5’－脱氧胞苷衍生物的制作方法

专利名称：5’－脱氧胞苷衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的5′-脱氧胞苷衍生物、药用组合物、其用于辅助5-氟尿嘧啶对肿瘤组织的选择性释放的试剂盒以及制备该新的5′-脱氧胞苷衍生物的方法。
更精确地，本发明涉及通式(I)所示的新的5′-脱氧胞苷衍生物，
其中的R1是氢原子或易于在生理条件下水解的基团；R2是氢原子，或-CO-OR4基[其中的R4是由1-15个碳原子的饱和或不饱和的、直链或支链的烃基，或通式-(CH2)n-Y的基团(其中的Y是环己基或苯基；n是从0到4的整数)]；R3是氢原子、溴基、碘基、氰基、C1-4烷基[其可用卤素原子取代]、乙烯基或乙炔基[其可用卤素原子、C1-4烷基、环烷基、芳烷基、或可带有一个或多个杂原子的芳环取代]，或是可被取代的芳烷基；但须R2和R3不能同时为氢原子。
虽然，5-氟尿嘧啶(5-Fu)或其衍生物是临床上有用的治疗各种实体肿瘤的抗肿瘤剂，但通常其在有效性和安全性方面还是不能令人满意的。这些缺陷主要是由于二氢嘧啶脱氢酶(DPD)所致的5-Fu快速失活以及/或者是由于5-Fu对肿瘤组织释放的选择性不能令人满意。设法通过抑制DPD而增强5-Fu或其衍生物的抗肿瘤活性已有报道随同给药5-Fu或其衍生物和DPD抑制剂如尿嘧啶[USP，4,328,229]、5-乙炔基尿嘧啶[WO92/04901]、5-氯-2，4-二羟基吡啶[USP，5,525,603]等。如此的随同给药引起5-Fu或其衍生物的抗肿瘤活性增强，但由于DPD抑制剂的释放对肿瘤组织无足够的选择性(结果，5-Fu水平在肿瘤和血浆中都增加)从而安全性没有改进。
相反，按照本发明，与5-Fu或其衍生物和已知的DPD抑制剂如5-乙炔基尿嘧啶的组合相比，已发现随同给药通式(I)所示的新的5′-脱氧胞苷衍生物和5-Fu或其衍生物导致5-Fu对肿瘤组织的选择性释放的显著改进，并在人癌症异种移植模型中显示出显著改进的抗肿瘤活性。
通式(I)的各个基团详细解释如下；R1的解释R1是氢原子或在生理状态下易于水解的基团。
上文中，术语“在生理状态下易于水解的基团”优选地指乙酰基，丙酰基，苯甲酰基，甲苯酰基，甘氨酰基，丙氨酰基，β-丙氨酰基，缬氨酰基，赖氨酰基，以及类似基团。R2的解释R2是氢原子，或-CO-OR4基团[其中的R4是由1到15个碳原子组成的、饱和的或不饱和的、直链或支链的烃基，或通式-(CH2)n-Y的基团(其中的Y是环己基或苯基；n是0到4的整数)]。
以上的基团R4中，术语“由1到15个碳原子组成的、饱和的或不饱和的、直链或支链的烃基”优选地指甲基，乙基，正-丙基，1-异丙基-2-甲基丙基，1，1，2-三甲基丙基，正-丁基，异丁基，2-乙基丁基，3，3-二甲基丁基，正-戊基，异戊基，新戊基，2-丙基戊基，正-己基，2-乙基己基，正-庚基，正-辛基，烯丙基，2-丁烯-1-基，3-丁烯-1-基，3-戊烯-1-基，4-戊烯-1-基，3-己烯-1-基，4-己烯-1-基，5-己烯-1-基，正-十三烷基及类似基团。
术语“通式-(CH2)n-Y的基团(其中的Y是环己基或苯基；n是从0到4的整数)”优选地指环己基，环己基甲基，2-环己基乙基，3-环己基丙基，4-环己基-丁基，苯基，苄基，苯乙基，3苯基丙基，4-苯基丁基及类似基团。在本发明的化合物的最优选的实施方案中，R4指正-丙基，正-丁基，正-戊基，异戊基，新戊基，正-己基，3，3-二甲基丁基，2-乙基丁基，苯基乙基，以及环己基甲基。R3的解释R3是氢原子，溴基，碘基，氰基，C1-4烷基[其可用卤素原子取代]，乙烯基或乙炔基[其可用卤素原子，C1-4烷基，环烷基，芳烷基，或可带有一个或多个杂原子的芳环取代]，或是可被取代的芳烷基；但须R2和R3不能同时为氢原子。
上文中，术语“可用卤素原子取代的C1-4烷基”优选地指甲基，三氟甲基，乙基，丙基及类似基团。
术语“乙烯基或乙炔基[其可用卤素原子，C1-4烷基，环烷基，芳烷基，或可带有一个或多个杂原子的芳环取代]”优选地指乙烯基，1-氯乙烯基，2-溴乙烯基，2-溴-1-氯乙烯基，乙炔基，丙-1-炔基，丁-1-炔基，戊-1-炔，己-1-炔，3，3-二甲基-丙-1-炔基，环戊基乙炔基，环己基乙炔基，苯基乙炔基，3-苯基丙-1-炔基。吡啶-2-基乙炔基，咪唑-2-基乙炔基，及类似基团。最优选的基团是乙炔基和碘基。
术语“可被取代的芳烷基”优选地指3-(苄氧基)苄基，3-甲氧基苄基，3-溴苄基，3-甲基苄基，3-羟基苄基及类似基团。
本发明优选的5′-脱氧胞苷是5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-5-丙-1-炔胞苷，5′-丁-1-炔-5′-脱氧胞苷，5′-脱氧-5-戊-1-炔基胞苷，5′-脱氧-5-己-1-炔基胞苷，5′-脱氧-5-碘代胞苷，5′-溴基-5′-脱氧胞苷，5-(1-氯乙烯基)-5′-脱氧胞苷，5′-脱氧-5-乙烯胞苷，5′-脱氧-5-三氟甲基胞苷，5-(3-苄氧苄基)-5′-脱氧胞苷，5-氰基-5′-脱氧胞苷，5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)-5-丙-1-炔基胞苷，5-丁-1-炔基-5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-戊-1-炔基-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-己-1-炔基-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-碘基-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5-溴基-5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5-(1-氯乙烯)-5′-脱氧-N4-(正戊氧羰基)胞苷，N4-(乙氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，5′-脱氧-N4-(正-丙氧羰基)-5-乙烯基胞苷，N4-(正-丁氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)-5-乙烯基胞苷，N4-(苄氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，5′-脱氧-N4-(正戊氧羰基)-5-三氟甲基胞苷，5-(3-苄氧苄基)-5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5-氰基-5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(甲氧羰基)胞苷，5′-脱氧-N4-(乙氧羰基)-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正-丙氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(异-丙氧羰基)胞苷，N4-(正-丁氧羰基)-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(异丁氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2-丙基戊氧)羰基]胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(异戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2-甲基戊氧)羰基]胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(3-甲基戊氧)羰基]胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正-己氧羰基)胞苷，5′-脱氧-N4-[(2-乙基丁基)氧羰基]-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-N4-[(2-乙基己基)氧羰基]-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2-苯乙氧基)羰基]胞苷，N4-(环己氧羰基)-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，N4-[(环己基甲氧)羰基]-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(新戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-N4-[(3，3-二甲基丁氧)羰基]-5-乙炔基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正-丙氧羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-N4-(乙氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-N4-(正-丙氧羰基)-5-乙烯基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-N4-(正-丁氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)-5-乙烯基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-N4-(苄氧羰基)-5′-脱氧-乙烯基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正癸氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2，6-二甲基环己氧)-羰基]胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(苄氧羰基)胞苷5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(1-异丙基-2-甲基-丙氧基)]胞苷5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(3-甲氧苄氧)-羰基]胞苷式(I)所示的新的5′-脱氧-胞苷衍生物可按下列方法制备。在以下方法A-F中，P1表示羟基保护基如乙酰基，苯甲酰基，三甲基甲硅烷基，叔-丁基二甲基硅烷甲基及类似基团。方法A式(I)所示的化合物，其中的R1，R2和R3同上文所定义，可通过式(II)所示的化合物 ，与通式(III)所示的化合物R4OCOX (III)[其中的R4同上文所定义；X是氯基或溴基]，在酸性中和剂的存在下反应，随后，若需要，通过除去保护基而制备。方法B式(I)所示的化合物，其中R1和R2同上文中所定义而R3是乙炔基或乙烯基[其可用卤原子，C1-4烷基，环烷基，芳烷基，或可带有一个或多个杂原子的芳环取代]，还可通过式(IV)所示的化合物 与乙炔或乙烯衍生物在钯催化剂的存在下反应，随后，若需要，通过除去保护基而制备。方法C式(I)所示的化合物，其中的R1和R2同上文中所述而R3是氰基，还通过式(IV)所示的化合物 与碱金属氰化物反应，随后，若需要，通过除去保护基而制备。方法D式(I)所示的化合物，其中的R1和R3同上文中所定义而R2是氢原子，还可通过式(V)所示的化合物 与磷酰氯在酸中和剂存在下反应，随后，用氨处理，随后，若需要，除去保护基而制备。方法E式(I)所示的化合物，其中的R1，R2和R3同上文中所定义，还可通过式(VI)所示的化合物 与式(VII)所示的化合物 在路易斯酸催化剂存在下偶联，随后，若需要，通过除去保护基而制备。方法F式(I)所示的化合物，其中的R3是乙烯基[其可用卤素原子，C1-4烷基，环烷基，芳烷基，或可带有一个或多个杂原子的芳环取代]，R1和R2同上文中所定义，可用Lindlar催化剂对式(VIII)所示的化合物 催化加氢，随后，若需要，除去保护基而制备。
