毛诃子肉乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物及其组合物的医药用途和制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属医药技术领域，具体涉及一种毛诃子肉乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物及 其组合物的制备方法以及它在治疗阿尔茨海默病（AD)等方面的医药用途。
【背景技术】
[0002] 本品为使君子科植物毛诃子，学名Terminalia chebula Retz.，使君子科植物田比 黎勒Terminaliabillerica (Gaertn.) Roxb.的干燥成熟果实。产于我国云南西部和西 南部。果皮和树皮富含单宁（35-40%)，为一有价值的鞣料植物，系制革工业重要原料之一。 果实供药用，能敛肺涩肠，为治疗慢性痢疾的有效良药。幼果干燥后通称"藏青果"，治慢性 咽喉炎，咽喉干燥等。木材供建筑、车辆、农具、家具等用。
[0003] 毛诃子肉功效清热解毒，收敛养血，调和诸药之功效。用于各种热证，泻痢，黄水 病，肝胆病，病后虚弱。本发明通过大规模、系统地活性筛选，意外地发现维吾尔药毛诃子肉 提取物及其部分化学组分，具有显著地乙酰胆碱酯酶抑制活性，该活性提取物及其组合物 有望应用于治疗阿尔茨海默病（AD)等方面的医药用途。
【发明内容】
[0004] 本发明所解决的技术问题是提供一种毛诃子肉提取物。
[0005] 本发明还提供了以毛诃子肉提取物为主要活性成分的组合物。
[0006] 本发明同时提供了毛诃子肉提取物及其组合物的制备和在制备乙酰胆碱酯酶抑 制活性药物中的应用。
[0007] 本发明是通过如下技术方案实现的： 维吾尔药毛诃子肉经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅 胶柱，用氯仿-甲醇混合溶剂梯度洗脱(氯仿-甲醇，比例见表1)，各氯仿-甲醇比例混合 溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外筛选体系测试其乙酰胆碱酯酶抑制活性，意外地发现 先用氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿_甲醇，1〇〇: 5,体积比）洗脱，继用氯仿-甲醇混合溶剂(氯 仿-甲醇，100:8,体积比）洗脱得到的氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿-甲醇，100:8,体积比）洗 脱液经回收有机溶剂，干燥，即为乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物。而其他比例的洗脱部位， 没有乙酰胆碱酯酶抑制活性的作用。最优为先用氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿-甲醇，100:5， 体积比）洗脱10倍柱体积，继用氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿-甲醇，100:8,体积比）洗脱30 倍柱体积，洗脱液即为本发明乙酰胆碱酯酶抑制活性的提取物。乙酰胆碱酯酶抑制活性的 提取物，可以通过以上方法得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该毛诃子肉乙酰胆碱 酯酶抑制活性提取物从未见文献报道，其薄层谱色谱（TLC)分析表征如图1，TLC分析条件： GF254硅胶板，展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇（3:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。
[0008] 具体，发现过程如下： 1、毛诃子肉经溶剂超声提取物的制备 取维吾尔药毛诃子肉20g，经100mL溶剂超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0047A 6. 1726g，SN0047B 0. 8814g，合并共 2. 8508g 留样 0. 0362g，氯仿-甲醇系统洗 脱。
[0009] 2、氯仿-甲醇混合溶剂梯度洗脱方法和结果 取维吾尔药毛诃子肉20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物 SN0047A 6. 1726g，SN0047B 0. 8814g，合并共 2. 8508g 留样 0. 0362g。上柱，甲醇溶解，共 用甲醇15ml。上硅胶柱色谱，拌样硅胶3g，空白硅胶10g，玻璃柱内径2cm。系统梯度洗 脱(条件见表1 )，柱体积22ml，每个梯度洗脱200ml，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物， 即得，氯仿：甲醇梯度洗脱提取物，TLC分析结果见图2,图3, TLC分析条件：GF254硅胶板， 展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇（3:1:1)，氯仿：乙酸乙酯：甲醇（1:1:1)显色方法：香草 醛-硫酸显色。
