本发明涉及的是辣椒栽培，具体涉及一种辣椒种子培养及种苗培育的快速扩繁方法。
背景技术：
1、辣椒是一种重要的蔬菜作物和调味品，我国辣椒种植面积居世界首位,约占全国蔬菜总种植面积的10%左右，辣椒富含辣椒素、维生素c、蛋白质等营养物质，具有抗菌消炎、抗氧化、抗癌、镇痛、防治心脑血管疾病和增强免疫力等作用，广泛应用于食品添加剂、医疗保健、生物防治和军事等领域，市场前景广阔。
2、辣椒是贵州省最重要的特色农业产业之一，骄阳2号是第6届贵州遵义国际辣椒博览会评选出了的十大新优辣椒品种之一。骄阳2号是一个杂交种，属于干、鲜两用型遵义朝天指形椒，全生育期为180天左右，干椒平均亩产量达350千克左右，而鲜椒平均亩产量达2500千克左右，具有抗性强的特点，特别适合加工糟辣椒、油辣椒和煳辣椒面等，适宜在贵州各个市县地区进行推广种植，因而对骄阳2号种苗的需求量非常大。
3、传统的辣椒种植方法，一般都是将辣椒种子撒在育苗床上进行育苗处理，在苗长至一定程度后，再将其移栽至种植基地中进行栽种。采用传统的种植方法，不仅导致辣椒成活率较低，抗病性较差，而且单株辣椒的产量也相对较低，极大程度的限制了农户种植的积极性，并且在种植过程中，需要使用大量的农药，导致辣椒种植成本较高，并且获得的辣椒品质较差。
4、针对现有的种子繁育方式，为了满足骄阳2号的种植需求，采用传统繁种方式已经无法获得足够的种苗，因此，根据辣椒种子小，富含抑制物质的特点，从而提供一种快速扩繁的方法，旨在通过该技术，达到简化辣椒育种流程、缩短育种时间，从而达到提高育种效率，满足种苗在春季进行大面积种植需求。
技术实现思路
1、本发明要解决的技术问题是针对背景技术中存在的问题，采用辣椒果实为外植体，在无菌条件下，通过组织培养技术，直接培育成苗，从而建立植物无菌苗体系，以解决现有技术中辣椒育种流程多、育种周期长及效率低的技术问题，具体地说是一种辣椒种子培养及种苗培育的快速扩繁方法。
2、为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：一种辣椒种子培养及种苗培育的快速扩繁方法，所述扩繁方法包括种子采集与处理、种子预处理、诱导培养、外植体分离培养与愈伤诱导、以及分化成株诱导，具体包括以下步骤：
3、s1、种子采集与处理：采集成熟的辣椒果实，之后将果实切成两半，取出成熟种子，将取出的种子用清水浸泡，以便除去漂在水面上的杂物及发育不良种子；
4、s2、种子预处理：将经过清水浸泡后的种子取出后，进行消毒处理，得辣椒种子备用；
5、s3、诱导培养：将经过预处理的辣椒种子，先用无菌滤纸吸干表面水分，然后将种子接种于事先准备好的诱导培养基中，放置在温度为25±1℃，光照时长为8～12小时/天，光照强度为3000～3500lx条件下的光照培养箱中，进行诱导培养，每隔2～3天，检测是否感菌，如有感菌，需及时移除或转接；经诱导培养，诱导出不定芽；
6、s4、外植体分离培养与愈伤诱导：当诱导的辣椒子叶展开时，再培养3～5天后，分离外植体，先将下胚轴剪成长度为0.3～0.4cm小段，每片子叶剪成3小片，然后将下胚轴及子叶分开接种于分离培养基中；接种好的外植体，放置于黑暗环境下的培养箱中培养，在温度为25±1℃条件下，3～4天可看出愈伤长出，培养7～10天后，转移到光培箱中继续培养，使愈伤组织长大；
7、s5、分化成株诱导：愈伤于光培箱中培养7天后，进行分化诱导，将分化好的愈伤接入增殖培养基中，密度控制在20～25个愈伤，封口膜封好后，放入光照培养箱中，在温度为25±1℃，光照时长8～12 小时/天，光照强度3000～3500lx条件下，继续培养7～10天后，经过炼苗后，得到健壮的生根苗进行移栽；或者继续分离组织，按照上述步骤，扩繁辣椒。
8、进一步地，本发明所述的快速扩繁方法，在所述s1步骤中，对取出的种子，采用温度为35～45℃的清水浸泡2～3天即可。
9、进一步地，本发明所述的快速扩繁方法，在所述s2步骤中，所述消毒处理是对取出后的种子，先采用浓度为0.1～0.3％高锰酸钾溶液进行消毒10～15min，再采用75～80％的乙醇浸泡5～10s，之后采用灭菌好的无菌水进行冲洗3～5次，经冲洗后再用0.1～0.15％升汞溶液消毒3～5min，经二次消毒后，最后采用无菌水冲洗3～5次。