下文中，将更详细地说明按本发明的制备新的5′-脱氧胞苷衍生物的方法。方法A通式(II)所示的化合物的具体实例包括2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧基-5-丙-1-炔胞苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-丙-1-炔胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5-丁-1-炔基-5′-脱氧胞苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-丁-1-炔基-5′-脱氧胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-戊-1-炔基胞苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-戊-1-炔基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-己-1-炔基胞苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-己-1-炔基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-碘代胞苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘代胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5-溴-5′-脱氧胞苷，
2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-溴-5′-脱氧胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5-(1-氯乙烯基)-5′-脱氧胞苷2′，3′-双-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-(1-氯乙烯基)-5′-脱氧胞苷，2′，3′-二-脱氧-乙酰基-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-三氟甲基胞苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-三氟甲基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5-(3-苄氧苄基)-5′-脱氧胞苷，5-(3-苄氧苄基)-2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧胞苷2′，3′-二-O-乙酰基-5-氰基-5′-脱氧胞苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-氰基-5′-脱氧胞苷以及类似物。
上述通式(II)的化合物与通式(III)的化合物的反应可在诸如吡啶，二O环己烷，四氢呋喃，乙腈，氯仿，二氯甲烷及其类似物的溶剂中于诸如三乙胺，吡啶，甲基吡啶，4-(N，N-二甲基氨基)吡啶，二甲基吡啶及类似物的酸中和剂的存在下进行。该反应可在介于0-30℃的温度下进行。若需要，可在反应后通过本领域熟练技术人员周知的方法，如通过碱或酸水解，或用氟化物阴离子处理，除去保护基。方法B通式(IV)所示的化合物的具体实例包括，2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘-N4-(甲氧羰基)胞苷，2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-N4-(乙氧羰基)-5-碘代胞苷，2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘-N4-(正丙氧羰基)胞苷，N4-(正丁氧羰基)-2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘代胞苷，2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘-N4-(正戊氧羰基)-胞苷，2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘-N4-(异戊氧羰基)-胞苷，2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘-N4-(正己氧羰基)-胞苷，2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-N4-[(2-乙基丁基)氧羰基]-5-碘代胞苷，2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘-N4-((2-苯基乙氧)-羰基)]胞苷，2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-N4-[(环己基甲氧基)羰基]-5′-脱氧-5-碘代胞苷，2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘-N4-(新戊氧羰基)胞苷，2′3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-N4-[(3，3-二甲基丁氧羰基]-5-碘代胞苷，2′3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-碘-N4-(乙氧羰基)胞苷2′3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-碘-N4-(正丙氧羰基)胞苷2′3′-二-O-乙酰基-N4-(正丁氧羰基)-5′-脱氧-5-碘-胞苷，2′3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-碘-N4-(正戊氧羰基)胞苷及其类似物。
用于此偶联反应的乙炔或乙烯基衍生物的具体实例是三甲基甲硅烷基乙炔，叔-丁基二甲基甲硅烷基乙炔，1-丁炔，1-戊炔，1-庚炔，1-己炔，3-甲基-1-丁炔，3，3-二甲基-1-丁炔，环己基乙炔，苯基乙炔，3-苯基-1-丙炔，三-丁-丁基(乙烯基)锡烷及类似物。
式(IV)所示的化合物和乙炔衍生物的偶联反应可在钯催化剂如双(三苯基膦)氯化钯(II)-碘化铜(I)，双(三苯基膦)乙酸钯(II)-碘化铜(I)及类似物的存在下进行。式(IV)所示的化合物和乙烯衍生物的偶联反应可在钯催化剂[如三(二亚苄基丙酮)二钯，四(三苯基膦)钯，双(乙腈)氯化钯(II)]以及三-2-呋喃膦，三苯基膦及类似物存在下进行。
这些反应可在诸如氯仿，二氯甲烷，四氢呋喃，N-甲基吡咯烷酮，N，N-二甲基甲酰胺及其类似物的溶剂中进行。此反应可在介于0到80℃的温度下，优选地介于10到60℃的温度下进行。方法C上述通式(IV)化合物与诸如氰化钠，氰化钾等的碱金属氰化物的反应可在诸如N，N-二甲基甲酰胺，二甲基亚砜，乙腈及其类似物的溶剂中进行。此反应可在介于0-100℃的温度下，优选地介于10-30℃温度下进行。方法D通式(V)所示的化合物的具体实例包括2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙炔尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-丙-1-炔尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-丁-1-炔-5′-脱氧尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-戊-1-炔尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-己-1-炔尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘代尿苷，5-溴-2，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧尿苷，2，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-(1-氯乙烯基)-5′-脱氧尿苷，2，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙烯基尿苷，2，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-三氟甲基尿苷，5-(3-苄氧苄基)-2′，3′-双-O-(叔-丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-氰-5′-脱氧胞苷及其类似物。
上文列出的原材料可通过类似于方法E的方法(其中用5-取代的尿嘧啶衍生物代替5-取代的胞嘧啶)用已知的5-取代的尿嘧啶衍生物制备。
上述通式(V)化合物和磷酰氯的反应可在介于0-30℃的温度下于诸如吡啶，二O环己烷，四氢呋喃，乙腈，氯仿，二氯甲烷及类似物的溶剂中于诸如三乙胺，吡啶，甲基吡啶，4-(N，N-二甲基氨基)吡啶，二甲基吡啶及其类似物的酸中和剂的存在下进行，随后在介于0到30℃的温度下的诸如甲醇，乙醇，乙腈，N，N-二甲基甲酰胺及其类似物的溶剂中用氨水或氨气处理。方法E通式(VI)所示的化合物的具体实例包括5-乙炔基胞嘧啶，5-丙-1-炔胞嘧啶，5-丙-1-炔胞嘧啶，5-丁-1-炔-5′-脱氧胞嘧啶，5-戊-1-炔胞嘧啶，5-己-1-炔胞嘧啶，5-碘代胞嘧啶，5-溴代胞嘧啶，5-(1-氯乙烯基)-胞嘧啶，5-乙烯基胞嘧啶，5-三氟甲基胞嘧啶，5-(3-苄氧-苄基)胞嘧啶，5-氰基胞嘧啶，5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)胞嘧啶及其类似物。
通式(VII)所示的化合物的具体实例包括已知的5-脱氧-1，2，3-O-三乙酰基-D-呋喃核糖苷，5-脱氧-1，2，3-O-三苯甲酰基-D-呋喃核糖苷及其类似物。
式(VI)化合物可首先用甲硅烷基化剂(如六甲基二硅氮烷基)转变成三甲基甲硅烷基衍生物，随后在路易斯酸催化剂如氯化锡(IV)，氯化钛(IV)及其类似物的存在下与式(VII)所示的化合物进行偶联反应。此偶联反应在诸如乙腈，二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，硝基甲烷，甲苯及其类似物的溶剂中于介于0-30℃，优选地介于0-10℃的温度下进行。方法F通式(VIII)所示的化合物的具体实例包括5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-N4-(乙氧羰基)-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正丙氧羰基)胞苷，N4-(正-丁氧羰基)-5′-脱氧-5-乙炔胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)胞苷，N4-(苄氧羰基)-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，
2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(乙氧羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正丙氧羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)胞苷，及其类似物。
式(VIII)化合物的乙炔基的催化加氢可按本领域熟练的技术人员周知的方法用Lindlar催化剂进行[参看“合成方法”，1952年，第7卷，第38页(Interscience Publishers，Inc.，New York)]。
本发明的新的5′-脱氧胞苷衍生物与周知的生理可接受的药用载体一起用作抗肿瘤剂。
本发明也提供了一种包括通式(I)所示的5′-脱氧胞苷衍生物和5-氟尿嘧啶(5-Fu)或其衍生物的药用组合物。在此种组合物中，5′-脱氧胞苷衍生物强化了5-Fu或其衍生物的抗肿瘤效应，其是通过对肿瘤组织选择性地释放明显更多量的5-Fu而并不显著地增加5-Fu的血浆浓度而实现的。
