一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的制作方法

本实用新型涉及医疗器械技术领域，具体地说，是一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体。

背景技术：

近年来男性不育患者的比例日益增高，临床表现为少精、弱精、无精等精子质量异常。少精症患者可以通过射精获得微量的精子，而无精子症患者可以通过睾丸精子抽吸术(TESA)和经皮附睾精子抽吸术(PESA)获得少量的睾丸或附睾精子，然后通过人类单精子卵胞浆注射(ICSI)技术可以使这些患者的妻子成功受孕。

这些精子数量有限而且来之不易，因此有必要将稀少精子冷冻保存。对于严重少精症患者，冻精可以避免取卵当日因没有精子而造成受精失败的风险；对于无精症患者，冻精可以避免因反复手术穿刺取精给患者带来的躯体、精神上痛苦。

传统的用2毫升精子冻存管冻精的方法会造成冻融精子不同程度的丢失，不适合稀少精子的冷冻。寻找合适冷冻载体是目前稀少精子冷冻的研究重点之一。

目前国内外报道的稀少精子冷冻载体主要包括：空的卵透明带(Zona pellucida)、冷冻环(Cryoloop)、冷冻管(Cryolock)、及冷冻薄膜(Cryotop)等。空的卵透明带因其生物安全性的问题，无法在临床上得到推广；而Cryoloop、Cryolock、Cryotop都是胚胎的冷冻载体，仅能装载不足5微升的冷冻液体标本，临床上稀少精子的液体体积量一般为20～30微升，冷冻时还要再加入等体积的冷冻保护剂，因此也无法满足临床的需求。

本研究小组前期在薄膜载体Cryotop的基础上，通过加长加粗其薄膜装载部，经过临床实验，有效解决了稀少精子的冷冻问题，同时也保留了冷冻胚胎和卵子的功能，成功获得了一项国家实用新型专利的授权(201520231461.X)。我们将这新载体命名为Cryoplus。

但是Cryoplus与Cryotop一样，都是一种开放式载体，即在冷冻中冷冻标本(精子、卵子或者胚胎)都会直接与液氮或液氮蒸汽接触。有研究表明在液氮零下196度的环境中各种致病细菌与病毒任能存活，因此开放式载体理论上存在被液氮中致病微生物污染的可能性，美国FDA近年来也已经不再批准开放式载体的上市。而封闭式载体，在冷冻和解冻的过程中冷冻标本与液氮或液氮蒸汽可以做到物理隔绝，因而是安全的。所以目前开发一种既能满足临床上稀少精子冷冻，又能保留冷冻胚胎和卵子功能的封闭式冷冻载体很有必要。

中国专利文献：CN104823966A公开了一种微量精子冷冻保存载体及相应的冷冻和解冻方法，冷冻保存载体呈长方形、方形或圆形的水平状或凹槽状，大小为可以承载1-3个0.1-10.0uL的冷冻液微滴，以透明的塑料材料或透明的玻璃材料制作。冷冻保存载体上准备好冷冻液微滴后插入盖油的精子培养皿内，用显微注射针抓取精子置入冷冻液微滴，取出冷冻保存载体并用吸水纸吸干矿物油，快速冷冻，解冻时将冷冻保存载体直接插入ICSI皿中，利用其37℃矿物油复苏精子。中国专利文献：CN205794638U公开了一种旋盖套管式稀少精子超薄片冷冻载体，包括外套管、冷冻载片、旋纽盖；所述的冷冻载片一端固定在旋钮盖上，另一端插入外套管中；所述的外套管端部连接旋钮盖；所述外套管一端设有外螺纹；所述的旋钮盖包括子旋钮盖和母旋钮盖；所述的子旋钮盖和母旋钮盖的内侧面均设有内螺纹；所述的子旋钮盖外侧设有子锁扣；所述的母旋钮外侧设有母锁扣；所述的子旋钮盖上还设有平台，且平台上设有固定凹槽；所述载片的一端还设有圆形标识；所述载片的另一端还设有固定卡条、手柄；所述的固定卡条与固定凹槽相配合。中国专利文献：CN203290151U公开了一种稀少精子新型封闭式冷冻超细管载体，设有内管，所述的内管设有粗端和细端，所述的内管外面设有外套管，内管和外套管可以相对滑动，所述的内管的长度大于外套管的长度。但是关于本实用新型的适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体目前还未见报道。

