本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种红心猕猴桃初代培养基及其制备方法。
背景技术：
红心猕猴桃(Actinidia Chinensis),别名红心果或者藤梨子。分布区域凉都六盘水，河南西峡县，陕西眉县，浙江遂昌县，四川苍溪县。是一种可食用与药用为一体的水果，每百克鲜果肉含维生素C100-420毫克，比柑橘高5-10倍，比柠檬高11-13倍，比苹果高20-80倍。红心猕猴桃果肉细嫩、香气浓郁、口感香甜清爽、酸度极低，营养丰富，看之饱眼福、食之饱口福。富含维生素C及P、K、Ca、Mg、Fe、Cu等多种矿物质和18种氨基酸，特别是微量元素中的含钙量为果中之首，被誉为“人间仙果”、被称为“果中之王”、“维C之王”，特别是微量元素中的含钙量较高。果实中的钙可直接被人体吸收，是中老年人良好的补钙剂，营养价值丰富。红心猕猴桃是新品种，属中华猕猴桃中的红肉猕猴桃变种，是特早熟红心品种，其子代遗传性状稳定，抗逆性强，果实较大，风味浓甜可口，较耐贮藏。红心猕猴桃在高、低海拔地区均能正常生长与结果，生态适应性良好，且丰产、稳产，果实品质优良，抗高温干旱能力强，具有较强的抗病虫能力，但在低海拔地区栽培，果肉红色变淡，以海拔1000米以上的地区栽培最能体现其果实红心的特性。因此，龙藏红更适宜于在海拔较高(1000-1500m)的地区种植，以充分表现其品种特色。
技术实现要素：
为了克服现有技术的不足，本发明的目的是为了提供一种植株存活率高的红心猕猴桃初代培养基。
本发明的目的之二在于提供上述红心猕猴桃初代培养基的制备方法。
本发明的目的之一采用以下技术方案实现：
一种红心猕猴桃初代培养基，包括以下浓度的以下组分：20-30mL/L的稀释10倍的大量元素母液、5-10mL/L的稀释100倍的微量元素母液、5-10mL/L的铁盐母液、5-10mL/L的稀释50倍的有机物母液、0.1-0.2g/L的肌醇、3.5-4.8g/L的琼脂粉、20-40g/L的蔗糖、0.1-0.3mL/L的6-BA和余量的水；
所述大量元素母液包括以下浓度的以下组分：180-200g/L的KNO3、150-170g/LNH4NO3、110-130g/L的CaCl2、196-228g/L的MgSO4、150-200g/L的KH2PO4；
所述微量元素母液，包括以下浓度的以下组分：80-90mg/L的KI、650-750mg/L的H3BO3、2.2-2.3g/L的MnSO4、382-405mg/L的ZnSO4、25-30mg/L的Na2MoO4、1.3-2.0mg/L的CuSO4和2-3mg/L的CoCl2；
所述铁盐母液包括按重量浓度计的以下组分：27.0-27.5g/L FeSO4和27-28g/L EDTA二钠；
所述有机物母液包括以下浓度的以下组分：30g/L的蔗糖、90-140mg/L的维生素B和200-210g/L的甘氨酸。
进一步地，包括以下浓度的以下组分：24-26mL/L的稀释10倍的大量元素母液、7-8mL/L的稀释100倍的微量元素母液、7-8mL/L的铁盐母液、7-8mL/L的稀释50倍的有机物母液、0.1-0.2g/L的肌醇、3.5-4.8g/L的琼脂粉、20-40g/L的蔗糖、0.1-0.3mL/L的6-BA和余量的水。
进一步地，所述红心猕猴桃初代培养基的pH值为5.8-6.0。
进一步地，所述维生素B包括维生素B1、维生素B3和维生素B6。
进一步地，所述维生素B3、维生素B6和维生素B1的重量比为6:(5-7):(1-3)。
本发明的目的之二采用以下技术方案实现：
红心猕猴桃初代培养基的方法，其特征在于，包括以下步骤：
大量元素母液的配制：分别称取CaCl2·2H2O 40-45g加水溶解，称取KNO3 180-200g、NH4NO3 150-170g、MgSO4·7H2O 35-40g和KH2PO4 15-20g，加水溶解，定容至1000mL，得到大量元素母液；
微量元素母液：称取KI 80-90mg，H3BO3 650-750mg，MnSO4 2200-2300mg，ZnSO4·7H2O 850-900mg，Na2MoO4 25-30ng，CuSO4·5H2O 2.0-3.0mg，CoCl2 2.0-3.0mg，加水溶解，定容至1000mL，得到微量元素母液；
