一种提高华南锥生根率的方法与流程

文档序号:12598941阅读:464来源:国知局

本发明属于华南锥无性繁殖技术,涉及一种提高华南锥生根率的方法。



背景技术:

华南锥(Castanopsis concinna (Champ. ex Benth.) A. DC.),壳斗科锥属,常绿乔木,高10-15米,很少达20米,胸径达50厘米,当年生枝及花序轴被黄或红棕色微柔毛及颇厚的细片状易抹落的蜡鳞层,三年生枝无或几无毛。分布于中国珠江三角洲以西南至广西岑溪、防城一带,北限见于广东的广宁县(越过北回归线稍北),沿海岛屿只见于香港。生于海拔约500米以下花岗岩风化的红壤丘陵坡地常绿阔叶林中。种子含淀粉,种仁可作木本粮食,味道能与板栗媲美;木材颜色鲜艳,材质坚重有弹性,耐水湿,是家具、器械、建筑的优良用材。是中国国家Ⅱ级重点保护野生植物。

目前,华南锥有性繁殖主要靠杂交授粉完成,即选用不同品种或同品种不同株间相互授粉,然而有性繁殖周期较长。组织培养技术是一种快速无性繁殖技术,选择华南锥优良家系或者无性系为材料,通过组织培养方法繁殖苗木,既可以满足生产上的数量要求,又可保持母本性状。然而在组培过程中,常常出现生根率低、生根不统一、根系数量少以及根系不粗壮的问题。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种能提高华南锥组培苗的生根率,根系数量以及根系萌发整齐度的华南锥组培苗生根诱导方法。

为了实现上述发明目的,本发明的技术方案如下:

一种提高华南锥生根率的方法,选取增殖继代华南锥小苗,先进行预生根培养,然后再进行生根培养,置于适宜环境中培养,获得带根组培苗,主要操作步骤如下:

(1)取材:选取经常规组培中壮芽培养35~40d的华南锥继代芽,消毒瓶子外表后,在超净工作台上的无菌空间内,选取继代芽丛中生长健壮、高度1~2cm的单芽,于节下2~3mm处剪切,清除基部叶片和叶柄,备用;

(2)预生根培养:将步骤(1)修剪后的单芽接种于预生根培养基中,在特定的光温环境中进行预生根培养;

(3)生根培养:待步骤(2)中的单芽经过30~35d预生根培养后,将单芽转接入生根培养基,在特定的光温环境中进行生根培养。

以上所述的预生根培养基其原料含量为:1/2改良ER培养基+IBA 1.0~2.0mg/L+维生素C 6g/L++VC 1.0~2.0mg/L +葡萄糖25g/L+琼脂5.0g/L。

以上所述的生根培养基其原料含量为:1/2改良ER培养基+IAA 1.0~2.0mg/L+KT0.5~2.0 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5.0g/L。

以上所述的改良ER培养基的配方为:NH4NO3 1560mg/L + KNO3 1600mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 260mg/L + KH2PO4 480mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 40mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。

以上步骤(2)和步骤(3)所述的光温环境为:温度20±1℃,湿度55~70%,光照强度2000~2500lux,光照15~16h/d。

本发明具有的优点及有益效果如下:

1、本发明采用1/2改良ER培养基作为基本培养基,同时重点调整了与华南锥生根的相关的微量元素和有机成分,使得培养基更科学,更有针对性,更易促使华南锥继代芽生根,效果显著。

2、本发明在生根诱导前采用低浓度IBA和抗坏血酸(VC)对继代单芽进行预生根培养,然后再进行生根培养,可使组培苗发根统一,发根速度快,根系粗壮且数量较多。

3、本发明在增殖继代单芽经过30~35d时间预生根培养后转入生根培养,即可达到预生根培养效果,又避免了小苗在预生根培养阶段长出根系而使后期生根培养发根不整齐。

4、本发明的在特定的光温条件下进行预生根和生根培养,适应华南锥组培苗的生长特性,促进苗木的生长。

5、本发明缩短了华南锥继代芽生根周期,生根率高,根系多,质量好,生根组培苗移栽成活率高,可实现华南锥组培产业化育苗,为人工无性系林的建设提供优质种苗,具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