在通式(I)所示的5′-脱氧胞苷衍生物与5-Fu或其衍生物合用来治疗癌症，其疗效和安全性均有改进。该5-Fu衍生物优选地选自5-氟-1-(2-四氢呋喃)尿嘧啶，1-(正-己氧羰基)-5-氟尿嘧啶，5′-脱氧-5-氟尿苷5′-脱氧-5-氟尿苷-N4-(正丙氧羰基)胞苷，N4-(正丁氧羰基)-5′-脱氧-5-氟胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-(正戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-(异戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-(正己氧羰基)胞苷，5′-脱氧-N4-[(2-乙基丁基)氧羰基]-5-氟胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-[(2-苯基乙氧)羰基]胞苷，N4-[(环己基甲氧基)羰基]-5′-脱氧-5-氟胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-(新戊氧羰基)-胞苷，5′-脱氧-N4-[(3，3-二甲基丁氧基)羰基]-5-氟胞苷，
5′-脱氧-5-氟-N4-(3，5-二甲基苯甲酰基)胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-(3，5-二氯苯甲酰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-氟-N4-(正戊氧羰基)胞苷及其类似物。
式(I)化合物可单独给药或与5-Fu或其衍生物同时给药。
相应地，本发明的药用组合物可通过将式(I)化合物和5-Fu或其衍生生物配成单一制剂或者以两个分装的单独制剂提供。
式(I)的药用组合物可在5-Fu或其衍生物给药前或与之同时给药；优选地，在5-Fu或其衍生物给药前3小时内或与之同时给药。
在含有5-Fu或其衍生物和通式(I)所示的5′-脱氧胞苷衍生物的本发明的药用组合物中，两种组分的合适摩尔比为每摩尔的5-Fu或其衍生物约0.001-10摩尔，优选地为0.002-0.5摩尔的式(I)化合物。
本发明还提供了一种包括含有式(I)化合物的药用组合物(组分A)以及含有5-Fu或其衍生物的药用组合物(组分B)的试剂盒。
因此，本发明也涉及式(I)化合物和有或无5-Fu或其衍生物的药用组合物及其试剂盒以治疗结肠直肠癌，乳腺癌，胃癌，肺癌，颈癌，膀胱癌及其它恶性疾病和类似疾病。
本发明的药用组合物和试剂盒中的组分A和B可以任何形式(如片剂，丸剂，栓剂，胶囊剂，颗粒剂，散剂，或乳剂等)给药。用于配制本发明的药用组合物的药学可接受的载体和赋形剂是常用的那些。药学可接受的材料可以是适于肠内、经皮或非经肠给药的有机的或非有机的惰性载体材料，如水，明胶，阿拉伯胶，乳糖，淀粉，硬脂酸镁，滑石粉，植物油，聚亚烷基二醇和凡士林。本发明所提供的药用组合物可以口服(如以片剂，胶囊剂，丸剂，散剂，颗粒剂，溶液剂，糖浆剂，悬浮剂或酏剂)给药。也可通过非经肠道途径(如以无菌溶液剂、悬乳剂或乳剂形式)给药；或局部地(如以溶液剂，悬浮剂，油膏剂，散剂或气雾剂形式)给药。该药用组合物可经无菌处理并进一步含有辅剂，如防腐剂，稳定剂，凝固剂，乳化剂，矫味剂，调整渗透压的盐或用作缓冲液的物质。
该药用组合物可用常规方法制备。
本发明的药用组合物的剂量范围依赖于给药途径，患者的年龄，体重和身体状况以及待治的具体疾病而定。在对成人口服，直肠或非经肠道给药时，近似的每日剂量是基于所用的5-Fu衍生物的种类而介于大约1mg到2,000mg的式(I)化合物和介于大约10mg到4,000mg的5-Fu或其衍生物。口服给药是优选的给药本发明的药用组合物的途径。
5-Fu通过式(I)化合物对肿瘤DPD选择性抑制的对肿瘤的选择性释放，下文从所述的试验中体现。1.实施例6化合物A对肿瘤DPD的选择性抑制实施例6化合物A对抑制DPD活性的活性与已知的DPD抑制剂5-乙炔尿嘧啶(5-Eu)在带有人前列腺癌移种移植PC-3的BALB/c裸鼠中比较。分别在给药化合物A(0.05mmol/kg)和5-Eu(0.05μmol/kg)后2和8小时切除每组三只小鼠的肝脏和肿瘤组织。然后，如别处(Naguib等，癌症研究45，5450-5412，1985)所述检测这些组织中的DPD活性。5-Eu在肝脏和肿瘤组织中都抑制DPD活性，而化合物A仅在肿瘤组织(表1)中强烈地抑制该活性。这些结果提示实施例6化合物A选择性地抑制肿瘤组织的DPD活性。表1.实施例6化合物A对DPD活性的抑制DPD活性(pmol/mg蛋白质/分钟)组织 对照 5-EU化合物A2小时8小时2小时8小时2小时8小时肝脏 288 162 46 83 177 326肿瘤 31 29 17 13 992.通过实施例6化合物选择性升高用氟嘧啶治疗的小鼠的肿瘤内的5-Fu水平表2所示的实验证明实施例6化合物A选择性地升高用氟嘧啶治疗的小鼠的肿瘤内的5-Fu AUC(曲线下面积)。在此项研究中，氟嘧啶，如5-Fu，去氧氟尿苷[5′-脱氧-5-氟尿苷]和Capecitabine[5′-脱氧-5-氟-N4-(正戊氧羰基)胞苷]，联合化合物A或者5-Eu对带有人胃癌移种移值MKN28的BALB/c裸鼠给药。然后，在每次氟嘧啶给药(n＝3只小鼠)后0.25，0.5，2，4和7小时检测血浆和肿瘤组织的5-Fu水平，并计算5-Fu AUC。已知的DPD抑制剂5-Eu在用5-Fu，Capecitabine或去氧氟尿苷治疗的小鼠的血浆和肿瘤组织中都能大大地增加5-Fu AUC。由于血浆中5-Fu水平的升高会引起5-Fu的全身性毒性，5-Eu应是强化氟嘧啶的有效性和毒性。
相反，化合物A仅在肿瘤组织中大大地增加5-Fu AUC，这可能是由于化合物A选择性抑制肿瘤中的DPD降解5-Fu的活性。因此，实施例6化合物增加氟嘧啶的有效性而几乎不增加其毒性。表2.用氟嘧啶治疗的小鼠的血浆和肿瘤中的5-Fu AUC试验化合物氟嘧啶(mmol/kg)5-FU AUC(nmolohr/mL)(μmol/kg)血浆 肿瘤实验1- 5-FU(0.3) 9.31.3化合物A(2)5-FU(0.3) 9.56.05-EU(1) 5-FU(0.3) 75 48- Capecitabine(1.5) 1.330化合物A(2)Capecitabine(1.5) 3.1675-EU(1) Capecitabine(1.5) 53 120实验2- 去氧氟尿苷(0.75)2.68.0化合物A(2)去氧氟尿苷(0.75)11 305-EU(1) 去氧氟尿苷(0.75)86 73- Capecitabine(1.5) 1.530化合物A(2)Capecitabine(1.5) 3.8765-EU(1) Capecitabine(15)54 1203.实施例6化合物增强Capecitabine的抗肿瘤活性检测实施例6化合物增强Capecitabine在带有人前列腺癌移种移植PC-3的BALB/c裸鼠体的有效性的活性。在肿瘤接种后53天(当肿瘤可触知时)开始每周连续五天同时或先后口服给药化合物A和Capecitabine三周。在第75天，计算了肿瘤体积增量以及肿瘤生长抑制的百分数。如表3所示，当与化合物A联合同时或先后给药时，Capecitabine在更大的程度上抑制肿瘤生长。由于化合物A本身不是细胞毒性(未有资料显示)，其通过抑制DPD活性而增强Capecitabine的有效性。表3.实施例6化合物A增强Capecitabine的有效性Capecitabine 化合物A肿瘤体积变肿瘤生长抑 体重变化 第25天的(mmol/kg/d)(μmol/kg/d)化(mm3) 制(％) (g) 存活小鼠第53-75天 第75天 第75天-- 981 - -3.6 5/51.0 - 757 23-3.4 5/51.0 1.0 323*67-1.8 5/51.0 1.0#201*80-0.3 4/5*与对照组相比P＜0.05#Capecitabine给药前一小时给药化合物A下列实施例旨在更详细地说明本发明，但并非想以任何方式限制本发明的范围。参考实施例1a)2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔尿苷的制备将5-乙炔尿嘧啶(12g，88.2mmol)悬浮于硫酸铵(570mg，4.3mmol)的六甲基二硅氮烷(240ml)的溶液中。回流该悬浮液6小时。减压下浓缩该反应混合物后，加入5-脱氧-1，2，3-三-O-乙酰基-D-呋喃核糖苷(27.5g，105.8mmol)的乙腈(300ml)溶液到该残留物中。然后，在保持温度低于0℃的条件下滴加无水的四氯化锡(27.6g，105.8mmol)的硝基甲烷(60ml)溶液。再在0℃下搅拌该混合物4小时后，加入碳酸氢钠并随后滴加水。搅拌该混合物2小时后，过滤该反应混合物除去不可溶物，用乙酸乙酯洗涤。合并该滤液和洗涤液并用MgSO4干燥并过滤。减压蒸发该滤液。用硅胶色谱(用正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2作为洗脱剂)纯化该残留物得到2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基尿苷(13.7g，48％收率)。
MALDI-MS(m/z)359[M+Na]+，375[M+K]+1H-NMR(270MHz；CDCl3)δ1.47(3H，d，J＝6.6)，2.10(3H，s)，2.12(3H，s)，3.23(1H，s)，4.19-4.28(1H，m)，5.01-5.05(1H，m)，5.30-5.34(1H，m)，5.90(1H，d，J＝4.95)，7.57(1H，s)，8.34(1H，br.s)b)2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙炔基尿苷的制备在0℃下，边搅拌边滴加NaOH(3.3g，81.4mmol)水(10ml)溶液到溶于甲醇(100ml)的2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基尿苷(13.7g，40.7mmol)的溶液中。再在0℃下搅拌30分钟后，用1N HCl水溶液调节该反应混合物到pH7。然后，减压下蒸发该混合物。
将残留物溶于DMF(250ml)，并在搅拌下加入咪唑(41.6g，610mM)和叔丁基二甲基氯硅烷(30.7g，203mmol)到该溶液中。连续搅拌该混合物23小时。将该反应混合物在乙酸乙酯和水间分配。用乙酸乙酯反萃取水层。用盐水洗涤该合并的有机层，Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。硅胶色谱(用正己烷∶乙酸乙酯＝3∶1作为洗脱剂)纯化该残留物得到2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙炔基尿苷(14.9g，76％收率)。
