专利名称：家畜的梭状芽孢杆菌属细菌引起的疾病的预防及/或治疗用饲料及抗梭状芽孢杆菌剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或同时含有檟如酸和腰果酚的由梭状芽孢杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。
背景技术：
家畜的感染症使家畜的体重减少或引起各种疾病等，显著降低其商品价值。例如， 金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus)是牛、羊、山羊的乳房炎、皮下肿瘤、脓血症、马的疹子、猪、鸡的关节炎、皮肤炎、败血症的病原菌。又，猪链球菌(Sti^ptococcus suis)是猪的脑膜炎、败血症、心内膜炎、关节炎的病原菌。又，梭状芽孢杆菌属细菌中，尤以产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)通过感染引发坏疽性肠炎等，成为肠毒血症、恶性水肿的原因。坏疽性肠炎的患病率、致死率都很高，给养鸡、小型肉鸡、养猪、畜牧业带来的经济危害很大。所以，是家畜以及家禽的有限的疾病中急需确立其防治对策的最重要的疾病之一。坏疽性肠炎在疾病临床上表现为仔猪、雏鸡等的腹泻，以细菌侵入到肠粘膜、伴有小肠的坏死为特征。肠毒血症是产气荚膜梭菌在动物小肠内繁殖、通过其产生的毒素引起坏死性、出血性的病变、且由于毒血症招致急性死亡的一种疾病。恶性水肿是细菌侵入到因偶发性或外科手术产生的创面中，其菌发芽、增殖后产生毒素，引起毒血症、菌血症，导致死亡的疾病。产气荚膜梭菌感染症虽然是重大的传染病，但是尚未确立预防·治疗方法。虽然适当地进行饲养管理作为预防方法，但实际上预防是极其困难的。目前为止，为了预防以及治疗本症，还进行了将抗生素或其他的抗菌剂和饲料一起同时投与的方法。然而，近年来，尤其存在耐药菌的发生或抗生素等残留在食用肉的问题等，认为给动物投与抗生素等并不恰当的形势正在高涨。因此，期待开发不使用抗生素等的本病的预防及治疗方法和预防及治疗剂。另一方面，已知有一种含有选自黄柏、龙胆草、厚朴、丹参、知母、大黄、丁香、女贞子、荊芥、桂皮、玄参、决明子、枇杷叶、防风、啤酒花、紫苏叶、杨梅皮、连翘、芦荟、牛舌、威灵仙、乌梅、延命草、车前草、辛夷、茵陈蒿、沉香、川芎、藁本、苦配巴、山茱萸、紫根、胡黄连、芍药、金樱子、麝香草、白南天、地榆及麻黄的1种或2种以上的生药的、家畜及家禽的产气荚膜梭菌感染症的预防及治疗剂(专利文献1)。此外，已知特征为含有菔烯、麝香草酚、丁香酚、柠檬烯、肉豆蔻、麝香草、丁香及柑橘的产气荚膜梭菌感染症的预防及治疗剂(专利文献2)。然而，这些技术都有效果不确定这样的问题，尚未达到实用化。对腰果壳油及/或檟如酸，已知其有抗菌作用(非专利文献1)、减轻球虫病作用 (专利文献幻。此外，已有报告称腰果壳油及/或檟如酸对金黄色葡萄球菌、变形链球菌、 枯草杆菌、产氨短杆菌这样的革兰氏阳性菌有抗菌作用，对大肠杆菌、产气肠杆菌、绿脓杆菌这样的革兰氏阴性菌及啤酒酵母菌、产朊假丝酵母菌、产黄青霉菌这样的真菌没有抗菌作用(非专利文献2)。然而，关于腰果壳油及/或檟如酸对于梭状芽胞杆菌属细菌、尤其对产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的抗菌作用不为人知，完全没有关于其对于坏疽性肠炎、肠毒血症、恶性水肿的预防以及治疗效果的报告。现有技术文献专利文献专利文献1 日本专利第2599161号公报专利文献2 日本专利特开2008-110951号公报专利文献3 日本专利特开平8-231410号公报# 专禾Ij JC ^ =Muroi, H. et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry 12, 583-587(2004)非特許文献2 :Himejima Μ. and Kubo I. , J. Agric. Food Chem. ,39, 418-421(1991)
发明内容
本发明的课题在于防治家畜的重大传染病-产气荚膜梭菌感染症。本发明人反复专心研究的结果，发现了腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或檟如酸和腰果酚的组合可以用于产气荚膜梭菌引起的疾病的防治，从而完成了本发明。即，本发明的要旨如下所述。(1)梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂，其特征在于，含有；腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者同时含有檟如酸和腰果酚。(2)防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物，其特征在于，含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者同时含有檟如酸和腰果酚。(3)防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料，其特征在于，含有腰果壳油、 加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者同时含有檟如酸和腰果酚。(4)防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物，其特征在于，含有(1)记载的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。(5)防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料，其特征在于，含有(4)记载的防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物。