专利名称：一种利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法
技术领域：
本发明属于饲料行业，具体是一种利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法。
背景技术：
李用芳等检测了香菇菌渣的营养成分，包括灰分、还原糖、总糖、粗脂肪、磷、粗蛋白、粗纤维等，证明香菇可用于饲料(李用芳，李学梅，李鹤宾.香菇木屑菌渣营养成分分析及在平菇菌种生产中的应用.微生物学杂志，2001，21 (3):59-60)。白永亮等具体介绍了研究利用工业生产剩下的香菇渣，接种纤维单胞菌和产朊假丝酵母菌进行发酵，生产出高蛋白饲料的试验结果(白永亮，杜冰，肖南，等.香菇渣发酵饲料的研究.广东饲料，2011，20 (6):20-22)。具体方法是，香菇渣经干燥粉碎以后，添加一定量的玉米淀粉和麸皮混合，接种纤维单胞菌和产朊假丝酵母菌进行发酵，得到发酵饲料。多种大型真菌具有降解纤维素、半纤维素和木质素的能力，香菇也具有这种能力(叶汉玲，尤纪雪，房桂干.选择性降解木质素白腐菌筛选的研究.纤维素科学与技术，2004，12 (1):19-26)。葡萄压榨后产生汁和大量皮渣。对葡萄皮渣的处理方法，主要包括作为粗饲料不加工，其营养价值比较低；或者当作肥料掩埋，但容易滋生病菌，污染环境。葡萄皮渣中含有较多的纤维物质，能快速通过猪的胃肠，导致养分的吸收利用率降低，因此会降低饲料利用效率(王敬勉，廖德胜，张永洪.葡萄皮渣发酵制饲料研究.饲料研究，1996 (11):10-11页)。未发现以葡萄皮渣配合豆柏、麸皮和玉米面做培养基原料或饲料生产的原料，并使用香菇菌和酵母菌共生的培养液，接种固体原料，通过培养香菇菌和酵母菌共生发酵生产猪饲料的报道。
发明内容
本发明提供一种利用香菇分解纤维素、半纤维素等的能力，与酵母菌共生发酵，将葡萄酒生产的废弃物葡萄皮渣，以及补加的麸皮、玉米面和豆柏制作成蛋白饲料的方法，该方法利用香菇生长过程分泌的酶降解葡萄皮渣和辅料中的纤维物质和半纤维质等，可以增加配方中葡萄皮渣的比例，降低饲料成本，增加经济效益；酶降解生成的糖又可以被酵母菌所利用，发酵生成醇、酯类等风味物质，促进猪的食欲，提高饲料中生物蛋白的质量和适口性。葡萄皮渣中Ca和P等矿物质含量较高，膳食纤维丰富，所以废弃不仅浪费了资源，而且污染了环境。依据猪饲料国家(行业)标准制成葡萄皮渣蛋白饲料，可形成资源的循环利用，对循环经济和可持续发展具有一定意义。本发明的技术方案是这样实现的:一种利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，将葡萄皮渣、麸皮、玉米面和豆柏混合制成基料，加入培养液进行菌种培养并发酵制成饲料，所述培养液为香菇——酵母种子液，其制作方法为:在无菌条件下，取香菇至马铃薯葡萄糖培养基中，25 28°C下培养3 5天，接种酿酒酵母再培养2 5天。进一步地，所述的马铃薯葡萄糖培养基的制法为:200g马铃薯洗净去皮切成小块，加水IOOOml煮沸半个小时，纱布过滤后加入10 20g葡萄糖。进一步地，所述葡萄皮渣、麸皮、玉米面和豆柏所占基料的质量分数分别为:葡萄皮渣20 30%，麸皮10 25%，玉米面25 30%，豆柏25 30%。进一步地，基料中加入20 30%的水，混合均匀后经100 121°C蒸汽灭菌60 120分钟，冷却至室温后加入培养液进行培养，在20 25°C培养3 5天，直至出现白色丝状菌体后，再敷膜隔氧发酵24 96小时。进一步地，所述培养液的加入量为基料质量的5 10%。进一步地，将香菇用75%酒精消毒后再至马铃薯葡萄糖培养基培养。 进一步地，所述香菇一酵母种子液的培养过程中，用摇瓶机震荡培养。进一步地，发酵后的饲料经47 50°C热风干燥处理。相同构思的另一种技术方案为:一种利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，将葡萄皮渣、麸皮、玉米面和豆柏混合制成基料，先后加入香菇种子液和酵母种子液进行菌种培养并发酵制成饲料，其特征在于，所述香菇种子液为:在无菌条件下，先取香菇至马铃薯葡萄糖培养基中，25 28°C下培养3 5天，接种到基料中，25 28°C下培养5 10天；所述酵母种子液用常规培养基，25 30°C下培养2 3天后，接种到上述混合料中，25 30°C下培养2 5天。进一步地，香菇种子液以5 10%接种到基料中，酵母种子液以5 10%接种到香燕种子液培养后的混合料中。进一步地，常规的培养基为马铃薯葡萄糖培养基、合成培养基或者10° Bx麦芽浸出汁培养基。