专利名称：一种酵母培养物在促进酸奶生产中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及ー种酵母培养物在促进酸奶生产中的应用。
背景技术：
酸奶生产所需的基本发酵时间长达16小吋，对于生产商来说，这是ー项耗时但必须的エ序。DMV International公司开发出一系列发酵增强剂，能大幅度地缩短酸奶发酵时间达50%。对于益生菌酸奶，它能増加益生菌总数及贮存时的存活率，明显地減少了菌种的接种量，在为生产商节省成本的同时，更改进了ー产品的细滑质感。鉴于生产益生菌酸奶发酵剂中的菌种对其生长条件和营养素有特殊的要求，而这系列发酵增强剂以乳蛋白为原料，是专为益生菌提供所需营养素的基质。酵母培养物(yeast culture, YC)是指由酵母菌在特定エ艺条件下经充分发酵后所形成的微生态制品，主要包括酵母细胞代谢产物、经发酵后变异的培养基以及少量已无活性的酵母细胞。作为ー种生物活性添加剤，酵母培养物营养丰富、成分复杂，含有维生素、氨基酸、消化酶、有机酸、多糖以及未知的生长因子等。据相关报道，酵母培养物可有效改善动物胃肠道菌群，促进乳酸菌、纤维素菌等有益菌繁殖。故酵母培养物存在成为酸奶发酵增强剂的可能性。
发明内容
本发明的ー个目的是提供ー种酵母培养物的用途。本发明提供了ー种酵母培养物在制备促进酸奶生产的产品中的应用；所述酵母培养物是按照包括如下步骤的方法制备得到的将酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) CGMCC No. 2. 1882进行液体发酵后，收集发酵液，除去所述发酵液中的所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC No. 2. 1882细胞得到的无菌液体，即得到所述酵母培养物。上述应用中，所述液体发酵在如下条件下进行20°C -50°C静置培养30小时-60小吋。上述应用中，所述除去所述发酵液中的所述酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae) CGMCC No. 2. 1882细胞得到的无菌液体为将所述发酵液离心收集上清液，再将所述上清液过滤，收集滤液即为所述酵母培养物；所述离心为4000rpm离心5min,所述离心半径为13. 5cm ；所述过滤采用截留分子量为O. 22 μ m的细菌过滤器。上述应用中，所述液体发酵所使用的发酵培养基由溶质I和溶剂组成，所述溶剂为水，所述溶质I由如下I)-3)的物质组成I)碳源，如下A)_C)中的任ー种A)葡萄糖和蔗糖；B)葡萄糖和糖蜜；
C)葡萄糖、蔗糖和糖蜜中的任一种；2)氮源，所述氮源为如下D) -F)中的任ー种D)酵母膏、蛋白胨和硫酸铵；E)酵母膏、蛋白胨和硫酸铵中的任两种；F)酵母膏、蛋白胨和硫酸铵中的任ー种；3)无机盐，所述无机盐为 KH2PO4' MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, CaCl2, CuSO4 · 5H20、ZnSO4 · 7H20 和 FeSO4 · 4H20 ；所述碳源在所述发酵培养基中的总浓度为20_200g/L ； 在IL所述发酵培养基中，所述20_200g碳源具体为如下1)_7)I) IO-IOOg 葡萄糖和 IO-IOOg 蔗糖；2 ) 2O-2OOg 葡萄糖；3) IO-IOOg 葡萄糖和 IO-IOOg 糖蜜；4)20_200g 蔗糖；5)20_200g 糖蜜。所述氮源在所述发酵培养基中的总浓度为5_300g/L ；在IL所述发酵培养基中，所述5_300g氮源具体为如下1)_7)l)2g_100g 酵母膏、2g_100g 蛋白胨和 Ig-IOOg 硫酸铵；2) 2. 5-150g 酵母膏和 2. 5_150g 蛋白胨；3) 2. 5g-150g 酵母膏和 2. 5g_150g 硫酸铵；4) 2. 5g-150g 蛋白胨和 2. 5g_150g 硫酸铵；5)5g_300g 酵母膏；6) 5g_300g 蛋白胨；7)5g_300g 硫酸铵。所述无机盐中的各组分在所述发酵培养基中的浓度分别为=KH2PO4O. lg/L-10g/L、MgS04.7H20 O. lg/L—10g/L,MnSO4 ·Η20 O. lg/L—4g/L、CaCl2 0. lg/L—4g/L、CuS04 ·5Η200. lg/L-4g/L、ZnSO4 · 7H20 0. lg/L_4g/L、FeSO4· 4H20 0.lg/L_4g/L ；所述发酵培养基的pH值为4· 0—6. 5ο上述应用中，所述液体发酵按照包括如下步骤的方法进行将所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) CGMCC No. 2. 1882接种于种子培养基中，20_50°C、100-200转/分钟振荡培养18-40小吋，获得种子液；再将所述种子液按照(1-30) 100的体积比接种于所述发酵培养基中按照所述液体发酵的条件进行发酵。上述应用中，所述种子培养基由溶质2和溶剂组成，所述溶剂为水，所述溶质2为葡萄糖、酵母粉、蛋白胨和MnSO4 · H2O,在所述种子培养基中各溶质的浓度分别为葡萄糖10g/L-40g/L、酵母粉 5g/L-40g/L、蛋白胨 10g/L_40g/L、MnSO4 · H2OO. lg/L_4g/L。 上述应用中，所述促进酸奶生产体现在缩短酸奶生产时间。本发明的另ー个目的是提供一种生产酸奶的方法。本发明提供的方法，包括如下步骤将嗜热链球菌(Strep tococcusthermophilus) CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckiisubsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482和上述应用中的所述酵母培养物接种到牛奶中，发酵至凝固，即得到酸奶。上述嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus) CGMCC I. 2471 和德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 的集落形成单位数目比为I : I。上述牛奶购自北京郊区奶牛场，符合GB/T6914-1986 (生鮮牛乳收购标准)。按GB2476-1999《酸牛乳》进行处理。上述方法中，在所述接种前还包括如下步骤将所述牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C -45°C的步骤；在所述发酵至凝固后，还包括将凝固得到的产物置于4°C进行后熟的步骤。 上述方法中，所述发酵的温度为42°C ；所述酵母培养物均按照(O. 1-10) 100的体积比接种于所述牛奶中。上述酵母培养物在促进酸奶生产的中的应用也是本发明保护的范围；或上述酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CGMCC No. 2. 1882在制备促进酸奶生产的产品中的应用也是本发明保护的范围；或上述酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CGMCC No. 2. 1882在促进酸奶生产的中的应用也是本发明保护的范围。本发明的第三个目的是提供ー种用于发酵培养的培养基I。本发明提供的培养基1，由上述应用中的所述溶质I和所述溶剂组成。本发明的第四个目的是提供ー种用于发酵培养的培养基2。本发明提供的培养基2，由上述应用中所述溶质2和所述溶剂组成。本发明的实验证明，本发明在使用嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471 和德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus) CGMCC I. 1482生产酸奶的过程中加入一定量酵母培养物，以pH值、乳清析出和组织形态为检测指标，具体具有如下优点1、应用本发明将酵母培养物应用于酸奶生产中，可获得显著減少发酵剂用量、缩短发酵时间同时使酸奶更加细滑的发酵增强剂；2、应用本发明生产发酵增强剂，为进一歩探讨酸奶中各种乳酸菌数量比例的关系打下了基础，为控制和快速提升酵母培养物的品质提供了有益參考。
