一种瞿麦的组织培养技术的制作方法

文档序号:16751162发布日期:2019-01-29 16:52阅读:395来源:国知局

本发明涉及植物生物技术中植物组织培养的方法,具体地说,涉及一种瞿麦的组织培养技术。



背景技术:

瞿麦为石竹科植物的干燥地上部份。产于河北、四川,湖北、湖南等地,夏秋季花末开放前割取全株,除去杂草、泥土,晒干。气微,味微甜。具有清热利尿、行血通经。用于小便不通,淋疬涩痛,水肿,经闭等。瞿麦长期以来供不应求,加上人为的掠夺式砍伐导致瞿麦野生资源枯竭,因此有必要对其资源进行保护。近年来,瞿麦资源开发有了一定的规模,在云南、四川、湖南、湖北陕西等建立了gap种植基地,对瞿麦野生资源保护工作起到了一定的促进作用。目前瞿麦主要通过种子进行种苗繁殖,但由于种子繁殖后代性状发生分离,不利于优质种质资源保护,制约了优质瞿麦的推广种植。因此,有必要建立瞿麦的组织培养技术,为其良种快速繁殖提供技术支撑和保障,也为满足我国对瞿麦种苗的需求、加速其资源扩充具有重要的现实意义。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种瞿麦的组织培养技术,以瞿麦带芽茎段为外植体,经过外植体消毒、丛生芽诱导、生根培养、炼苗移栽等过程从而建立了组织培养快速繁殖体系,从而实现了本发明的目的。

本发明的一种瞿麦的组织培养技术,包括以下的步骤:

步骤(1),丛生芽诱导:选取生长健壮无病虫的幼树当年生的带芽茎段作为外植体,用洗洁精水溶液浸泡30min,然后用自来水冲洗40min,擦干表面水分后备用,在超净工作台中以70%乙醇浸泡30s,0.1%升汞溶液消毒32min,再用无菌水清洗20次,擦干后切成长度为3.0cm的茎段接种到诱导培养基上,先在24℃条件下全暗培养25天,然后置于每天光照18小时,光照强度为2200lx,培养温度为24℃条件下培养,直至诱导形成丛生芽;诱导培养基为:ms+8mg/l6-ba+4mg/lnaa+0.8mmol/lla(no3)2+5.0%蔗糖+0.9%琼脂+2.0%活性炭,ph值为5.5;

步骤(2),增殖培养:将步骤(1)所得的丛生芽转入增殖培养基上进行增殖培养,接种后先在24℃条件下全暗培养直至叶腋处萌生一个侧芽,然后置于每天光照30小时,光照强度为2100lx,培养温度为24℃的条件下培养直至各丛生芽伸长到10cm;增殖培养基为:ms+9mg/l6-ba+0.9mg/lnaa+4.5%蔗糖+1.0%琼脂+1.2%活性炭,ph值为5.5;

步骤(3),生根培养:将步骤(1)或步骤(2)所获得的高度约为10cm的丛生芽芽切割并接种到生根培养基上进行生根培养,接种后先在24℃条件下全暗培养12天,然后置于每天光照18小时,光照强度为3200lx,培养温度为24℃的条件下培养至生根;生根培养基为:1/2ms+8mg/lnaa+4%蔗糖+0.5%琼脂+0.1%活性炭,ph值为5.5;

步骤(4),炼苗移栽:瞿麦瓶内生根32天后,置于自然光照下炼苗20天后,洗净根部培养基,移栽由黄心土:河沙=3:1混合成的基质中。

与现有技术相比本发明的优点是:本发明通过离体快繁技术获得优质种苗的育苗方法。以瞿麦带芽茎段为外植体,经过外植体消毒、丛生芽诱导、生根培养、炼苗移栽等过程从而建立了瞿麦组织培养快速繁殖体系,加速瞿麦良种的推广和资源开发利用具有重要的现实意义。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明,不是对本发明的限制。

实施例1:

(1)丛生芽诱导:选取生长健壮无病虫的幼树当年生的带芽茎段作为外植体,用洗洁精水溶液浸泡10min,然后用自来水冲洗15min,擦干表面水分后备用。在超净工作台中以75%乙醇浸10s,0.1%升汞溶液消毒12min,再用无菌水清洗6次,擦干后切成长度为2.0cm的茎段接种到诱导培养基上,先在28℃条件下全暗培养15天,然后置于每天光照10小时,光照强度为1600x,培养温度为27℃条件下培养41天即可诱导形成丛生芽,诱导率为65%。所述诱导培养基为ms+5mg/l6-ba+1.5mg/lnaa+0.2mmol/lla(no3)2+3.6%蔗糖+0.6%琼脂+0.5%活性炭,ph值为5.6。

(2)增殖培养:将步骤(1)所得的丛生芽转入增殖培养基上进行增殖培养,接种后先在27℃条件下全暗培养直至叶腋处萌生一个侧芽,然后置于每天光照16小时,光照强度为1600lx,培养温度为27℃的条件下培养32天各丛生芽即可伸长到6cm,增殖率为6.0。所述增殖培养基为ms+5mg/l6-ba+1.6mg/lnaa+4.0%蔗糖+1.0%琼脂+1.0%活性炭,ph值为5.6。

(3)生根培养:将步骤(1)或步骤(2)所获得的高度约为6cm的丛生芽芽切割并接种到生根培养基上进行生根培养,接种后先在27℃条件下全暗培养6天,然后置于每天光照12小时,光照强度为2600lx,培养温度为27℃的条件下培养41天即可生根,生根率为78%。

(4)炼苗移栽:瞿麦瓶内生根25天后,置于自然光照下炼苗10天后,洗净根部培养基,移栽由黄心土:河沙=3:2混合成的基质中。移栽成活率为88%。

实施例2:

(1)丛生芽诱导:选取生长健壮无病虫的幼树当年生的带芽茎段作为外植体,用洗洁精水溶液浸泡12min,然后用自来水冲洗14min,擦干表面水分后备用。在超净工作台中以78%乙醇浸泡14s,0.1%升汞溶液消毒14min,再用无菌水清洗10次,擦干后切成长度为3.0cm的茎段接种到诱导培养基上,先在27℃条件下全暗培养21天,然后置于每天光照15小时,光照强度为1900x,培养温度为27℃条件下培养40天即可诱导形成丛生芽,诱导率为75%。所述诱导培养基为ms+7mg/l6-ba+1.0mg/lnaa+1.3mmol/lla(no3)2+5.0%蔗糖+1.5%琼脂+0.1%活性炭,ph值为5.4。

(2)增殖培养:将步骤(1)所得的丛生芽转入增殖培养基上进行增殖培养,接种后先在27℃条件下全暗培养直至叶腋处萌生一个侧芽,然后置于每天光照18小时,光照强度为1900lx,培养温度为27℃的条件下培养34天各丛生芽即可伸长到7cm,增殖率为6.0。所述增殖培养基为ms+2.0mg/l6-ba+0.8mg/lnaa+4.0%蔗糖+0.4%琼脂+0.8%活性炭,ph值为5.4。

(3)生根培养:将步骤(1)或步骤(2)所获得的高度约为7cm的丛生芽芽切割并接种到生根培养基上进行生根培养,接种后先在28℃条件下全暗培养7天,然后置于每天光照15小时,光照强度为2500lx,培养温度为27℃的条件下培养33天即可生根,生根率为91%。

(4)炼苗移栽:瞿麦瓶内生根26天后,置于自然光照下炼苗11天后,洗净根部培养基,移栽由黄心土:河沙=2:1混合成的基质中。移栽成活率为91%。



技术特征:

技术总结
本发明公开了一种瞿麦的组织培养技术,瞿麦为石竹科植物的干燥地上部份。产于河北、四川,湖北、湖南等地,夏秋季花末开放前割取全株,除去杂草、泥土,晒干。气微,味微甜。具有清热利尿、行血通经。用于小便不通,淋疬涩痛,水肿,经闭等。瞿麦通过离体快繁技术获得优质种苗的育苗方法,以瞿麦带芽茎段为外植体,经过外植体消毒、丛生芽诱导、生根培养、炼苗移栽等过程从而建立了瞿麦组织培养快速繁殖体系,加速瞿麦良种的推广和资源开发利用具有重要的现实意义。

技术研发人员:曾海燕
受保护的技术使用者:广西玉林市千力农业科技有限公司
技术研发日:2018.11.29
技术公布日:2019.01.29
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