专利名称：蛹蛋白及其生产工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及动物提取蛋白，具体的说涉及一种蚕蛹蛋白。
背景技术：
蛋白质在人体营养中占有极为重要的地位，并且在食品、医药、化妆品等领域得到了广阔的应用。联合国粮油组织(PFO)和世界卫生组织(WHO)提出了理想蛋白的标准为必需氨基酸含量在40％以上，因此生产出达到该标准的食用及药用高质量蛋白质是广大研究者和生产者一直努力的方向。
蚕蛹为丝绸行业生产过程中的副产品，目前作为一种蛋白质来源已经引起了人们的广泛关注。蚕蛹中含蛹蛋白57％左右，蛹油30％左右，蛹油中含丰富多不饱和脂肪酸约70％左右，在制备强化食品及食品添加剂，水解氨基酸液等方面有所应用。由于蚕蛹有一股特殊的腥臭味，直接作为食品是难以接受的，目前尚无蚕蛹食品解决了腥臭味的问题，适应于消费者使用。
CN1087346、CN1091904、CN16101511除臭方法可分为两类，一类是用氧化剂(双氧水、氯气、臭氧)对蛋白浆进行除臭，而且除臭后蛋白有还原发臭问题，另外，这些氧化剂难以除尽，直接有食品安全问题；另一类用乙醇回流萃取除油除臭；上述专利的除臭工艺存在工艺复杂、流程长、能耗大、三废污染大，不适应于工业化生产。因此，目前蚕蛹仍作为初级饲料，用于畜、禽、鱼等实用价值不大，不仅仅资源利用低，而且蚕蛹饲养的畜、禽、鱼肉也带有蛹腥味，影响肉的质量。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了一种蚕蛹蛋白的制备方法，本发明的另一技术方案是提供了该方法制备的蛹蛋白及含有蛹蛋白的食品、化妆品。
本发明提供了一种制备蛹蛋白的方法，它包括如下步骤A、取蚕蛹，筛去死蚕、僵蚕和坏蛹及其它纤维杂质，粉碎；B、取A步骤粗粉粉碎后进行CO2超临界萃取，分离出粗蛋白；所述的CO2超临界萃取条件为400L容器内，压力20～35Mpa，温度30～40℃，分离压力4～8Mpa，温度25～34℃，CO2流量1～2m3/h，时间80～150min；C、取B的粗蛋白经细磨、筛分、得80-120目的细蛋白；D、细蛋白再经气流粉碎，得本发明蚕蛹蛋白。
其中，步骤D所述的气流粉碎条件为压力0.8～1Mpa，温度-80～-100℃，气流速670～700m/s，时间2-5秒。
本发明提供了蛹蛋白，它是由上述的制备方法制备得到。
它含有蛋白质的重量百分含量＞80％，脂肪的重量百分含量＞2％，水分的重量百分含量＜3％。
本发明提供了一种保健食品，它是含有蛹蛋白为活性成分，加上食品上可接受的辅料或辅助性添加剂制备而成的食品。所述食品上可接受的辅料或辅助性添加剂为粘结剂、崩解剂和矫味剂。所述矫味剂可以是桔味、橙味、草莓味。优选草莓味香精。
本发明蚕蛹蛋白的生产原料为丝绸工业的副产物，充分利用了资源，成本低廉，提高了行业经济和社会效益。
本发明蚕蛹蛋白采用了先进的超临界萃取方法，并经低温气流粉碎制得，易于人体吸收，而且本品除臭彻底，无异味，无有机残留，使用安全性更佳，有更为广阔的应用前景。制得的蚕蛹蛋白中人体八种必需氨基酸含量占50％以上，大大高于联合国粮油组织(PFO)和世界卫生组织(WHO)建议的理想蛋白质中八种氨基酸占40％的含量标准，营养价值更高，人体吸收利用度更好，试验表明，具有明显缓解体力疲劳的作用，是一种抗疲劳的营养保健品。
具体实施例方式
下面通过具体实施例的方式对本发明做进一步详述，但不限制本发明。
