在某些实施方案中提供了制备抑制变形链球菌(Sti^ptococcus mutans)导致的 龋齿形成的甘草提取物的方法。在某些实施方案中，所述方法一般包括提供甘草属种的根； 对所述根进行醇提取；对所述提取物进行干燥以制备具有抗变形链球菌活性的提取物。在 某些实施方案中所述活性与基本上纯化的glycyrrhizol A的活性相当或相等。在某些实 施方案中根被切为平均厚度为约2mm以下，或者Imm以下的切片。在某些实施方案中所述 根是在内蒙古生长并收获。在某些实施方案中醇提取包括以约1 8的比例将根和95%食 品级醇(例如，乙醇)混合的首次提取。在某些实施方案中将根/乙醇混合物孵育约4h、约 8h、约12h、约Mh、约4 或约7 或者更长时间。在某些实施方案中，所述方法还包括乙 醇，以及通过以约1 8的比例加入新鲜的95%食品级醇(例如，乙醇)并且再次孵育进行 二次提取。在某些实施方案中将乙醇干燥以制备基本上干燥的粉末提取物。在某些实施方 案中，所述方法不包括用有机溶剂进行溶剂/溶剂分配或用无机溶剂进行溶剂/溶剂分配。某些实施方案中，提供了用于减少人受试者的龋齿的组合物。该组合物一般包括 一种抑制龋齿形成的甘草提取物。在某些实施方案中所述提取物是按本说明书所述制备的 提取物。在某些实施方案中所述甘草提取物被包含在选自以下的产品中牙膏、漱口水、牙 齿增白条带/溶液、牙线、牙签、牙刷毛、口腔喷雾、口腔糖锭和口腔用烟雾器。定义当“基本上纯化的”这个词用来形容Glycyrrhizol A时，表示相比纯Glycyrrhizol A在1微克/毫升下具有抗变形链球菌活性，该化合物/提取物一般在10-30微克/毫升下 具有抗变形链球菌活性。“甘草提取物”指的是包括从甘草属种的甘草植物提取到的一种或多种化合物的 组合物。在某些实施方案中甘草提取物是由本说明书所述的方法制备的提取物。在某些实 施方案中甘草提取物包括一种glycyrrhizol (例如glycyrrhizol A和/或glycyrrhizol B)和/或甘草皂苷。在某些实施方案中glycyrrhizol A和/或glycyrrhizol B是基本上 纯化的。“棒棒糖”一词指的是一块硬糖，通常近似球形、卵圆形或者圆盘形，附着在一个棒 状物或“手柄”上。“降低龋齿的发生率”一词指的是抑制龋齿的形成和/或降低龋齿严重程度或减少 龋齿的数量。“基本上不含糖”一词指的是组合物基本不含并且优选完全不含形成龋齿的糖类。 在多个实施方案中糖醇和其他类似试剂能够用来构成基体和充当增甜剂。“不致龋” 一词用来形容增甜剂时是指增甜剂被口腔菌丛中致龋微生物发酵的能 力较低或不能被口腔菌丛中的致龋微生物发酵。在多个实施方案中增甜剂不能被发酵为 有害酸。示例性的不致龋增甜剂包括但不限于下列几种乙酰舒泛钾、阿力甜(alitame)、 阿斯巴甜、环己氨磺酸盐(cyclamate)、赤藓糖醇、内消旋赤藓糖醇、纽甜、糖精、蛇菊苷 (stevioside)、三氯蔗糖、异麦芽糖和塔格糖(tagatose)。已注意到，高强度的增甜剂如阿 斯巴甜、三氯蔗糖和纽甜的甜味都比蔗糖更持久。因此，在某些实施方案中，当增甜剂与酸 化剂一起使用时，增甜剂可以任选地与苹果酸而不是柠檬酸一起使用。苹果酸的酸味比柠 檬酸持久，因此能够与增甜剂搭配，即使在用作次级酸化剂时。