进一步地，所述合成培养基的制法为:葡萄糖5 g，KH2PO4 2.5 g，Na2HPO4 0.5 g，(NH4)2SO4 I g，尿素 I g，MgSO4.7Η20 0.5 g，酵母膏 0.5 g, FeSO4 0.1 g，l%孟加拉红水溶液3.3 mL，水定容至1000 mL，其pH值为4.5。进一步地，所述葡萄皮渣、麸皮、玉米面和豆柏的占基料的质量分数分别为:葡萄皮渣20 30%，麸皮10 25%，玉米面25 30%，豆柏25 30%。进一步地，发酵后的饲料经47 50°C热风干燥处理。进一步地，在香菇种子液和酵母种子液进行菌种培养过程中用摇瓶机震荡培养。本发明的有益效果为:有效地利用葡萄加工产生的废弃物葡萄皮渣及残余营养成分，深层次利用了资源；使用摇瓶机震荡培养菌种，使共生菌健壮、无杂菌，保证了固体发酵周期稳定和成功；葡萄皮渣蛋白饲料产品具有蛋白品质和浓郁醇酯香气与原料香味，提高了饲料品质和适口性；完善了 “葡萄种植一葡萄酒酿造一葡萄皮渣一猪饲料一猪的排泄物—沼气发电一沼渣一葡萄种植”的生产链，可实现循环生产经济。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明作进一步解释说明。实施例1 (I)除去葡萄皮渣中的梗、土石块等，与麸皮、玉米面和豆柏混配制成基料，比例为3:1:3:3 (质量比)。加入25%的水。混合均匀，以手握原料，指缝可见水但不流淌、松开后不成团为度。(2)100°C隔水蒸汽灭菌120分钟。(3)在无菌条件下，从香菇菌盖和菌柄交界处，切取内部组织(经75%酒精消毒)小块至马铃薯葡萄糖培养基中，控温20°C，摇瓶机连续震荡培养5天，再接种酿酒酵母菌，250C，摇瓶机培养5天，直至出现白色丝状菌体，且酵母数量达到IO5 6个/毫升。(4)把香菇一酵母种子液按8%比例泼入固体基料中，控温20°C 25°C培养3天 5天，期间每日翻料，直至可见白色丝状菌体后，再敷膜隔氧发酵72小时，当酵母数量达到IO3 4个/克原料，嗅到轻微酒味时结束。(5)发酵后的饲料经50°C热风干燥4小时，使水分降低至12%以下，即得蛋白饲料成品。实施例2 (I)葡萄皮渣、麸皮、玉米面和豆柏农副产品配合比例为1:1:1:1 (质量)，加入25%的水。混合均匀，以手握原料，指缝可见水但不流淌、松开后不成团为度。(2)121°C蒸汽灭菌60分钟。(3)在无菌条件下，从香菇菌盖和菌柄交界处，切取内部组织(经75%酒精消毒)小块至马铃薯葡萄糖培养基中，控温25°C，摇瓶机连续震荡培养4天，再接种酿酒酵母菌，280C，摇瓶机培养4天，直至出现白色丝状菌体，且酵母数量达到IO5 6个/毫升。(4)把香菇一酵母种子液按5%比例接种到固体混合原料中，控温20°C 25°C培养5天，期间每日翻料，直至可见白色丝状菌体后，再敷膜隔氧发酵96小时，取样镜检镜下视野可见酵母细胞，嗅到轻微酒味时结束。(5)发酵后的饲料经47°C热风干燥12小时左右，使水分降低至12%以下，即得蛋白饲料成品。实施例3 (I)葡萄皮渣、麸皮、玉米面和豆柏农副产品配合比例为2:2:3:3 (质量)，加入25%的水。混合均匀，以手握原料，指缝可见水但不流淌、松开后不成团为度。(2)121°C蒸汽灭菌60分钟。(3)在无菌条件下，从香菇菌盖和菌柄交界处，切取内部组织(经75%酒精消毒)小块至马铃薯葡萄糖培养基中，控温25°C，摇瓶机连续震荡培养4天，按10%接种到混合原料中，控温25°C培养5天，期间每日翻料，直至出现白色丝状菌体。(4)酿酒酵母种子液用常规的IOBx麦芽浸出汁(同啤酒生产用的麦芽汁)培养基，28°C摇瓶机培养2天后，按10%接种到前述的发酵原料中，翻拌均匀，敷膜隔氧25°C 28°C发酵72小时 96小时，当酵母数量达到10卜3个/克原料，嗅到轻微酒味时结束。(5)发酵后的饲料经48°C热风干燥8小时左右，使水分降低至12%以下，即得蛋白饲料成品。以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式
，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，将葡萄皮渣、麸皮、玉米面和豆柏混合制成基料，加入培养液进行菌种培养并发酵制成饲料，其特征在于，所述培养液为香菇一酵母种子液，其制作方法为:在无菌条件下，取香菇至马铃薯葡萄糖培养基中，25 28°C下培养3 5天，接种酿酒酵母再培养2 5天。
2.根据权利要求1所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，所述的马铃薯葡萄糖培养基的制法为:200g马铃薯洗净去皮切成小块，加水IOOOml煮沸半个小时，纱布过滤后加入10 20g葡萄糖。