FAB-MS(m/z)481[M+H]+1H-NMR(270MHz；CDCl3)δ0.10-0.13(12H，m)，0.91(18H，m)，1.40(3H，d，J＝6.6)，3.21(1H，s)，3.58(1H，dd，J＝4.29，6.6)，4.08-4.17(2H，m)，5.62(1H，d，J＝2.64)，7.68(1H，s)，8.24(1H，br.s)下列化合物以相同于上述的方法用相应的已知的5-取代的尿嘧啶衍生物制备2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘代尿苷，FAB-MS(m/z)583[M+H]+，605[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ-0.09(3H，s)，-0.03(3H，s)，0.00(3H，s)，0.02(3H，s)，0.75(9H，s)，0.81(9H，s)，1.24(3H，d，J＝6.6)，3.75(1H，dd，J＝4.6，4.0)，3.86(1H，m)，4.36(1H，dd，J＝5.3，5.0)，5.59(1H，d，J＝5.6)，7.91(1H，s)，11.69(1H，br.s)2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-三氟甲基尿苷，FAB-MS(m/z)525[M+H]+1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ0.00(6H，s)，0.02(3H，s)，0.06(3H，s)，0.83(9H，s)，0.83(9H，s)，1.32(3H，d，J＝5.9)，3.47(1H，m)，4.05(1H，m)，4.16(1H，m)，5.54(1H，d，J＝2.2)，7.84(1H，s)，8.43(1H，br.s)2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-(3-苄氧苄基)-5′-脱氧尿苷，FAB-MS(m/z)653[M+H]+1H-NMR(270MHz；CDCl3)δ-0.09-0.01(12H，m)，0.77-0.83(18H，m)，0.90(3H，d，J＝6.3)，3.27(1H，m)，3.31(1H，d，J＝16.5)，3.61(1H，d，J＝16.5)，3.86(1H，m)，3.95(1H，m)，4.94(2H，s)，5.50(1H，d，J＝2.0)，6.68-6.78(4H，m)，7.12-7.34(6H，m)，8.54(1H，br.s)下列化合物可按相同于上述的方法用相应的已知的5-取代的尿嘧啶衍生物制备2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-脱氧-5-丙-1-炔基尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-丁-1-炔基-5′-脱氧尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-戊-1-炔基尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-己-1-炔基尿苷，5-溴-2′，3′-双-O-(叔-丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-(1-氯乙烯基)-5′-脱氧尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙烯基尿苷，实施例12′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙炔基尿苷的制备在冰浴中氩气环境下，向二甲基氨基吡啶(19.0g，155.5mmol)的乙腈(120ml)和吡啶(12.6ml，155.5mmol)的溶液中滴加磷酰氯(14.4g，93.8mM)。在室温下搅拌该混合物一小时后，在冰浴中冷却的5℃下，加入2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙炔基尿苷(14.9g，31.1mmol)的乙腈(80ml)溶液。室温下搅拌该混合物2小时。然后，在温度控制在10℃下一批加入25％氨水溶液(10ml)到该反应混合物中。在温度控制在10℃下，加入第二批25％氨水溶液(65ml)到该反应混合物中。室温下搅拌该混合物45分钟。然后，在室温下用水(200ml)稀释该反应混合物并用乙酸乙酯萃取三遍。用1N HCl水溶液，饱和的NaHCO3水溶液和盐水连续洗涤该合并的有机层。将该有机层用MgSO4干燥，过滤并减压蒸发。用硅胶色谱(用正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1作用洗脱剂)纯化该残留物得到2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙炔基尿苷(14.8g，99％收率)。
MALDI-MS(m/z)502[M+Na]+，518[M+K]+1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ0.05(3H，s)，0.06(3H，s)，0.12(3H，s)，0.24(3H，s)，0.89(9H，s)，0.92(9H，s)，1.41(3H，d，J＝6.35)，3.36(1H，s)，3.46(1H，dd，J＝3.91，7.81)，4.19-4.26(2H，m)，5.57(1H，s)，5.79(1H，br.s)，7.57(1H，br.s)，7.80(1H，S)下列化合物用类似于实施例1的方法得到。实施例22′，3′-双-O-(叔-丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘代胞苷，FAB-MS(m/z)582[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.00(3H，s)，0.02(3H，s)，0.06(3H，s)，0.08(3H，s)，0.82(9H，s)，0.88(9H，s)，1.30(3H，d，J＝6.6)，3.78(1H，dd，J＝4.6，4.3)，3.93(1H，m)，4.33(1H，dd，J＝4.9，4.6)，5.67(1H，d，J＝5.0)，6.67(1H，br.s)，7.87(2H，br.s)实施例32′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-三氟-甲基胞苷，FAB-MS(m/z)524[M+H]+1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ0.00(6H，m)，0.08(3H，s)，0.19(3H，s)，0.84(9H，s)，0.87(9H，s)，1.35(3H，d，J＝6.6)，3.38(1H，m)，4.15(1H，m)，4.21(1H，m)，5.51(1H，s)，7.79(1H，s)实施例45-(3-苄氧苄基)-2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧胞苷，FAB-MS(m/z)652[M+H]+1H-NMR(270MHz；CDCl3)δ0.01(3H，s)，0.00(3H，s)，0.09(3H，s)，0.22(3H，s)，0.86(9H，s)，0.90(9H，s)，1.10(3H，d，J＝6.6)，3.37(1H，m)，3.57(2H，s)，4.08-4.18(2H，m)，5.03(2H，s)，5.59(1H，s)，6.75-6.90(3H，m)，7.11(1H，s)，7.26(1H，m)，7.31-7.44(5H，m)FAB-MS(m/z)652[M+H]+1H-NMR(270MHz；CDCl3)δ-0.01(3H，s)，0.00(3H，s)，0.09(3H，s)，0.22(3H，s)，0.86(9H，s)，0.90(9H，s)，1.10(3H，d，J＝6.6)，3.37(1H，m)，3.57(2H，s)，4.08-4.18(2H，m)，5.03(2H，s)，5.59(1H，s)，6.75-6.90(3H，m)，7.11(1H，s)，7.26(1H，m)，7.31-7.44(5H，m)实施例52′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-氰基-5′-脱氧胞苷FAB-MS(m/z)481[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ-0.04(3H，s)，0.00(3H，s)，0.02(3H，s)，0.76(9H，s)，0.82(9H，s)，1.21(3H，d，J＝6.3)，3.81(1H，m)，4.05(1H，t，J＝5.0)，4.71(1H，t，J＝5.0)，5.65(1H，d，J＝5.3)，6.41(1H，s)，7.69(1H，br.s)，7.85(1H，br.s)按类似于实施例5的方法制备下列化合物。
2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-丙-1-炔基尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-丁-1-炔基-5′-脱氧尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-戊-1-炔基尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-己-1-炔基尿苷，5-溴-2′，3′-双-O-(叔-丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-(1-氯乙烯基)-5′-脱氧尿苷，2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙烯基尿苷，实施例65′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正-戊氧羰基)胞苷的制备a)将2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷(45mg，0.09mmol)溶于二氯甲烷(1ml)和吡啶(33μl，0.42mM)中。在冰浴中氩气环境下向该混合物中滴加氯代甲酸正戊酯(42mg，0.28mmol)。在室温下搅拌该反应混合物2小时。加入水并搅拌该反应混合物30分钟。将该反应混合物在二氯甲烷和水间分配。用二氯甲烷萃取水层。用Na2SO4干燥该合并的有机层并过滤。减压蒸发该滤液。
硅胶色谱(用正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1作为洗脱剂)纯化该残留物得到2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)胞苷(40mg，72％收率)。
FAB-MS(m/z)594[M+H]+1H-NMR(270MHz；CDCl3)δ0.12-0.27(12H，m)，0.90-0.92(21H，m)，1.26-1.42(7H，m)，1.64-1.72(2H，m)，3.25-3.51(2H，m)，4.15-4.23(4H，m)，5.55-5.60(1H，m)，7.62(0.5H，br.s)，7.73(0.5H，br.s)，8.00(0.5H，br.s)，12.3(0.5H，br.s)b)在室温下的氩气环境中，向2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)胞苷(19mg，0.03mmol)的四氢呋喃(500μl)溶液中滴加氟化四丁铵(93μl，0.09mmol)[1.0M四氢呋喃溶液]。在室温下搅拌该混合物2小时后，减压蒸发该反应混合物。将该残留物在二氯甲烷和水中分配。用二氯甲烷反萃取该水层。将该合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。用硅胶色谱(用二氯甲烷∶甲醇＝20∶1作为洗脱剂)纯化该残留物得到5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)胞苷(化合物A)(9mg，81％收率)。
