专利名称：一种水溶性蜂胶及提取方法
技术领域：
本发明属于蜂产品深加工领域，涉及一种蜂胶及提取方法，尤其涉及水溶性蜂胶及水提取方法，该发明制备的蜂胶原料特别适用于保健品、化妆品和食品添加剂。
背景技术：
目前，国内外的蜂胶制品基本上都是通过酒精浸提获取有效成分。传统的蜂胶醇提方法有一种难以接受的刺激味道，使用时对酒精过敏者也易产生过敏反应，增加了过敏源，作为化妆品和口服保健品的原料有很大的限制性，而且蜂胶醇提液不易溶于水，吸收利用度低，水溶性活性成分有一部分没有被提取出来。已经报道的其它的提取方法大致有蜂胶氯仿、乙酸乙酯、二氯甲烷、甘油浸提、油提和超临界抽提法等，成本高，活性成分提取不完全。有报道的蜂胶水浸提也采用冷水浸提或者是热回流，提取效率低，生物活性成分破坏程度大。
长期以来，蜂胶的水提技术常规的采用冷水浸提，得到的蜂胶水提液，其中黄酮类化合物的含量只有1.914mg/ml，尽管蜂胶醇提液在相应条件下得到总黄酮的含量最高达51.36mg/ml，但是当溶于水时100ml水只能溶解4～6ml的蜂胶醇提液。目前有利用甘油浸泡加热的水溶性蜂胶的制备方法，但这种生理学活性未经检验，而且是一种将醇提品溶于水而不是用水提取。因此，蜂胶的水提技术没有得到实质性的突破，严重制约了产品的深层次开发。由于蜂胶难溶于水，蜂胶液体制剂大都采用乙醇提取的方法。产品的气味浓、刺激性强，多数消费者难以接受也不适合服用。醇提蜂胶的固体剂型产品虽然刺激性不强，但产品的剂型受到限制，而且其生物学活性和人体吸收率不如水提物理想。目前，国内也有少量的醇提蜂胶的碱化处理的水溶性蜂胶投放市场。由于碱性环境对蜂胶的活性发挥有一定的干扰作用，生物学效应受一定影响。因此，理想的水提技术是当前蜂胶产品深加工研究中的热点和难点。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种水溶性蜂胶及提取方法，得到水溶性的蜂胶水提液中总黄酮含量高达12.765mg/ml，该提取方法主要包括取蜂胶原料(毛胶)，用水为溶剂，加入少量天然绿色表面活性剂，控温加热，经超声波处理，过滤，制取蜂胶水提液。
本发明提供蜂胶提取方法中加入的表面活性剂，包括卵磷脂、大豆磷脂、聚乙二醇6000、吐温80、甘油酯等。
本发明提供的蜂胶提取方法，其中加温温度在60～80℃。
本发明提供的蜂胶提取方法，其中加热时间10～16小时。
本发明提供的蜂胶提取方法，其中超声波处理15～45分钟。
本发明的另一个目的是提供用本发明方法提取的蜂胶水提液为原料制备的各类产品。
采用本发明方法提取的蜂胶水提液具有以下优点(1)毒性低。按人正常剂量的400倍、600倍的情况下灌胃给小鼠进行急性毒性实验，一周内无死亡情况，说明毒性很低；(2)效果好。提取有效成分含量高，与常规的醇提取方法相比较，用量只有醇提的一半就可以达到相同的效果，甚至更好；(3)刺激性小。减少了过敏源成分，扩大了适用范围，特别是在减少传统的醇提取带来的酒精过敏方面有很大优势；(4)剂型易于被机体吸收和易于调味。特别适用于保健品、化妆品和食品添加剂。
图1为本发明方法的简单工艺流程图。
具体实施例方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例1 本发明方法的一个实例取蜂胶原料(毛胶)，用水为溶剂，加入1％卵磷脂，溶液经超声波处理15～45分钟、控制温度60～80℃、加热时间10～16小时，提取、过滤、即得蜂胶水提液。
简单工艺流程参见附图1。
采用本发明方法，可以提取到总黄酮含量高达12.765mg/ml的蜂胶提取液。而常规的冷水浸提得到的蜂胶水提液黄酮类化合物的含量只有1.914mg/ml。尽管蜂胶醇提液在相应条件下得到总黄酮的含量最高达51.36mg/ml，但是当溶于水时100ml水只能溶解4～6ml的蜂胶醇提液，相比较而言，本方法提取的水溶性蜂胶的黄酮类化合物的提取率远高于传统方法。经动物实验证实，用本发明方法提取的蜂胶液具有良好的药理学活性包括抗炎和免疫调节作用、抗糖尿病作用以及降血脂作用。
