专利名称：一种施氏假单胞菌菌株的制备及其在对含硫有机化合物脱硫中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种施氏假单胞菌菌株的制备及其在对含硫有机化合物脱硫中的应用，该菌株为Pseudomonas stutzeri UP-1，于2003年6月31日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心”，其保藏号CGMCC NO.0974；它主要来源于含硫较高的油田污水、油田污泥以及被油污染的土壤中，该菌株可通过特定的培养、分离和制备手段得到，它的培养基液体细胞、静息细胞和固定化细胞均能通过Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机物。
现有技术21世纪是环保世纪，世界炼油工业在环保和工艺方面都面临许多挑战和机遇。原油中含有硫醇、二硫化物、砜、硫醚、噻吩和其它结构更复杂的有机硫化物。尽管在炼油过程采取了多种方法脱硫，但在汽油、柴油等成品油中仍然会含有一定的硫化物。在汽油、柴油等石油产品的使用过程中，硫会以各种方式排入环境，造成严重污染，破坏生态平衡。所以当今世界各国对石油产品的含硫量限制日愈严格(徐承恩.炼油设计，2000，31(3)1-4)。例如，美国从2000年1月1日开始实施新配方汽油第二阶段规格，汽油含硫量从原来的340×10-6g/g降低到200×10-6g/g以下；2000年欧盟也规定汽油含硫量要降低到150×10-6g/g，2005年要进一步降低到50×10-6g/g。然而在对成品油含硫量限制越来越高的同时，目前世界开采出石油的含硫量也越来越高。而且炼油厂在脱硫的同时也同时污染了环境，因此，探索和研究经济有效并且对环境友好的石油脱硫技术的绿色工艺已成为21世纪石油化工最为紧迫的任务之一。
近年来，国外正在开发一种新的脱硫技术——生物催化脱硫(BDS)(Daniel J.Monticello.Chemtech，1998，28(7)38-45)。该技术是建立在生物工程基础上的崭新技术，被誉为21世纪的石油脱硫技术。石油生物催化脱硫技术是利用生物体内的酶催化氧化石油中含硫组分，使其转化成为水溶性的化合物(如石油磺酸盐或硫酸盐)，通过油水分离后即可实现石油脱硫的目的。石油的总硫含量在0.03％～7.89％之间，除元素硫、硫化物外，还有硫醇、噻吩、苯并噻吩、二苯并噻吩类及更复杂的含硫有机化合约200种。在实验中为了考察机理的方便常以二苯并噻吩(DBT)作为模型化合物来研究各种微生物脱除有机硫的性能。
早在1935年就有人进行生物脱硫方面的研究，并且在1948年第一项石油生物脱硫技术的专利在美国发表，但是这些技术一直没能实现工业化，主要原因是这些微生物在脱除有机硫的同时还消耗掉大量的烷烃，生物催化剂缺少最基本的作用底物专一性条件。直到1988年美国气体技术研究院(IGT)在生物催化脱硫方面取得了重大的突破，分离了两种特殊的菌种，可以选择性地从二苯并噻吩(DBT)中脱除硫，并于1992年获得美国专利(USA5002888和USA5104801)。但是，该技术的缺点是脱硫比活性较低，其生长细胞对模型化合物二苯并噻吩(DBT)的降解率为80％(DBT含量500ppm)，静息细胞的活性更低，同时其使用微生物菌株的活细胞，造成反应体系后续分离困难，微生物易流失和难以回收。
目前，对于DBT的降解，基本搞清楚了它们作用于DBT的代谢过程中的中间代谢物，其代谢途径有以下几种(1)DBT的碳骨架被专一氧化而C-S键依然保留。(2)DBT被彻底地降解为二氧化碳、水和无机硫。(3)专一地切断DBT的C-S键生成联苯途径。然而，三种途径各有优缺点，本发明涉及菌株属于第一种代谢途径，能降低碳值的损失，缩短反应时间，提高代谢副产物的经济价值。
发明内容