[0010] 表 1
【主权项】
1. 一种毛诃子肉提取物，其特征为毛诃子肉经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶 柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比为100:5的氯仿-甲醇混合溶剂洗脱，继用体积比为 100:8的氯仿-甲醇混合溶剂洗脱，用100:8的氯仿-甲醇混合溶剂洗脱的洗脱液经回收溶 剂，干燥，即为该提取物。
2. 如权利要求1所述毛诃子肉提取物，其特征为，该提取物的提取用溶剂可以为甲醇、 氯仿、水、丙酮、氯仿、甲醇、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，，最优条件为甲醇和95%乙 醇；提取物提取用溶剂用量为药材重量的2-50倍(重量/体积比)。
3. 如权利要求1所述毛诃子肉提取物，其特征为毛诃子肉经溶剂超声提取，提取液浓 缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿-甲醇，100:5,体积 比)洗脱，洗脱2-50倍柱体积，继用氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿-甲醇，100:8,体积比)洗脱， 洗脱2-50倍柱体积，用氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿-甲醇，100:8,体积比）洗脱的洗脱液经 回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。
4. 如权利要求1所述的维吾尔药毛诃子肉提取物，其特征为，先用体积先用体积比为 100:5的氯仿-甲醇混合溶剂2-50倍洗脱，继用体积比为100:8的氯仿-甲醇混合溶剂 2-50倍洗脱，优选为先用氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿-甲醇，100:5,体积比)洗脱10倍柱体 积，继用氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿-甲醇，100:8,体积比）洗脱30倍柱体积。
5. 权利要求1所述提取物的制备方法，其特征为：毛诃子肉经溶剂超声提取，提取液浓 缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿-甲醇，100:5,体积 比）洗脱2-50倍柱体积，继用氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿-甲醇，100:8,体积比）洗脱2-50 倍柱体积，用氯仿-甲醇混合溶剂(氯仿-甲醇，100:8，体积比)洗脱的洗脱液经回收有机溶 剂，干燥，即为该提取物。
6. -种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的维吾尔药毛诃子 肉提取物和药学上可接受的载体。
7. -种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的毛诃子肉提取物或 权利要求6所述的药物组合物。
8. 如权利要求7所述的药物制剂，其特征在于，所述的制剂为固体分散体、环糊精包合 物、分散片。
9. 权利要求1-5任何一项所述提取物或权利要求6所述的组合物或权利要求7所述的 药物制剂在制备乙酰胆碱酯酶抑制活性药物中的应用。
10. 如权利要求9所述的应用，其特征在于，乙酰胆碱酯酶抑制活性可用于治疗阿尔茨 海默病（AD)等方面的医药用途。
11. 如权利要求1-5任何一项所述的维吾尔药毛诃子肉提取物，其特征在于，用TLC法 检测，其色谱条件为：GF254硅胶板，展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇=3:1: 1，显色方法：香 草醛浓硫酸显色。
【专利摘要】本发明属医药技术领域，具体涉及一种毛诃子肉乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物及其组合物的制备方法以及它在治疗阿尔茨海默病(AD)等方面的医药用途。所述的提取物通过如下方法获得：先用氯仿-甲醇混合溶剂（氯仿-甲醇，100:5，体积比）洗脱，继用氯仿-甲醇混合溶剂（氯仿-甲醇，100:8，体积比）洗脱，用氯仿-甲醇混合溶剂（氯仿-甲醇，100:8，体积比）洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即为乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物。
【IPC分类】G01N30-90, A61P25-28, A61K131-00, A61K36-185
【公开号】CN104739899
【申请号】CN201510058771
【发明人】热娜·卡斯木, 王金辉, 黄健, 李国玉, 刘晓雪, 王晓梅, 曹苑, 张珂
【申请人】新疆医科大学
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2015年2月4日