FAB-MS(m/z)366[M+H]+1H-NMR(400MHz；DMSO-d6)δ0.88(3H，t，J＝6.84)，1.30-1.32(7H，m)，1.59-1.63(2H，m)，3.67-3.71(1H，m)，3.90-4.46(5H，m)，5.07(1H，m)，5.42(1H，m)，5.66(1H，m)，7.89(0.5H，br.s)，8.14(0.5H，br.s)，9.53(0.5H，br.s)，11.7(0.5H，br.s)下列化合物(实施例7-35)是以类似于实施例6的方法获得的。实施例75′-脱氧-5-乙基-N4-(正戊氧羰基)胞苷FAB-MS(m/z)370[M+H]+1H-NMR(270MHz；CDCl3)δ0.91(3H，t，J＝6.93)，1.16(3H，t，J＝7.5)，1.36(4H，m)，1.41(3H，d，J＝6.6)，1.72(2H，m)，2.47(2H，q，J＝7.5)，3.22(1H，br.s)，3.93(1H，m)，4.16(2H，t，J＝6.93)，4.28(2H，m)，4.49(1H，br.s)，5.66(1H，d，J＝3.63)，7.37(1H，br.s)，12.46(1H，br.s)实施例85′-脱氧-5-碘-N4-(正戊氧羰基)胞苷FAB-MS(m/z)468[M+H]+，490[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ1.36(3H，t，J＝7.0)，1.76-1.78(7H，m)，2.09(2H，m)，4.18(1H，m)，4.36(1H，m)，4.54(2H，t，J＝5.9)，5.54(1H，br.d，J＝5.0)，5.84(1H，br.d，J＝5.0)，6.09(1H，d，J＝4.3)，8.47(1H，s)，12.24(1H，br.s)实施例95′-脱氧-N4-(正戊氧羰基)-5-三氟甲基胞苷FAB-MS(m/z)410[M+H]+1H-NMR(270MHz；CDCl3)δ0.88-0.94(3H，m)，1.32-1.39(4H，m)，1.42(3H，d，J＝6.6)，1.68-1.75(2H，m)，3.09-3.30(1H，m)，3.92(1H，m)，4.15-4.27(5H，m)，5.67(1H，d，J＝3.3)，8.05-8.31(1H，m)，12.6(1H，br.s)实施例105-(3-苄氧苄基)-5′-脱氧-N4-(正戊氧羰基)胞苷FAB-MS(m/z)538[M+H]+1H-NMR(270MHz；CDCl3)δ0.90(3H，t，J＝6.9)，1.04(3H，d，J＝6.6)，1.26-1.39(4H，m)，1.72(2H，m)，3.16(1H，br.s)，3.67(1H，d，J＝16.5)，3.71(1H，m)，3.75(1H，d，J＝16.5)，4.10(2H，m)，4.16(21H，t，J＝6.9)，4.40(1H，br.s)，5.04(2H，s)，5.62(1H，d，J＝3.3)，6.79(1H，d，J＝7.6)，6.84-6.89(2H，m)，6.97(1H，br.s)，7.22-7.43(6H，m)，12.41(1H，br.s)实施例115-氰基-5′-脱氧-N4-(正戊氧羰基)胞苷FAB-MS(m/z)367[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.88(3H，t，J＝6.9)，1.30(4H，s)，1.31(3H，d，J＝6.3)，1.62(2H，m)，3.81(1H，quin.，J＝6.3)，3.91(1H，quin.，J＝6.3)，4.13(2H，t，J＝6.6)，4.39(1H，m)，5.09(1H，d，J＝6.3)，5.31(1H，d，J＝5.3)，5.83(1H，d，J＝4.0)，7.57(1H，s)，11.23(1H，br.s)实施例125′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正丙氧羰基)胞苷FAB-MS(m/z)338[M+H]+，360[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.91(3H，t，J＝7.3)，1.31(3H，d，J＝6.3)，1.63(2H，六重峰，J＝7.3)，3.69(1H，dt，J＝5.9，5.3)，3.91(1H，五重峰，J＝5.9)，4.03(2H，t，J＝6.6)，4.13(1H，dt，J＝5.0，4.3)，4.35(1H，br.s)，5.05(1H，d，J＝5.9)，5.41(1H，d，J＝5.3)，5.66(1H，d，J＝4.0)，8.01(1H，br.s)实施例135′-脱氧-5-乙炔基-N4-(异丙氧羰基)胞苷FAB-MS(m/z)388[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ1.24(6H，d，J＝5.9)，1.31(3H，d，J＝6.6)，3.68(1H，dt，J＝5.9，5.6)，3.90(1H，五重峰，J＝5.9)，4.12(1H，m)，4.30(1H，s)，4.85(1H，m)，5.05(1H，d，J＝5.9)，5.40(1H，d，J＝5.3)，5.66(1H，d，J＝3.6)，8.02(1H，br.s)实施例14N4-(异丁氧羰基)-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷FAB-MS(m/z)352[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.91(6H，d，J＝6.6)，1.30(3H，d，J＝6.3)，1.91(2H，m)，3.68(1H，dt，J＝5.9，5.3)，3.84(2H，d，J＝6.6)，3.89(1H，五重峰，J＝6.3)，4.11(1H，m)，4.30(1H，s)，5.03(1H，d，J＝5.9)，5.38(1H，d，J＝5.3)，5.66(1H，d，J＝4.0)，7.96(1H，s)实施例155′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2-甲基戊氧)羰基]胞苷FAB-MS(m/z)380[M+H]+，402[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.85-0.93(7H，m)，1.31(3H，d，J＝6.3)，1.28-1.37(3H，m)，1.77(1H，m)，3.69(1H，dt，J＝5.9，5.6)，3.88(2H，m)，3.92(1H，m)，4.13(1H，dt，J＝4.9，4.6)，4.37(1H，br.s)，5.06(1H，d，J＝5.9)，5.41(1H，d，J＝5.3)，5.66(1H，d，J＝4.0)，8.02(1H，br.s)，实施例165′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(3-甲基戊氧)羰基]胞苷FAB-MS(m/z)380[M+H]+1H-NMR(270MHz；CDCl3)δ0.86-0.98(6H，m)，1.51-1.80(8H，m)，3.25-3.26(1H，m)，3.53(1H，brs)，3.90-3.95(1H，m)，4.25-4.37(4H，m)，5.33(1H，brs)，5.71(1H，d，J＝4.28)，7.69(1H，br.s)，8.13(1H，br.s)，实施例175′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2-丙基戊氧)羰基]胞苷MALDI-MS(m/z)408.5[M+H]+，430.5[M+Na]+，446[M+K]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.87(6H，br.m)，1.29(11H，br.m)，1.66(1H，br.m)，3.69(1H，br.m)，3.94-4.5(5H，br.m)，5.06(1H，br.m)，5.42(1H，br.m)，5.66(1H，br.m)，7.90(0.5H，br.s)，8.14(0.5H，br.s)，9.53(0.5H，br.s)实施例185′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正辛氧羰基)胞苷FAB-MS(m/z)408[M+H]+，430[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.86(3H，t，J＝5.0)，1.26(10H，m)，1.31(3H，d，J＝6.0)，1.60(2H，m)，3.69(1H，dt，J＝5.9，5.6)，3.90(1H，quin.，J＝6.3)，4.06(2H，t，J＝6.3)，4.13(1H，m)，4.35(1H，br.s)，5.05(1H，d，J＝5.9)，5.41(1H，d，J＝5.3)，5.66(1H，d，J＝4.0)，8.02(1H，br.s)实施例195′-脱氧-N4-[(2-乙基己基)氧羰基]-5-乙炔基胞苷FAB-MS(m/z)408[M+H]+
1H-NMR(270MHz；CDCl3)δ0.88-0.94(6H，m)，1.30-1.41(12H，m)，3.25(1H，d，J＝3.63)，3.53(1H，m)，3.92-3.94(1H，m)，4.15-4.37(4H，m)，5.32(1H，m)，5.70(1H，dt，J＝4.61)，7.86(1H，br.s)，.814(1H，br.s)实施例205′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2-苯乙氧)羰基]胞苷FAB-MS(m/z)400[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ1.31(3H，t，J＝6.3)，2.94(2H，d，J＝6.9)，3.69(1H，dt，J＝5.9，5.6)，3.90(1H，quin.，J＝6.3)，4.14(1H，m)，4.28(2H，t，J＝6.9)，4.31(1H，br.s)，5.05(1H，d，J＝5.9)，5.41(1H，d，J＝4.9)，5.66(1H，d，J＝4.0)，7.27(5H，m)，8.01(1H，br.s)实施例21N4-(环己氧羰基)-5′-脱氧-5-乙炔胞苷FAB-MS(m/z)378[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ1.06-1.48(9H，m)，1.69(2H，m)，1.86(2H，m)，3.65-3.72(1H，m)，3.88-3.93(1H，m)，4.13-4.61(3H，m)，5.06(1H，d，J＝6.27)，5.42(1H，d，J＝4.95)，5.66(1H，d，J＝3.63)，7.9-8.1(1H，m)，9.4(0.5H，br.s)，11.8(0.5H，br.s)实施例22N4-[(环己基甲氧基)羰基]-5′-脱氧-5-乙炔胞苷FAB-MS(m/z)392[M+H]+，414[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.86-1.25(5H，m)，1.31(3H，d，J＝6.3)，1.61-1.72(6H，m)，3.69(1H，dt，J＝5.9，5.6)，3.89(2H，d，J＝6.3)，3.90(1H，m)，4.14(1H，m)，4.36(1H，br.s)，5.05(1H，d，J＝5.9)，5.41(1H，d，J＝5.3)，5.66(1H，d，J＝4.0)，8.02(1H，br.s)实施例235′-脱氧-5-乙炔基-N4-(新戊氧羰基)胞苷FAB-MS(m/z)366[M+H]+，388[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.93(9H，s)，1.30(3H，br.d)，3.67-4.27(5.5H，br.m)，4.47(0.5H，br.s)，5.06(1H，br.m)，5.39(1H，br.m)，5.43(1H，br.m)，7.88(0.5H，br.s)，8.16(0.5H，br.s)，9.56(0.5H，br.s)，11.69(0.5H，br.s)实施例245′-脱氧-N4-[(3，3-二甲基丁氧)羰基]-5-乙炔胞苷FAB-MS(m/z)380[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ1.01(9H，s)，1.39(3H，br.d)，1.63(2H，br.t)，3.77(1H，br.m)，3.98-4.32(4.5H，br.m)，4.56(0.5H，br.s)，5.13(1H，br.m)，5.45-5.51(1H，br.m)，5.73-5.75(1H，br.m)，7.96(0.5H，br.s)，8.23(0.5H，br.s)，9.57(0.5H，br.s)，11.76(0.5H，br.s)实施例255′-脱氧-5-乙炔基-N4-(三癸氧羰基)胞苷MALDI-MS(m/z)478[M+H]+，516[M+K]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.85(3H，d，J＝4.6)，1.24(20H，m)，1.30(3H，d，J＝6.3)，1.60(2H，m)，3.68(1H，dt，J＝5.9，5.6)，3.90(1H，quin.