10、进一步地，本发明所述的快速扩繁方法，在所述s3步骤中，所述诱导培养基选择添加有：0.05～0.1mg/l激动素kt和0.05～0.1mg/l naa的ms培养基，所述诱导培养基的ph值为5.6～5.8；其中，所述ms培养基包含有质量浓度为8%的蔗糖，质量浓度为6g/l的琼脂。
11、进一步地，本发明所述的快速扩繁方法，在所述s4步骤中，所述分离培养基选择添加有：1～3mg/l三十烷醇、2～4mg/l 2 ,4-d、0.8～1.5mg/l 6-ba和0.05～0.1mg/l naa的1/2ms培养基，所述分离培养基的ph值为5.6～5.8；其中，所述ms培养基包含有质量浓度为8%的蔗糖，质量浓度为6g/l的琼脂。
12、进一步地，本发明所述的快速扩繁方法，在所述s5步骤中，所述增殖培养基选择添加有：0.5～1.5mg/l石墨烯、0.2～0.5mg/l iaa、0.5～1.0mg/l iba和0.5～1.0mg/l 6-ba的1/2ms培养基，所述增殖培养基的ph值为5.6～5.8；其中1/2ms培养基包含有质量浓度为4%的蔗糖，质量浓度为6g/l的琼脂。
13、进一步地，本发明所述的快速扩繁方法，在所述s5步骤中，所述炼苗是将生根苗连同培养容器一同移出光照培养箱中移出，将生根后的辣椒苗放在室温房间中，在温度为23～25℃，光照强度为2000lx，光照时长为16h/天的条件下，炼苗时间为7～10天，控制室温房间中的湿度在85％以上。
14、进一步地，本发明所述的快速扩繁方法，所述辣椒果实选自骄阳2号辣椒品种。
15、采用本发明所述的快速扩繁方法，培养基中的ms培养基为植物组织培养技术中常用基本培养基配方，具有较高的无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿质营养，还能加速愈伤组织的生长，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。
16、三十烷醇是天然生物产品，其可增强淀粉酶、多氧化酶、过氧化物酶活性；还能促进发芽、生根、增强抗寒、抗旱能力，和其它激素相比，加入三十烷醇可以促使愈伤组织变绿，并提高植株愈伤组织诱导率。
17、kt的中文名为激动素/6-糠基氨基嘌呤，植物细胞分裂素的一种，是一种非天然的细胞分裂素，化学名称为6-糖基氨基嘌呤(或n6-呋喃甲基腺嘌呤)，其分子式c10h9n5o。不溶于水，溶于强酸、碱及冰醋酸中；除具有促进细胞分裂的作用外，还具有延缓离体叶片和切花衰老，诱导芽分化和发育及增加气孔开度的作用。
18、naa的中文名为萘乙酸，植物生长素的一种，能促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根增加坐果，防止落果，改变雌、雄花比率等，可经叶片、树枝的嫩表皮、种子进入到植株内，随营养流输导到全株。
19、iba的中文名吲哚丁酸，是植物生长素的一种，主要用于插条生根，可诱导根原体的形成，促进细胞分化和分裂，有利于新根生成和维管束系统的分化，促进插条不定根的形成，被广泛应用于树木和花卉的扦插生根。
20、iaa的中文名吲哚乙酸，是植物生长素的一种，用作刺激植物生长的激素类试剂，广泛应用于农业生产中。
21、6-ba的中文名苄基嘌呤/6-苄基氨基嘌呤，是植物细胞分裂素的一种，具有抑制植物叶内叶绿素、核酸、蛋白质分解,保绿防老;氨基酸、 生长素、无机盐等向处理部位调运等多种效能,广泛用农业、树和园艺作物从发芽收获各阶段。
22、2 ,4-d的中文名2，4-二氯苯氧乙酸，是一种植物生长调节剂，可以促进插条生根，果实早熟，防止落花落果等作用。
23、石墨烯是一种由碳原子以化轨道组成六角型呈蜂巢晶格的二维碳纳米材料，它具有优异的光学、电学、力学特性，在材料学、微纳加工、能源、生物医学和药物传递等方面具有重要的应用前景，将适宜浓度的石墨烯加入诱导培养基中，可以促进愈伤组织的稳定分化，以便提高扩繁效率。因为石墨烯的添加能有效提高辣椒在组培时的稳定分化效率，不仅能促进植物生长及根系生长，还可在培养基中起到杀菌的作用。
24、采用本发明所述的快速扩繁方法，与现有技术相比，其有益效果在于：可以不受季节、温度和地域影响，1个下胚轴可获得多个不定芽，与一粒种子一株苗相比，可在短时间内获得大量植株，不仅能够快速培育大量的辣椒无菌苗，还能有效提升辣椒的生长发育速度，培育的种苗可以满足骄阳2号大面积种植需求。由此可见，采用本发明所述的快速扩繁方法，能大大缩短辣椒生育期，提高辣椒种质创新和新品种选育效率，对推动辣椒产业发展具有重要意义。