pH均为5.0，其成分分别为:① WPM+TDZ 0.2mg/L+NAA0.1 mg/L+薦糖30g/L+琼 月旨8g/L、②WPM+TDZ 0.2mg/L+NAA0.5mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、③WPM+TDZ 0.2mg/L+ NAAl. Omg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、④WPM+TDZ 0.5mg/L+NAA0.1 mg/L+薦糖30g/L+琼脂Sg/ L、⑤WPM+TDZO. 5mg/L+NAA0.5mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、⑥WPM+TDZ 0.5mg/L+NAAl. Omg/L +薦糖30g/L+琼脂8g/L、⑦WPM+TDZ 1.0 mg/L+NAAO. Img/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、⑧WPM+TDZ 1.0 mg/L+NAAO. 5mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、⑨WPM+TDZ 1.0 mg/L+NAAl. Omg/L+薦糖30g/L+ 琼脂8g/L。控制培养条件为:溫度为25°C，光照时间为12h/d，光照强度为2000LX。每种增殖 培养基接种10瓶，每瓶接种4块不定芽团。培养40天后，观察结果如表2。由表2可W得出，不 定芽最佳的增殖培养基成分为WPM巧DZ 0.5mg/L+NAA0.5mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L，抑= 5.Oo
[0042]表2不同激素浓度下不定芽增值培养情况
[0044] 注：V'表示增殖后丛生芽团的大小，V'越多表示增殖后丛生芽团越大，即增殖倍 数越高。
[0045] 5、丛生芽伸长培养基
[0046] 将增殖后的不定芽切割成IcmX Icm大小的不定芽团，分不同组转接在不同丛生芽 伸长培养基上，培养基抑均为5.0，其成分分别为:①WPM+TDZ 0. lmg/L+GA32mg/L+薦糖30g/ L+琼脂8g/L、②WPM巧DZ 0.5mg/L+GA32mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、③WPM+TDZ I .Omg/L+ GA32mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、④WPM+ZT 0. lmg/L+GA32mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、⑤WPM +ZTO. 5mg/L+GA32mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、⑥WPM+ZT 1.0mg/L+GA32mg/L+薦糖30g/L+琼 月旨8g/L、⑦WPM+KT 0. lmg/L+GA32mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、⑧WPM+KT 0.5mg/L+GA32mg/L+ 薦糖30g/L+琼脂8g/L、⑨WPM+KT1.0mg/L+GA32mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L。控制培养条件 为:溫度为25°C，光照时间为12h/d，光照强度为2000LX。每种丛生芽伸长培养基接种10瓶， 每瓶培养基中接种4块丛生芽团。培养30天后，观察结果如表3。由表3可知，WPM+ZT 0.5mg/L +GA32.0mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L的培养基较适宜对丛生芽进行伸长培养，在此培养基 上，观察到培养30d后丛生芽苗生长健壮，单株丛生芽可W伸长到l-5cm不等，具体细节图如 图4。
[0047] 表3不同激素浓度配比下丛生芽的伸长和壮苗生长情况 [004引
[0049] 6、壮苗生根培养
[0050] 将长度>2cm的伸长的丛生芽剪成单株，分不同组转接在不同壮苗生根培养基上， 培养基pH均为5.0,其成分分别为：①WPM+IAAO.lmg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、②WPM+ IAAO . 5mg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、③WPM+IAA1. Omg/L+薦糖30g/L+琼脂8g/L、④WPM+ NAAO.lmg/L+薦糖 30g/L+琼脂 8g/L、⑤ WPM+NAA0.5mg/L+薦糖 30g/L+琼脂 8g/L、⑥ WPM+ 酷八1.〇111肖/1+薦糖30肖/1+琼脂8肖/1。控制培养条件为:溫度为25°0，光照时间为1211/(1，光照 强度为2000LX。每种壮苗生根培养基接种10瓶，每瓶接种4个丛生芽，壮苗和生根同时进行。 培养50天后，观察结果如表4。由表4可知，IAA含量对毛棉杜酷组培苗生根有很大影响，当 IAA浓度在O.lmg/L时生根率最高，培养50天后，开始长出长短不等的不定根，生根率为 90%，具体细节图如图5。