图 1 示出了 Glycyrrhizol A 的分子式。图 2 示出 了 Glycyrrhizol B 的分子式。图3举例说明了甘草提取物的HPLC图谱。
具体实施例方式本发明涉及对一种新的甘草提取物的鉴别，所述提取物显示出对变形链球菌 (S. mutans)有良好的对抗效果能，并且能有效抑制人受试者中龋齿的形成，尤其是该提取 物以棒棒糖和/或硬糖(例如，糖锭)的形式给药时。发明人特别意外地发现，当甘草提取物以糖锭形式给药时，其能有效地抑制变形 链球菌在食用所述糖锭的受试者口腔内的粘附和/或生长和/或增殖。另外认为，相对短期 (例如，几小时或几天，优选最长达约1或2周的时间)的给药能够使口腔内变形链球菌群 长时间的减少，最长至3个月，优选6个月，更优选最长达9个月，并且最优选最长达1年。 由于提取物只能是间歇地给药，因此认为细菌不可能会产生抗性。不囿于具体的理论，认为选择性减少/优先减少口腔中的变形链球菌能够使其他 (非形成龋齿的)细菌种类增殖到一定水平，所述水平减缓了变形链球菌群的重建。除了糖锭制剂，本发明还提供了用于获得具有良好一致性(consistency)的高活 性甘草提取物的有效方法。该方法非常适用于本说明书所述的甘草提取物的商业化生产。甘草提取物的生产意外地发现，根据不同的提取方法和/或甘草来源，不同的甘草提取物可具有显 著不同的活性。另外，还意外地发现，被认为几乎没有抗微生物作用的甘草皂苷能够通过抑 制细菌粘附而抑制龋齿的形成。已知不同的甘草提取物具有不同的生物活性，发明人开发了一种新的提取方法， 所述方法使得发明人能够一致地获得具有高抗变形链球菌活性的甘草提取物。为了达到上述效果，发明人收集了中国五个不同地区的甘草根，分别是浙江、江 苏、甘肃、新疆和内蒙古省，并且发现内蒙古的甘草根的活性最高(活性变化最高可达10 倍)。发明人将甘草根切成不同的形状，在不同的时间和比例下用不同的提取方法(例 如水煮或者乙醇浸泡)，尝试不同的过滤和干燥方法。使用不同的方法时，活性成分的产出 变化最高可达5000倍。以下是能一致地产生最佳结果的方法a)在内蒙古省生长和收获的甘草根；b)甘草根被切为薄片(约Imm)；c)将IOOkg甘草根薄片与95%食品级乙醇以1 8的比例在提取容器中混合，在 37°C下孵育72h(这些量可以成比例地放大)；d)在将第一批乙醇移除后，以1 8的比例向提取容器中加入更新鲜的95%食品 级乙醇，在37 °C下孵育96h ；将得到的乙醇溶液(含有提取物)过滤三次；然后将提取物通过酒精蒸发而浓缩。
然后在常压下将浓缩的提取物微波“干”馏法干燥，这种方法是微波加热和干馏的 结合。最终产率是甘草根鲜重的约4%。发明人为大量生产的每个批次的甘草提取物都建立了有效的QA/QC系统。所有的提取物都要用HPLC (参见，例如图3)来分析Glycyrrhizol A的量，所述 Glycyrrhizol A的量是龋齿抑制活性的显著指标。HPLC的条件是使用以下仪器进行分析AmershamBiosciences HPLC Instrument. SOURCE 15RPC(4. 6/100)流速0. 5ml/min洗脱系统=H2O(0. 1 % TEA,溶剂 Α)和 CH3CN (0. 1 % TEA,溶剂 B)检测器=UV215，260 和 280nm洗脱梯度在15CV(柱体积，ICV = 1，662ml)中从 10% (B)到 100% (B)。