实施例1 本发明蚕蛹蛋白的制备取蚕蛹，筛去死蚕、僵蚕和坏蛹及其它纤维杂质，粉碎，加10倍蒸馏水，用5％w/w的医药级盐酸中和至pH＝7±1，离心甩干，于50～70℃干燥至含水量小于5％。粉碎至80～100目的粉状，400L容器内进行超临界萃取，压力24～30Mpa，温度30～35℃，分离压力4～8Mpa；分离条件为温度25～33℃，CO2流量1.3m3/h，时间100～150min，分离出蛹蛋白粗品和蚕蛹毛油。
蛹蛋白经磨细过筛，取120目的细分蚕蛹蛋白(得到总蛋白的50％)，在压力0.8～0.9Mpa，温度-80～-90℃，气流速670～700m/s，的条件下进行超微气流粉碎，过筛，得过300目筛得超微蚕蛹蛋白。其余粗蛋白和蛹皮可做饲料，也可进一步提取蛋白。
得到的蚕蛹蛋白质量指标外观灰白色，蛋白质含量75～80％w/w，脂肪含量小于2％w/w，水分小于3％w/w。
实施例2 本发明蚕蛹蛋白的制备干蚕蛹筛去死蚕、僵蚕和坏蛹及其它纤维杂质，粉碎粗粉至100目，再经CO2超临界萃取，400L容器内，压力25～30Mpa，温度35～40℃，分离压力5～7Mpa，分离温度30～34℃，CO2流量1.5m3/h，时间80～120min分理出蚕蛹蛋白粗品和蚕蛹毛油。在压力0.9～1Mpa，-90～-100℃，气流速670～700m/s条件下进行超微气流粉碎，过筛，得到过320目筛的超微蚕蛹蛋白。
得到的蚕蛹蛋白质量指标外观灰白色，蛋白质含量78～82％w/w，脂肪含量小于2％w/w，水分小于3％w/w。
实施例3 本发明蛋白食品的制备取100Kg实施例1制备的超微蚕蛹蛋白粉，于强力搅拌中加入食用胶粘剂8.2Kg、崩解剂2Kg，脱膜剂2Kg，食用矫味剂9.5Kg(桔味、橙味、草莓味)制成颗粒状，压片，烘干后包装，制成每板12粒，每粒500mg的蛋白营养食品，其中每粒含蛋白质310mg，脂肪7.75mg，辅料112.5mg，碳水化合物及纤维77.5mg。
以下通过口感对比试验对本发明做进一步详述，但不应理解为是对本发明的限定，凡基于上述技术思想作出的修改、替换、变更均属于本发明。
试验例1 本发明营养食品口感对比实验选择40名男青年、40名女青年、50岁以上老年人10人、青少年10名，对实施例3制备的三种不同口感的营养片与不加矫味剂的的营养片进行试验。每人食用不同口感的营养片各10粒，每人每天两次，每次两片，试验结果如下未加矫味剂的营养片，100人中有4％的人反应有过敏，70％的人在口中有粘齿和渣感；加有桔味矫味剂的营养片，100人中70％的人反应味淡；加有橙味矫味剂的营养片，100人中60％的人反应味淡；加有草莓味矫味剂的营养片，100人中98人反应味香，咀嚼无粘齿现象，口感最好。
口感试验说明，本发明蛹蛋白最适应与草莓味甜味剂配伍，能改善口感，便于消费者使用。
试验例2本发明蚕蛹蛋白缓解体力疲劳功能试验1、材料与方法1.1样品蚕蛹蛋白由成都市裕邑丝绸有限责任公司提供，以25/人/日(相当于0.42g/kg.kw/d)作为人体推荐摄入量。检品为浅褐色粉末。
1.2实验动物雄性ICR小鼠，体重18-21g，由四川省医学科学院实验动物中心提供(动物合格证号SCXK(川)2004-015号)1.3主要仪器与试剂荷兰ISP-M型半自动生化分析仪、SBA-生物传感分析仪、VIS-7200可见分光光度计、匀浆机、离心机、电子天平。
1.4实验方法将实验动物随机分为空白对照组和三个蚕蛹蛋白实验组。受试物剂量分别为4.2g/kg.bw、8.4g/kg.bw、12.5g/kg.bw(分别相当于人体推荐摄入量的10、20和30倍)。将受试物按相应例拌入基础饲料(由四川大学华西实验动物中心提供)，以20％比例(w/w)喂饲实验组动物，空白对照组动物以基础饲料喂养，连续喂饲30天后分别进行以下实验。