技术实现要素：

本实用新型的目的是，提供一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体。

为实现上述目的，本实用新型采取的技术方案是：一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体，所述的双槽封闭式载体由载体面板、双槽装载部和操作手柄组成；所述的载体面板为一个头部上下两侧倒角、中间设有贯穿的圆柱型孔的板，所述的载体面板的尾部和双槽装载部的头部连接；所述的双槽装载部为长方体剪切成的组合体，所述的双槽装载部头部左右两侧各剪切掉一个弧形流线体，左右两侧表面各设一个装载槽；所述的双槽装载部尾部和操作手柄连接，所述的操作手柄为一个长方体；所述的载体面板的长3～6mm、宽2～2.3mm，所述的圆柱型孔直径为0～1.5mm，所述的圆柱型孔距离载体面板边缘0.5～2mm，所述的双槽装载部长25～35mm，宽2～2.3mm，所述的两个装载槽槽面宽1.2～1.6mm，槽深0.8～1mm，所述的操作手柄长35～45mm，宽2～2.3mm，高2～2.3mm。

所述的双槽封闭式载体还包括0.25ml的麦管。

本实用新型优点在于：

1、本实用新型的双槽封闭式载体既能冷冻稀少精子，又能保留冷冻胚胎或卵子。

2、使用本实用新型的双槽封闭式载体时，稀少精子装载在双槽中，装载量可达20微升，胚胎或卵子可以随冷冻保剂装载在前缘小孔中。

3、冷冻时，本实用新型的双槽封闭式载体可以在室温的条件下，水平放入0.25毫升麦管外套中，然后用热封仪对麦管外套进行热封闭，达到在冻存中与液氮或液氮蒸汽完全物理隔绝的封闭式的效果。

4、本实用新型的双槽封闭式载体总长度仅80毫米左右，比目前商业化的载体都要短30％以上，在传统的冷冻支架上，可采取双层存贮，有助于增加在液氮罐中的存贮数量。

附图说明

附图1是一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的示意图。

附图2是一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的载体面板示意图。

附图3是一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的双槽装载部示意图。

附图4是一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的载体面板和双槽装载部的结合示意图。

附图5是一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的前视图。

附图6是一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的示意图。

具体实施方式

下面结合实施例并参照附图对本实用新型作进一步描述。

附图中涉及的附图标记和组成部分如下所示：

1、载体面板

11、圆柱型孔

2、双槽装载部

21、装载槽

3、操作手柄

实施例1

请参照附图1、附图2、附图3、附图4、附图5，附图1是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的示意图，附图2是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的载体面板示意图，附图3是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的双槽装载部示意图，附图4是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的载体面板和双槽装载部的结合示意图，附图5是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的前视图。

所述的适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体由载体面板1、双槽装载部2和操作手柄3组成。

所述的载体面板1为一个头部上下两侧倒角、中间设有贯穿的圆柱型孔11的板，所述的载体面板1的尾部和双槽装载部2的头部连接。

所述的双槽装载部2为长方体剪切成的组合体，所述的双槽装载部2头部左右两侧各剪切掉一个弧形流线体，左右两侧表面各设一个装载槽21。

所述的双槽装载部2尾部和操作手柄3连接，所述的操作手柄3为一个长方体。

所述的载体面板1的长为3～6mm、宽为2～2.3mm。

所述的圆柱型孔11直径为0～1.5mm，所述的圆柱型孔11距离载体面板1边缘0.5～2mm。

所述的双槽装载部2长为25～35mm，宽为2～2.3mm，所述的两个装载槽21槽面宽1.2～1.6mm，槽深0.8～1mm。

所述的操作手柄3长35～45mm，宽2～2.3mm，高2～2.3mm。

所述的双槽封闭式载体还包括0.25ml的麦管。

实施例2

请参照附图2、附图3、附图4、附图5、附图6，附图2是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的载体面板示意图，附图3是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的双槽装载部示意图，附图4是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的载体面板和双槽装载部的结合示意图，附图5是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的前视图，附图6是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的示意图。

