专利名称：多用途接种装置的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及微生物菌种的上罐设备，具体是一种多用途接种装置。背景技术：
将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种，接种是微生物发酵中的一项最基本的操作技术。接种的关键是要严格的进行无菌操作，如操作不慎引起污染，将造成整个发酵的失败。菌种的扩大培养是发酵生产的第一道工序，该工序又称为种子制备。种子制备的目的是使菌体数量增加，培养出高质量的生产种子供第二道工序使用，因此，提供发酵产量高、性能稳定、数量充足且不被其他杂菌污染的生产菌种，并安全地上罐，是至关重要的，是发酵生产成败的关键。将培养好的孢子液或菌丝体接种到种子罐上，一般有压差接种法、火焰接种法这两种方法。但是这两种方法操作过程繁琐，需要菌种、霉菌、看罐、消毒等多个岗位人员密切配合。压差接种法要反复的将种子罐升压和降压，火焰接种法需要多岗位人员密切配合并且需要火焰保护，这就需要所有操作人员都具有极高的技术熟练程度，且对周围环境要求较高，不能有气流等， 这两种接种方法都存在较大的染菌风险。目前，国内也有一些接种的专利方法，如专利CN 201148435Y、CN 2552935Y等，这些专利主要涉及孢子液接种，接种的容量在2L以下，不适合大量的菌丝体接种。随着科技的进步，发酵罐规模也在逐步扩大，发酵罐吨位往往在上百吨，甚至是几百吨的规模。相应的一级种子罐都在500L以上，需要接种的液体菌种量在几升到几十升。因此，目前的接种装置无法满足行业发展的需要，设计一种大容量的接种装置就显得十分迫切。曰发明内容本实用新型的目的就是提供一种既可以实现大容量的在线接种，也可以离线小容量的接种，操作简单，染菌机会少的多用途接种装置。本实用新型的技术方案是具有接种瓶，接种瓶上部具有接种口，底部具有移种管件，其特征在于所述的接种瓶设置于百级层流罩下，其上部分别设置有蒸汽进汽管及无菌空气进气管，蒸汽进汽管上装有排空阀；所述的蒸汽进汽管及无菌空气进气管并联接入一主管上，该主管连接于接种瓶上，主管上装有法兰截止阀及压力表，在蒸汽进汽管及无菌空气进气管上分别装有阀门。所述的移种管件包括接种瓶底部的移种管道，该管道与后续步骤中的种子罐相连接，管道上装有移种阀门，或包括接种瓶底部的移种管道，管道上装有移种阀门，阀门下连接一个接种针，接种针外套接一个保护套，保护套装有排气阀。所述的接种针以法兰与移种管道上的移种阀门相连接，保护套与接种针以丝扣连接。所述的接种瓶为不锈钢接种瓶，瓶体直径为Φ 133-Φ 351mm，瓶体体积1-40L。使用的蒸汽进汽管及无菌空气进气管均为Φ20Χ2.5 mm不锈钢管。所述的阀门为DN15不锈钢抗生素阀或不锈钢截止阀。所述的接种口为方便开启的DN50带有聚四氟乙烯密封垫的不锈钢法兰。在接种瓶瓶体上装有方便移动的提手。本实用新型既可实现大种量在线接种，也可以实现离线小种量接种，其具体操作如下一、大种量在线接种1.开启百级层流罩，使得整个装置在百级层流下工作；2、将接种瓶进行在线蒸汽灭菌封闭接种口，开启蒸汽进汽管阀门和接种瓶底部移种阀门，关闭无菌空气进气管阀门及排空阀，使蒸汽通入接种瓶，经过移种管道一直到后续步骤的种子罐移种管道排污阀。维持压力表的压力在0.121 0.123MPa，使整个移种系统消毒30分钟。消毒完成后， 关闭蒸汽进汽管阀门，开启无菌空气管道阀门，使用无菌空气吹整个管路系统，将接种瓶及管路温度降至常温，关闭后续步骤的种子罐移种管道排污阀；3、关闭无菌空气管道阀门和接种瓶底部移种阀门，开启排空阀，将压力表压力降到0，开启接种口。