本发明的目的就在于避免上述现有技术的不足之处而提供了一种施氏假单胞菌菌株的制备及其在对含硫有机化合物脱硫中的应用技术。它主要是通过在含硫较高的油田污水、油田污泥以及被油污染的土壤中筛选具有降解有机硫化物能力的天然菌种，在此基础上进行诱变，得到高效稳定的催化氧化有机硫化物的生物催化剂，并开发出了其固定化细胞和复合酶体系在脱除化石燃料中有机硫的应用。其技术特点是含硫较高的油田污水、油田污泥以及被油污染的土壤中，并通过特定的培养和分离技术得到菌株，而该菌株适宜在弱碱性培养基中培养，培养温度31℃；其细菌学特征菌落形态为乳黄色；革兰氏染色阴性、不抗酸；细胞呈现直或弯曲杆状，但不是螺旋状，不成链；大小0.6～0.8×1.4～2.0μm；有极生鞭毛，能运动；不形成芽孢，无鞘或突起物；未观察到聚-β羟丁酸颗粒；不产生荧光色素；该菌株为Pseudomonas stutzeri UP-1，于2003年6月31日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心”，其保藏号CGMCC NO.0974。它的培养、分离和筛选步骤如下1.样品的采集从油田污水、油田污泥以及被油污染的土壤中采集样品；2.富集液的制备取样品5克或5ml放入加有50mgDBT的50ml基本盐溶液(在每升蒸馏水中加入4g Na2HPO4，2g(NH4)2SO4.0.2g MgSO4.7H2O，0.001g CaCl2，0.001g FeSO4.7H2O，PH为7.0，20分钟121℃高压灭菌)中，在31℃、200r/min的条件下培养10天，然后转入含有50mgDBT的NBYE培养基(基本盐溶液中再加入0.8％的牛肉浸膏、和0.5％的酵母浸膏)中在同样的条件下培养4天，取5ml的上述培养物接入同样的培养基中再培养4天，连续4次这种操作得到最后的培养物富集液；3.菌落的制备把得到的富集培养物稀释到1012，然后取1μL涂布在盛有固体桑塔斯培养基(蛋白胨10g，葡萄糖10g，酶水解干酪素2g，酵母浸粉2g，NaCl 6g，蒸馏水1000ml，pH7.5)的培养皿中，然后放入生化培养箱中31℃条件下培养4天，待平板上的菌落长出后在净化工作台里在平板培养基上的菌落喷上一层DBT，然后在31℃条件下的生化培养箱中培养2天，然后分别在可见光和荧光下观察颜色的变化，挑选能使二苯并噻吩的颜色发生变化的菌落；4.菌落的分离将得到的菌落采用平板划线的方法纯化，具体操作将接种环或接种针在酒精灯上灼烧，然后从待纯化的菌落或待分离的斜面菌种中沾取少量菌样，在相应的培养基平板中划线分离，划线的方法主要有连续划线法和分区划线法，重复此步骤的操作，直到获得单一菌落为止，此时即可得到一种对二苯并噻吩具有专一脱硫效果的施氏假单胞菌Pseudomonas Stutzeri UP-1。
将采用上述方法分离制备的施氏假单胞菌菌株可以作用生物脱硫催化剂而应用于含硫有机化合物的脱硫过程中，其方法是将该Pseudomonas Stutzeri UP-1菌株按照Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机化合物，通过后续分离达到脱硫的目的，主要有以下几种方式1.将Pseudomonas stutzeri UP-1菌株的生长细胞培养液通过Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机物。
2.将Pseudomonas stutzeri UP-1菌株的静息细胞通过Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机物。
3.将Pseudomonas stutzeri UP-1菌株的固定化细胞通过Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机物。
4.将Pseudomonas stutzeri UP-1菌株的复合酶体系通过Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机物。
图1菌株UP-1的透射电镜照片；
图2菌株UP-1降解DBT路线；图3菌株UP-1降解DBT曲线；图4固定化UP-1降解DBT曲线其中，■——为DBT加入量500ppm；●——为DBT加入量625ppm；▲——为DBT加入量750ppm。
具体实施例方式
