专利名称：乳酸菌的培养方法
技术领域：
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种乳酸菌的培养方法。
背景技术：
乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。 能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌统称为乳酸菌。青贮饲料是将含水率为 65 % 75 %的青绿饲料经切碎后，在密闭缺氧的条件下，通过厌氧乳酸菌的发酵作用，抑制各种杂菌的繁殖而得到的一种粗饲料。青贮饲料气味酸香、柔软多汁、适口性好、营养丰富、 利于长期保存.是家畜优良饲料来源。乳酸菌是在青贮发酵过程中占主导地位的微生物， 乳酸菌发酵可产生大量的乳酸来降低饲料的PH值，抑制其中有害微生物(主要为酵母菌) 的生长，从而使得青贮饲料得到长期保持。乳酸菌多数属于厌氧菌体或微好氧菌体，在普通培养条件下，乳酸菌均菌体生长十分缓慢，甚至不能生长，这给乳酸菌的利用带来了一定的困难，同时也使得采用发酵法生产的青贮饲料品质难以得到进一步提高。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中乳酸菌培养方法中乳酸菌生产缓慢，效率不高，利用其制备的青贮饲料品质低下的技术问题。本发明涉及的乳酸菌的培养方法包括如下步骤采用涂布法将菌种接种至MRS培养基上，之后进行厌氧培养。优选地，所述乳酸菌为布氏乳杆菌(LactcAacillus casei)、植物乳杆菌 (Lactobacillus ρIantarum) 5 ! 11^ (Pediococcuspentosaceus)。优选地，所述乳酸菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。优选地，所述厌氧培养的温度为37°C。本发明具有如下的有益效果本发明的方法培养的乳酸菌菌落较多且个体较大， 利用本发明培养的乳酸菌可制备高品质的青贮饲料。
具体实施例方式以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。本发明涉及的布氏乳杆菌(Lactobacillus casei)、植物乳杆菌(Lac tobacillus plantarum)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)已在名为《傅彤；微生物接种剂对玉米青贮饲料发酵进程及其品质的影响[D]；中国农业科学院；2005年》的硕士论文中公开；本发明涉及的MRS培养基已在《黄良昌，吕晓玲.保加利亚乳杆菌浓缩培养的研究 [J].中国乳品工业，2002，30(1) :12-15》中公开。实施例1、采用涂布法将菌种接种至MRS培养基上
(1)称取新鲜的玉米植株25g，装入盛有225ml灭菌生理盐水的三角瓶内，加少量玻璃珠摇床震荡30min ；(2)用灭菌吸管吸取Iml上述液体，缓缓注入到含有9ml灭菌生理盐水的试管内；(3)另取一支灭菌吸管，按上述操作顺序，作10倍递增稀释液体，如此每递增一次，即换用1支灭菌吸管；(4)从以上方法培养出的菌落中，用钓菌环分别钓取一个戊糖片球菌 (Pediococcus pentosaceus)胃胃、才直·学LIflif (Lactobacillusplantarum) 1 '^^ '! 杆菌(Lactobacillus casei)菌落，然后分别倍比稀释到 1(Γ6、1(Γ5、1(Γ4、1(Γ3 ；(5)用移液枪从各个稀释梯度中分别吸取0. Iml置于倒好的MRS培养基上，用刮铲涂布均勻，每个稀释度做5个重复。2、厌氧培养翻转平板，置37°C温箱内培养72h，取出观察乳酸菌菌落特征。选取菌落数目在30 300的平板进行计数，结果见表1。由表1可以看出，戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)培养72小时后，菌落数目可达163. 6CFU/g，菌落大小可达1. 25mm ；植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)培养72小时后，菌落数目可达105. 2CFU/g，菌落大小可达 2. 06mm;布氏乳杆菌(Lactobacillus casei)培养72小时后，菌落数目可达M2CFU/g，菌落大小可达2. 42mm ；可见，利用本实施例的方法培养的乳酸菌菌落较多且个体较大，培养效果较好。表权利要求
1.一种乳酸菌的培养方法，其特征在于，包括如下步骤采用涂布法将菌种接种至MRS 培养基上，之后进行厌氧培养。
2.如权利要求1所述的乳酸菌的培养方法，其特征在于，所述乳酸菌为布氏乳杆 lif (Lactobacillus casei)、^直· ？L If lif (Lactobacillusplantarum) JlK 1 H Jn δ < lif (Pediococcus pentosaceus)。
3.如权利要求2所述的乳酸菌的培养方法，其特征在于，所述乳酸菌为植物乳杆菌 (Lactobacillus ρIantarum)0
4.如权利要求1所述的乳酸菌的培养方法，其特征在于，所述厌氧培养的温度为37°C。
全文摘要
本发明涉及一种微生物技术领域的乳酸菌的培养方法，包括如下步骤采用涂布法将菌种接种至MRS培养基上，之后进行厌氧培养。本发明的方法培养的乳酸菌菌落较多且个体较大，利用本发明培养的乳酸菌可制备高品质的青贮饲料。
文档编号C12N1/20GK102337230SQ20101023793
公开日2012年2月1日 申请日期2010年7月27日 优先权日2010年7月27日
发明者丁国才, 沙飞翔, 郭景鹏 申请人:上海海帝园艺有限公司