专利名称：虎奶菇菌核的工厂化生产方法以及相关的培养基的制作方法
技术领域：
本发明涉及虎奶菇菌核的工厂化生产方法以及相关的培养基混合物。
背景技术：
虎奶菇菌核为热带食用菌，主产于非洲，在亚洲热带地区以及澳大利亚也有分布。在一些国家和地区有食用的传统，在民间也可入药用于治疗胃痛、便秘、发烧、感冒、水肿、胸痛、神经系统疾病、天花、哮喘、及高血压、糖尿病等疾病，并能促进胎儿发育，提高早产儿成活率。随着人们生活水平的日益提高以及医药上的广泛应用，对虎奶菇菌核的需求量将越来越大，仅靠野生的虎奶菇菌核远远满足不了人们的需求。近年来，已有人工栽培虎奶菇菌核的报道。
现有技术的虎奶菇菌核的生产方法是通过菌核或子实体的组织分离获得菌种，用固定培养基培养，普遍存在菌种培养时间长、菌种栽培收成率低、生长期长、菌核体小、产量低等问题，且由于所用的组织体不同，易造成菌核的生长规模、性能各异，长期使用将导致生产性状的退化。因此，现有技术难于形成规模化生产能力。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术生产虎奶菇菌核的不足之处，提供一种能规模化生产虎奶菇菌核的方法以及相关的培养基混合物。
虎奶菇菌核的工厂化生产方法，主要包括虎奶菇菌种制作和虎奶菇菌核栽培管理两个阶段。
本发明所述的虎奶菇菌种制作方法，主要步骤包括A、配制液体培养基其配方重量比组份为黄豆粉3-8％；人参粉0.1-2％；葡萄糖3-8％；纤维素5-10％；VB10.1-2％；氯化钙1-3％；硫酸镁1-3％；磷酸二氢钾1-3％；蛋白胨20-30％；水余量。
B、液体培养基消毒将步骤A得到的液体营养基，装入三角瓶中，用纱布棉垫封口，包扎牛皮纸，在灭菌高压锅中蒸煮消毒1小时，冷却后移入超净工作台内紫外线灯照射30-40分钟；
C、选取母种菌核取实体圆润、结实、鲜活的虎奶菇菌核用水冲洗干净后待用；D、母种菌核消毒将洗净的母种菌核在超净工作台上，用常规无菌操作方法置于75％酒精浸泡8-12分钟，再用0.1％升汞溶液浸泡10-15分钟，用无菌水冲洗4-5次，并用滤纸吸干其表面水分；E、制作菌核组织将消毒后的虎奶菇菌核用小刀去除外皮，然后切成约1cm的方块状菌核组织，一般取20-40块；F、组织培养将在超净工作台制作好的菌核组织用镊子装送入三角瓶内，纱布棉垫封口，包扎牛皮纸，置于旋转摇床上，转速为1000转/分，28±2℃室内培养4-6天，当三角瓶内液体培养基布满白色菌球或菌丝体液体成粘稠状时，即获得虎奶菇液体菌种。
本发明所述的虎奶菇菌核栽培方法，主要步骤包括；A、配制固体培养基，其配方重量比组份为木屑30-50％；麸皮40-60％；参叶粉1-2％；蔗糖1-3％；碳酸钙1-2％。
B、栽培袋的制作、灭菌及接种用大约17×33cm的塑料袋，装入步骤A固体培养基，经常规灭菌后，冷却备用；然后在无菌箱中将每个栽培袋接上虎奶菇菌种，然后移到20-25℃的温室中培养。
C、栽培管理接种成活后，将栽培袋排放在栽培室的床架上，温度控制在25-35℃之间，湿度75％-95％，培养30-40天后，洁白菌丝发满袋，随后在培养料上方或中间菌丝开始集结，形成虎奶菇菌核，当菌核快要顶破塑料袋时，可以脱去塑料套环，拔去棉塞，松开袋口，防止塑料袋破裂，随后，其湿度可相对提高，大约4个月后培养料剧烈收缩、出水、变软，菌核不会继续长大之后，就可以陆续采收。