下面将结合附图及实施例进一步描述本发明的技术特点实施例1本发明所述的Pseudomonas stutzeri UP-1菌株的筛选1.从胜利油田孤岛油区的油田污水、油田污泥以及油井附近被油污染的土壤中采集样品，来做进一步分离和筛选用。取样品5克(或5ml)放入加有50mgDBT的50ml基本盐溶液(组成在每升蒸馏水中加入4g Na2HPO4，2g(NH4)2SO4.0.2g MgSO4.7H2O，0.001gCaCl2，0.001g FeSO4.7H2O，PH为7.0，20分钟121℃高压灭菌)中，在31℃、200r/min的条件下培养10天，然后转入含有50mgDBT的NBYE培养基(基本盐溶液中再加入0.8％的牛肉浸膏、和0.5％的酵母浸膏)中在同样的条件下培养4天，取5ml的上述培养物接入同样的培养基中再培养4天，连续4次这种操作得到最后的培养物富集液；2.把得到的富集培养物稀释到1012，然后取1μL涂布在盛有固体桑塔斯培养基的培养皿中，然后放入生化培养箱中31℃条件下培养4天。根据文献报道，假单胞菌属的某些菌种能把二苯并噻吩降解为在可见光下为黄色或褐色的代谢物；红球菌属的某些菌种能把二苯并噻吩降解为在紫外线的波长下发出红色荧光的物质，因此根据这个特点来筛选菌种，待平板上的菌落长出后在净化工作台里在平板培养基上的菌落喷上一层DBT，然后在31℃条件下的生化培养箱中培养2天，然后分别在可见光和荧光下观察颜色的变化，挑选能使二苯并噻吩的颜色发生变化的菌落做进一步的研究；3.将得到的菌落采用平板划线的方法纯化。具体操作将接种环或接种针在酒精灯上灼烧，然后从待纯化的菌落或待分离的斜面菌种中沾取少量菌样，在相应的培养基平板中划线分离，划线的方法主要有连续划线法和分区划线法，其目的是获得单个菌落。此步骤可重复操作，直到获得单一菌落为止。结果，选择到一种对二苯并噻吩具有专一脱硫效果的施氏假单胞菌Pseudomonas Stutzeri UP-1。
该Pseudomonas Stutzeri UP-1菌株适宜在弱碱性培养基中培养，培养温度31℃。
它的细菌学特征革兰氏染色阴性、不抗酸；细胞呈现直或弯曲杆状，但不是螺旋状，不成链；大小0.6～0.8×1.4～2.0μm；有极生鞭毛，能运动；不形成芽孢，无鞘或突起物；未观察到聚-β羟丁酸颗粒；不产生荧光色素。
它的培养特征酵母膏蛋白胨琼脂，营养琼脂和桑特斯琼脂培养基上31℃培养1-3天后观察菌落形态和颜色；结果表1。
表1
它的的生理生化特征参照《Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology》Vol.III和《常见细菌系统鉴定手册》的相关内容进行生理生化测定；结果见表2。
表2
注“+”表示阳性反应 “-”表示阴性反应它的16SrDNA分析所得的脱氧核糖核酸的序列如下所示＞3.1(全序列)GCCTAACACATGCAAGTCGAGCGGATGAGTGGAGCTTGCTCCATGATTCAGCGGCGGACGGGTGAGTAATGCCTAGGAATCTGCCTGGTAGTGGGGGACAACGTTTCGAAA
GGAACGCTAATACCGCATACGTCCTACGGGAGAAAGTGGGGGATCTTCGGACCTCACGCTATCAGATGAGCCTAGGTCGGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAAAGGCTCACCAAGGCGACGATCCGTAACTGGTCTGAGAGGATGATCAGTCACACTGGAACTGAGACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAAGCACTTTAAGTTGGGAGGAAGGGCAGTAAGTTAATACCTTGCTGTTTTGACGTTACCGACAGAATAAGCACCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAG3GTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCGCGTAGGTGGTTCGTTAAGTTGGATGTGAAAGCCCCGGGCTCAACCTGGGAACTGCATCCAAAACTGGCGAGCTAGAGTATGGCAGAGGGTGGTGGAATTTCCTGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATAGGAAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACCACCTGGGCTAATACTGACACTGAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAG表3
