一种诃子再生植株的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种诃子再生植株的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽等步骤，本发明方法所制备的诃子再生植株品质优良，性状稳定，再生成活率高，短期内可以提供大量的诃子幼苗，并能有效降低生产成本。
【专利说明】
一种诃子再生植株的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及组培条件下诃子再生植株的培养，属于植物栽培【技术领域】。
【背景技术】
[0002]诃子，Terminalia chebula Retz.,又称诃黎勒、诃黎、诃梨、随风子，使君子科，乔木，产云南西部和西南部；广东、广西有栽培。分布于东南亚大部。生于海拔800-1840米的疏林中，常成片分部。喜高温润气候。耐旱、耐霜。喜阳光充足。多生于海拔950-1850m之间，年雨量在1000-1500mm左右，对土壤要求不甚严格，但宜选疏松肥沃、排水良好的壤土栽培，产云南西部和西南部，广东、广西(南宁)有栽培。分布于越南(南部)、老挝、柬埔寨、泰国、緬甸、马来西亚、尼泊尔、印度。药用效果:敛肺；涩肠；下气；利咽；收敛、止泻；抗病原微生物；解痉，久泻；久痢；脱肛；喘咳痰嗽；久咳失音，治疗大叶性肺炎，细菌性痢疼，治疗白喉带菌者。目前主要用种子和嫁接繁殖，组培技术应用于诃子的繁殖尚未见报道。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供诃子再生植株的快速繁殖方法，本发明方法所制备的诃子再生植株品质优良，性状稳定，再生成活率高，短期内可以提供大量的诃子幼苗，并能有效降低生产成本。
[0004]为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案:
取诃子的叶片，在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗为25min，超净工作台上氯化汞处理9min，无菌水冲洗5遍，消毒处理过的诃子叶片放入_4°C液氮罐中低温处理12h，取出接入培养基配方为VR+2，4-D0.5mg/L+ZT4mg/l的培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，暗室培养，温度26°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基VR+NAA0.lmg/L+TDZ0.lmg/L+ABA5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，温度26°C，取长约3cm的芽苗从培养瓶中取出浸润在1/2MS+NAA0.5mg/L配制而成的培养液30min，用双层黑色遮荫网覆盖，定时浇水除草，每隔一周喷施80%的疫霜灵800倍溶液，温度25°C，湿度90%，一个月后统计生根情况。
[0005]采用本发明制备的诃子生长速度快，生根率高，操作简单，能耗小，污染小。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取诃子的叶片，在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗为25min，超净工作台上氯化汞处理9min，无菌水冲洗5遍，消毒处理过的诃子叶片放入_4°C液氮罐中低温处理12h，取出接入培养基配方为VR+2，4-D 0.5mg/L+ZT4mg/l的培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，暗室培养，温度26°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基VR+NAA0.lmg/L+TDZ0.lmg/L+ABA3mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，温度26°C，取长约3cm的芽苗从培养瓶中取出浸润在1/2MS+NAA0.5mg/L配制而成的培养液30min，用双层黑色遮荫网覆盖，定时浇水除草，每隔一周喷施80%的疫霜灵800倍溶液，温度25°C，湿度90%，一个月后统计生根情况，生根率91%。
[0008]实施例2
取诃子的叶片，在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗为25min，超净工作台上氯化汞处理9min，无菌水冲洗5遍，消毒处理过的诃子叶片放入_4°C液氮罐中低温处理12h，取出接入培养基配方为VR+2，4-D 0.5mg/L+ZT4mg/l的培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，暗室培养，温度26°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基VR+NAA0.15mg/L+TDZ0.2mg/L+ABA5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，温度26°C，取长约3cm的芽苗从培养瓶中取出浸润在1/2MS+NAA0.5mg/L配制而成的培养液30min，用双层黑色遮荫网覆盖，定时浇水除草，每隔一周喷施80%的疫霜灵800倍溶液，温度25°C，湿度90%，一个月后统计生根情况，生根率90%。
[0009]实施例3
取诃子的叶片，在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗为25min，超净工作台上氯化汞处理9min，无菌水冲洗5遍，消毒处理过的诃子叶片放入_4°C液氮罐中低温处理12h，取出接入培养基配方为VR+2，4-D 0.5mg/L+ZT4mg/l的培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，暗室培养，温度26°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基VR+NAA0.lmg/L+TDZ0.2mg/L+ABA4mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，温度26°C，取长约3cm的芽苗从培养瓶中取出浸润在1/2MS+NAA0.5mg/L配制而成的培养液30min，用双层黑色遮荫网覆盖，定时浇水除草，每隔一周喷施80%的疫霜灵800倍溶液，温度25°C，湿度90%，一个月后统计生根情况，生根率93%。
【权利要求】
1.本发明研究了一种诃子再生植株的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽等，主要步骤如下: (1)取诃子幼嫩的叶片，按照常规的消毒方法对其进行消毒处理； (2)将步骤(I)消毒处理过的诃子叶片放入-4°C液氮罐中低温处理12h，取出接入培养基配方为VR+2，4-D0.5mg/L+ZT4mg/l的培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，ρΗ5.8，暗室培养，温度 26 0C ； (3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入培养基VR+NAA0.1-0.15mg/L+TDZ0.1-0.2mg/L+ABA3-5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照20001x，温度26 °C ； (4)取步骤(3)分化出来的芽苗进行野外生根诱导。
2.按照权利要求1所述的一种诃子再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中所述诃子无菌叶片的获得为，取诃子的叶片，在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗为25min,超净工作台上氯化萊处理9min,无菌水冲洗5遍。
3.按照权利要求1所述的一种诃子再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中所述野外生根诱导的方法为取长约3cm的芽苗从培养瓶中取出浸润在1/2MS+NAA0.5mg/L配制而成的培养液30min，用双层黑色遮荫网覆盖，定时浇水除草，每隔一周喷施80%的疫霜灵800倍溶液，温度25°C，湿度90%，一个月后统计生根情况。
【文档编号】A01H4/00GK104221870SQ201410540406
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司