3.根据权利要求1或2所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，所述葡萄皮渣、麸皮、玉米面和豆柏所占基料的质量分数分别为:葡萄皮渣20 30%，麸皮10 25%，玉米面25 30%，豆柏25 30%。
4.根据权利要求1或2所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，基料中加入20 30%的水，混合均匀后经100 121 °C蒸汽灭菌60 120分钟，冷却至室温后加入培养液进行培养，在20 25°C培养3 5天，直至出现白色丝状菌体后，再敷膜隔氧发酵24 96小时。
5.根据权利要求1或2所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，所述培养液的加入量为基料质量的5 10%。
6.根据权利要求1或2所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，将香菇用75%酒精消毒后再至马铃薯葡萄糖培养基培养。
7.根据权利要求1或2所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，所述香菇一酵母种子液的培养过程中，用摇瓶机震荡培养。
8.根据权利要求1 或2所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，发酵后的饲料经47 50°C热风干燥处理。
9.一种利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，将葡萄皮渣、麸皮、玉米面和豆柏混合制成基料，先后加入香菇种子液和酵母种子液进行菌种培养并发酵制成饲料，其特征在于，所述香菇种子液为:在无菌条件下，先取香菇至马铃薯葡萄糖培养基中，25 28°C下培养3 5天，接种到基料中，25 28°C下培养5 10天；所述酵母种子液用常规培养基，25 30°C下培养2 3天后，接种到上述混合料中，25 30°C下培养2 5天。
10.根据权利要求9所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，香菇种子液以5 10%接种到基料中，酵母种子液以5 10%接种到香菇种子液培养后的混合料中。
11.根据权利要求9所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，常规的培养基为马铃薯葡萄糖培养基、合成培养基或者10° Bx麦芽浸出汁培养基。
12.根据权利要求9所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，所述合成培养基的制法为:葡萄糖5 g, KH2PO4 2.5 g, Na2HPO4 0.5 g，(NH4)2SO4 I g，尿素 I g，MgSO4.7H20 0.5 g，酵母膏 0.5 g, FeSO4 0.1 g，I % 孟加拉红水溶液 3.3 mL，水定容至1000 mL，其pH值为4.5。
13.根据权利要求9所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，所述葡萄皮渣、麸皮、玉米面和豆柏的占基料的质量分数分别为:葡萄皮渣20 30%，麸皮10 25%，玉米面25 30%，豆柏25 30%。
14.根据权利要求9所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，发酵后的饲料经47 50°C热风干燥处理。
15.根据权利要求9所述的利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法，其特征在于，在香菇种子液和酵 母种子液进行菌种培养过程中用摇瓶机震荡培养。
全文摘要
本发明公开了一种利用香菇分解纤维素、半纤维素等的能力，与酵母菌共生发酵，将葡萄酒生产的废弃物葡萄皮渣，以及补加的麸皮、玉米面和豆粕制作成蛋白饲料的方法。本发明有效地利用葡萄加工产生的废弃物葡萄皮渣及残余营养成分，深层次利用了资源；使用摇瓶机震荡培养菌种，使共生菌健壮、无杂菌，保证了固体发酵周期稳定和成功；葡萄皮渣蛋白饲料产品具有生物蛋白品质和浓郁醇酯香气与原料香味，提高了饲料品质和适口性。
文档编号A23K1/18GK103082145SQ201310033438
公开日2013年5月8日 申请日期2013年1月29日 优先权日2013年1月29日
发明者周广麒, 陈成, 齐文茂 申请人:大连工业大学