铁盐母液的配制：分别称取FeSO4 27.0-27.5g加水溶解、称取乙EDTA二钠27-28g加水溶解，定容至1000mL，得铁盐母液；
有机物母液的配制：分别称取45-70mg的维生素B和100-105g的甘氨酸加水溶解、称取15g蔗糖加水溶解，混合，定容至500mL，得到有机物母液；
初代培养基的配制：取肌醇0.1-0.2g、琼脂粉3.5-4.8g、蔗糖20-40g、6-BA 0.1-0.3mL、稀释10倍的大量元素母液20-30mL、稀释100倍的微量元素母液5-10mL、铁盐母液5-10mL、稀释50倍的有机物母液5-10mL，加热至琼脂粉融化，混合，冷却后定容至1000mL，分装至培养瓶，盖上瓶盖；
杀菌：将培养瓶置于121-125℃、压力0.15-0.3MPa灭菌，得到红心猕猴桃初代培养基。
进一步地，初代培养基配制步骤中，琼脂粉融化后，调节pH至5.8-6.0。
进一步地，采用稀盐酸或稀氢氧化钠溶液调节pH。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
本发明提供的红心猕猴桃初代培养基根据红心猕猴桃组织初代生长所需营养成分和微量元素等的特点，研制了适合红心猕猴桃茎、叶均能长出愈伤组织的培养基，使用该初代培养基进行培养能够使后期的诱导出芽等操作成功率高。
附图说明
图1为新绿色叶在实施例1的培养基中的长势图；
图2为茎在实施例1的培养基中的长势图；
图3为成熟叶在实施例1的培养基中的长势图。
具体实施方式
下面，结合附图以及具体实施方式，对本发明做进一步描述：
本发明提供一种红心猕猴桃初代培养基，包括以下浓度的以下组分：20-30mL/L的稀释10倍的大量元素母液、5-10mL/L的稀释100倍的微量元素母液、5-10mL/L的铁盐母液、5-10mL/L的稀释50倍的有机物母液、0.1-0.2g/L的肌醇、3.5-4.8g/L的琼脂粉、20-40g/L的蔗糖、0.1-0.3mL/L的6-BA和余量的水；
所述大量元素母液包括以下浓度的以下组分：180-200g/L的KNO3、150-170g/LNH4NO3、110-130g/L的CaCl2、196-228g/L的MgSO4、150-200g/L的KH2PO4；
所述微量元素母液，包括以下浓度的以下组分：80-90mg/L的KI、650-750mg/L的H3BO3、2.2-2.3g/L的MnSO4、382-405mg/L的ZnSO4、25-30mg/L的Na2MoO4、1.3-2.0mg/L的CuSO4和2-3mg/L的CoCl2；
所述铁盐母液包括按重量浓度计的以下组分：27.0-27.5g/L FeSO4和27-28g/L EDTA二钠；
所述有机物母液包括以下浓度的以下组分：30g/L的蔗糖、90-140mg/L的维生素B和200-210g/L的甘氨酸。该红心猕猴桃初代培养基根据红心猕猴桃组织初代生长所需营养成分和微量元素等的特点，研制了适合红心猕猴桃茎、叶均能长出愈伤组织的培养基，使用该初代培养基进行培养能够使后期的诱导出芽等操作成功率高。
实施例1：
一种红心猕猴桃初代培养基，其制备方法包括以下步骤：
大量元素母液的配制：分别称取CaCl2·2H2O 43g加水溶解，称取KNO3 190g、NH4NO3160g、MgSO4·7H2O 38g和KH2PO4 18g，加水溶解，混合定容至1000mL，得到大量元素母液；
微量元素母液：称取KI 85mg，H3BO3 700mg，MnSO4 2250mg，ZnSO4·7H2O 25mg，Na2MoO40.25g，CuSO4·5H2O 2.5mg，CoCl2 2.5mg，加水溶解，定容至1000mL，得到微量元素母液；
铁盐母液的配制：分别称取硫酸亚铁27.3g加水溶解、称取乙二胺四乙酸二钠27.5g加水溶解，加水定容至1000mL，得铁盐母液；
有机物母液的配制：分别称取25g维生素B3、25g维生素B6、8g维生素B1和103g的甘氨酸加水溶解、称取15g蔗糖加水溶解，混合，定容至500mL，得到有机物母液；
初代培养基的配制：取肌醇0.15g、琼脂粉4.2g、蔗糖30g、6-BA0.2mL、稀释10倍的大量元素母液25mL、稀释100倍的微量元素母液8mL、铁盐母液8mL、稀释50倍的有机物母液7mL，混合，加热至琼脂粉融化，调节pH至5.8-6.0，冷却后定容至1000mL，分装至培养瓶，盖上瓶盖；