所述的适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体由载体面板1、双槽装载部2和操作手柄3组成。

所述的载体面板1为一个头部上下两侧倒角、中间设有贯穿的圆柱型孔11的板，所述的载体面板1的尾部和双槽装载部2的头部连接。

所述的双槽装载部2为圆柱体剪切成的组合体，所述的双槽装载部2头部左右两侧各剪切掉一个弧形流线体，左右两侧表面各设一个装载槽21，所述的装载槽21头端开口、尾部连接面倾斜向上。

所述的双槽装载部2尾部和操作手柄3连接，所述的操作手柄3为一个圆柱体。

所述的载体面板1的长为3～6mm、宽为2～2.3mm。

所述的圆柱型孔11直径为0～1.5mm，所述的圆柱型孔11距离载体面板1前边缘0.5～2mm。

所述的双槽装载部2长为25～35mm，宽为2～2.3mm，所述的两个装载槽21槽面宽1.2～1.6mm，槽深0.8～1mm。

所述的操作手柄3长35～45mm，底面直径为2.8～3.2mm。

所述的双槽封闭式载体还包括0.25ml的麦管。

实施例3

请参照附图1、附图2、附图3、附图4、附图5，附图1是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的示意图，附图2是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的载体面板示意图，附图3是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的双槽装载部示意图，附图4是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的载体面板和双槽装载部的结合示意图，附图5是本实施例的一种适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的前视图。

所述的适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体由载体面板1、双槽装载部2和操作手柄3组成。

所述的适用于冷冻人类稀少精子以及胚胎和卵子的双槽封闭式载体的材料可为医用塑料(如PVC、PETG)或者医用树脂，具有安全无毒、耐低温冷冻的特点。在实际操作使用中可装载最多达20微升的精液。在精液冻融中冰晶的形成是最重要的冷冻损伤，而提高冷冻和复苏的速度被认为可以有效减少冰晶的形成，现在通过双槽装载部2可以使精液标本凭借其液体的表面张力均匀分布在双槽装载部2的两个装载槽21中，与液氮和复苏液的接触面积更大，与传统2毫升精子冻存管(其内装精液堆积成圆柱状)相比，精液在冻融中可以获得更快的降温和复温速度，从而减少冷冻损伤。胚胎或者卵子随冷冻保护剂可以装载在载体面板1上面的圆柱型孔11中。无论是冷冻稀少精子或者卵子胚胎，冷冻标本装载好后可以在室温的条件下，水平放入0.25毫升麦管外套中，然后用热封仪对麦管外套进行热封闭，达到封闭式的效果。

冷冻稀少精子时首先用移液器吸取最多20微升的处理过的精子标本均匀涂布于双槽装载部2的两个装载槽21中，在室温的条件下，载体水平放入0.25毫升麦管外套中，然后用热封仪对麦管外套进行热封闭，达到封闭式的效果。将热封闭的载体水平移置液氮上方4厘米(－120℃)处5分钟，待标本成为固态后置于液氮中保存。

在进行单精子卵胞浆注射(ICSI)之前解冻稀少精子，在液氮中取下封闭式载体，用剪刀剪开0.25毫升麦管外套，取出载体直接放入经37℃预热的覆盖有矿物油的Falcon 1006皿(即ICSI所用)中的10微升培养基中，然后直接行ICSI；或者取出载体直接放入经37℃预热的装有1毫升培养基的Eppendorf离心管中，再稍离心，洗去部分冷冻保护剂，然后将剩余精子加入Falcon 1006皿后行ICSI。

此外本载体总长度仅80毫米左右，比目前商业化的载体都要短30％以上，在传统的冷冻支架上，可采取双层存贮，有助于增加在液氮罐中的存贮数量，胚胎或者卵子的冷冻方法与各商业化冷冻试剂公司相同。

以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本实用新型原理的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本实用新型的保护范围。