诃子乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物及其组合物的医药用途和制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属医药技术领域，具体涉及一种诃子乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物及其组 合物的制备方法以及它在治疗阿尔茨海默病（AD)等方面的医药用途。
【背景技术】
[0002] 诃子出自《本草图经》。乔木，高达30m。枝近无毛，皮孔细长，白色或淡黄色，幼枝 黄褐色，被绒毛。生于海拔800-1840米的疏林中，常成片分部。喜高温润气候。耐旱、耐霜。 喜阳光充足。多生于海拔950-1850m之间。年雨量在1000-1500mm左右。对土壤要求不甚 严格，但宜选疏松肥沃、排水良好的壤土栽培。产云南西部和西南部。广东、广西(南宁）有 栽培。分布于越南(南部)、老挝、柬埔寨、泰国、缅甸、马来西亚、尼泊尔、印度。
[0003] 诃子对敛肺；涩肠；下气；利咽；收敛、止泻；解痉；久泻；久痢；久咳失音具有一定 的功效，经诃子水煎液处理之小鼠恶性肿瘤(腹水癌、梭形细胞肉瘤）细胞、接种于小鼠体 内，将失其生活能力。诃子对小鼠艾氏腹水癌，中国小鼠腹水肉瘤，梭形细胞肉瘤的生长，具 有抑制作用。
[0004] 本发明通过大规模、系统地活性筛选，意外地发现维吾尔药诃子提取物及其部分 化学组分，具有显著地乙酰胆碱酯酶抑制活性，该活性提取物及其组合物有望应用于治疗 阿尔茨海默病（AD)等方面的医药用途。
【发明内容】
[0005] 本发明所解决的技术问题是提供一种诃子提取物。
[0006] 本发明还提供了以诃子提取物为主要活性成分的组合物。
[0007] 本发明同时提供了诃子提取物及其组合物的制备和在制备乙酰胆碱酯酶抑制活 性药物中的应用。
[0008] 本发明是通过如下技术方案实现的： 维吾尔药诃子经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅胶 柱，用石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱(石油醚-丙酮，比例见表1 )，各石油醚-丙酮比例混 合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外筛选体系测试其乙酰胆碱酯酶抑制活性，意外地发 现先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:25,体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混 合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积比)洗脱得到的石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮， 100:50,体积比)洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物。而其他 比例的洗脱部位，没有乙酰胆碱酯酶抑制活性的作用。特地，优选为先用石油醚-丙酮混合 溶剂(石油醚-丙酮，100:25,体积比）洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油 醚-丙酮，100:50,体积比）洗脱25倍柱体积，洗脱液干燥后即为乙酰胆碱酯酶抑制活性的 提取物。乙酰胆碱酯酶抑制活性的提取物可以通过以上方法得到富集，从而与其他杂质类 成分分离开。该诃子乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物从未见文献报道，其薄层谱色谱（TLC)分 析表征如图1，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1: 1:1)显 色方法：香草醛-硫酸显色。
[0009] 具体，发现过程如下： 1、诃子经甲醇超声提取物的制备 取维吾尔药诃子20 g，经100 mL甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物 SN0269A ，留样1.8106g 0. 9940g上样量1.9985g，拌样硅胶3. 0 g，空白硅胶10 g，石油醚-丙 酮系统洗脱。
[0010] 2、石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱方法和结果 取维吾尔药诃子20 g，经100 mL甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物 SN0269A，上柱，甲醇溶解，共用甲醇15 mL。上硅胶柱色谱，拌样硅胶3.0 g，空白硅胶10 g， 玻璃柱内径2. 0 cm，石油醚-丙酮系统梯度洗脱(条件见表1 )，柱体积25 mL，每个梯度洗 脱200 mL，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得，石油醚：丙酮梯度洗脱提 取物，TLC分析结果见图2,图3，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯： 丙酮（6:1:1)，石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。
[0011] 表 1
【主权项】
1. 一种诃子提取物，其特征为诃子经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上 样后的硅胶柱，先用体积比100:25的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，继用体积比100:50的石 油醚-丙酮混合溶剂洗脱，用100:50的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱的洗脱液经回收溶剂， 干燥，即为该提取物。
2. 如权利要求1所述诃子提取物，其特征为，该提取物的提取用溶剂可以为甲醇、石油 醚、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，优选为甲醇和95%乙醇； 提取物提取用溶剂用量为药材重量的2-50倍(重量/体积比)。
3. 如权利要求1所述诃子提取物，其特征为诃子经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅 胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:25,体积比)洗 脱，洗脱2-50倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积比)洗脱， 洗脱2-50倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积比)洗脱的洗脱 液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。
4. 如权利要求1所述的维吾尔药诃子提取物，其特征为，先用先用体积比100:25的石 油醚-丙酮混合溶剂2-50倍洗脱，继用体积比100:50的石油醚-丙酮混合溶剂2-50倍洗 脱，先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:25,体积比）洗脱15倍柱体积，继用石 油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积比）洗脱25倍柱体积。
5. 权利要求1所述提取物的制备方法，其特征为：诃子经溶剂超声提取，提取液浓缩 后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:25,体 积比）洗脱2-50倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积比）洗 脱2-50倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积比)洗脱的洗脱液 经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物；以上条件最优为先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油 醚-丙酮，100:25,体积比）洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮， 100:50，体积比）洗脱25倍柱体积。
6. -种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的提取物和药学上 可接受的载体。
7. -种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的提取物或权利要求6 所述的药物组合物。
8. 权利要求1-5任何一项所述的诃子提取物或权利要求6所述的组合物或权利要求7 所述的药物制剂在制备乙酰胆碱酯酶抑制活性药物中的应用。
9. 如权利要求8所述维吾尔药广枣提取物，其特征为，所述乙酰胆碱酯酶抑制活性， 可用于治疗阿尔茨海默病（AD)等方面的医药用途。
10. 权利要求1-5任何一项所述的一种维吾尔药诃子提取物，其特征在于，用TLC法检 测，其色谱条件为：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=1:1:1，显色方法：香 草醛浓硫酸显色。
【专利摘要】本发明属医药技术领域，具体涉及一种诃子乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物及其组合物的制备方法以及它在治疗阿尔茨海默病(AD)等方面的医药用途。所述的提取物通过如下方法获得：先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:50，体积比）洗脱，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:50，体积比）洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即为该乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物。
【IPC分类】A61P25-28, A61K36-185
【公开号】CN104825502
【申请号】CN201510058760
【发明人】热娜·卡斯木, 王金辉, 黄健, 李国玉, 王雁丽, 王小青, 马庆东, 张珂
【申请人】新疆医科大学
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年2月4日