，J＝6.3)，4.05(2H，t，J＝6.6)，4.13(1H，dt，J＝5.0，4.3)，4.34(1H，br.s)，5.05(1H，d，J＝5.9)，5.40(1H，d，J＝5.3)，5.65(1H，d，J＝3.6)，8.00(1H，br.s)实施例26N4-(正丁氧羰基)-5′-脱氧-5-乙炔胞苷FAB-MS(m/z)352[M+H]+，374[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.89(3H，t，J＝7.2)，1.28-1.41(5H，m)，1.53-1.64(2H，m)，3.64-3.71(1H，m)，3.85-3.92(1H，m)，4.03-4.15(3H，m)，4.34(1H，s)，5.04(1H，d，J＝5.9)，5.39(1H，d，J＝5.3)，5.64(1H，d，J＝3.6)，8.06(1H，br.s)实施例275′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正己氧羰基)胞苷FAB-MS(m/z)380[M+H]+，402[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.95(3H，t，J＝6.6)，138-1.40(9H，m)，1.63-1.71(2H，m)，3.74-3.80(1H，m)，3.94-4.03(1H，m)，4.14(2H，t，J＝6.6)，4.19-4.24(1H，m)，4.43(1H，s)，5.13(1H，d，J＝5.9)，5.49(1H，d，J＝5.3)，5.74(1H，d，J＝4.0)，8.09(1H，br.s)实施例285′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正癸氧羰基)胞苷MSFAB-MS(m/z)436[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)d0.85(3H，t，J＝6.4)，1.15-1.42(17H，m)，1.60(2H，m)，3.69(1H，m)，3.90(1H，m)，4.05(2H，t，J＝6.6)，4.13(1H，m)，4.34(1H，br.s)，5.04(1H，d，J＝5.6)，5.40(1H，d，J＝4.9)，5.66(1H，d，J＝3.6)，8.01(1H，br.s)实施例295′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2，6-二甲基环己氧)羰基]胞苷MSFAB-MS(m/z)406[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)d0.83(36H，d，J＝6.3)，1.20-1.50(9H，m)，1.55-1.75(2H，m)，3.68(1H，m)，3.93(1H，m)，4.12-4.20(2H，m)，4.45(0.7H，s)，4.86(0.3H，s)，5.04(1H，d，J＝5.6)，5.43(1H，br.s)，5.67(1H，br.s)，7.96(0.3H，br.s)，8.14(0.7H，br.s)，9.50(0.7H，br.s)，12.00(0.3H，br.s)实施例305′-脱氧-5-乙炔基-N4-(苄氧羰基)胞苷MSFAB-MS(m/z)386[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)d1.30(3H，d，J＝6.3)，3.69(1H，m)，3.89(1H，m)，4.13(1H，m)，4.35(1H，br.s)，5.05(1H，d，J＝5.9)，5.14(2H，s)，5.41(1H，d，J＝5.3)，5.66(1H，d，J＝3.6)，7.31-7.45(5H，m)，8.01(1H，br.s)实施例315′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(1-异丙基-2-甲基丙氧基-羰基)]胞苷MSFAB-MS(m/z)394[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)d0.93(12H，d，J＝6.6)，1.40(3H，d，J＝6.6)，1.97(2H，m)，3.33(1H，d，J＝3.6)，3.55(1H，s)，3.91(1H，m)，4.30(1H，m)，4.36(1H，m)，4.62(1H，m)，5.40(1H，s)，5.72(1H，d，J＝4.3)，7.69(1H，s)，8.11(1H，s)实施例325′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(3-甲基丙氧)羰基]胞苷MSFAB-MS(m/z)416[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)d1.31(3H，d，J＝6.0)，3.70(1H，m)，3.76(3H，S)，3.90(1H，m)，4.14(1H，m)，4.26(0.5H，br.s)，4.44(0.5H，br.s)，5.06(2H，s)，5.16(1H，br.s)，5.41(1H，br.s)，5.66(1H，m)，6.91(1H，d，J＝7.9)，7.00(2H，m)，7.30(1H，dd，J＝7.9，7.9)，7.89(0.5H，br.s)，8.14(0.5H，br.s)，9.72(0.5H，br.s)，11.7(0.5H，br.s)，实施例335′-脱氧-5-乙炔基-N4-(甲氧羰基)胞苷MSFAB-MS(m/z)310[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)d1.30(3H，d，J＝6.3)，3.66(3H，s)，3.70(1H，s)，3.90(1H，quin.，J＝6.3)，4.13(1H，m)，4.34(1H，s)，5.05(1H，d，J＝5.9)，5.40(1H，d，J＝5.3)，5.66(1H，d，J＝4.0)，8.00(1H，br.s)实施例345′-脱氧-5-乙炔基-N4-(乙氧羰基)胞苷MSFAB-MS(m/z)324[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)d1.23(3H，t，J＝6.93)，1.31(3H，d，J＝6.27)，3.69(1H，m)，3.90(1H，m)，4.08-4.14(3H，m)，4.35(1H，br.s)，5.05(1H，d，J＝5.94)，5.40(1H，d，J＝5.27)，5.66(1H，d，J＝3.63)，8.02(1H，br.s)实施例355′-脱氧-N4-(正戊氧羰基)胞苷FAB-MS(m/z)342[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.88(3H，d，J＝6.9)，1.31(4H，m)，1.32(3H，t，J＝6.3)，1.55-1.63(2H，m)，3.63(1H，dt，J＝5.6，5.6)，3.93(1H，quin.，J＝6.3)，3.98(1H，m)，4.01(2H，t，J＝6.9)，5.04(1H，d，J＝5.9)，5.42(1H，d，J＝4.6)，5.73(1H，d，J＝3.0)，7.07(1H，d，J＝7.6)，7.97(1H，d，J＝7.6)，10.66(1H.br.s)实施例365′-脱氧-N4-(正戊氧羰基)-5-乙烯基胞苷MSLC-MS(m/z))368(M+H)+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.88(3H，t，J＝7.1)，1.31(7H，m)，1.61(2H，m)，3.74(1H，m)，3.91(1H，m)，4.06(2H，t，J＝6.4)，4.22(1H，m)，5.08(1H，d，J＝5.3)，5.20(1H，d，J＝11.3)，5.40(1H，d，J＝4.9)，5.69(1H，d，J＝4.0)，5.88(1H，d，J＝17.9)，6.57(1H，dd，J＝11.3，17.9)，7.78(1H，s)，11.88(1H，s)实施例375′-脱氧-N4-(苄氧羰基)-5-乙烯基胞苷MSFAB-MS(m/z)388[M+H]+，410[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ1.30(3H，d，J＝6.3)，3.73(1H，m)，3.92(1H，m)，4.23(1H，m)，5.13(2H，s)，5.04-5.22(2H，m)，5.42(1H，d，J＝5.3)，5.69(1H，d，J＝4.3)，5.69(1H，dd，J＝15.8，2.0)，6.55(1H，dd，J＝11.2，15.8)，7.36-7.42(5H，m)，7.78(1H，s)，11.87(1H，s)实施例38N4-(乙氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷MSFAB-MS(M/Z)326[M+H]+，348[M+NA]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)Δ1.23(3H，T，J＝7.26)，1.32(3H，D，J＝6.27)，3.70-3.76(1H，M)，3.89-3.94(1H，M)，4.11(2H，Q，J＝7.26)，4.22(1H，M)，5.09(1H，D，J＝5.61)，5.18-5.22(1H，M)，5.42(1H，Q，J＝5.61)，5.69(1H，D，J＝3.96)，5.85-5.92(1H，M)，6.57(1H，DD，J＝11.82，17.82)，7.79(1H，S)，11.88(1H，BR.S)实施例395′-脱氧-5-碘-N4-[(2-苯乙氧)羰基]胞苷MSFAB-MS(m/z)502[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ1.30(3H，d，J＝6.3)，2.96(2H，t，J＝7.1)，3.69(1H，m)，3.88(1H，m)，4.17(1H，m)，4.29(2H，t，J＝7.1)，5.07(1H，d，J＝5.9)，5.38(1H，d，J＝5.3)，5.62(1H，d，J＝4.6)，7.19-7.35(5H，m)，8.01(1H，s)，11.70(1H，br.s)实施例405′-脱氧-5-碘-N4-(异丙氧羰基)胞苷MSMALDI-TOF(m/z)4.62.5[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ1.24(6H，d，J＝6.3)，1.30(3Hd，J＝6.3)，3.69(1H，m)，3.88(1H，m)，4.17(1H，m)，4.87(1H，m)，5.07(1H，dJ＝5.6)，5.38(1H，d，J＝5.3)，5.62(1H，d，J＝4.3)，8.02(1H，s)，11.77(1H，br.s)实施例41N4-(环己氧羰基)-5′-脱氧-5-碘胞苷MSLC-MS(m/z)479.9[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ1.23-1.42(6H，m)，1.29(3Hd，J＝6.3)，1.70(2H，m)，1.89(2H，m)，3.69(1H，m)，3.88(1H，m)，4.16(1H，m)，4.60(1H，m)，5.05(1H，d，J＝5.9)，5.37(1H，d，J＝5.3)，5.62(1H，d，J＝4.3)，8.00(1H，s)下列化合物也可用类似于实施例6的方法获得5′-脱氧-N4-(正戊氧羰基)-5-丙-1-炔基胞苷5-丁-1-炔基-5′-脱氧-N4-(正戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-戊-1-炔基-N4-(正戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-己-1-炔基-N4-(正戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-溴-N4-(正戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-(1-氯乙烯)-N4-(正戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-N4-(正戊氧羰基)-5-乙烯基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(异戊氧羰基)胞苷，和5′-脱氧-N4-[(2-乙基丁基)氧羰基]-5-乙炔基胞苷。