根据该菌株的16srDNA序列与GenBank中的相关序列Blast比较的结果见表3，与目前已发表的相关菌株相比，该菌株与施氏假单胞菌CCUG的序列同源性最高，为100％，可见该菌株属于假单胞菌进化分枝。再根据该菌株的细胞革兰氏阴性、不抗酸，细胞呈杆状，极生鞭毛，不形成芽孢，无鞘或突起物，属于假单胞菌属(Pseudomonas)。根据多项分类原则，综合考虑培养特征、生理生化特征和16SrDNA序列分析结果表明该菌株的特征与施氏假单胞菌CCUG不同，故将该菌株定名为Pseudomonas Stutzeri UP-1。
该菌株可以在桑特斯培养基中培养，也可在含硫源的培养基中培养，菌株在31℃下，进行弱碱性好氧培养。
实施例2该Pseudomonas stutzeri UP-1菌株的碳源利用实验表4是碳源利用实验结果，它充分表明了该菌株不能以十二烷、十四烷、十六烷、液体石蜡、萘为唯一碳源生长，这说明该菌株不能以油品中占主要成分的饱和份和芳香份作为唯一的碳源，而实验结果已证明该菌株对模型化合物二苯并噻吩有良好的降解作用，综合以上实验结果，该菌株具有工业上生物催化脱硫用菌的潜力。
表4 实施例3制备Pseudomonas stutzeri UP-1菌株细胞的液体培养液1.桑特斯培养基葡萄糖10g，酵母浸粉2g，酶水解干酪素2g，大豆蛋白胨10g，氯化钠6g，水1000ml(固体桑特斯培养基的加2％琼脂)，PH值为7.2(用NaOH调节)。
2.用接种针从固体桑特斯培养基斜面接Pseudomonas Stutzeri UP-1菌株到250ml的锥形瓶中，锥形瓶中盛有灭过菌的100ml液体桑特斯培养基，于31℃，200转/分下在恒温摇床中培养20-24小时，制得Pseudomonas Stutzeri UP-1菌株细胞的液体培养液。
实施例4制备Pseudomonas stutzeri UP-1菌株静息细胞液将通过实施例3的方法所获得的菌株UP-1的液体培养液离心分离(10000转/分，4℃)15分钟，倒掉上层清液，得到聚集的菌株细胞。用磷酸盐缓冲液洗涤离心沉淀4次，洗去残余的培养基养分，将得到的离心沉淀细胞悬浮于磷酸盐缓冲液中，冷冻保藏在冰箱中备用，即得到Pseudomonas stutzeri UP-1菌株静息细胞液。
实施例5制备Pseudomonas stutzeri UP-1菌株的固定化细胞(包埋法制备固定化细胞)1.聚乙烯醇包埋通过实施例3的方法所获得的菌株UP-1；称取细胞湿重1克，悬浮于20毫升生理盐水(0.9％)；制备0.1克/毫升的聚乙烯醇溶液，加热搅拌溶解，室温下静置冷却；将细菌加入20毫升聚乙烯醇溶液，用注射器滴加到饱和的硼酸溶液，使其形成直径3～5毫米的小球，并浸泡24小时；用生理盐水洗涤3次备用。
2.琼脂包埋通过实施例3的方法所获得的菌株UP-1，称取湿重5克，加入200加热溶解的2％琼脂溶液，倒入平板冷却凝胶，然后切成小片备用。
3.海藻酸钠包埋通过实施例3的方法所获得的菌株UP-1；称取1克，悬浮于20毫升生理盐水，加入到20毫升4％的海藻酸钠胶液中，混合均匀，用注射器滴入2％的氯化钙溶液中，4℃交联成球，小球直径3～5毫米，交联24小时，移入冰箱保藏备用。
实施例6本发明的液体培养液在降解二苯并噻吩中有机硫的应用1.将已灭菌的DBT配成DBT-N，N-二甲基甲酰胺(DMF)储液；2.将储液加入50毫升实施例3培养的细胞液体培养液中，使DBT的浓度为2.7mM；3.将含有DBT的细胞液体培养液移入250毫升锥形瓶，放入恒温摇床，31℃，200转/分下反应；4.反应24小时后，在培养液中加入2M的HCL使培养液的PH＝2，然后再加入0.8体积的乙酸乙酯，充分震荡后，离心混合液、二苯并噻吩及其氧化代谢产物被萃取在上面的乙酸乙酯相中，取1μl进行GC-MS分析，再结合薄层色谱分析得到其降解路线如图2所示。
