一种山香圆再生植株的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种山香圆再生植株的快速繁殖方法，包括山香圆叶片的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽等步骤，本发明方法建立了山香圆的植株再生体系，生长周期短，遗传稳定性好，可以短期内提供大量的山香圆幼苗。
【专利说明】 一种山香圆再生植株的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及山香圆组织培养的快繁方法，属于植物栽培【技术领域】。
【背景技术】
[0002]山香圆，小乔木，Turpiniaarguta(Lindl.)Seem.省沾油科，枝灰白绿色。叶对生，两面无毛，圆锥花序顶生，花较多，疏松，花小，果球形，皮薄，紫红色，喜凉爽湿润的小气候，苗期稍能耐阴，成年树喜阳光，稍耐寒，在排水良好，深厚肥沃的土壤。中国南部和西南部。中南半岛、印度尼西亚的爪哇和苏门答腊也有。叶含2 α，3 β - 二羟基乌苏-12-烯-28-羧酸即2 α -羟基熊果酸，2 α，3 β，19 α -三羟基乌苏_12_烯_28_羧酸即2 α，19 α -二羟基熊果酸，α-香树脂醇，熊果酸，19 α-羟基熊果酸，肉豆蘧酸，胡萝卜甙，2α-过氧基熊果酸，药用部分为山香圆的叶。夏、秋二季叶茂盛时采收，除去杂质，晒干。性味苦，寒。归肺、肝经。功能:清热解毒，利咽消肿，活血止痛。用于乳蛾喉痹，咽喉肿痛，疮疡肿毒，跌扑伤痛，用种子繁殖。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种山香圆的快速繁殖方法，该方法建立了山香圆的植株再生体系，生长周期短，遗传稳定性好，可以短期内提供大量的山香圆幼苗。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取山香圆幼嫩的叶片，流水冲洗干净，用1%次氯酸钠中浸泡8min，浸入70%酒精lmin,无菌水冲洗5遍至无残留，消毒处理过的山香圆叶片接入培养基MSB+1.0mg/L6-BA+0.02mg/LNAA中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，温度24°C，暗光照，PH5.8，诱导出来的愈伤组织放入培养基MSB+1.0-1.2mg/L6-BA+0.8-1.0mg/LKT+硫酸腺嘌呤10-20mg/L进行愈伤组织的分化，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，温度24°C，光照强度25001x，每天光照时间10h，PH5.8，分化培养出来的不定芽，放入MS培养基中生根诱导，生根后的试管苗洗去琼脂，移栽到装有蛭石:泥炭土 =1:1的育苗箱内，覆盖塑料薄膜，一周后揭膜，在玻璃温室中生长，一个月后统计成活率。
[0005]采用本发明制备的山香圆成活率高，周期短，产量大，污染小，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取山香圆幼嫩的叶片，流水冲洗干净，用1%次氯酸钠中浸泡8min，浸入70%酒精lmin,无菌水冲洗5遍至无残留，消毒处理过的山香圆叶片接入培养基MSB+1.0mg/L6-BA+0.02mg/LNAA中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，温度24°C，暗光照，PH5.8，诱导出来的愈伤组织放入培养基MSB+1.0mg/L6-BA+0.8mg/LKT+硫酸腺嘌呤lOmg/L进行愈伤组织的分化，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，温度24°C，光照强度25001x，每天光照时间10h, pH5.8,分化培养出来的不定芽,放入MS培养基中生根诱导，生根后的试管苗洗去琼脂，移栽到装有蛭石:泥炭土 =1:1的育苗箱内，覆盖塑料薄膜，一周后揭膜，在玻璃温室中生长，一个月后统计成活率，成活率88%。
[0008]实施例2
取山香圆幼嫩的叶片，流水冲洗干净，用1%次氯酸钠中浸泡8min，浸入70%酒精lmin,无菌水冲洗5遍至无残留，消毒处理过的山香圆叶片接入培养基MSB+1.0mg/L6-BA+0.02mg/LNAA中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，温度24°C，暗光照，PH5.8，诱导出来的愈伤组织放入培养基MSB+1.2mg/L6-BA+l.0mg/LKT+硫酸腺嘌呤20mg/L进行愈伤组织的分化，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，温度24°C，光照强度25001x，每天光照时间10h, pH5.8,分化培养出来的不定芽,放入MS培养基中生根诱导，生根后的试管苗洗去琼脂，移栽到装有蛭石:泥炭土 =1:1的育苗箱内，覆盖塑料薄膜，一周后揭膜，在玻璃温室中生长，一个月后统计成活率，成活率89%。
[0009]实施例3
取山香圆幼嫩的叶片，流水冲洗干净，用1%次氯酸钠中浸泡8min，浸入70%酒精lmin,无菌水冲洗5遍至无残留，消毒处理过的山香圆叶片接入培养基MSB+1.0mg/L6-BA+0.02mg/LNAA中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，温度24°C，暗光照，PH5.8，诱导出来的愈伤组织放入培养基MSB+1.2mg/L6-BA+0.8mg/LKT+硫酸腺嘌呤20mg/L进行愈伤组织的分化，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，温度24°C，光照强度25001x，每天光照时间10h, pH5.8,分化培养出来的不定芽,放入MS培养基中生根诱导，生根后的试管苗洗去琼脂，移栽到装有蛭石:泥炭土 =1:1的育苗箱内，覆盖塑料薄膜，一周后揭膜，在玻璃温室中生长，一个月后统计成活率，成活率90%。
【权利要求】
1.一种山香圆再生植株的快速繁殖方法，包括山香圆叶片的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取山香圆幼嫩的叶片，进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的山香圆叶片接入培养基MSB+1.0mg/L6-BA+0.02mg/LNAA中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，温度24°C，暗光照，pH5.8 ； (3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入培养基MSB+1.0-1.2mg/L6-BA+0.8-1.0mg/LKT+硫酸腺嘌呤10-20mg/L进行愈伤组织的分化，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，温度24°C，光照强度25001x，每天光照时间10h，pH5.8 ； (4)取步骤(3)分化培养出来的不定芽，放入MS培养基中生根诱导，生根后的试管苗进行炼苗移栽。
2.按照权利要求1所述的一种山香圆再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(O中所述山香圆叶片的消毒方法为选取山香圆幼嫩的叶片，流水冲洗干净，用1%次氯酸钠中浸泡8min,浸入70%酒精lmin,无菌水冲洗5遍至无残留。
3.按照权利要求1所述的一种山香圆再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中山香圆的炼苗方法为已生根的幼苗，洗去琼脂，移栽到装有蛭石:泥炭土 =1:1的育苗箱内，覆盖塑料薄膜，一周后揭膜，在玻璃温室中生长。
【文档编号】A01H4/00GK104255507SQ201410540436
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司