实施例422′，3′-二-O-乙酰基-5′脱氧-5-碘胞苷的制备将5-碘胞嘧啶(110g；4.22mmol)和催化量的(NH4)2SO4混悬于甲苯(10ml)和六甲基二硅氮烷(20ml)的溶液中。在110℃下加热该悬浮液18小时使之成澄清溶液。减压浓缩该反应液后，向残留物中加入乙腈(25ml)和5-脱氧-1，2，3-三-O-乙酰基-D-呋喃核糖苷(1.32g；5.06mmol)。然后，将无水的氯化锡(0.58ml；5.06mmol)的硝基甲烷(5ml)在5分钟内滴加到该混合物中。在此加入过程中，通过冰浴保持该混合物低于0℃。于0-5℃下搅拌该混合物2小时后，加入2g NaHCO3，随后滴加水(0.7ml)。加完后，室温下剧烈搅拌该混合物30分钟。过滤该反应混合物以除去可溶性物质，并用CH2Cl2洗涤。合并该滤液和洗涤液，并用水和饱和的NaHCO3水溶液洗涤，然后用Na2SO4干燥并过滤。减压下蒸发该滤液。通过以SiO2为载体的闪式色谱(洗脱剂5％MeOH/CH2Cl2)纯化该粗产物得到无色固体5′-脱氧-2′，3′-二-O-乙酰基-5-碘代胞苷。(1.22g，66％收率)。
FAB-MS(m/z)438[M+H]+，460[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ1.32(3H，d，J＝6.3)，2.04(3H，s)，2.06(3H，s)，4.02(1H，quin.，J＝6.3)，5.14(1H，t，J＝6.6)，5.48(1H，dd，J＝6.6，4.3)，5.69(1H，d，J＝4.0)，6.78(1H，br.s)，8.01(1H，br.s)，8.11(1H，s)实施例432′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘-N4-(正戊氧羰基)胞苷的制备a)将5′-脱氧-2′，3′-二-O-乙酰基-5-碘代胞苷(200mg；0.46mmol)溶于甲醇(5ml)。在0℃下，向此溶液中滴加1mol/LNaOH。搅拌10分钟后，用1N HCl溶液调节该反应混合物到pH7。减压下蒸发该反应混合物。
将咪唑(467mg；6.9mmol)的DMF混合物加入到该残留物。然后，加入叔丁基二甲基氯硅烷(345mg；2.29mmol)到该混合物中。在50℃下搅拌该反应混合物一小时。用二氯甲烷萃取该混合物，用水洗涤，然后用Na2SO4干燥并过滤。减压下蒸发该滤波。通过以SiO2为载体的闪式色谱(洗脱剂70％乙酸乙酯/正己烷到100％乙酸乙酯)纯化该粗产品得到无色固体5′-脱氧-2′，3′-二-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-5-碘代胞苷。(176.5mg，66％收率)。
FAB-MS(m/z)582[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.00(3H，s)，0.02(3H，s)，0.06(3H，s)，0.08(3H，s)，0.82(9H，s)，0.88(9H，s)，1.30(3H，d，J＝6.6)，3.78(1H，dd，J＝4.6，4.3)，3.93(1H，m)，4.33(1H，dd，J＝4.9，4.6)，5.67(1H，d，J＝5.0)，6.67(1H，br.s)，7.87(2H，br.s)b)在室温下的氩气环境中，向搅拌的5′-脱氧-2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-碘代胞苷(116mg，0.200mmol)的CH2Cl2(2ml)的溶液中加入吡啶(84μl，1.00mmol)，N，N-二甲基氨基-吡啶(6mg，0.05mmol)，和氯代甲酸正戊酯。搅拌30分钟后，在二氯甲烷和水中分配该反应混合物并分离该有机相，而水相则用CH2Cl2(15ml×4)萃取。用水和盐水洗涤该合并的有机相，Na2SO4干燥并过滤。减压下蒸发该滤液。通过以SiO2为载体的闪式色谱(洗脱剂20％乙酸乙酯/正己烷)纯化该粗产物得到无色多孔固体。2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘-N4-(正戊氧羰基)胞苷。(132.4mg，91％收率)。
FAB-MS(m/z)696[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ0.00(3H，s)，0.03(3H，s)，0.05(3H，s)，0.07(3H，s)，0.77(9H，s)，0.81(9H，s)，1.20-1.27(10H，m)，1.46-1.55(2H，m)，3.74(1H，dd，J＝4.6，4.6)，3.89-4.01(3H，m)，4.37(1H，dd，J＝4.5，4.6)，5.55(1H，d，J＝4.6)，7.92(1H，s)，11.70(1H，br.s)实施例442′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-[(三甲基甲硅烷基)-乙炔基]-N4-(正戊氧羰基)胞苷的制备在室温下的黑暗的氩气环境中，向2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5′-脱氧-5-碘-N4-(正戊氧羰基)胞苷(130mg，0.18mmol)的CH2Cl2(2ml)和EtsN(2ml)的溶液中加入CnI(10.7mg，0.1056mmol)，Pd(pph3)2Cl2(2.6mg，0.0036mmol)，和三甲基甲硅烷基乙炔(58.6μl，0.04mmol)并搅拌2小时。减压浓缩该反应混合物并将残留物溶于乙酸乙酯(25ml×3)，用2％EDTAo2Na(10ml×2)，水和盐水洗涤，Na2SO4干燥并过滤。减压下蒸发该滤液。用以SiO2为载体的闪式色谱(洗脱剂10％乙酸乙酯/正己烷)纯化该粗产物得到无色多孔的固体2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-脱氧-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-N4-(正戊氧羰基)胞苷。(30.2mg，26％收率)FAB-MS(m/z)666[M+H]+，688[M+Na]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ-0.18(3H，s)，-0.16(3H，s)，-0.14(3H，s)，-0.12(3H，s)，0.00(9H，s)，0.64(9H，s)，0.65(3H，s)，0.67(9H，s)，1.01(4H，m)，1.14(3H，d，J＝6.6)，1.40(2H，m)，3.58(1H，t，J＝4.9)，3.79(1H，m)，3.87(2H，m)，4.20(1H，m)，5.43(1H，d，J＝3.6)，7.88(1H，br.s)实施例45
5′-脱氧-2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-氰基胞苷室温下加入NaCN(34.3mg，0.70mmol)到搅拌的5′-脱氧-2′，3′-双-(O-叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-5-碘代胞苷(153mg，0.263mmol)的DMF(5ml)溶液中。搅拌一天后，减压下浓缩该反应混合物。将粗产物溶于乙酸乙酯，然后，用水和盐水洗涤。用Na2SO4干燥该抽提液并过滤。减压下浓缩该过滤液。通过以SiO2为载体的闪式色谱(洗脱剂乙酸乙酯)纯化该粗产物得到浅黄色的固体5′-脱氧-2′，3′-双-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-氰基胞苷。(71.1mg，56％收率)FAB-MS(m/z)481[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)δ-0.04(3H，s)，0.00(3H，s)，0.02(3H，s)，0.76(9H，s)，0.82(9H，s)，1.21(3H，d，J＝6.3)，3.81(1H，m)，4.05(1H，t，J＝5.0)，4.71(1H，t，J＝5.0)，5.65(1H，d，J＝5.3)，6.41(1H，s)，7.69(1H，br.s)，7.85(1H，br.s)实施例462′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷在室温下的氩气环境下，向2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-碘代胞苷，Ro 09-4620，(1.6g，3.66mmol)和10ml DMF溶液中加入Pd2(dba)3(67mg，0.073mmol)和三-2-呋喃膦(85mg，0.366mmol)和三-正-丁基(乙烯基)锡烷(2.1ml，7.318mmol)。搅拌19小时后，加入三-正-丁基(乙烯基)锡烷(2.1ml，7.3(8mmol))到该反应混合物中，然后，搅拌下加热该反应混合物至40℃，24小时。真空除去溶剂，并在硅胶柱(洗脱剂乙酸乙酯-CH2Cl2∶乙醇＝95∶5)上纯化该残留物得到无色固体2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷(1.13g，92％)MSFAB-MS(m/z)338[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)d1.33(3H，d，J＝6.3)，2.05(3H，s)，2.06(3H，s)，4.05(1H，quin.，J＝6.3)，5.14(1H，d，J＝10.8)，5.16(1H，t，J＝6.6)，5.54(1H，d，J＝17.2)，5.53(1H，dd，J＝6.9，5.9)，5.73(1H，d，J＝4.3)，6.55(1H，dd，J＝17.2，10.8)，7.20(1H，br.s)，7.57(1H，br.s)，7.88(1H，s)实施例475′-脱氧-5-乙烯基胞苷的制备在室温下，向2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷(111mg，3.29mmol)的5ml甲醇溶液中加入1N NaOH(0.32ml，0.32mmol)。搅拌1小时后，加入1N HCl(约0.3ml)到该反应混合物中，然后，减压下浓缩该反应混合物。通过固相抽提(MEGA Bond Elute LRC，洗脱剂H2O-H2O∶MeOH＝1∶1，分级梯度)纯化该残留物得到无色固体5′-脱氧-5-乙烯基胞苷(82mg，98％)MSLC-MS(m/z)253.9[M+H]+1H-NMR(270MHz；DMSO-d6)d1.29(3H，d，J＝6.3)，3.68(1H，m)，3.86(1H，m)，4.08(1H，m)，4.97(1H，d，J＝5.9)，5.12(1H，d，J＝11.1)，5.28(1H，d，J＝5.3)，5.50(1H，d，J＝17.2)，5.70(1H，d，J＝3.6)，6.58(1H，dd，J＝11.1，17.2)，7.10(1H，br.s)，7.42(1H，br.s)，7.64(1H，s)下列实施例说明含有本发明提供的化合物的药用制剂。
实施例A用本身已知的方法制备每个含下列成分的互锁式明胶胶囊5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)-胞苷 40mg乳糖 70mg玉米淀粉 25mg硬脂酸镁 1mg交联聚乙烯吡咯烷酮(Crospovidone) 4mg140mg实施例B用本身已知的方法制备每个含下列成分的互锁式胶囊5′-脱氧-5-氟-N4-(正戊氧羰基)-胞苷 100mg5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)-胞苷 10mg乳糖 70mg玉米淀粉 25mg硬脂酸镁 1mg交联聚乙烯吡咯烷酮4mg210mg实施例C用本身已知的方法制备每个含下列成分的片剂5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)-胞苷 40mg乳糖 70mg硬脂酸镁 3mg交联聚乙烯吡咯烷酮 7mg聚乙烯吡咯烷酮 10mg130mg若需要，用羟丙基甲基纤维素、滑石和着色剂涂膜该药片。