具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例的接种量的百分比均为体积百分含量。下述实施例中所用牛奶购自北京郊区奶牛场，符合GB/T6914-1986(生鮮牛乳收购标准)。按GB 2476-1999《酸牛乳》进行处理。下述实施例中所用的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)均为如下酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2.1882)。下述实施例中酸奶制备中加入的嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471 和德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus) CGMCC I. 1482的集落形成单位数目比均为I I。
实施例I、酵母培养物及其制备方法与应用—、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取IOg葡萄糖(食品级)、5g酵母粉(食品级)、40g蛋白胨(食品级)和4g MnSO4 · H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min,备用。发酵培养基(pH4.0):称取IOg葡萄糖(食品级)、IOg蔗糖(食品级)、2g酵母膏(食品级)、2g蛋白胨(食品级)、lg硫酸铵(食品级)、10g KH2PO4 (食品级)、IOgMgSO4WH2O (食品WAg MnSO4 .H2O (食品级)、4g CaCl2 (食品级)、4g CuSO4 ·5Η20 (食品级)、4g ZnSO4 ·7Η20(食品级)和4g FeSO4 · 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌 15min,备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，28°C、150rpm (摆振幅度25mm)振荡培养24h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将2ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为1%)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的终浓度为lX105cfu/ml ;将发酵初始体系20°C静置发酵60h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径为13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(O. 22 μ m)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。ニ、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 O. 1% (体积百分含量)上述一得到的酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是4. 5h, pH值是4. 75，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例2、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取40g葡萄糖(食品级)、40g酵母粉(食品级)、10g蛋白胨(食品级)和0. Ig MnSO4 · H2O (食品级)，用蒸馏水溶解后定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH5.5):称取IOOg葡萄糖(食品级)、IOOg蔗糖(食品级)、IOOg酵母膏(食品级)、100g蛋白胨(食品级)、100g硫酸铵(食品级)、0. Ig KH2PO4 (食品级)、0. IgMgSO4 · 7H20 (食品级)、0· Ig MnSO4 · H2O (食品级)、0· Ig CaCl2 (食品级)、0· Ig CuSO4 · 5Η20(食品级)、0. Ig ZnSO4 ·7Η20 (食品级)和O. Ig FeSO4MH2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至 IL ;121°C、0. IMpa 高温灭菌 15min,备用。2、种子液的获得 将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，20°C、IOOrpm (摆振幅度25mm)振荡培养18h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将60ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为30%)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为3 X 106cfu/ml ;将发酵初始体系50°C静置发酵30h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(O. 22 μ m)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。ニ、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 10% (体积百分含量)上述一得到酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是3. Oh, pH值是4. 62，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是6. Oh, pH值4. 95，乳清稍有析出，组织形态良好，稍有气泡。实施例3、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 · H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6.5)称取50g葡萄糖(食品级)、50g蔗糖(食品级)、50g酵母膏(食品级)、50g蛋白胨(食品级)、50g硫酸铵(食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、IgMgSO4WH2O (食品WAg MnSO4 .H2O (食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4 ·5Η20 (食品级)、lg ZnSO4 ·7Η20(食品级)和Ig FeSO4 · 4Η20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min,备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。
4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(O. 22 μ m)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。ニ、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5· 0% (体积百分含量)上述一得到酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是4. 2h, pH值是4. 71，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. 5h, pH值4. 90，乳清稍有析出，组织形态良好，稍有气泡。实施例4、酵母培养物及其制备方法与应用·一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 · H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(PH6.5)称取20g葡萄糖(食品级)、2.5g酵母膏(食品级)、2.5g蛋白胨(食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、lg MgSO4 ·7Η20 (食品级)、lg MnSO4 ·H2O (食品级)、lg CaCl2(食品级)、lg CuSO4AH2O (食品级)、lg ZnSO4 ·7Η20 (食品级)和 Ig FeSO4 ·4Η20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 μ m)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。ニ、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (体积百分含量)上述一得到的酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是4. 4h, pH值是4. 79，无乳清析出，组织形态良好。
