一种基于植物生长素调节基因gh3的asa型酶抑制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种基于植物生长素调节基因GH3的ASA型酶抑制剂及其制备方法，其中酶抑制剂的结构式为：R为苯乙基或萘基。本发明的酶抑制剂对于GH3-6的IC50分别为16.00±1.80、0.45±0.02μM，具有较好的酶抑制活性，在农药等领域显示潜在的应用前景。本发明酶抑制剂的制备方法简单，无需特殊反应条件，在常温常压下反应，后处理简便，产物收率较高。
【专利说明】—种基于植物生长素调苄基因GH3的ASA型酶抑制剂及其制备方法
一、【技术领域】
[0001]本发明涉及一种酶抑制剂及其制备方法，具体地说是一种基于植物生长素调苄基因GH3的ASA型酶抑制剂及其制备方法。
二、【背景技术】
[0002]植物生长素是最早发现的植物激素，它的化学本质是一类没有结构特征的有机小分子物质，包括水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)以及最有代表性的2-吲哚乙酸(IAA)等，主要集中在植物的嫩芽、顶端、根尖等具有生长优势的部位。它们对细胞的分裂与增殖、组织与器官的分化、开花与果实成熟、种子的萌发及休眠等有重要的生理调节作用。植物生长素对于植物的生理具有双重调节作用:在低浓度时，它可以促进嫩芽生长，根尖发达；在高浓度时会抑制植物顶端、根系的生长，甚至会导致植物死亡等。
[0003]目前，对于植物生长素调苄基因研究较彻底的是GH3基因家族。在拟南芥基因组中，目前已经发现19个基因成员，分别命名为GH3-l、GH3-2、GH3-3、……GH3-19等。已经有证据表明，GH3基因编码的蛋白质具有催化水杨酸(SA) J引哚乙酸(IAA)、茉莉酸(JA)的腺苷化作用，从而可以调节这些植物激素的体内水平。另外，研究还发现它们还能催化IAA与各种氨基酸的连接反应，以IAA-X(X = Ala、Asp、Glu、Leu等)非活性体的形式存储在体内，从而达到调节IAA和相关氨基酸在体内水平的目的。具体过程如下式所示:
[0004]
【权利要求】
1.一种基于植物生长素调苄基因GH3的ASA型酶抑制剂，其特征在于其结构式为:
其中R为苯乙基或萘基。
2.—种权利要求1所述的基于植物生长素调苄基因GH3的ASA型酶抑制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤: 1)羧基的活化 在氮气保护下，将羧酸和羧基活化剂溶于有机溶剂中，室温下密闭反应l_2h，得到中间体I ; 所述羧酸和所述羧基活化剂之间的摩尔比为1:1.1-1.3 ； 所述中间体I的结构式为:
R为苯乙基或萘基； 2)偶联 向步骤I)制得的反应液中加入ASA中间体，在冰水浴的条件下向反应液中加入1，8-二氮杂环[5.4.0] 十一碳-7-烯，室温密闭条件下反应8-12h，分离纯化后得到中间体2 ; 反应液中中间体1、ASA中间体以及1，8_ 二氮杂环[5.4.0]十一碳_7_烯之间的摩尔比为:1:1:1.8-2.5 ； 所述ASA中间体的结构式为:
所述中间体2的结构式为:
R为苯乙基或萘基； 3)脱保护基 将中间体2加入脱保护基试剂溶液中，室温下反应1.5-2.5h，反应结束后减压脱除溶剂，以丙酮重结晶后得到目标产物。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于: 步骤I)中所述羧酸为苯丙酸或萘甲酸；所述羧基活化剂为羰基二咪唑、N-羟基琥珀酰亚胺、1- (3- 二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐或二环己基碳二亚胺。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于:步骤I)中所述有机溶剂为无水乙腈、N，N-二甲酰胺、二甲亚砜或干燥的二氯甲烷。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于: 步骤2)中所述分离纯化的具体过程如下: 反应结束后将反应液减压蒸馏脱除溶剂，然后加入CHCl3溶解，再加入质量浓度3%的柠檬酸溶液洗涤，分离收集有机相，有机相依次用水和饱和食盐水洗涤后经无水硫酸钠干燥，减压蒸馏脱除CHCl3,随后过硅胶柱分离得到中间体2。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于: 步骤3)中所述脱保护基试剂溶液为质量浓度80%的HCOOH水溶液、质量浓度的5-10 %盐酸溶液或三氟乙酸。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于: 步骤3)中所述以丙酮重结晶的具体过程如下: 将减压脱除溶剂后得到的白色固体加入烧瓶中，加入丙酮，加热至回流状态并不断添加新的丙酮，直至白色固体不再溶解，趁热过滤，滤液在冰水浴的条件下静置结晶，过滤、洗涤并干燥后即得目标产物。
【文档编号】A01P21/00GK104177361SQ201410422288
【公开日】2014年12月3日 申请日期:2014年8月25日 优先权日:2014年8月25日
【发明者】杨庆华 申请人:合肥工业大学