本发明，其积极效果在于1、直接将菌核组织置于液体培养基中在摇床上进行培养，既获得工厂化生产所需的大量菌种，又大大缩短了菌种的培养时间。本发明从菌核组织至获取菌种仅需5天左右的时间，而采用固体培养基等传统方法获取菌种为23-25天。
2、母种菌核消毒采用“乙醇+升汞+无菌水冲洗”方法，其培养成功率在95％以上，而采用“乙醇+次氯酸钠溶液+无菌水冲洗”方法，其培养成功率一般在70％以下。
3、由于固体营养基配料合理，使虎奶菇菌生长繁殖速度加快，4个月即可收获菌核，不仅缩短生长周期性，而且提高了单菌核产量30％以上。
4、本发明培养基所用原料价格低廉，随处可得，而且栽培方法简单，投入少，见效快，适合在山区推广应用，大规模工厂化栽培生产。
具体实施例方式实施例1、用于制取虎奶菇菌种的液体培养基。
液体培养基的配方重量比组份为黄豆粉4％；人参粉1％；葡萄糖5％；纤维素8％；VB10.5％；氯化钙2％；硫酸镁2％；磷酸二氢钾2％；蛋白胨22％；水余量。
实施例2、虎奶菇菌种制作方法。
主要步骤包括A、配制液体培养基将实施例1所得液体培养基作为虎奶菇菌种的培养基。
B、液体培养基消毒将实施例1所得的液体营养基装入5000ml三角瓶中，用纱布棉垫封口，包扎牛皮纸，在灭菌高压锅中(121℃)蒸煮消毒1小时，冷却后移入超净工作台内紫外线灯照射35分钟。
C、选取母种菌核取实体圆润、结实、鲜活的虎奶菇菌核用水冲洗干净后待用。
D、母种菌核消毒将洗净的母种菌核在超净工作台上，用常规无菌操作方法置于75％酒精浸泡10分钟，再用0.1％升汞溶液浸泡15分钟，用无菌水冲洗5次，并用滤纸吸干其表面水分。
E、制作菌核组织将消毒后的虎奶菇菌核用小刀去除外皮，然后切成约1cm的方块状菌核组织，选取30块。
F、组织培养将在超净工作台制作好的菌核组织用镊子送装入三角瓶内，纱布棉垫封口，包扎牛皮纸，置于旋转摇床上，转速为1000转/分，28±2℃室内培养5天，当三角瓶内液体培养基布满白色菌球或菌丝体液体成粘稠状时，即获得虎奶菇液体菌种。
实施例3、用于栽培虎奶菇菌核的固体培养基。
其配方重量比组份为木屑42％；麸皮50％；参叶粉2％；蔗糖3％；碳酸钙3％。将配方量组份充分混和后，加水调配使其湿润，一般加水的量以手握培养基不滴水为宜。
实施例4、虎奶菇菌核栽培方法。
主要步骤包括A、配制培养基将实施例3所得固体培养基，作为栽培虎奶菇菌核的固体培养基。
B、栽培袋的制作、灭菌及接种用大约17×33cm的聚丙烯塑料袋，装入实施例3所得固体培养基，经常规灭菌后，冷却备用，然后在无菌箱中将每个栽培袋接上实施例2所得虎奶菇菌种，再移到20-25℃的温室中培养。
C、栽培管理接种成活后，首先检查菌种成活情况，若菌种发白，菌组恢复生长，又没有感染其它杂菌的，就可以将栽培袋排放在栽培室的床架上，室内温度控制在25-35℃之间，湿度为75％-95％，培养30-40天后，洁白菌丝发满袋，随后在培养料上方或中间菌丝开始集结，形成虎奶菇菌核。当菌核快要顶破塑料袋时，可以脱去塑料套环，拔去棉塞，松开袋口，防止塑料袋破裂，随后，其湿度可相对提高，大约4个月后培养料剧烈收缩、出水、变软，菌核不会继续长大之后，就可以陆续采收。