实施例7本发明的静息细胞在降解二苯并噻吩中有机硫的应用1.将实施例4制得的静息细胞1克悬浮于盛有50毫升磷酸盐缓冲液的250毫升锥形瓶，再加入DBT，使其浓度为780ppm；2.按照(1)制得8个同样的样品，同时放入恒温摇床，31℃，200转/分下反应；每隔一段时间，取出一个样品测定，得到其降解曲线(如图3)，由图可见反应时间为24小时时，降解率不再增加，达到最大值；3.反应24小时，调节PH值为2，用正己烷萃取剩余DBT，其浓度为87ppm，降解率为88.8％。
实施例8本发明的固定化细胞在降解二苯并噻吩中有机硫的应用将实施例5制得的固定化细胞10g和0.02mg加入盛有50毫升水的250毫升锥形瓶，然后放入恒温摇床，31℃，200转/分下反应，反应6天后，用正己烷萃取剩余DBT，DBT初始浓度为780ppm，剩余270ppm，降解率为65.4％。图4是UP-1降解DBT曲线。
实施例9本发明在脱除模拟燃油体系中二苯并噻吩硫的应用1.要处理的模拟油体系由十四烷加DBT构成；2.将模拟油体系40毫升移入250毫升锥形瓶，121℃消毒灭菌20分钟；3.将实施例4制得的静息细胞1克悬浮于10毫升水中，把制得细胞悬浮溶液加入2步骤的锥形瓶中，使DBT浓度为0.27mM，然后放入恒温摇床，31℃，200转/分下反应，反应结束后，调节PH值为2，用正己烷萃取剩余DBT，用色谱测定其浓度，DBT初始浓度500ppm，降解后模拟油体系剩余DBT浓度270ppm降解率为46％。
实施例10本发明在脱除加氢脱硫柴油中的有机硫的应用将实施例9中的模拟油体系换成灭菌后的加氢脱硫柴油，其它操作步骤和方法不变，经本发明生物催化脱硫后，柴油的硫含量从231降到176，脱硫率为23.8％。
发明效果由于本发明是建立在生物工程基础上的崭新技术，主要是利用生物体内的酶催化氧化石油中含硫组分，使其转化成为水溶性的化合物(如石油磺酸盐或硫酸盐)，通过油水分离后即可实现石油脱硫的目的。该生物催化脱硫与现有技术的加氢脱硫(HDS)相比具有许多优点1.它是在低温(20～60℃)、常压下进行反应和不需要氢，从而可以省去制氢装置。
2.BDS脱出的硫以水溶性化合物形式存在，从而增加经济效益，同时很少有废液排放，对环保极为有利。
3.它能有效地除去HDS难以除去的二苯并噻吩(DBT)。
4.对于通常处理困难的物料，如FCC汽油、原油及渣油，BDS都能进行脱硫，能使得FCC汽油不致因加氢后氢饱和而出现辛烷值损失。据估计，设备投资BDS比HDS低50％，操作费用降低15％。因此BDS是极有前途的石油脱硫新技术。
本发明提供的Pseudomonas stutzeri UP-1菌株可作为脱硫生物催化剂选择性氧化含硫有机物，生成3-羟基-2甲醛基-苯并噻吩从而达到脱硫目的；该发明尤其适用于石油及其产品中有机硫的脱除，该Pseudomonas stutzeri UP-1菌株按照Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机化合物，对二苯并噻吩具有良好的降解能力，有望解决目前石油加氢脱硫工艺不易脱除噻吩类杂环硫化物的不足；该菌株广泛存在于高含硫油田的污水和土壤中，来源广泛，遗传性能稳定，降解产物易于分离。
权利要求
1.一种施氏假单胞菌菌株，它主要来源于含硫较高的油田污水、油田污泥以及被油污染的土壤中，并通过特定的培养和分离技术得到，其特征在于该菌株适宜在弱碱性培养基中培养，培养温度31℃；其细菌学特征菌落形态为乳黄色；革兰氏染色阴性、不抗酸；细胞呈现直或弯曲杆状，但不是螺旋状，不成链；大小0.6～0.8×1.4～2.0μm；有极生鞭毛，能运动；不形成芽孢，无鞘或突起物；未观察到聚-β羟丁酸颗粒；不产生荧光色素；该菌株为Pseudomonas stutzeri UP-1，于2003年6月31日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心”，其保藏号CGMCC NO.0974。