(6)梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治方法，其特征在于，向出现由梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的家畜投与腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者同时投与檟如酸和腰果酚。(7)腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合的用途，用于制造由梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。(8)腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合的用途，用于制造防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物。(9)腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合的用途，用于制造防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料。
含有本发明的防治剂和含有该防治剂的饲料通过投与给家畜，可以防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。本发明的防治剂和含有该防治剂的饲料能够通过杀灭梭状芽胞杆菌属细菌改善肠内环境来促进家畜的生长。
具体实施例方式本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂的特征是含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者同时含有檟如酸和腰果酚。还有，本发明中，防治是包括预防和治疗的概念。本发明中使用的腰果壳油是鸡腰果(Anacardium occidentale L.)的果实的壳中含有的油状液体。腰果壳油的成分包括檟如酸、腰果酚、腰果二酚。一般，檟如酸通过进行加热处理转换为腰果酚，也可以是通过加热处理仅成为腰果酚、腰果二酚的腰果壳油。如J. Agric. Food Chem. 2001，49，2548-2551记载，通过压榨腰果的壳提取出的非加热腰果壳油(以下称腰果壳油)含有阳 80质量％的檟如酸、5 20质量％的腰果酚、 5 30质量％的腰果二酚。将腰果壳油在130°C以上加热处理得到的加热处理腰果壳油中，腰果壳油的主成份檟如酸的大部分脱碳酸变成腰果酚，成为含有O 10质量％的檟如酸、55 80质量％的腰果酚、5 30质量％的腰果二酚的油。本发明中使用的腰果壳油可以通过压榨腰果的壳提取出的植物油来得到。此外， 本发明中使用的腰果壳油也可以通过加热或提取如将腰果壳干馏或溶剂提取来得到。进而，本发明中使用的腰果壳油也可以通过日本专利特开平8-231410号公报中记载的方法来得到。本发明中使用的腰果壳油可以是不加热而将腰果壳粉碎 破碎而得到的油。此外， 也可以是壳本身。本发明中使用的腰果壳油可以使用市售品。本发明的腰果壳油可以是将如上所述地得到的腰果壳油加热为70°C以上、理想的是加热为130°C以上而得到的腰果壳油。本发明的腰果壳油可以是从腰果壳压榨提取、将其在130°C加热处理得到的油。本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂也可以含有加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合来替代腰果壳油。作为本发明中使用的檟如酸举例有天然物檟如酸、合成檟如酸、它们的衍生物。此外，也可以使用市售的檟如酸。如日本专利特开平8-231410号公报中记载，可以通过用有机溶剂对腰果壳提取处理，使用如硅胶柱色谱法改变正己烷、醋酸乙酯及醋酸的混合溶剂的比率对得到的腰果油进行洗脱来得到檟如酸(日本专利特开平3-M0721号公报、特开平 3-240716号公报等)。作为本发明中使用的腰果酚举例有天然物腰果酚、合成腰果酚、它们的衍生物。此外，作为本发明中使用的腰果酚可以通过对腰果壳油的主成分檟如酸进行脱碳酸来得到。此外，使用加热处理腰果壳油时，加热腰果壳油中的檟如酸和腰果酚之间的质量比理想的是0 100 20 80。
以所述防治剂的总量为基准，本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂中的腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合的含量理想的是1质量％ 100质量％，更理想的是5质量％ 95质量％，特别理想的是10质量％ 90质量％。如果在1质量％以上，就可以有效防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。如果在5质量％以上、特别理想的是在10质量％以上，其倾向变显著，比较理想。另一方面，即使是100质量％也能防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病，为了改善动物的嗜好性，理想的是95质量％以下，特别理想的是在90质量％以下。本发明的防治剂可以用于防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。本发明中，梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病特别指感染产气荚膜梭菌而发病的疾病，具体地举例有坏疽性肠炎、肠毒血症、恶性水肿，并不限定于这些。本发明中含有的梭状芽胞杆菌属细菌举例有产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)、破伤风杆菌(C. tetani) >肉毒梭菌(C. botulinum) >艰难梭菌 (C. difficile)、热纤梭菌(C. thermocellum)、丁酸梭菌(C. butyricum)等，并不限定于此。