对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例5、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 · H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6. 5)称取50g葡萄糖(食品级)、50g酵母膏(食品级)、50g蛋白胨(食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、lg MgSO4 ·7Η20 (食品级)、lg MnSO4 ·H2O (食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4AH2O (食品级)、lg ZnSO4 ·7Η20 (食品级)和 Ig FeSO4 ·4Η20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(O. 22 μ m)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。ニ、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5· 0% (体积百分含量)上述一得到酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是3. 5h, pH值是4. 37，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为对照组的凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例6、酵母培养物及其制备方法与应用—、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 · H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6.5):称取200g葡萄糖(食品级)、150g酵母膏(食品级)、150g蛋白胨(食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、lg MgS04*7H20 (食品级)、lg MnSO4 · H2O (食品级)、lgCaCl2 (食品级)、lg CuSO4 ·5Η20 (食品级)、lg ZnSO4 · 7H20 (食品级)和 Ig FeSO4 ·4Η20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得 将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(O. 22 μ m)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。ニ、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (体积百分含量)上述一得到的酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是3. 5h, pH值是4. 39，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例7、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 · H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6.5)称取50g葡萄糖(食品级)、50g糖蜜(食品级)、2.5g酵母膏(食品级)、2. 5g 硫酸铵(食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、lg MgSO4 ·7Η20 (食品级)、lg MnSO4 · H2O(食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4 ·5Η20 (食品级)、lg ZnSO4 · 7H20 (食品级)和 IgFeSO4 · 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得
将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(O. 22 μ m)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。ニ、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5· 0% (体积百分含量)上述一得到酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是3. 8h, pH值是4. 34，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例8、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 · H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6.5)称取20g蔗糖(食品级)、50g酵母膏(食品级)、50g硫酸铵(食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、lg MgSO4WH2O (食品级)、lg MnSO4 -H2O (食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4 · 5H20 (食品级)、lg ZnSO4 · 7H20 (食品级)和 IgFeSO4 · 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 μ m)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。ニ、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (体积百分含量)上述一得到的酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是4. 7h, pH值是4. 55，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母、培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例9、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 · H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6.5)称取50g蔗糖(食品级)、150g酵母膏(食品级)、150g硫酸铵 (食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、lg MgSO4 ·7Η20 (食品级)、lg MnSO4 ·H2O (食品级)、lg CaCl2(食品级)、lg CuSO4AH2O (食品级)、lg ZnSO4 ·7Η20 (食品级)和 Ig FeSO4 ·4Η20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(O. 22 μ m)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。ニ、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5· 0% (体积百分含量)上述一得到酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是4. Oh, pH值是4. 36，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例10、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 · H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6. 5)称取200g蔗糖(食品级)、2. 5g蛋白胨(食品级)、2. 5g硫酸铵(食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、lg MgSO4 ·7Η20 (食品级)、lg MnSO4 ·H2O (食品级)、lg CaCl2(食品级)、lg CuSO4AH2O (食品级)、lg ZnSO4 ·7Η20 (食品级)和 Ig FeSO4 ·4Η20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。
