一种大花序桉的组培快繁方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及按树栽培技术领域，特别是设及一种大花序按的组培快繁方法。
【背景技术】
[0002] 按树原产澳大利亚，是桃金娘科（Mytaceae)按树属（Eucalyptus)、杯果木属 (Ango地ora)、伞房属(Corymbia)3个属树种的统称。共有1039个种、亚种和变种，大花序按 属于按树的一个种。因为天然分布在澳大利亚昆±兰州，故又名昆±兰按。
[0003] 按树由于生长速度快，用途广泛，经济效益高，目前已经成为世界公认的Ξ大人工 林树种之一。按树在我国的引种栽培和发展非常迅速，对中国林业的发展发挥了突出的作 用。到2013年，中国按树人工林面积达440万公顷，占我国森林面积的2.2%，但提供了占全国 木材总量25%的木材。为缓解我国木材资源短缺，解决木材供需矛盾，维护我国生态安全发 挥了十分重要作用。
[0004] 但目前我国按树木材的利用方式，主要是造纸和纤维板，而作为高档实木材被忽 视。随着社会经济的发展，对木材的需求越来越大。据有关资料显示，2007年国内林木产品 折算的木材消费总量约3.71亿立方米，但国内可供给量只有2.02亿立方米，实际消费缺口 超过1亿立方米。而且木材消费呈刚性增长，预计到2020年，我国木材消费总量达到4.57-4.77亿立方米，木材供应缺口将长期保持在1-1.5亿立方米。木材供求矛盾十分突出，每年 有40%W上木材需要从国外进口，因此，发展替代天然林实木材的按树速生丰产林就显得十 分迫切。
[000引大花序按是一种顶端优势强，自然整枝良好，干形通直的常绿高大乔木，树高可达 35-45m，其木材呈黄褐色，沉重坚固，非常耐久，是很好的银材，有按树中的"红木"之称。该 树种耐干旱贫瘡，抗病虫能力强，后期生长优势非常明显，是商品经营大径材的优良树种。
[0006] 我国引种大花序按始于1972年，在广东、广西、海南、福建、四川都做了引种试验。 特别在1982-1989年间，通过中澳技术合作一一东口按树示范林项目实施，东口林场引种了 大花序按11个种源，建立了种源试验。到现在，树高达30-35m，平均胸径达到30-42畑1，树干 通直，生长良好，适合东口地区种植。
[0007] 大花序按生长迅速，后期生长优势明显，轮伐周期比尾叶按、尾巨按稍长，在12-15 年，在实施国家木材战略储备林建设中，具有极重要的地位。同时也为解决速生按的大量木 材生产和保障生态安全的矛盾创造了条件。因为尾巨按等速丰林在快速发展中，由于单纯 追求经济效益的超短轮伐期利用，结果出现造林中树种单一，全部为短周期工业用材林，林 分单纯，全为纯林，林地生物多样性不够丰富，产品用途单一，全部用于纸浆材和人造板，实 木利用的树种很少，存在森林生态功能不够强，抵抗病虫害能力弱等问题。发展大花序按正 好弥补了尾巨按等树种的不足。
[0008] 大花序按的优越性非常明确，可是，因为现在的存量很少，而且开花结实量不多， 要扩大种植，种子要依靠进口，价格昂贵，种子播种后发芽率低，远低于尾叶按，加上实生苗 造林后遗传分化明显，进而制约了规模推广种植。同时，采用无性繁殖方式获得苗木，大花 序按是一种难生根树种，杆插繁殖生根困难，生根率几乎为零，因此，种苗问题已成为发展 大花序按的突出瓶颈。
[0009] 为打破运一制约瓶颈，利用组培快繁方法是最有效的途径。
[0010] 我国在20世纪70年代开展按树组培研究，至今，在尾叶按、巨按、赤按、园角按及其 杂交子代的组培繁育上，取得了长足的进步，已大规模应用于工厂化生产苗木造林。对于大 花序按组培育苗，有不少学者进行了尝试，取得一定进展，但由于各学者的研究结果不同， 许多问题都有待进一步研究和解决。最关键的是，至今未见到有建立大花序按组培无性系 林分的报道。