本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂除了含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合之外，只要是乳糖、白糖、D-甘露醇、 淀粉、玉米淀粉、结晶纤维素、硅胶、轻质无水硅酸等的能够用于饲料或药品或食品的赋形剂，即可含有任何种类。此外，本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂除了含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合之外，也可以进一步含有对促进家畜以及家禽的生长有效的成分、营养辅助成分、提高保存稳定性的成分、包衣剂成分等的任意成分。作为这样的任意成分，举例有饲料的原料或饲料添加物、食品原料或食品添加物、药品原材料等。例如，肠球菌属细菌、芽孢杆菌属细菌、双歧杆菌、乳酸杆菌等的活菌剂； 淀粉酶、脂肪酶等的酶、L-抗坏血酸、氯化胆碱、肌醇、叶酸等的维生素；氯化钾、柠檬酸铁、 氧化镁、磷酸盐类等的矿物质、DL-丙氨酸、DL-蛋氨酸、L-赖氨酸等的氨基酸；富马酸、丁酸、乳酸、乙酸等的有机酸以及它们的盐；乙氧基喹、二丁基羟基甲苯等的抗氧化剂；丙酸钙等的防霉剂；羧甲基纤维素(CMC)、酪蛋白钠、聚丙烯酸钠等的粘结剂；脂肪酸甘油酯、脱水山梨糖醇脂肪酸酯等的乳化剂；虾青素、角黄素等的色素；各种酯、醚、酮类等的着香料。本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂的剂型没有特别限制，举例有粉剂、液剂、固体、片剂、胶囊、乳剂、颗粒剂、包衣剂等任意形态，理想的是粉剂、液剂、胶囊、 颗粒剂、包衣剂。作为粉剂，也可以在腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合中添加上述赋形剂，进行粉末化。作为液剂，可以直接使用腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合，也可以在乙醇等的溶剂中溶解腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、 腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合，或者也可以添加上述赋形剂或任意成分使用。作为胶囊，可以将腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合直接装入胶囊中，或者也可以添加上述赋形剂或任意成分。作为颗粒剂，可以在腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合中添加上述赋形剂，造粒，颗粒化。
作为包衣剂，可以在腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合中添加上述赋形剂并造粒，用包衣剂等包衣。如上所述，可以通过将腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚及根据需要的赋形剂或任意成分混合并进行制剂化来制造本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。还有，根据制剂的形态，可以使前述的腰果壳的粉碎 破碎物或没有经过任何处理的腰果壳直接与其他任意成分混合后作为本发明的防治剂。进而， 可以不混合其他成分而将粉碎·破碎物本身或腰果壳本身作为防治剂，也可以将所述防治剂本身作为饲料用组合物或者饲料。此外，也可以使腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、 腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合溶解于乙醇等的溶剂中，使其混合吸收到饲料用组合物或者饲料中。本发明的饲料用组合物的特征是含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合。本发明的饲料用组合物中的腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合的含量，以总量为基准，理想的是0. 0005质量％ 100质量％，更理想的是0. 05质量％ 95质量％，尤其理想的是1质量％ 90质量％。0.0005质量％以上的话，可以有效防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。0.05质量％以上、尤其理想的在1质量％以上的话，其倾向变显著，比较理想。另一方面，即使在 100质量％也可以防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病，但为了改善动物的嗜好性，理想的是在95质量％以下，尤其理想的是90质量％以下。将本发明的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂用作饲料用组合物时，可以与用于动物用补充剂(以下称补充剂)的其他补充剂成分混合做成补充剂。补充剂的种类或腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合以外的成分没有特别限定。本发明的饲料的特征在于，含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合。此外，本发明的饲料中的腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合的含量，每份饲料的干燥质量，以总量为基准，理想的是0. 001 5质量％，更理想的是0. 01 2质量％，尤其理想的是0. 1 1质量％。0. 001质量％以上时，可以有效防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病。0. 01质量％以上、尤其理想的是0. 1质量％ 以上的话，其倾向变显著，比较理想。