4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(O. 22 μ m)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。ニ、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (体积百分含量)上述一得到的酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是3. 6h, pH值是4. 61，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例11、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 · H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6.5)称取IOg葡萄糖(食品级)、10g糖蜜(食品级)、50g蛋白胨(食品级)、50g 硫酸铵(食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、lg MgS04*7H20 (食品级)、lg MnSO4 · H2O(食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4 ·5Η20 (食品级)、lg ZnSO4 · 7H20 (食品级)和 IgFeSO4 · 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 ym)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。二、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (体积百分含量)上述一得到酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是4. 4h, pH值是4. 40，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例12、酵母培养物及其制备方法与应用 一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6. 5)称取IOOg葡萄糖(食品级)、100g糖蜜(食品级)、150g蛋白胨(食品级)、150g 硫酸铵(食品级)、lg KH2P04(食品级)、lg MgSO4 WH2CK食品级)、Ig MnSO4 -H2O(食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4 5H20 (食品级)、IgZnSO4 7H20 (食品级)和 IgFeSO4 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 ym)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。二、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (体积百分含量)上述一得到的酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是3. 2h, pH值是4. 25，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。
实施例13、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6.5)称取20g糖蜜(食品级)、5g酵母膏(食品级)、lg KH2PO4 (食品WAg MgSO4 7H20 (食品级)、lg MnSO4 .H2O (食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4AH2O(食品级)、lg ZnSO4 7H20 (食品级)和Ig FeSO4 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa 高温灭菌 15min,备用。
2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 ym)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。二、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (体积百分含量)上述一得到酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是3. 7h, pH值是4. 40，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例14、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6. 5)称取200g糖蜜(食品级)、150g酵母膏(食品级)、lg KH2PO4(食品级)、lg MgSO4 WH2CK食品级)、Ig MnSO4 哄0(食品级)、Ig CaCl2 (食品级)、lg CuSO4 *5H20(食品级)、lg ZnSO4 7H20 (食品级)和Ig FeSO4 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa 高温灭菌 15min,备用。
2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 ym)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。二、利用酵母培养物生产酸奶·酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (体积百分含量)上述一得到的酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是2. 8h, pH值是4. 23，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例15、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6. 5)称取50g糖蜜(食品级)、300g酵母膏(食品级)、lg KH2PO4(食品WAg MgSO4 7H20 (食品级)、lg MnSO4 .H2O (食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4AH2O(食品级)、lg ZnSO4 7H20 (食品级)和Ig FeSO4 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa 高温灭菌 15min,备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 ym)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。