在百级层流的条件下分别将培养好的液体菌种分别通过接种口倒入接种瓶内；4、盖好接种口的法兰，关闭排空阀，开启无菌空气管道阀门，使得压力表压力升到 0. 15 0. 2MPa，开启接种瓶底部移种阀门，使得接种瓶内的种子液压入到移种管道中，这时候开启后续步骤的种子罐上移种阀门，种子液就压入种子罐中，即可以实现在线接种了。本装置安放在种子室培养间或无菌操作间内，不需要在超净工作台下进行并瓶操作，减少了操作环节。培养好的液体菌种不用移动到室外，种子液暴露环节是在百级层流下，无菌程度可以得到保证。移种过程是在无菌密闭管道中来完成，整个过程只需要一个人即可完成，不需要多岗位来配合，减少了差错的产生和染菌机会，同时接种的量可以很大。二、离线小种量接种将本装置接种瓶底部移种管件进行小的改动，也可实现较小接种量的接种，如对于放线菌、真菌类的孢子液菌种或0. 2 2L的三角瓶液体菌种接种。具体步骤如下1.开启百级层流罩，使得整个装置在百级层流下工作；2.先对接种瓶进行在线蒸汽灭菌封闭接种口，开启蒸汽进汽管阀门和接种瓶底部移种阀门，关闭无菌空气进气管阀门及排空阀，使蒸汽通入接种瓶，经过接种瓶底部移种阀门及接种针及保护套，通过保护套上的排汽阀排气。维持压力表的压力在0. 121 0. 123MPa，使整个移种系统消毒30分钟。消毒完成后，关闭蒸汽进汽管阀门，开启无菌空气进气管阀门，使用无菌空气吹整个管路系统，将接种瓶及管路温度降至常温，关闭接种瓶底部移种阀门；3、关闭无菌空气进气管阀门，开启排空阀，将压力表压力降到0，开启接种口。在百级层流的条件下分别将培养好的液体菌种分别通过接种口倒入接种瓶内；4、盖好接种口的法兰，关闭排空阀，开启无菌空气进气管阀门，使得压力表压力升到0. 15 0. 2MPa，关闭无菌空气进气管阀门，使得接种瓶内的压力维持在0. 15 0. 2Mpa。 从主管法兰截止阀上法兰处拆卸下整个接种瓶，利用提手将接种瓶移动到需要接种的种子罐前；5、取下保护套，将瓶体的接种针直接插入消好种子罐接种口，开启接种瓶底部移种阀门，利用瓶体内的压力直接将种子液压人种子罐，种子液压完后，关闭移种阀门，抽出接种针即可完成整个接种过程，不需要对种子罐进行其它的操作。本实用新型与现有技术相比，具有以下优点[0029]1、可实现在线接种，不受接种量的限制，所接的种量可以由几升到几十升，能够进行大种量的接种；2、该接种装置安全性及密封性能好，制作材料简单。瓶体采用的是无缝不锈钢管材，能够耐受很0.5Mpa的压力，不会产生玻璃孢子接种瓶爆裂的危险。接口部分采用法兰连接，使用聚四氟乙烯密封垫片，阀门使用抗生素阀，整体密封性好；3、该接种装置还可实现几十毫升到几百毫升的小接种量的离线接种，一种装置多种功能；4、离线接种装置采用了保护套的设计，能够对接种针进行保护，可以将接种瓶进行长距离搬运。接种时也很方便，不需要对接种针和种子罐接种口重新消毒；5、在线接种及离线接种装置操作简单，不需要菌种、霉菌、看罐、消毒等多个岗位人员密切配合。不需要对种子罐进行升压降压操作，节省了人员，减少了染菌的机会；6、本装置适用范围广，适用于一切微生物菌种的上罐，尤其适合于细菌类菌种上罐。㈣
图1是本实用新型大种量在线接种时的结构示意图；图2是本实用新型离线小种量时的工作状态示意图；图3是图2中的接种针放大结构示意图；图4是图2中的保护套放大结构示意图。图中，1 一接种瓶，2—接种口，3—移种管道，4一移种阀门，5—百级层流罩，6_蒸汽进汽管，7—无菌空气进气管，8—排空阀，9一主管，10—法兰截止阀，11 一压力表，12— 阀门，13-接种针，14-保护套，15-法兰盘，16-针体，17-丝扣，18-针头，19-丝扣连接座， 20-套体，21-保护套排气阀，22-提手，23-种子罐。㈤具体实施方式