实施例2 水提蜂胶液的抗炎免疫作用采用4种急性炎症动物模型(角叉菜胶致大鼠足肿胀模型、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型、角叉菜胶致大鼠胸膜炎模型及油酸加LPS致大鼠急性肺损伤模型)及小鼠棉球肉芽肿慢性炎症模型、完全弗氏佐剂致大鼠免疫性炎症模型等共6批整体动物实验观察了蜂胶水提液的抗炎作用，在此基础上从对炎症介质生成与释放、过氧化脂质含量及SOD活性、细胞因子、黏附分子、转录调节因子等多方面、多层次地研究了该方法提取的蜂胶水提液的抗炎作用及其机理。研究表明，该方法提取的提取液具有良好的抗炎作用，能抑制炎症急性期白细胞游走，减轻炎症反应的发生程度.对角叉菜胶致大鼠急性胸膜炎炎症渗出液中NO和PGE2的产生有明显的抑制作用，降低NO和前列腺素间相互作用，减少各种蛋白酶的激活效应，从而减轻炎症反应的发生程度。而且能够对抗佐剂性关节炎大鼠造模期间体重的减轻，对慢性炎症和免疫性炎症有良好的防治作用，能够预防糖尿病大鼠并发症糖尿病肾病、高血脂高血压病的发生，在一定程度上能够控制血糖的升高。特别是在糖尿病模型中表现出低剂量、高活性的效应。通过免疫组化和原位杂交技术发现蜂胶水提液能够抑制NF-kBp65的活化和组织中细胞间粘附分子-1(CD54)表达，说明蜂胶水提液通过此途径发挥抗炎症作用是其作用机理之一。与其抗炎作用相关的环节有减少炎症部位PGE2及MDA的生成；降低胸膜炎大鼠胸腔渗出液中NO的含量；阻止炎症反应过程中IL-6的异常升高；抑制急性肺损伤大鼠支气管上皮细胞中CD54的表达；抑制急性炎症期间细胞中NF-kB p65的活化及p65 mRNA的转录增加，控制炎症反应的中心环节。
实施例3 水提蜂胶液对糖尿病的作用用本发明方法提取的蜂胶液在限饲条件下对糖尿病有良好的防治作用，效果比同剂量的蜂胶醇提液好。蜂胶水提取液能降低糖尿病大鼠体内血糖水平给药2周后与模型组相比水提液组血糖下降了22.3％(P＜0.05)而醇提液组下降12.8％；给药3周后与模型组相比水提液组下降了22.2％(P＜0.01)，而醇提液组下降15.2％(P＜0.01)；给药4周后与模型组相比水提液组下降了17.9％(P＜0.05)，而醇提液组下降6.8％；给药5周后，水提液组下降了27.3％(P＜0.01)，而醇提液组下降18.6％(P＜0.05)；给药6周后，下降了33.8％(P＜0.01)，而醇提液组下降22.3％(P＜0.01)，给药7周后，水提液组下降了30.4％(P＜0.01)，而醇提液组下降21.7％(P＜0.01)；随着时间的延长，控制血糖的效果有增加的趋势。调节体内脂质代谢和蛋白质代谢，降低蛋白质的消耗与模型组相比水提液组总胆固醇降低了18.4％(P＜0.05)，而醇提液组降低了15.8％(P＜0.05)；极低密度脂蛋白胆固醇水提液组下降了34.4％(P＜0.01)，而醇提液组降低了24.5％(P＜0.05)；总蛋白水提液组升高了4.8％，而醇提液组升高了5.4％，白蛋白含量水提液组升高了32.1％，而醇提液组升高了9.5％。对肾脏具有一定的保护作用与模型组相比，水提液组尿酸下降了12.5％，而醇提液组降低了12.3％；水提液组肌酐下降了7.4％，而醇提液组降低了4.9％；并且能够抑制肾肿大。蜂胶水提液对糖尿病的血糖控制是通过抑制α-葡萄糖苷酶而达到降低血糖的目的。
实施例4 水提蜂胶液对高脂血症的作用实验研究证明，该提取液对高脂血症有良好的治疗效果。该水提法提取的提取液能有效抑制高脂血症SD大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)的升高；能显著降低肝脏组织TC、TG值，并且能显著降低血清谷丙转氨酶(GOT)、谷草转氨酶(GPT)的浓度；能显著提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性。表明采用该法提取的蜂胶液能显著改善高脂血症大鼠的脂肪代谢，并具有一定的抗氧化作用。
实施例5 不同提取方法蜂胶液中总黄酮类化合物含量及对小鼠S180肿瘤生长的影响将用不同提取方法获得的蜂胶液，比较其中总黄酮类化合物含量及对小鼠S180肿瘤生长的影响，结果见表1。
表1蜂胶提取液中的总黄酮浓度蜂胶液抑瘤率(％)(mg/m1)75％蜂胶酊 27.09948.7680％蜂胶酊 51.36 67.3695％蜂胶22.64455.75普通水提液 1.914 53.48本发明方法水提液12.76580.78
本发明涉及的部分参考文献(1)郭华，叶暾昊，李次力等.微波对蜂胶黄酮提取率影响的研究.江苏食品与发酵，2001，105(2)10-11.