[0011] 广西国有东口林场立足于推广引种驯化成功的大花序按种源，选取优良家系的优 良单株，重视外植体的选择，直接用优树伐倒后的萌芽条作为外植体，由芽器官离体诱导无 菌芽的途径获得无菌快繁体系，不经过愈伤组织途径，没有经过脱分化过程。运样的组培苗 造林后能够保持母树的优良性状，造林后林相整齐，生长量高，是目前最佳的林木组培方 式，目前，大花序按组培育苗技术取得突破性进展，建立了大田种植的组培无性系苗木。
【发明内容】
[0012] 本发明的目的在于提供一种采用引种驯化后适合本地生长的大花序按优良种源/ 家系的优良单株，伐倒后萌芽条作外殖体，不经过愈伤组织途径，直接由芽器官离体诱导无 菌芽进行组织培养，快速获得大量的再生植株的大花序按的组培快繁方法，使用该方法得 到的无菌繁殖体系，生长稳定，重复性良好，可反复多代规模扩繁，用无菌芽作生根培养，总 的生根率达到72.8%W上，已具备推广价值，生根小苗移植后成活率高达78%，苗木生长正 常，再生植株大田种植后，生长健壮，能保持优树的优良遗传性状。
[0013] 为实现本发明的目的，采取如下技术方案： 一种大花序按的组培快繁方法，是采用大花序按优良家系的优良单株，对其进行伐粧 萌芽，利用萌芽作为外殖体，通过带芽茎段离体诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代增殖培 养、生根培养和生根苗移栽，获得再生植株； 该方法的具体步骤如下： (1) 在澳大利亚引种的家系试验林中，经测试对比，选择出适合本地生长的大花序按优 良家系； (2) 在大花序按优良家系中，通过测量胸径、树高、蓄积、连年生长量、木材材性W及干 形指标，综合对比后选择出优良单株； (3) 将优良单株在离地面15-20cm高度处伐倒，促萌芽，当萌芽条长到12-18cm时，剪取 萌芽条，用水浸泡基部带回实验室备用； (4) 萌芽条修剪去叶片、叶柄，用自来水流水冲洗3-5min，再用饱和洗衣粉溶液洗涂 lOmin，用纯净水清洗干净； 巧)在超净工作台上，将萌芽条剪去嫩梢段和基部老化部分，留半木质化茎段，切成长 2-3cm，保留有1-2个潜伏芽的切段做消毒材料； (6)将待消毒材料置于高压灭菌处理过的无菌瓶中，用75%酒精溶液浸泡15-17S，无菌 水清洗3-5次，洗去残留酒精，再用0. l%Hg化2溶液浸泡并适当揽拌，7-9min后倒去Hg化2溶液 至专用收集罐中，用无菌水清洗材料5-6次； (7) 用綴子夹取清洗好的茎段，放置在灭菌的接种碟上，用灭菌过的滤纸吸干表面水 分，切去叶柄和茎段的两端，接种到无菌芽诱导培养基上，全暗培养8-12天后，在溫度26±2 °C，光照12h/d，光照强度1500-2000 lux条件下培养15-25天； (8) 外殖体萌芽后，侧芽和不定芽不断生长，萌芽15-20天后，选取没有污染的无菌芽， 切割后转入继代增殖培养基上，在溫度26±2°C，光照强度2000-25001UX条件下，培养18-23 天，W促进丛芽增殖和生长，在增殖培养基上反复继代培养，无菌芽苗数量不断增多； (9) 当继代培养的芽苗长到2-3cm，并有3-4对叶片时，切取芽苗转入生根培养基上培 养，溫度28-30°C，光照强度1200-15001UX，培养6-10天，当切口冒出短根或根点，出根率达 到30-40%时，移瓶至溫度28-35°C，光照强度3000-50001UX的自然光下培养15-20天； (10) 生根齐全，苗高3-4cm的生根瓶苗，洗去琼脂，移栽至用KMn化消毒过的黄屯、±和赔 石做基质的营养杯或羟基质育苗杯上，黄屯、上和赔石的比例为5:1，培养60-80天，得到再生 植株； (11) 将具有发育不完全根，苗高1.5-2.0cm的生根瓶苗，洗去琼脂，移栽到用KMn化消毒 过的黄屯、±+赔石+河沙按照4:1:1做基质的营养杯，移栽前用481'1生根