在这些条件下，发明人可以有效地检测到与生物学效能研究相符的glycyrrhizol的量。除了化学分析，检查了所有的批次或者连续生产过程中的统计学相关样本(例如 1/3600块糖；或者1/5000块糖；1/10，000块糖等)或者糖块生产批次中的统计学相关样 本(例如1/10批次；1/20批次；1/50批次)的生物学活性。纯的glycyrrhizol A化合物 在1毫克/毫升下具有抗变形链球菌活性，而混合的化合物通常在10-30毫克/毫升下具 有抗变形链球菌活性。糖锭制剂发明人还开发了一种糖锭(例如，棒棒糖)作为将甘草提取物的抗微生物化合物 递送到口腔的独特递送手段。发明人试验了多种递送机制，如水溶液、凝胶、牙膏等等。最终 发明人决定用无糖棒棒糖，因为这样发明人可通过造成龋齿的途径递送所述活性成分。而 且，这有助于递送至目标群体而不需要改变他们的行为。棒棒糖是一种可接受的，安全的递送机制途径，其受到儿童、老年人群和其他有贫 困人群的欢迎。发明人意外地发现棒棒糖是一种特别有效的递送方式。人们一般会咀嚼硬糖或者 软糖，并且通常3分钟之内吃完。咀嚼口香糖时将会在前30秒内释放所有的主要成分。相 反，溶解一支棒棒糖则通常需要花费5-10分钟，这样就提供了最佳的杀菌动力学，如下文 所述a.针对变形链球菌的体外时间-杀菌数据a. 30 秒31% 杀死b.60 秒41% 杀死c. 5分钟67%杀死d.10 分钟85% 杀死发明人配制了一种含有甘草提取物的棒棒糖，所述棒棒糖显示出优良的效能、稳 定性和安全性。发明人通过与一家制糖公司订立合同，制作了具有各种甘草提取物浓度的 各种形式的不同糖块，所述糖块混有各种调味剂。例如，发明人尝试了 5、15、25mg草药提 取物(每个棒棒糖)。发明人还尝试了干粉或者溶于水或乙醇中的提取物。发明人尝试了 在制糖过程的不同阶段加入草药粉末，并且发明人尝试了许多不同的调味剂，如薄荷、橘子寸。在多个实施方案中，只是将甘草提取物与无糖的糖基体(candy base)结合形成棒 棒糖或其他硬糖，这优选地递送上文所述的甘草提取物剂量。本领域技术人员公知无糖糖基体。例如，日本专利公布文本JP-B-56-18180公开 了一种包含赤藓糖醇的无糖糖基体。美国专利4，883，685公开了一种包含内消旋赤藓糖 醇的无糖糖基体，该专利中公开的化合物和制剂以引用的方式纳入本说明书。一种基于乳 糖醇(Iactitol)的硬糖的基本配方包含乳糖醇、麦芽糖醇糖浆、酸、增甜剂、着色剂和调味 剂。乳糖醇可溶于糖浆中而不需要额外的水。其他的无糖糖基体在例如W0/1997/003569(PCT/US1996/011620)中有记载，所述 专利申请中描述的组合物和方法以引用的方式纳入本说明书。这些基体主要包含基本上不 吸湿的糖醇成糖液(candying solution)。这一般包括一种市售的且价格合理的糖醇，所述 糖醇在被熬制时会形成基本上不吸湿的、硬的且经熬制的产品。示例性的糖醇包括但不局 限于异麦芽糖醇(isomalt)(例如由德国曼海姆的I^alatint Sussungsmitel GmbH提供的 商品Isomalt M)、山梨糖醇、木糖醇、乳糖醇、甘露醇和聚葡萄糖。可以使用其他的氢化单糖 和二糖，也可以使用氢化糖类和多糖的混合物，如氢化葡萄糖浆。混合物也是适用的。在某 些实施方案中，组合物包括至少50重量％ (熬制后的干物重)的指定糖醇、通常至少80重 量％，并且经常至少90重量％的指定糖醇。