(2)顾青，张艳萍，钟立人.蜂胶中有效成分提取工艺研究.浙江农业学报，2001，13(3)161-164.
(3)徐倩，郭华，叶怀义.蜂胶有效成分醇液两步提取法的研究.应用科技，2002，29(7)75-77.
(4)陈荷凤，韩文辉，李兵，等.蜂胶各种溶剂提取物的抑菌效果比较.食品研究与开发，2001，22(增刊)18-19.
(5)胡福良.蜂胶的提取方法.养蜂科技，2000，(5)28-31.
(6)叶陆星，胡福良，玄红专，等.蜂胶的提取方法及影响因素.蜜蜂杂志，2002，(7)16-17.
(7)Krell R.Value-addded products from beekeeping.FAO Bulletin 124，Rome，1996.
(8)Vassya S，Bankova V.PropolisRencent advances in chemistry and plant origin.Apidologie.2000，313-15.
(9)吴晓闻，吴家森.超临界CO2流体萃取蜂胶工艺前景灿烂.养蜂科技，2002，(1)11-12.
(10)张伟.蜂胶提取技术及提取物的应用.中国养蜂，2002，53(5)28-29.
(11)游海，陈岑，高荫榆，等.蜂胶黄酮类化合物提取工艺参数优化.食品科学，2002，23(8)173-174.
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
权利要求
1.一种水溶性蜂胶及提取方法，其特征是提取方法的主要步骤包括取蜂胶原料(毛胶)，用水为溶剂，加入少量天然绿色表面活性剂，控温、加热，经超声波处理，过滤，制取蜂胶水提液。
2.如权利要求1所述的一种水溶性蜂胶及提取方法，其特征是加入的表面活性剂包括大豆磷脂、聚乙二醇6000、吐温80、甘油酯、卵磷脂等。
3.如权利要求1所述的一种水溶性蜂胶及提取方法，其特征是加温温度控制在60～80℃。
4.如权利要求1所述的一种水溶性蜂胶及提取方法，其特征是加热时间控制在10～16小时。
5.如权利要求1所述的一种水溶性蜂胶及提取方法，其特征是超声波处理时间控制在15～45分钟。
6.如权利要求1所述的一种水溶性蜂胶及提取方法，其特征是用本发明方法提取的蜂胶水提液为原料制备的产品。
全文摘要
本发明提供一种水溶性蜂胶及提取方法，该提取方法是利用增溶、超声技术和控制合理的温度、加热时间，对蜂胶中的活性成分进行提取。该方法提取有效成分完全，能够减少活性成分的破坏，而且能够避免过敏源之一酒精的使用。该方法提取的蜂胶液总黄酮含量高达12.765mg/ml，具有良好的抗炎免疫、降血脂、降血糖和防止糖尿病并发症的发生作用，对肾上腺皮质系统的影响较小。由于水提制剂易于被机体吸收，不存在溶剂残留带来的副作用，也容易调味，因而极具开发潜力，在保健品、化妆品和食品添加剂方面有良好的应用前景。
文档编号A23L1/076GK1515176SQ03150648
公开日2004年7月28日 申请日期2003年8月25日 优先权日2003年8月25日
发明者胡福良, 李英华, 王超敏 申请人:浙江大学, 江山天宝蜂业科技开发有限公司