2.根据权利要求1所述的施氏假单胞菌菌株，其特征在于该施氏假单胞菌菌株的培养、分离和筛选步骤如下①样品的采集从油田污水、油田污泥以及被油污染的土壤中采集样品；②富集液的制备取样品5克或5ml放入加有50mg二苯并噻吩的50ml基本盐溶液中，在31℃、200r/min的条件下培养10天，然后转入含有50mgDBT的NBYE培养基中在同样的条件下培养4天，取5ml的上述培养物接入同样的培养基中再培养4天，连续4次这种操作得到最后的培养物富集液；③菌落的制备把得到的富集培养物稀释到1012，然后取1μL涂布在盛有固体桑塔斯培养基的培养皿中，然后放入生化培养箱中31℃条件下培养4天，待平板上的菌落长出后在净化工作台里在平板培养基上的菌落喷上一层二苯并噻吩，然后在31℃条件下的生化培养箱中培养2天，然后分别在可见光和荧光下观察颜色的变化，挑选能使二苯并噻吩的颜色发生变化的菌落；④菌落的分离将得到的菌落采用平板划线的方法纯化，具体操作将接种环或接种针在酒精灯上灼烧，然后从待纯化的菌落或待分离的斜面菌种中沾取少量菌样，在相应的培养基平板中划线分离，划线的方法主要有连续划线法和分区划线法，重复此步骤的操作，直到获得单一菌落为止，此时即可得到一种对二苯并噻吩具有专一脱硫效果的施氏假单胞菌Peudomonas stutzeri UP-1。
3.根据权利要求2所述的施氏假单胞菌菌株，其特征在于所述的基本盐溶液的组成为在每升蒸馏水中加入4g Na2HPO4，2g(NH4)2SO4，0.2g MgSO4.7H2O，0.001g CaCl2，0.001gFeSO4.7H2O，PH为7.0，20分钟121℃高压灭菌；NBYE培养基为基本盐溶液中再加入0.8％的牛肉浸膏、和0.5％的酵母浸膏。
4.一种施氏假单胞菌菌株在脱除含硫有机化合物中硫的应用，其特征在于将该Pseudomonas stutzeri UP-1菌株按照Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机化合物，通过后续分离达到脱硫的目的，
5.根据权利要求4所述的一种施氏假单胞菌菌株在脱除含硫有机化合物中硫的应用，其特征在于将Pseudomonas stutzeri UP-1菌株的生长细胞培养液通过Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机物。
6.根据权利要求4所述的一种施氏假单胞菌菌株在脱除含硫有机化合物中硫的应用，其特征在于将Pseudomonas stutzeri UP-1菌株的静息细胞通过Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机物。
7.根据权利要求4所述的一种施氏假单胞菌菌株在脱除含硫有机化合物中硫的应用，其特征在于将Pseudomonas stutzeri UP-1菌株的固定化细胞通过Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机物。
8.根据权利要求4所述的一种施氏假单胞菌菌株在脱除含硫有机化合物中硫的应用，其特征在于将Pseudomonas stutzeri UP-1菌株的复合酶体系通过Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机物。
全文摘要
一种施氏假单胞菌菌株的制备及其在对含硫有机化合物脱硫中的应用技术，该菌株为Pseudomonas stutzeri UP－1，于2003年6月31日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心”，其保藏号CGMCC NO.0974；它主要来源于含硫较高的油田污水、油田污泥以及被油污染的土壤中，该菌株可通过特定的培养、分离和制备手段得到，它的培养基液体细胞、静息细胞和固定化细胞均能通过Kodama路线作用于含硫有机化合物，生成溶于水的含硫有机物。
文档编号C12N1/20GK1594549SQ03156758
公开日2005年3月16日 申请日期2003年9月10日 优先权日2003年9月10日
发明者孙瑛, 侯影飞, 杨金荣, 史德青, 王云芳, 赵金生 申请人:中国石油天然气集团公司, 石油大学(华东)