一种大花序桉的组培快繁方法_3

文档序号:9694644阅读:来源:国知局
殊培养25天,将长出真根的苗和未长出真根的苗分开管理,再培养80天 后,长出真根的苗得到再生植株。
[0029] 所述的优良家系是指,从澳大利亚引种的种源/家系,通过栽培试验、测定分析,选 择出适合本地生长、生长量高、抗逆性强,已成功驯化的家系/种群。所述的优良单株是指, 经试验测定分析后,确定的优良家系中树高、胸径、蓄积量等生长指标突出,木材材性、干 形、抗病虫害能力等指标优越的优势木个体。
[0030] 上述步骤(11)中的发育不完全根是指,从苗茎切口长出的根状突起,长0.5-1.0cm,表面光滑,没有根毛,又称假根的根状组织;特殊培养是指,将发育不完全根的苗移 栽后弱光培养,光照强度lOOOLux,用微型喷头喷淋雾状水保湿,始终保持叶面湿润,栽培基 质保持不干不溃状态,不积水,小苗生长稳定后,叶面喷施低浓度大量元素和微量元素肥。 [0031 ] 实施例2 一种大花序按的组培快繁方法,其步骤如下: (1) 在澳大利亚引种的家系试验林中,经测试对比,选择出适合本地生长的大花序按优 良家系; (2) 在大花序按优良家系中,通过测量胸径、树高、蓄积、连年生长量、木材材性W及干 形指标,综合对比后选择出优良单株; (3) 将优良单株在离地面18cm高度处伐倒,促萌芽,当萌芽条长到15cm时,剪取萌芽条, 用水浸泡基部带回实验室备用; (4) 萌芽条修剪去叶片、叶柄,用自来水流水冲洗4min,再用饱和洗衣粉溶液洗涂 lOmin,用纯净水清洗干净; 巧)在超净工作台上,将萌芽条剪去嫩梢段和基部老化部分,留半木质化茎段,切成长 2-3cm,保留有1-2个潜伏芽的切段做消毒材料; (6) 将待消毒材料置于高压灭菌处理过的无菌瓶中,用75%酒精溶液浸泡16s,无菌水清 洗4次,洗去残留酒精,再用0.1%HgCL2溶液浸泡并适当揽拌,8min后倒去化化2溶液至专用收 集罐中,用无菌水清洗材料6次; (7) 用綴子夹取清洗好的茎段,放置在灭菌的接种碟上,用灭菌过的滤纸吸干表面水 分,切去叶柄和茎段的两端,接种到无菌芽诱导培养基上,无菌芽诱导培养基为:改良MS+N 6 苄基腺嚷岭(6-BA)1.0mg/L+糞乙酸0.3mg/L+维生素 C 2.0 mg/L+核黄素7.0 mg/L+薦糖 30g/L+琼脂3.75g/L,抑5.8-6.0;全暗培养10天后,在溫度26±2°C,光照12h/d,光照强度 1500-20001UX条件下培养20天; (8) 外殖体萌芽后,侧芽和不定芽不断生长,萌芽18天后,选取没有污染的无菌芽,切割 后转入继代增殖培养基上,继代增值培养基为:改良MS+N 6苄基腺嚷岭(6-BA)0.4mg/L+糞乙 酸0.15mg/L+核黄素7.0mg/L+维生素 C2.0mg/L+薦糖30g/L+琼脂3.75g/L,pH5.8-6.0;在 溫度26 ± 2°C,光照强度2000-25001UX条件下,培养20天,W促进丛芽增殖和生长,在增殖培 养基上反复继代培养,无菌芽苗数量不断增多; (9) 当继代培养的芽苗长到2-3cm,并有3-4对叶片时,切取芽苗转入生根培养基上培 养,生根培养基为:1/2改良MS+ABT10.6mg/L+IBA0. lmg/L+薦糖15g/L+琼脂3.9g/L,pH 5.8-6.2;溫度28-30°C,光照强度1200-15001UX,培养6天,当切口冒出短根或根点,出根率达到 30-40%时,移瓶至溫度28-35°C,光照强度3000-50001UX的自然光下培养20天; (10) 将生根齐全,苗高3-4cm的生根瓶苗,洗去琼脂,移栽至用KMn化消毒过的黄屯、±和 赔石做基质的营养杯或羟基质育苗杯上,黄屯、上和赔石的比例为5:1,培养70天,得到再生 植株; (11) 将具有发育不完全根、苗高1.5-2.0cm的生根瓶苗,洗去琼脂,移栽到用KMn化消毒 过的黄屯、赔石+河沙按照4:1:1的比例配置的营养杯或羟基质育苗杯上,小苗移栽前用 ABT1生根粉20化pm水溶液浸泡20min,移栽后特殊培养27d,将长出真根的苗和未长出真根 的苗分开管理,再培养70天后,长出真根的苗得到再生植株。