实施例1，参见图1，图1为大种量在线接种时的结构，具有接种瓶1，由Φ 351mm不锈钢管制成，体积为6-40L ；接种瓶上部具有接种口 2，该接种口为方便开启的DN50带有聚四氟乙烯密封垫的不锈钢法兰；接种瓶底部具有移种管件，本实施例中的移种管件包括接种瓶底部的移种管道3，该管道与后续步骤中的种子罐(图中未示出)相连接，管道上装有移种阀门4;该移种阀门为不锈钢抗生素阀门。所述的接种瓶设置于百级层流罩5下，其上部分别设置有由Φ 20 X 2. 5mm不锈钢管制成的蒸汽进汽管6及无菌空气进气管7，蒸汽进汽管上装有排空阀8 ；所述的蒸汽进汽管及无菌空气进气管并联接入一主管9上，该主管连接于接种瓶上，主管上装有法兰截止阀10及压力表11，在蒸汽进汽管及无菌空气进气管上分别装有阀门12，该阀门为DN15不锈钢截止阀。实施例2，参见图2，图2为离线小种量时的工作状态示意图，此接种瓶上部结构与实施例1相同，只是瓶体直径为Φ 133mm，体积为适合小种量的1-5L ；图2是在图1所示的装置下经消毒杀菌后从主管9上拆下，再与种子罐23连接，其区别在于接种瓶底部的移种管件还包括与接种瓶底部的移种阀门4以法兰连接有一个接种针13，接种针外套接有一个保护套14 ；接种针及保护套的具体结构见图3，图4，所述的接种针主要包括连接法兰盘15， 针体16，丝扣17，针头18，所述的保护套主要包括丝扣连接座19，套体20及保护套排气阀 21，保护套与接种针以丝扣连接。[0044] 为方便移动，瓶体上设置有的方便移动的提手22。
权利要求1.多用途接种装置，具有接种瓶，接种瓶上部具有接种口，底部具有移种管件，其特征在于所述的接种瓶设置于百级层流罩下，其上部分别设置有蒸汽进汽管及无菌空气进气管，蒸汽进汽管上装有排空阀；所述的蒸汽进汽管及无菌空气进气管并联接入一主管上，该主管连接于接种瓶上，主管上装有法兰截止阀及压力表，在蒸汽进汽管及无菌空气进气管上分别装有阀门。
2.根据权利要求1所述的多用途接种装置，其特征在于所述的移种管件包括接种瓶底部的移种管道，该管道与后续步骤中的种子罐相连接，管道上装有移种阀门，或包括接种瓶底部的移种管道，管道上装有移种阀门，阀门下连接一个接种针，接种针外套接一个保护套，保护套装有排气阀。
3.根据权利要求2所述的多用途接种装置，其特征在于所述的接种针以法兰与移种管道上的移种阀门相连接，保护套与接种针以丝扣连接。
4.根据权利要求1或2所述的多用途接种装置，其特征在于所述的接种瓶为不锈钢接种瓶，瓶体直径为Φ 133-Φ 351mm，瓶体体积1-40L。
5.根据权利要求1或2所述的多用途接种装置，其特征在于使用的蒸汽进汽管及无菌空气进气管均为Φ 20X2. 5mm不锈钢管。
6.根据权利要求1或2所述的多用途接种装置，其特征在于所述的阀门为DN15不锈钢抗生素阀或不锈钢截止阀。
7.根据权利要求1或2所述的多用途接种装置，其特征在于所述的接种口为方便开启的DN50带有聚四氟乙烯密封垫的不锈钢法兰。
8.根据权利要求1或2所述的多用途接种装置，其特征在于在接种瓶瓶体上装有方便移动的提手。
专利摘要多用途接种装置，具有接种瓶，接种瓶上部具有接种口，底部具有移种管件，其特征在于所述的接种瓶设置于百级层流罩下，其上部分别设置有蒸汽进汽管及无菌空气进汽管，蒸汽进汽管上装有排空阀；所述的蒸汽进汽管及无菌空气进气管并联接入一主管上，该主管连接于接种瓶上，主管上装有法兰截止阀及压力表，在蒸汽进汽管及无菌空气进气管上分别装有阀门；本实用新型既可以实现大容量的在线接种，也可以离线小容量的接种，操作简单，染菌机会少。
文档编号C12M1/26GK202297598SQ201120345508
公开日2012年7月4日 申请日期2011年9月15日 优先权日2011年9月15日
发明者丁立, 胡军, 蔡翔, 陈从富 申请人:湖北绿雪生物产业有限公司