[0051 ]表4不同激素浓度下组培苗的生根情况
[0053] 7、炼苗与移栽
[0054] 将具有4条根W上的生根小苗开口炼苗2天后，移入穴盘中。洗掉附着根部的培养 基，定植在珍珠岩:草炭±体积比为1:1配制的基质中，诱透水，覆盖农用膜保湿。控制培养 条件为:溫度为25°C，光照时间为12h/d，光照强度为2000LX，培养一周后，掲开薄膜，得到组 培苗，组培苗移栽成活率在90 % W上，具体细节图如图6。
【主权项】
1. 一种毛棉杜鹃的快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 外植体采集与消毒:采集毛棉杜鹃嫩茎，洗净并消毒，剪去变黑部分，放入装入滤纸 的无菌培养皿中吸干表面水分，得到无菌外植体； (2) 初代培养:将外植体接种至外植体初代诱导培养基中，控制培养条件为：25±1°C、 光照8-12h/d、光照强度为1500-2500LX，培养至得到不定芽； (3) 增殖培养:将不定芽转移至丛生芽增殖培养基中，培养条件同步骤(2)，培养至得到 丛生芽团； (4)丛生芽伸长培养:将丛生芽团切成小块，接种至丛生芽伸长培养基中，培养条件同 步骤(2)，进行丛生芽伸长生长； (5)壮苗生根培养:将伸长的丛生芽接种至壮苗生根培养基中，培养条件同步骤(2)，得 到生根小苗； (5)炼苗与移栽:将生根小苗开口炼苗，再定植于基质中，浇透水，覆盖农用膜保湿，培 养条件同步骤(2)，得到组培苗。2. 根据权利要求1所述的毛棉杜鹃的快速繁殖方法，其特征在于，所述的毛棉杜鹃嫩茎 采集自生长健壮、无病害的实生苗。3. 根据权利要求1所述的毛棉杜鹃的快速繁殖方法，其特征在于，所述的外植体的消毒 是在无菌超净台上，用浓度为70%的酒精处理10s，无菌水冲洗一次;浓度为2%的NaCIO浸泡 15min，不停摇动瓶子，使外植体与NaCIO溶液充分接触，再用无菌水冲洗4次以上。4.根据权利要求1所述的毛棉杜鹃的快速繁殖方法，其特征在于，所述的外植体初代诱 导培养基ρΗ=5·0,且其成分为:WPM+NAA0.01mg/L+ZT0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L。5.根据权利要求1所述的毛棉杜鹃的快速繁殖方法，其特征在于，所述的丛生芽增殖培 养基ρΗ=5·0,且其成分为:WPM+TDZ0.5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L。6. 根据权利要求1所述的毛棉杜鹃的快速繁殖方法，其特征在于，所述的丛生芽伸长培 养基ρΗ=5·0,且其成分为:WPM+ZT0.5mg/L+GA3 2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L。7.根据权利要求1所述的毛棉杜鹃的快速繁殖方法，其特征在于，所述的壮苗生根培养 基ρΗ=5·0,且其成分为:WPM+IAA0.1mg/L+1%蔗糖+琼脂8g/L。8. 根据权利要求1所述的毛棉杜鹃的快速繁殖方法，其特征在于，伸长的丛生芽其长度 > 2cm〇9. 根据权利要求1所述的毛棉杜鹃的快速繁殖方法，其特征在于，丛生芽伸长培养，每 瓶培养基中接种4块丛生芽团。10. 根据权利要求1所述的毛棉杜鹃的快速繁殖方法，其特征在于，所述的壮苗生根培 养，每瓶接种4个丛生芽。
【专利摘要】本发明公开了一种毛棉杜鹃的快速繁殖方法，包括以下步骤：外植体采集与消毒、初代培养、增殖培养、丛生芽伸长培养、壮苗生根培养和炼苗与移栽。这种毛棉杜鹃的快速繁殖方法克服了组培中无菌体系建立难度大、丛生苗细弱、移栽成活率低等技术问题，实现了不受季节影响的、规模化、低成本的毛棉杜鹃生产，而且该繁殖遗传性状稳定，能很好地保持原植株基因型和优良观赏特性，并且所选用的最佳培养基激素配比，试验重复性非常好。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105475138
【申请号】CN201510964685
【发明人】谢利娟, 白宇清, 王定跃, 徐涛, 林贝满, 张华
【申请人】深圳职业技术学院
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年12月18日