实施例D用本身已知的方法制备每个含下列成分的片剂5′-脱氧-5-氟-N4-(正戊氧羰基)胞苷 300mg5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)胞苷 20mg乳糖 70mg硬脂酸镁 3mg交联聚乙烯吡咯烷酮 7mg聚乙烯吡咯烷酮 10mg186mg若需要，用羟丙基甲基纤维素、滑石和着色剂涂膜该药片。
权利要求
1.通式(I)所示的化合物
其中的R1是氢原子或是易于在生理条件下水解的基团；R2是氢原子，或-CO-OR4基，其中的R4是由1-15个碳原子的饱和的或不饱和的、直链或支链的烃基，或通式-(CH2)n-Y的基团，其中的Y是环己基或苯基，n是从0到4的整数；R3是氢原子、溴基、碘基、氰基、可用卤素原子取代的C1-4烷基、可用卤素原子、C1-4烷基、环烷基、芳烷基、或可带有一个或多个杂原子的芳环取代的乙烯基或乙炔基、或是可被取代的芳烷基；但须R2和R3不能同时为氢原子。
2.权利要求1的化合物，其中的R3是氢原子，溴基，碘基，三氟甲基，乙基，丙基，氰基，乙烯基，1-氯乙烯基，乙炔基，丙-1-炔基，丁-1-炔基，戊-1-炔基，己-1-炔基或，溴乙炔基。
3.权利要求1或2的化合物，选自5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-5-丙-1-炔胞苷，5′-丁-1-炔-5′-脱氧胞苷，5′-脱氧-5-戊-1-炔基胞苷，5′-脱氧-5-己-1-炔基胞苷，5′-脱氧-5-碘代胞苷，5′-溴基-5′-脱氧胞苷，5-(1-氯乙烯基)-5′-脱氧胞苷，5′-脱氧-5-乙烯胞苷，5′-脱氧-5-三氟甲基胞苷，5-(3-苄氧苄基)-5′-脱氧胞苷，5-氰基-5′-脱氧胞苷，5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)-5-丙-1-炔基胞苷，5-丁-1-炔基-5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-戊-1-炔基-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-己-1-炔基-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-碘基-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5-溴基-5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5-(1-氯乙烯)-5′-脱氧-N4-(正戊氧羰基)胞苷，N4-(乙氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，5′-脱氧-N4-(正-丙氧羰基)-5-乙烯基胞苷，N4-(正-丁氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)-5-乙烯基胞苷，N4-(苄氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)-5-三氟甲基胞苷，5-(3-苄氧苄基)-5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5-氰基-5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(甲氧羰基)胞苷，5′-脱氧-N4-(乙氧羰基)-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正-丙氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(异-丙氧羰基)胞苷，N4-(正-丁氧羰基)-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(异丁氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2-丙基戊氧)羰基]胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(异戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2-甲基戊氧)羰基]胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(3-甲基戊氧)羰基]胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正-己氧羰基)胞苷，5′-脱氧-N4-[(2-乙基丁基)氧羰基]-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-N4-[(2-乙基己基)氧羰基]-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2-苯乙氧基)羰基]胞苷，N4-(环已氧羰基)-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，N4-[(环己基甲氧)羰基]-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(新戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-N4-[(3，3-二甲基丁氧)羰基]-5-乙炔基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正-丙氧羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正-戊氧羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-乙炔基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-N4-(乙氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-N4-(正-丙氧羰基)-5-乙烯基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-N4-(正-丁氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-N4-(正-戊氧羰基)-5-乙烯基胞苷，以及2′，3′-二-O-乙酰基-N4-(苄氧羰基)-5′-脱氧-5-乙烯基胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(正癸氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(2，6-二甲基环己氧)-羰基]胞苷，5′-脱氧-5-乙炔基-N4-(苄氧羰基)胞苷5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(1-异丙基-2-甲基-丙氧基)]胞苷5′-脱氧-5-乙炔基-N4-[(3-甲氧苄氧)-羰基]胞苷
4.权利要求1，2或3的化合物，其用于医疗。
5.权利要求1，2或3的化合物，其用于治疗肿瘤。
6.一种药用组合物，其含有权利要求1，2或3的化合物作为活性成分。
7.一种治疗肿瘤的药用组合物，其含有权利要求1，2或3的化合物以及一种活性成分。
8.一种药用组合物，其含有权利要求1，2或3的化合物以及5-氟尿嘧啶或其衍生物。
9.权利要求8的组合物，其中的5-氟尿嘧啶或其衍生物选自5-氟-1-(2-四氢呋喃)尿嘧啶，1-(正-己氧羰基)-5-氟尿嘧啶，5′-脱氧-5-氟尿苷5′-脱氧-5-氟尿苷-N4-(正丙氧羰基)胞苷，N4-(正丁氧羰基)-5′-脱氧-5-氟胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-(正戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-(异戊氧羰基)胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-(正己氧羰基)胞苷，5′-脱氧-N4-[(2-乙基丁基)氧羰基]-5-氟胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-[(2-苯基乙氧)羰基]胞苷，N4-[(环己基甲氧基)羰基]-5′-脱氧-5-氟胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-(新戊氧羰基)-胞苷，5′-脱氧-N4-[(3，3-二甲基丁氧基)羰基]-5-氟胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-(3，5-二甲基苯甲酰基)胞苷，5′-脱氧-5-氟-N4-(3，5-二氟苯甲酰基)胞苷，以及2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脱氧-5-氟-N4-(正戊氧羰基)胞苷。
10.权利要求8的药用组合物，其用于治疗肿瘤。
11.应用权利要求1，2或3的化合物来制备治疗肿瘤的药剂。
12.一种试剂盒，其包括一种含权利要求1，2或3的化合物作为活性成分的药用组合物以及一种含5-氟尿嘧啶或其衍生物作为活性成分的药用组合物。
13.一种制备通式(I)所示的化合物的方法，
其中的R1是氢原子或易于在生理条件下水解的基团；R2是氢原子，或-CO-OR4基，其中的R4是由1-15个碳原子的饱和或不饱和的、直链或支链的烃基，或通式-(CH2)n-Y的基团，其中的Y是环己基或苯基，n是从0到4的整数；R3是氢原子、溴基、碘基、氰基、可用卤素原子取代的C1-4烷基、可用卤素原子、C1-4烷基、环烷基、芳烷基、或可带有一个或多个杂原子的芳环取代的乙烯基或乙炔基、或是可被取代的芳烷基；但须R2和R3不能同时为氢原子，其包括(A)式(I)所示的化合物，其中的R1，R2和R3同上文所定义，可通过式(II)所示的化合物
其中的P1是羟基保护基，而R3同上文中定义，与通式(III)所示的化合物R4OCOX (III)其中的R4同上文所定义；X是氯基或溴基，在酸性中和剂的存在下反应，随后，若需要，通过除去保护基而制备，(B)式(I)所示的化合物，其中R1和R2同上文中所定义而R3是可用卤原子、C1-4烷基、环烷基、芳烷基、或可带有一个或多个杂原子的芳环取代的乙炔基或乙烯基，可通过式(IV)所示的化合物
其中的P1和R2同上文中所定义与乙炔或乙烯衍生物在钯催化剂的存在下反应，随后，若需要，通过除去保护基而制备，(C)式(I)所示的化合物，其中的R1和R2同上文中所述而R3是氰基，可通过式(IV)所示的化合物
其中的P1和R2同上文中所定义与碱金属氰化物反应，随后，若需要，通过除去保护基而制备。(D)式(I)所示的化合物，其中的R1和R3同上文中所定义而R2是氢原子，可通式(V)所示的化合物
其中的P1和R3同上文中所定义与磷酰氯在酸中和剂存在下反应，随后，用氨处理，随后，若需要，除去保护基而制备，(E)式(I)所示的化合物，其中的R1，R2和R3同上文中所定义，可通过式(VI)所示的化合物
其中的R1和R3同上文中所定义，与式(VII)所示的化合物
其中的P1同上文中所定义，在路易斯酸催化剂存在偶联，随后，若需要，通过除去保护基而制备，(F)式(I)所示的化合物，其中的R3是可用卤素原子，C1-4烷基，环烷基，芳烷基，或可带有一个或多个杂原子的芳环取代的乙烯基，R1和R2同上文中所定义，可用Lindlar催化剂对式(VIII)所示的化合物
其中的P1是羟基保护基，R3是可用卤素原子，C1-4烷基，环烷基，芳烷基，或可带有一个或多个杂原子的芳环取代的乙炔基，而R2同上文中所定义，催化加氢，随后，若需要，除去保护基而制备。
14.权利要求1的化合物，随时通过权利要求13的方法而制备。
15.基本上如前述的，尤其是参照实施例的发明。
全文摘要
用于医疗,尤其是肿瘤治疗的通式Ⅰ所示的新的5′－脱氧—胞苷衍生物,其中的R
文档编号A01N43/04GK1201037SQ9810872
公开日1998年12月9日 申请日期1998年6月1日 优先权日1997年6月2日
发明者服部一夫, 石川彻, 石冢秀夫, 河内靖典, 及川信宏, 新间信夫, 须田瞳 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司