专利名称：胚胎激光辅助孵化的方法
技术领域：
本发明涉及在辅助生殖领域中的胚胎激光辅助孵化的方法。
背景技术：
目前，胚胎激光辅助孵化通常采用胚胎透明带打通法或透明带外层削薄法来减 少胚胎在孵出时受到的来自透明带的阻力。透明带打通法是将胚胎培养至第三天，使用 激光辅助孵化仪将部分透明带熔解，使其形成一个约30-40微米的通道，但是胚胎透明 带打通法使得胚胎卵裂球过早与外界环境接触，增加了外部环境对卵裂球伤害的机率， 同时还有丢失卵裂球的可能性。透明带外层削薄法是使用激光辅助孵化仪将第三天胚 胎的透明带的五分之一至四分之一周长的外层消融，消融的深度约为透明带总厚度的 50%-60%,因胚胎透明带为双层结构，内层致密、坚硬，外层较厚且较松散，因此透明 带外层削薄法并不能去除胚胎孵出时的主要阻碍。所以现有技术中常用的这两种方法均 存在其局限性。
发明内容
本发明要解决的技术问题在于克服上述现有技术存在的不足，提供一种胚胎激 光辅助孵化的方法，其既可以去除胚胎孵化时遇到的主要障碍，又可以避免胚胎卵裂球 过早的受到外界环境的干扰。本发明要解决的技术问题是提供一种胚胎激光辅助孵化的方法，包括如下步 骤步骤1 :将胚胎放置在Quirai，s卵裂液中培养三天；步骤2:将第三天的胚胎置于胚胎培养皿中，并使用巴斯德吸管在胚胎培养皿 中制作培养滴；步骤3 使用激光辅助孵化仪在倒置显微镜下将第三天的胚胎的内层熔解。所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其中，所述步骤2中的培养滴为25微升，并 覆盖无菌组织培养油。所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其中，所述步骤3中，倒置显微镜的放大倍 数为400倍。所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其中，所述步骤3中，熔解透明带的周长为 透明带总周长的五分之一。所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其中，所述步骤3中，熔解透明带的厚度为 透明带总厚度的50%。所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其中，所述步骤3中，激光脉冲时间为 600 μ S,能量为 300mW。所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其中，所述步骤3中，激光的作用位置为卵 裂球与透明带间空隙较大的位置。
本发明的有益技术效果在于因胚胎透明带为双层结构，内层致密、坚硬，外层较厚且较松散，所以，透明 带的内层为胚胎孵出时的主要阻碍，而发明胚胎激光辅助孵化的方法通过使用激光辅助 孵化仪将第三天胚胎的透明带的五分之一周长的内层消融，消融的深度约为透明带总厚 度的50%，大大减少了胚胎在孵出时受到的来自透明带的阻力，又可以避免胚胎卵裂球 过早的受到外界环境的干扰，有效提高了胚胎的着床率。
图1为本发明胚胎激光辅助孵化方法的方框图。
具体实施例方式参阅图1，本发明胚胎激光辅助孵化方法采用如下步骤步骤1 :将胚胎放置在Quirai，s卵裂液中培养三天；步骤2:将第三天的胚胎置于胚胎培养皿中，并使用巴斯德吸管在胚胎培养皿 中制作培养滴。步骤3 使用激光辅助孵化仪在倒置显微镜下将第三天的胚胎的透明带的内层 熔解。其中，步骤2中，培养滴约为25微升，并覆盖无菌组织培养油；步骤3中，倒 置显微镜的放大倍数约为400倍。熔解透明带的周长约为透明带总周长的五分之一，熔解透明带的厚度应约为 透明带总厚度的50%，且，在操作过程中所使用的激光脉冲时间为600μ s，能量为 300mW。为了最大程度地保证卵裂球不受到伤害，步骤3中激光的作用位置应尽量选择 在卵裂球与透明带间空隙较大的位置。因胚胎透明带为双层结构，内层致密、坚硬，外层较厚且较松散，所以，透明 带的内层为胚胎孵出时的主要阻碍，本发明胚胎激光辅助孵化的方法通过使用激光辅助 孵化仪将第三天胚胎的透明带的五分之一周长的内层消融，消融的深度约为透明带总厚 度的50%，大大减少了胚胎在孵出时受到的来自透明带的阻力，有效提高了胚胎的着床率。以上所述仅为本发明的较佳可行实施例，并非限制本发明的保护范围，凡运用 本发明说明书及附图内容所作出的等效结构变化，均包含在本发明的保护范围内。
权利要求
1.一种胚胎激光辅助孵化的方法，其特征在于，包括如下步骤步骤1 :将胚胎放置在Quinn’ s卵裂液中培养三天；步骤2:将第三天的胚胎置于胚胎培养皿中，并使用巴斯德吸管在胚胎培养皿中制 作培养滴；步骤3 使用激光辅助孵化仪在倒置显微镜下将第三天的胚胎的内层熔解。
2.如权利要求1所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其特征在于，所述步骤2中的培养 滴为25微升，并覆盖无菌组织培养油。
3.如权利要求1所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其特征在于，所述步骤3中，倒置 显微镜的放大倍数为400倍。
4.如权利要求1所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其特征在于，所述步骤3中，熔解 透明带的周长为透明带总周长的五分之一。
5.如权利要求1所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其特征在于，所述步骤3中，熔解 透明带的厚度为透明带总厚度的50%。
6.如权利要求1所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其特征在于，所述步骤3中，激光 脉冲时间为600 μ s，能量为300mW。
7.如权利要求1所述的胚胎激光辅助孵化的方法，其特征在于，所述步骤3中，激光 的作用位置为卵裂球与透明带间空隙较大的位置。
全文摘要
一种胚胎激光辅助孵化的方法，该方法通过将胚胎放置在Quinn’s卵裂液中培养三天；然后将第三天的胚胎置于胚胎培养皿中，并使用巴斯德吸管在胚胎培养皿中制作培养滴；最后使用激光辅助孵化仪在倒置显微镜下将第三天的胚胎的内层熔解，熔解透明带的周长为透明带总周长的五分之一；熔解透明带的厚度为透明带总厚度的50％。该胚胎激光辅助孵化的方法，大大减少了胚胎在孵出时受到的来自透明带的阻力，又可以避免卵裂球过早的受到外界环境的干扰，有效提高了胚胎的着床率。
文档编号C12N13/00GK102021142SQ201010532740
公开日2011年4月20日 申请日期2010年11月4日 优先权日2010年11月4日
发明者张红, 马博 申请人:马博