[003引所述的优良家系是指,从澳大利亚引种的种源/家系,通过栽培试验、ii定分析,选 择出适合本地生长、生长量高、抗逆性强,已成功驯化的家系/种群。所述的优良单株是指, 经试验测定分析后,确定的优良家系中树高、胸径、蓄积量等生长指标突出,木材材性、干 形、抗病虫害能力等指标优越的优势木个体。
[0033] 上述步骤(11 )中的发育不完全根是指,从苗茎切口长出的根状突起,长0.5-1.0cm,表面光滑,没有根毛,又称假根的根状组织;特殊培养是指,将发育不完全根的苗移 栽后弱光培养,光照强度lOOOLux,用微型喷头喷淋雾状水保湿,始终保持叶面湿润,栽培基 质保持不干不溃状态,不积水,小苗生长稳定后,叶面喷施低浓度大量元素和微量元素肥。
[0034] 实施例3 一种大花序按的组培快繁方法,其步骤如下: (1) 在澳大利亚引种的家系试验林中,经测试对比,选择出适合本地生长的大花序按优 良家系; (2) 在大花序按优良家系中,通过测量胸径、树高、蓄积、连年生长量、木材材性W及干 形指标,综合对比后选择出优良单株; (3) 将优良单株在离地面20cm高度处伐倒,促萌芽,当萌芽条长到18cm时,剪取萌芽条, 用水浸泡基部带回实验室备用; (4 )萌芽条修剪去叶片、叶柄,用自来水流水冲洗5 m i η,再用饱和洗衣粉溶液洗涂 lOmin,用纯净水清洗干净; 巧)在超净工作台上,将萌芽条剪去嫩梢段和基部老化部分,留半木质化茎段,切成长 2-3cm,保留有1-2个潜伏芽的切段做消毒材料; (6) 将待消毒材料置于高压灭菌处理过的无菌瓶中,用75%酒精溶液浸泡17s,无菌水清 洗5次,洗去残留酒精,再用0.1%HgCL2溶液浸泡并适当揽拌,9min后倒去化化2溶液至专用收 集罐中,用无菌水清洗材料6次; (7) 用綴子夹取清洗好的茎段,放置在灭菌的接种碟上,用灭菌过的滤纸吸干表面水 分,切去叶柄和茎段的两端,接种到无菌芽诱导培养基上,无菌芽诱导培养基为:改良MS+N 6 苄基腺嚷岭(6-BA)1.0mg/L+糞乙酸0.4mg/L+维生素 C 2.0 mg/L+核黄素7.0 mg/L+薦糖 30g/L+琼脂3.75g/L,抑5.8-6.0;全暗培养12天后,在溫度26±2°C,光照12h/d,光照强度 1500-20001UX条件下培养15天; (8) 外殖体萌芽后,侧芽和不定芽不断生长,萌芽20天后,选取没有污染的无菌芽,切割 后转入继代增殖培养基上,继代增值培养基为:改良MS+N 6苄基腺嚷岭(6-BA) 0.5mg/L+糞 乙酸0.15mg/L+核黄素7.0 mg/L+维生素 C 2.0mg/L+薦糖30g/L+琼脂3.75g/L,pH 5.8-6.0; 在溫度26±2°C,光照强度2000-25001UX条件下,培养18天,W促进丛芽增殖和生长,在增殖 培养基上反复继代培养,无菌芽苗数量不断增多; (9) 当继代培养的芽苗长到2-3cm,并有3-4对叶片时,切取芽苗转入生根培养基上培 养,生根培养基为:1/2改良MS+ABT10.6mg/L+IBA0. lmg/L+薦糖15g/L+琼脂3.9g/L,pH 5.8-6.2;溫度28-30°C,光照强度1200-15001UX,培养10天,当切口冒出短根或根点,出根率达到 30-40%时,移瓶至溫度28-35°C,光照强度3000-50001UX的自然光下培养15天; (10) 生根齐全,苗高3-4cm的生根瓶苗,洗去琼脂,移栽至用KMn化消毒过的黄屯、±和赔 石做基质的营养杯或羟基质育苗杯上,黄屯、上和赔石的比例为5:1,培养80天,得到再生植
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