通常，组合物中任选地不与糖醇(和包装组分 (casing composition)中残存的微量水)一起熬制的仅有成分一般是着色剂、酸化剂和调 味剂和/或本说明书中所述的甘草提取物。在某些实施方案中这些物质总量一般低于所述 经熬制组合物的10重量％，而且一般低于5重量％。在某些实施方案中，所述制剂提供约 IOmg甘草提取物/约9g糖块。在某些实施方案中，甘草提取物成分的优选量在下文描述。防腐剂和/或着色剂 和/或调味剂的量可为用于硬糖的常规量。相关的添加剂如调味剂、着色剂或其他活性成 分可以常规量存在。在多个实施方案中，糖块可以通过常规制糖过程步骤的适当组合制成。已知，硬糖 材料可通过以下步骤制备熬制糖醇水溶液形成水分含量很少的浆体，通常称为成糖液。成 糖液的含水量一般必须低于3%，优选低于2%。然后使成糖液冷却，接着结晶并且形成所 述硬糖组分。接受熬制处理的水溶液中的非水性成分是由所述糖醇或醇类以及所需量的调味 剂、着色剂和酸化剂(它们的量通常不希望超过5%)提供的。或者，部分或者全部的添加 剂可以在熬制后且冷却和结晶前加到成糖液中。当进行大规模熬制时，需要根据所用材料和加工条件来选择温度。熬制往往在薄 膜熬糖锅中进行，例如在130-170°C的温度下。在一个示例性实施方案中，由67% w/w异麦芽糖醇和33% w/w水形成糖醇溶液组 合物，并且将其在例如薄膜熬糖锅中熬制至160°C的温度，此时产生的成糖液的水含量为约 2%。在这种包装成糖液中可以加入调味剂(例如约0. 3% w/w至约2% w/w)、任选的柠 檬酸(例如约0. 1% w/w)、任选的着色剂，以及甘草提取物。一个可产生良好效能的优选制剂是将15mg甘草提取物粉末在冷却过程中加入到 橘子口味的无糖糖浆中。
在这个实施方案中，常规的棒棒糖包括氢化淀粉水解产物(HSH)、柠檬酸、天然 橘味调味剂、着色剂FD&C Yellow#6、人工增甜剂(乙酰舒泛钾)和约15mg的甘草。在某些实施方案中，每磅有50支棒棒糖并且每支棒棒糖含有15毫克提取物，这样 453. 6克/1磅使得每支棒棒糖的9. 07克糖块中有15毫克提取物(约0. 16% w/w)。然而 发明人发现根据糖基体的制剂、糖锭的大小等，可改变甘草提取物的量以优化活性。因此， 在某些实施方案中，提取物的范围为约0. 01 % w/w到约1 % w/w,优选约0. 05% w/w到约 0. 8% w/w,更优选约0. 1% w/w到约0. 4% w/w、0. 3% w/w或0. 2% w/w,并且在某些实施方 案中为约0. 1% w/w到约0. 3% w/w。在另一个实施方案中，一个典型的糖锭包括异麦芽糖醇、柠檬酸、天然橘子味调 味剂、着色剂FD&C kllow#6、人工增甜剂(乙酰舒泛钾)和约15mg甘草提取物。在某些实施方案中，每磅有90个糖锭，每个糖锭中含有8. 3mg甘草提取物，因此 453. 6克/1磅使得每个糖锭的5克糖块中有8. 3毫克提取物。棒棒糖/硬糖制剂的优点包括1)如对在25°C下储存6个月后无变化的活性组分的HPLC分析所示，15mg棒棒糖 具有良好的稳定性；2)经过制糖过程(有IOmin的高温期)后杀菌能力仍然保持不变；3)经过6个月保存后，草药棒棒糖保持了大于95%的杀菌活性；4)通过体外时间-杀菌测定法测得，提取物的杀菌活性在经过25°C下储存6个月 后没有变化；5)棒棒糖没有安全性问题；6)基因组毒性的艾姆斯试验证明没有检测到毒性；7)用上皮细胞、免疫细胞、肝细胞和肾细胞进行的细胞毒性试验证明没有检测到