1.4.1负重游泳实验末次给予受试物30min后，将尾根部负荷5％体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。箱中水深不少于30cm，水温25℃±1℃，记录小鼠自游泳开始至死亡时间。
1.4.2血乳酸测定末次给予受试物30min后，将动物置温度为30℃的水中不负重游泳10min，并于游泳前、游泳后0min、游泳后休息20min各采眼球血20ul测定乳酸含量。并按以下公式计算血乳酸曲线下面积，以判断运动后血乳酸变化情况。
血乳酸曲线下面积＝5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min血乳酸值+2×游泳后休息20min血乳酸值)1.4.3血清尿素氮测定末次给予受试物30min后，将小鼠置温度为30℃的水中不负重游泳90min，休息60min后采眼球血0.5ML，血凝固后取血清用二乙酰-肟法测定血清尿素氮含量。
1.4.4肝糖原测定于末次给予受试物后30min处死动物，取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干后置于冰面上的平皿内，迅速称取肝脏100mg，蒽酮法测定肝糖原含量。
1.5实验数据统计实验数据用PEMS for Windows 3.1统计软件进行统计分析。
2、结果2.1蚕蛹蛋白对小鼠体重的影响见表1-表4表1-表4显示，在尿素氮测定实验中，实验结束时蚕蛹蛋白4.2g/kg.bw剂量组小鼠体重高于空白对照组，差异具有显著性(P＜0.05)，在其他三个实验中，蚕蛹蛋白三个剂量组和空白对照组间小鼠初始体重、实验中期和实验结束时体重无显著性差异。
表1 蚕蛹蛋白对小鼠体重的影响(负重游泳实验)(X±S)
表2 蚕蛹蛋白对小鼠体重的影响(血乳酸测定)(X±S)
表3蚕蛹蛋白对小鼠体重的影响(尿素氮测定)(X±S)
与空白对照组比较*p＜0.05表4蛹蛋白对小鼠体重的影响(肝糖原测定)(X±S)
2.2蚕蛹蛋白对小鼠负重游泳时间的影响见表5运动耐力的提高是抗疲劳能力加强最直接的表现，游泳时间的长短可反映动物运动疲劳的程度，如表5所述，蚕蛹蛋白4.2g/kg.bw剂量组小鼠负重游泳时间显著长于空白对照组(P＜0.05)表5蚕蛹蛋白小鼠负重游泳时间的影响(X±S)
与空白对照组比较，*P＜0.052.3蚕蛹蛋白对小鼠血乳酸含量的影响见表6
表6蚕蛹蛋白小鼠血乳酸含量的影响(X±S)
与空白对照组比较*P＜0.05**P＜0.01乳酸是机体无氧酵解的最终产物，运动时骨骼肌大量生成乳酸。酸性大量产物堆积是造成运动性疲劳的重要原因。乳酸清除速率越快，越有利于疲劳恢复。如表6所示，蚕蛹蛋白三个剂量组游泳后0min血乳酸含量显著低于空白对照组(P＜0.05、P＜0.01)。8.4g/kg.bw剂量组游泳后20min血乳酸含量显著低于空白对照组(P＜0.01)。8.4g/kg.bw和12.5g/kg.bw二个剂量组三个时点血乳酸曲线、面积显著低于空白对照组(P＜0.05、P＜0.01)。
2.4蚕蛹蛋白对小鼠肝糖原含量的影响见表7。
表7蚕蛹蛋白对小鼠肝糖原含量的影响(X±S)
与空白对照组比较，*P＜0.05机体运动能力降低与机体糖原耗竭关系密切，充足的糖原储备能有效延缓体力性疲劳。如表7所示，蚕蛹蛋白4.2g/kg..bw剂量组肝糖原含量显著高于空白对照组(P＜0.05)。
2.5蚕蛹蛋白对小鼠血清尿素氮含量的影响见表8。
表8蚕蛹蛋白对小鼠血清尿素氮含量的影响(X±S)