在本例中，可将实施例2所得菌种直接接种在实施例3所得培养基上，也可以先将液体菌种生成原种菌种后再接种栽培由实施例3所得培养基，装入菌种瓶或塑料袋，套上塑料环，塞上棉塞，经常规灭菌后，冷却备用，用常规灭菌操作方法，接入由实施例2所得液体菌种，待菌丝生长满瓶或满袋后即获得原种菌种。
权利要求
1.一种用于制取虎奶菇菌种的液体培养基，其配方重量比组份为黄豆粉3-8％；人参粉0.1-2％；葡萄糖3-8％；纤维素5-10％；VB1 0.1-2％；氯化钙1-3％；硫酸镁1-3％；磷酸二氢钾1-3％；蛋白胨20-30％；水余量。
2.一种虎奶菇菌种制作方法，主要步骤包括A、配制液体培养基，其配方重量比组份为黄豆粉3-8％；人参粉0.1-2％；葡萄糖3-8％；纤维素5-10％；VB1 0.1-2％；氯化钙1-3％；硫酸镁1-3％；磷酸二氢钾1-3％；蛋白胨20-30％；水余量；B、液体培养基消毒将步骤A得到的液体营养基，装入三角瓶中，用纱布棉垫封口，包扎牛皮纸，在灭菌高压锅中蒸煮消毒1小时，冷却后移入超净工作台内紫外线灯照射30-40分钟；C、选取母种菌核取实体圆润、结实、鲜活的虎奶菇菌核用水冲洗干净后待用；D、母种菌核消毒将洗净的母种菌核在超净工作台上，用常规无菌操作方法置于75％酒精浸泡8-12分钟，再用0.1％升汞溶液浸泡10-15分钟，用无菌水冲洗4-5次，并用滤纸吸干其表面水分；E、制作菌核组织将消毒后的虎奶菇菌核用小刀去除外皮，然后切成约1cm的方块状菌核组织，20-30块；F、组织培养将在超净工作台制作好的菌核组织用镊子装送入三角瓶内，纱布棉垫封口，包扎牛皮纸，置于旋转摇床上，转速为1000转/分，28±2℃室内培养4-6天，当三角瓶内液体培养基布满白色菌球或菌丝体液体成粘稠状时，即获得虎奶菇液体菌种。
3.一种用于栽培虎奶菇菌核的固体培养基，其配方重量比组份为木屑30-50％；麸皮40-60％；参叶粉1-2％；蔗糖1-3％；碳酸钙1-2％。
4.一种虎奶菇菌核栽培方法，主要步骤包括A、配制固体培养基，其配方重量比组份为木屑30-50％；麸皮40-60％；参叶粉1-2％；蔗糖1-3％；碳酸钙1-2％；B、栽培袋的制作、灭菌及接种用大约17×33cm的塑料袋，装入步骤A固体培养基，经常规灭菌后，冷却备用，然后在无菌箱中将每个栽培袋接上虎奶菇菌种，然后移到20-25℃的温室中培养；C、栽培管理接种成活后，将栽培袋排放在栽培室的床架上，温度控制在25-35℃之间，湿度75％-95％，培养30-40天后，洁白菌丝发满袋，随后在培养料上方或中间菌丝开始集结，形成虎奶菇菌核，当菌核快要顶破塑料袋时，可以脱去塑料套环，拔去棉塞，松开袋口，防止塑料袋破裂，随后，其湿度可相对提高，大约4个月后培养料剧烈收缩、出水、变软，菌核不会继续长大之后，就可以陆续采收。
全文摘要
本发明涉及虎奶菇菌核的工厂化生产方法以及相关的培养基混合物。虎奶菇菌核的工厂化生产方法，主要包括虎奶菇菌种制作和虎奶菇菌核栽培管理两个阶段。本发明的主要特征在于直接将菌核组织置于液体培养基中在摇床上进行培养，其积极效果在于既获得工厂化生产所需的大量菌种，又大大缩短了菌种的培养时间。本发明从菌核组织至获取菌种仅需5天左右的时间。本发明所述的液体培养基的配料包括黄豆粉、人参粉、葡萄糖、纤维素、VB
文档编号C12N1/14GK1568653SQ20041002723
公开日2005年1月26日 申请日期2004年5月13日 优先权日2004年5月13日
发明者温宝国, 赖丽华 申请人:温宝国