毒性；8) 口服和静脉注射200mg/ml草药提取物/小鼠的动物毒性试验证明没有可检测 的毒性。除了上述体外效能研究，发明人还进行了试验性人类研究。基于三个小的试验性 研究(共M名受试者)，高变形链球菌含量(每毫升唾液中变形链球菌多于500000个)的 受试者的变形链球菌含量明显减少了 5倍到500倍。没有使用棒棒糖的受试者报告使用该 棒棒糖的任何不利作用。鉴于上文，在某些实施方案中，提供的如下这种糖锭(例如棒棒糖)，所述糖锭包 括甘草属种的根的提取物，其中所述提取物包括glycyrrhizol，并且在常规摄入时递送其 量足以抑制口腔中变形链球菌的粘附和/或生长和/或增殖的这种提取物。其他制剂作为具有与良好QA/QC程序一致的抗微生物活性的干粉末，本文所述的甘草提取 物可用于许多其他应用。这些应用包括但不局限于扩展的牙科应用，例如茶、牙签涂层、牙 线涂层、牙膏、凝胶、漱口水、保护漆(varn i sh)，甚至是专业口腔产品。甘草提取物也可以杀死其他致病细菌。例如，所述提取物具有抗牙周炎和口臭中 涉及的细菌的活性，并且可用于治疗/缓解这些疾病。另外，它还能杀死可能源于口腔的肺 部感染和耳部感染中涉及的细菌。因此，发明人还考虑了所述活性提取物在洗耳水、气雾剂吸入器、漱口剂等中的应用。在某些实施方案中，提供了治疗牙周疾病或者降低其发生率、病程或严重程度 的方法。这些方法可包括对龈下隙和牙周袋施用含有本文所述的甘草提取物(例如 glycyzzhizol组合物)以及载体/稳定剂的组合物。在所施用的组合物中，载体/稳定剂 能够对甘草提取物起到贮留、组织穿透、沉积和缓释的作用，用于减少牙周生物膜和相关组 织内特定细菌种的群。在某些实施方案中，载体试剂使甘草提取物渗透并保留在龈下隙和 牙周袋及相关组织中并且使其缓释，以增强使齿龈组织和牙本质小管组织中选定细菌群减 少的作用。在多个实施方案中，载体试剂可以包括但不局限于聚丙交酯、聚乙交酯、聚丙交 酯共-乙交酯、聚己内酯、纤维素基聚合物、乙二醇聚合物和它的共聚物、氧乙烯聚合物、 聚乙烯醇、壳多糖，以及透明质酸和它的共聚物。在一方面，载体试剂包括羟乙基纤维素、 羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚环氧乙烷、环氧乙 烷-环氧丙烷共聚物、壳多糖、透明质酸和它的共聚物，或者上述物质的组合。在另一方面， 载体试剂包括透明质多糖(hyaluronan)或透明质酸及其共聚物，包括透明质酸盐、透明质 酸酯、透明质酸交联凝胶、透明质酸的酶法衍生物、透明质酸的化学修饰衍生物或者上述物 质的组合。这里使用透明质酸广义上是指由D-葡萄糖醛酸多糖和N-乙酰基-D-葡糖胺的 残基构成的、具有不同分子量的酸性多糖的天然存在的衍生物、微生物衍生物和合成衍生 物。在某些实施方案中，甘草提取物和载体试剂为混合物的形式，共价偶联的复合物 的形式，或者它们的组合。在某些实施方案中，载体试剂包括生物粘合剂。合适的生物粘合 剂载体试剂包括但不局限于纤维素基聚合物和/或糊精。