一种甜薯茎段离体快速繁殖的方法与流程

本发明属于植物组织培养领域，涉及一种甜薯茎段离体快速繁殖的方法。

背景技术：
甜薯（D.esculenta(Lout)brukill）为山药同属不同种食用植物，广泛分布于热带、南亚热带地区，如中国广东、广西、海南及非洲尼日利亚等。其食用部分为类似马铃薯状的球形块茎，肉质细嫩、食味佳、入口绵软，可做蔬菜、杂粮或药用等。目前甜薯是品种丰富但无规模栽培的农家小种，我们近年来从海南农家引种，并通过耐寒性筛选获得了在江苏适生的品系，通过营养成分检测发现，其多糖含量为目前市场公认的多糖含量最高的铁棍山药的3~4倍；且与江苏主栽的直根类山药品种不同，甜薯为浅根类植物，种植无需挖深沟、筑高垄、套管等，收获也容易，因此，极大地降低了生产成本；甜薯一棵植株可生长30-40个球状块茎，亩产可达3000斤以上，产量大；同时，就其社会效益来看，甜薯抗旱耐肥、少病虫害且长势强，适合在江苏省缺水缺肥的低山丘陵地区种植，并且因其对光照要求不高，不仅可种植在已有的耕地上，还可以在次生林、经济林间的空地种植，不用与现有农作物抢占土地资源，从而缓解土地资源日益匮乏的矛盾。多糖含量高、浅根系易种好收、产量高、江苏适生等诸多优点，使得甜薯成为一个新兴的、开发潜力大、前景好的山药新种。此外，传统的山药种植是在收获季节选健壮、无病虫害的块茎贮藏，次年种植季节取出切断种植，这种传统的“春种、秋收、冬藏”方式存在种块严重浪费、繁殖速度很慢、人力物力消耗大等问题；而且，由于长期的无性繁殖，导致病毒和病害的积累与传播，致使品质退化、产量下降。前人研究表明，通过组织培养脱除病毒的方法不仅可以极大提高山药繁殖系数，而且也会解决长期营养繁殖所造成的病毒病和品质退化等问题，在很多种或品种如铁棍山药、怀山药、叉蕊薯蓣等中已有很多报道。甜薯中尚未见组织培养获得脱毒苗的研究报道，本发明将以甜薯为研究对象，通过不同外植体、不同激素种类与浓度处理等多因素多水平的实验设计，筛选出了最佳实验条件，建立了甜薯组织培养的最佳快速繁殖体系，为甜薯的产业化生产提供了理论依据和实践指导。

技术实现要素：
本发明提供了一种甜薯茎段离体快速繁殖的方法，通过组织培养技术，选择甜薯外植体，消毒灭菌后接种入不同的激素和浓度的培养基进行培养，并筛选出最佳快速获得脱毒苗的体系，解决甜薯长期无性繁殖品质退化、产量下降的问题。为了达到上述目的，本发明采用的技术步骤如下：（1）将所采健康甜薯的幼嫩茎段进行灭菌消毒；（2）将步骤（1）中消毒后的茎段切成单节茎段；（3）将步骤（2）中的单节茎段接入已经灭菌的MS培养基中进行诱导出芽；（4）将步骤（3）中的芽苗转入1/2MS培养基进行继代培养；（5）将步骤（4）中生长成的无根幼苗转入生根培养基进行生根培养。其中步骤（1）中的幼嫩茎段可采甜薯生长三个月之后成熟植株顶端幼嫩茎段；步骤（2）中单节茎段要切除接触升汞的伤口及叶片；步骤（3）中的操作最好在超净工作台上完成，要保持在无菌条件下操...