杀菌：将培养瓶置于123℃、压力0.22MPa灭菌，得到红心猕猴桃初代培养基。
分别取新鲜、无虫害的红心猕猴桃新绿色叶、茎和成熟叶，剪成1cm长度左右样品，每个培养瓶内放5个样品，采用实施例1得到的红心猕猴桃初代培养基进行培养15天后，如图1-3所示，均长出愈伤组织。
实施例2：
一种红心猕猴桃初代培养基，其制备方法包括以下步骤：
大量元素母液的配制：分别称取CaCl2·2H2O 45g加水溶解，称取KNO3 180g、NH4NO3170g、MgSO4·7H2O 40g和KH2PO4 20g，加水溶解，混合定容至1000mL，得到大量元素母液；
微量元素母液：称取KI 80mg，H3BO3 750mg，MnSO4 2300mg，ZnSO4·7H2O 20mg，Na2MoO40.25g，CuSO4·5H2O 2mg，CoCl2 2mg，加水溶解，定容至1000mL，得到微量元素母液；
铁盐母液的配制：分别称取硫酸亚铁27.5g加水溶解、称取乙二胺四乙酸二钠28g加水溶解，加水定容至1000mL，得铁盐母液；
有机物母液的配制：分别称取20g维生素B3、30g维生素B6、5g维生素B1和100g的甘氨酸加水溶解、称取16g蔗糖加水溶解，混合，定容至500mL，得到有机物母液；
初代培养基的配制：取肌醇0.2g、琼脂粉3.5g、蔗糖20g、6-BA0.3mL加水调配成基础培养基、稀释10倍的大量元素母液20mL、稀释100倍的微量元素母液6mL、铁盐母液10mL、稀释50倍的有机物母液10mL，混合，加热至琼脂粉融化，调节pH至5.8-6.0，冷却后定容至1000mL，分装至培养瓶，盖上瓶盖；
杀菌：将培养瓶置于122℃、压力0.3MPa灭菌，得到红心猕猴桃初代培养基。
分别取新鲜、无虫害的红心猕猴桃新绿色叶、茎和成熟叶，剪成1cm长度左右样品，每个培养瓶内放5个样品，采用实施例3得到的红心猕猴桃初代培养基进行培养，在培养15天后，全部长出愈伤组织。
实施例3：
一种红心猕猴桃初代培养基，其制备方法包括以下步骤：
大量元素母液的配制：分别称取CaCl2·2H2O 40g加水溶解，称取KNO3 200g、NH4NO3150g、MgSO4·7H2O 35g和KH2PO4 15g，加水溶解，混合定容至1000mL，得到大量元素母液；
微量元素母液：称取KI 90mg，H3BO3 650mg，MnSO4 2200mg，ZnSO4·7H2O 30mg，Na2MoO4 0.3g，CuSO4·5H2O 3mg，CoCl2 3mg，加水溶解，定容至1000mL，得到微量元素母液；
铁盐母液的配制：分别称取硫酸亚铁27g加水溶解、称取乙二胺四乙酸二钠27g加水溶解，加水定容至1000mL，得铁盐母液；
有机物母液的配制：分别称取30g维生素B3、20g维生素B6、10g维生素B1和105g的甘氨酸加水溶解、称取15g蔗糖加水溶解，混合，定容至500mL，得到有机物母液；
基础培养基的配制：取肌醇0.1g、琼脂粉4.8g、蔗糖40g、6-BA0.1mL加水调配成基础培养基；向基础培养基中加入稀释10倍的大量元素母液30mL、稀释100倍的微量元素母液10mL、铁盐母液5mL、稀释50倍的有机物母液5mL，混合，加热至琼脂粉融化，调节pH至5.8-6.0，冷却后定容至1000mL，分装至培养瓶，盖上瓶盖；
杀菌：将培养瓶置于125℃、压力0.15MPa灭菌，得到红心猕猴桃初代培养基。
分别取新鲜、无虫害的红心猕猴桃新绿色叶、茎和成熟叶，剪成1cm长度左右样品，每个培养瓶内放5个样品，采用实施例3得到的红心猕猴桃初代培养基进行培养，在培养15天后，全部长出愈伤组织。
对比例1
分别取新鲜、无虫害的红心猕猴桃新绿色叶、茎和成熟叶，剪成1cm长度左右样品，每个培养瓶内放5个样品，使用市售的初代培养基进行培养，在培养15天后，仍有1个样品未分化出愈伤组织。
对本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种相应的改变以及形变，而所有的这些改变以及形变都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。