合适的纤维素基聚合物包括但不 局限于羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟甲基纤维素，或者它们的混合物。在一个实施方案 中，生物粘合剂载体试剂包括聚丙交酯、聚乙交酯、聚丙交酯-共-乙交酯、聚乙二醇、透明 质多糖、透明质酸、壳多糖或者它们的混合物。生物粘合剂载体试剂可以包括共聚物，所述 共聚物包括聚乙二醇、透明质多糖、透明质酸、壳多糖或者它们的混合物。在某些实施方案中，载体试剂能够穿透牙周组织。合适的穿透载体试剂包括，但不 局限于透明质酸、透明质酸衍生物、壳多糖、壳多糖衍生物或者它们的混合物。在一个实施 方案中，所述穿透载体试剂包括透明质酸盐、透明质酸酯、透明质酸的酶法衍生物、透明质 酸的交联凝胶、透明质酸的化学修饰衍生物或者它们的混合物。 在某些实施方案中，本说明书所述的甘草提取物被掺入一种“家庭保健，，制剂中。 这样的制剂包括，但不局限于牙膏、漱口水、牙齿增白条带或溶液、牙线、牙签、牙刷毛、口腔 喷雾、口腔糖锭等。本领域技术人员熟知这样的保健产品制剂，而且本发明的甘草提取物是以有效剂 量(例如，抑制龋齿形成的预防量等)简便地加入这些制剂的。例如，本领域技术人员熟知牙膏制剂。这些制剂通常是如下物质的混合物研磨剂 和表面活性剂；防龋试剂，如氟化物；牙垢控制成分，如焦磷酸四钠和甲基乙烯醚/马来酸 酐共聚物；PH缓冲液；用来预防干燥和增加舒适口感的保湿剂；还有保证粘稠度和形状的 粘合剂(参见，例如表1)。粘合剂可以使固相很好地悬浮在液相中以防止液相从牙膏中分 离。它们还给牙膏赋形，尤其是当从管中挤出到牙刷上之后。
表1牙膏的常见组分
权利要求
1.一种用于减少人受试者的龋齿的组合物，所述组合物包括一种棒棒糖或硬糖，其中 所述棒棒糖或硬糖基本上不含糖，所述棒棒糖或硬糖包含甘草属种(Glycyrrhiza spp.)的 根的提取物，其中所述提取物包含glycyrrhizol。
2.权利要求1的组合物，所述棒棒糖或硬糖为棒棒糖。
3.权利要求1的组合物，所述棒棒糖或硬糖包含 淀粉或糊精；调味剂； 增甜剂；和 所述提取物。
4.权利要求3的组合物，其中所述增甜剂是不致龋的。
5.权利要求3的组合物，其中所述增甜剂是一种糖醇。
6.权利要求3的组合物，其中所述增甜剂是一种人工增甜剂。
7.权利要求3的组合物，其中所述增甜剂选自甜菊糖、阿斯巴甜、糖精、乙酰舒泛钾、三 氯蔗糖和纽甜。
8.权利要求3的组合物，所述棒棒糖或硬糖包含 氢化淀粉水解产物；柠檬酸； 调味剂；和 乙酰舒泛钾。
9.权利要求8的组合物，其中所述棒棒糖或硬糖还包括着色剂。
10.权利要求1-9任一项的组合物，其中所述提取物包括基本上纯化的glycyrrhizol A和/或基本上纯化的glycyrrhizol B和/或基本上纯化的6，8- 二异戊二烯基_5，7，4，-三羟基异黄酮。
11.权利要求10的组合物，其中所述提取物包括基本上纯化的glycyrrhizolA。
12.权利要求1-9任一项的组合物，其中所述提取物基本上由基本上纯化的 glycyrrhizol A和/或基本上纯化的glycyrrhizol B和/或基本上纯化的6，8-二异戊二 烯基-5，7，4’ -三羟基异黄酮组成。
13.权利要求12的组合物，其中所述提取物基本上由基本上纯化的glycyrrhizolA组成。
14.权利要求1-9任一项的组合物，其中所述棒棒糖或硬糖含约2mg到约200mg所述提 取物。