另一方面，即使在5质量％也可以防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病，但为了改善动物的嗜好性，理想的是在2质量％以下，尤其理想的是在 1质量％以下。将腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合直接添加到饲料成分中混合，或者将含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合的饲料用组合物添加到饲料成分中并混合，可以制造本发明的饲料。 此时，使用粉末状、固体状的饲料用组合物时，为了容易混合，可以将饲料用组合物做成液状或凝胶状的形态。此时，可以将水、植物油、液体动物油、矿物油、合成油、水溶性高分子化合物等的流动性液体作为液体载体使用。此外，为了确保饲料中的腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合的均一性，混合藻酸、藻酸钠、苍耳烷胶、 酪蛋白钠、阿拉伯胶、瓜尔胶、罗望子种子多糖类等的水溶性多糖类也比较理想。
摄取本发明的饲料的家畜中除了牛、猪等的家畜外也包括鸡等的家禽。摄取的饲料的量可以依据家畜的种类、体重、年龄、性别、健康状态、饲料的成分等适当调节。摄取饲料的方法及饲养的方法可以根据家畜的种类采取通常使用的方法。实施例制造例从力〉工一 · l· > 一 fM W (株)得到500kg腰果壳，压榨，从而制造了腰果壳油158kg。此外，从力* ^一 卜> — W (株)得到通过在130°C下加热处理将檟如酸转换为腰果酚的加热处理腰果壳油(二一> K > 7才O (印度产))。腰果壳油的组成用以下的方法测定。S卩，使用了 HPLC(WaterS600、日本々才一夕一文(株))、检测器(Waters490E、日本々才一夕一文(株))、打印机(夕π 卜/O 夕C-R6A、岛津制作所)、柱(SUPELCOSIL LC18、SUPELC0社)。使用乙腈水醋酸为 80 20 1(容量比)的溶剂，流速为anl/分钟。用280nm的吸光度检测。腰果壳油中含有檟如酸61. 8质量％、腰果酚8. 2质量％、腰果二酚19. 9质量％， 加热处理腰果壳油中含有檟如酸0. 0质量％、腰果酚71. 4质量％、腰果二酚14. 4质量％。实施例1依据日本化学疗法学会标准法(1981)测定腰果壳油以及加热处理腰果壳油的最小发育阻止浓度(MIC)。前培养使用感受性测定用肉汤培养基(日水制药(株)产品)培养，对接种菌液用生理盐水调整至约IO5 106CFU/ml。测定培养基使用了感受性测定用培养基(日水制药(株)产品)。厌氧培养产气荚膜梭菌，37°C下约20小时后测定。结果在表1显示。[表1]腰果壳油的最小发育阻止浓度
权利要求
1.梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂，其特征在于，含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者同时含有檟如酸和腰果酚。
2.防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物，其特征在于，含有腰果壳油、 加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者同时含有檟如酸和腰果酚。
3.防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料，其特征在于，含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者同时含有檟如酸和腰果酚。
4.防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物，其特征在于，含有权利要求1 记载的梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。
5.防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料，其特征在于，含有权利要求4记载的防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物。
6.梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治方法，其特征在于，向出现由梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的家畜投与腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者同时投与檟如酸和腰果酚。
7.腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合的用途， 用于制造由梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。
8.腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合的用途， 用于制造防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料组合物。
9.腰果壳油、加热处理腰果壳油、檟如酸、腰果酚或者檟如酸和腰果酚的组合的用途， 用于制造防治梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病用饲料。
全文摘要
本发明提供特征为含有腰果壳油、加热处理腰果壳油、槚如酸、腰果酚或者同时含有槚如酸和腰果酚的、梭状芽胞杆菌属细菌引起的疾病的防治剂。
文档编号A23K1/16GK102245193SQ200980150310
公开日2011年11月16日 申请日期2009年12月14日 优先权日2008年12月12日
发明者望月正己, 杉本康明, 长岛协 申请人:出光兴产株式会社