尿素是体内蛋白质和氨基酸分解代谢的最终产物，在肝脏合成后释放入血，然后经肾脏排出体外。正常生理状态下，尿素的生成和排泄处于平衡状态，血尿素氮浓度相对稳定。运动时，肌肉能量代谢加强，蛋白质及氨基酸的分解代谢加强，尿素生成增多，使血中尿素氮含量升高。机体对运动负荷的适应性越差，则血尿素氮浓度升高幅度越大。如表8所示，蚕蛹蛋白三个剂量组血清尿素氮含量与空白对照组相比无显著性差异。
3、小结本实验采用雄性ICR小鼠，蚕蛹蛋白按人体推荐摄入量的10、20、30倍拌饲连续喂养30天，结果表明在尿素氮测定实验中，实验结束时蚕蛹蛋白4.2g/kg.bw剂量组小鼠体重高于空白对照组，差异具有显著性(P＜0.05)。在其他三个实验中，蚕蛹蛋白三个剂量组和空白对照组间小鼠初始体重、实验中期和实验结束时体重无显著性差异。蚕蛹蛋白4.2g/kg.bw剂量组小鼠负重游泳时间显著长于空白对照组(P＜0.05)。蚕蛹蛋白三个剂量组游泳后0min血乳酸含量显著低于空白对照组(P＜0.05、P＜0.01)。8.4g/kg.bw剂量组游泳后20min血乳酸含量显著低于空白对照组(P＜0.01)。8.4g/kg.bw和12.5g/kg.bw二个剂量组三个时点血乳酸曲线下面积显著低于空白对照组(P＜0.05、P＜0.01)。蚕蛹蛋白4.2g/kg.bw剂量组肝糖原含量显著高于空白对照组(P＜0.05)。依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)评价标准，本检品(蚕蛹蛋白)具有缓解体力疲劳的作用。
综上所述，本发明采用了先进的超临界萃取方法，并经低温气流粉碎制得蚕蛹蛋白，除臭彻底，无异味，无有机残留，使用安全性更佳，有更为广阔的应用前景。制得的蚕蛹蛋白营养价值更高，人体吸收利用度更好，具有明显缓解体力疲劳的作用，是一种抗疲劳的营养保健品。
权利要求
1.一种制备蛹蛋白的方法，它包括如下步骤A、取蚕蛹，筛去死蚕、僵蚕和坏蛹及其它纤维杂质，粉碎；B、取A步骤粗粉粉碎后进行CO2超临界萃取，分离出粗蛋白；所述的CO2超临界萃取条件为400L容器内，压力20～35Mpa，温度30～40℃，分离条件为压力4～8Mpa，温度25～34℃，CO2流量1～2m3/h，时间80～150min；C、取B的粗蛋白经细磨、筛分、得细蛋白；D、细蛋白再经气流粉碎，得本发明蚕蛹蛋白。
2.根据权利要求1所述的蛹蛋白的制备方法，其特征在于步骤D所述的气流粉碎条件为压力0.8～1Mpa，温度-80～-100℃，气流速670～700m/s，时间2-5秒。
3.蛹蛋白，它是由权利要求1或2所述的制备方法制备得到。
4.根据权利要求3所述的蛹蛋白，其特征在于它含有蛋白质的重量百分含量＞80％，脂肪的重量百分含量＞2％，水分的重量百分含量＜3％。
5.一种保健食品，它是含有权利要求2或3所述的蛹蛋白为活性成分，加上食品上可接受的辅料或辅助性添加剂制备而成的食品。
6.根据权利要求5所述的保健食品，其特征在于所述的辅料或辅助性添加剂中含有矫味剂。
7.根据权利要求5所述的保健食品，其特征在于所述的矫味剂为草莓香精。
8.根据权利要求5所述的保健食品，其特征在于所述的食品是固体制剂。
9.根据权利要求8所述的保健食品，其特征在于所述的固体制剂为胶囊剂或片剂。
全文摘要
本发明提供了一种制备蛹蛋白的方法，它包括如下步骤蚕蛹粉碎后进行CO
文档编号A23L1/305GK1763091SQ20051009580
公开日2006年4月26日 申请日期2005年8月15日 优先权日2005年2月28日
发明者马国安, 颜泽勤 申请人:成都市裕邑丝绸有限责任公司