15.权利要求1-9任一项的组合物，其中所述棒棒糖或硬糖含约2mg到约IOOmg所述提 取物。
16.权利要求1-9任一项的组合物，其中所述棒棒糖或硬糖含约2mg到约30mg所述提 取物。
17.权利要求15的组合物，其中所述硬糖或棒棒糖被配制为在人口腔中在约aiiin到约 15min内溶解。
18.权利要求15的组合物，其中所述硬糖或棒棒糖被配制为耗时至少约:3min。
19.权利要求15的组合物，其中所述提取物依照权利要求四-36任一项来制备。
20.一种降低人的龋齿发生率的方法，所述方法包括给予所述人一种能将 glycyrrhizol递送到所述人的口腔的组合物，其中所述递送过程时长为至少约％iin。
21.权利要求20的方法，其中时长为至少5min。
22.权利要求20的方法，其中时长范围为从约5min到约15min。
23.权利要求20-22的方法，其中所述glycyrrhizol是以甘草属种的根提取物形式提{共。
24.权利要求20-22的方法，其中所述提取物包括基本上纯化的glycyrrhizolA。
25.权利要求20-22的方法，其中所述提取物基本上由基本上纯化的glycyrrhizolA 组成。
26.权利要求23的方法，其中将约2、5或IOmg至约100、50、25、20或15mg的所述提取 物递送到口腔。
27.权利要求20的方法，其中所述组合物包括一种含有glycyrrhizol的棒棒糖。
28.权利要求20的方法，其中所述组合物包括权利要求1-18任一项所述的棒棒糖或硬糖。
29.一种提供抑制由变形链球菌(Sti^ptococcus mutans)所致的龋齿形成的甘草提 取物的方法，所述方法包括提供甘草属种的根 对所述根进行醇提取；和干燥所述提取物以制备具有抗变形链球菌活性的提取物。
30.权利要求四的方法，其中所述根被切成平均厚度为约2mm以下或者约Imm以下的 切片。
31.权利要求四的方法，其中所述根是在内蒙古生长并收获。
32.权利要求四的方法，其中所述醇提取包括将所述根和95%的食品级乙醇以1 8 的比例混合的首次提取。
33.权利要求32的方法，其中将所述根/乙醇混合物孵育约72小时。
34.权利要求32的方法，还包括除去所述乙醇，以及通过以约1 8的比例加入新鲜的 95 %的食品级乙醇并再次孵育来进行第二次提取。
35.权利要求32或34的方法，其中将所述乙醇干燥来制备基本干燥的粉末提取物。
36.权利要求四的方法，其中所述方法不包括使用有机溶剂的溶剂/溶剂分配。
37.一种用于减少人受试者中的龋齿的组合物，所述组合物包括根据权利要求四-36 任一项制备的甘草提取物。
38.一种能减少人受试者中的龋齿的组合物，所述组合物包括权利要求37的甘草提取 物，其中所述甘草提取物被包含在选自以下的产品中牙膏、漱口水、牙齿增白条带或溶液、 牙线、牙签、牙刷毛、口腔喷雾、口腔糖锭和口腔用烟雾器。
全文摘要
本发明涉及以下发现，即甘草的某些提取物——特别是被制成糖块、棒棒糖或者其它能够在口腔中提供延缓释放(例如，大于约4分钟)的产品时——能够显著抑制人受试者的龋齿的形成。
文档编号A01N59/26GK102123595SQ200980113038
公开日2011年7月13日 申请日期2009年3月13日 优先权日2008年3月14日
发明者M·H·安德森 申请人:因特里赫伯有限责任公司