实施例1:

选取经常规组培中壮芽培养35~40d的华南锥继代芽,消毒瓶子外表后,在超净工作台上的无菌空间内,选取继代芽丛中生长健壮、高度1~2cm的单芽,于节下2~3mm处剪切,清除基部叶片和叶柄。将修剪后的单芽接种于预生根培养基中, 所述的预生根培养基其原料含量为:1/2改良ER培养基+IBA 1.0mg/L+维生素C 6g/L++VC 2.0mg/L +葡萄糖25g/L+琼脂5.0g/L,在温度20±1℃,湿度55~60%,光照强度2000lux,光照16h/d的环境中进行预生根培养。待单芽经过30~35d预生根培养后,将单芽转接入生根培养基,所述的生根培养基其原料含量为:1/2改良ER培养基+IAA 1.0mg/L+KT0.5 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5.0g/L,在温度20±1℃,湿度55~60%,光照强度2000lux,光照16h/d环境中进行生根培养。培养15-20d,90%以上的单芽长出根系。

以上所述的改良ER培养基的配方为:NH4NO3 1560mg/L + KNO3 1600mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 260mg/L + KH2PO4 480mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 40mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。

实施例2:

选取经常规组培中壮芽培养35~40d的华南锥继代芽,消毒瓶子外表后,在超净工作台上的无菌空间内,选取继代芽丛中生长健壮、高度1~2cm的单芽,于节下2~3mm处剪切,清除基部叶片和叶柄。将修剪后的单芽接种于预生根培养基中, 所述的预生根培养基其原料含量为:1/2改良ER培养基+IBA 1.5mg/L+维生素C 6g/L++VC 1.0mg/L +葡萄糖25g/L+琼脂5.0g/L,在温度20±1℃,湿度60~65%,光照强度2000lux,光照15h/d的环境中进行预生根培养。待单芽经过30~35d预生根培养后,将单芽转接入生根培养基,所述的生根培养基其原料含量为:1/2改良ER培养基+IAA 1.5mg/L+KT1.0 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5.0g/L,在温度20±1℃,湿度60~65%,光照强度2000lux,光照15h/d的环境中进行生根培养。培养15-20d,90%以上的单芽长出根系。

以上所述的改良ER培养基的配方为:NH4NO3 1560mg/L + KNO3 1600mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 260mg/L + KH2PO4 480mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 40mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。

实施例3:

选取经常规组培中壮芽培养35~40d的华南锥继代芽,消毒瓶子外表后,在超净工作台上的无菌空间内,选取继代芽丛中生长健壮、高度1~2cm的单芽,于节下2~3mm处剪切,清除基部叶片和叶柄。将修剪后的单芽接种于预生根培养基中, 所述的预生根培养基其原料含量为:1/2改良ER培养基+IBA 2.0mg/L+维生素C 6g/L++VC 1.5mg/L +葡萄糖25g/L+琼脂5.0g/L,在温度20±1℃,湿度65~70%,光照强度2500lux,光照15h/d的环境中进行预生根培养。待单芽经过30~35d预生根培养后,将单芽转接入生根培养基,所述的生根培养基其原料含量为:1/2改良ER培养基+IAA 2.0mg/L+KT2.0 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5.0g/L,在温度20±1℃,湿度65~70%,光照强度2500lux,光照15h/d的环境中进行生根培养。培养15-20d,90%以上的单芽长出根系。

以上所述的改良ER培养基的配方为:NH4NO3 1560mg/L + KNO3 1600mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 260mg/L + KH2PO4 480mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 40mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。

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