三、酵母培养物的应用酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (体积百分含量)上述一得到酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是3. 5h, pH值是4. 33，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例16、酵母培养物及其制备方法与应用 一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、IOg酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnS04 H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min,备用。发酵培养基(pH6. 5)称取200g蔗糖(食品级)、5g蛋白胨(食品级)、lg KH2PO4(食品WAg MgSO4 7H20 (食品级)、lg MnSO4 .H2O (食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4AH2O(食品级)、lg ZnSO4 7H20和Ig FeSO4 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、
0.IMpa高温灭菌15min,备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 ym)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。二、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (体积百分含量)上述一得到的酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是3. 3h, pH值是4. 40，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例17、酵母培养物及其制备方法与应用
一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6. 5)称取50g葡萄糖(食品级)、50g蔗糖(食品级)、150g蛋白胨(食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、lg MgSO4WH2O (食品级)、lg MnSO4 -H2O (食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4 5H20 (食品级)、lg ZnSO4 7H20 (食品级)和 IgFeSO4 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、 200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 ym)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。三、酵母培养物的应用酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobscillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (体积百分含量)上述一得到酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是4. Oh, pH值是4. 43，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例18、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6. 5)称取200g蔗糖(食品级)、300g蛋白胨(食品级)、lg KH2PO4C^品级)、lg MgSO4 WH2CK食品级)、Ig MnSO4 哄0(食品级)、Ig CaCl2 (食品级)、lg CuSO4 *5H20(食品级)、lg ZnSO4 7H20 (食品级)和Ig FeSO4 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa 高温灭菌 15min,备用。2、种子液的获得
将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得 在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 ym)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。二、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (体积百分含量)上述一得到的酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是3. Oh, pH值是4. 36，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例19、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6.5)称取50g葡萄糖(食品级)、50g蔗糖(食品级)、5g硫酸铵(食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、lg MgSO4 7H20 (食品级)、lg MnSO4 H2O (食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4 5H20 (食品级)、lg ZnSO4 7H20 (食品级)和 Ig FeSO4 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 ym)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。
二、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (体积百分含量)上述一得到酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是4. 5h, pH值是4. 45，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例20、酵母培养物及其制备方法与应用一、酵母培养物的制备I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6. 5)称取200g蔗糖(食品级)、150g硫酸铵(食品级)、lg KH2PO4C^品级)、lg MgSO4 WH2CK食品级)、Ig MnSO4 哄0(食品级)、Ig CaCl2 (食品级)、lg CuSO4 *5H20(食品级)、lg ZnSO4 7H20 (食品级)和IgF eS04 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa 高温灭菌 15min,备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 ym)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。二、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (体积百分含量)上述一得到的酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是4. lh, pH值是4. 35，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。实施例21、酵母培养物及其制备方法与应用—、酵母培养物的制备、
I、培养基的配制种子培养基(自然pH):称取20g葡萄糖(食品级)、10g酵母粉(食品级)、20g蛋白胨(食品级)和2g MnSO4 H2O (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。发酵培养基(pH6.5)称取50g葡萄糖(食品级)、50g蔗糖(食品级)、300g硫酸铵(食品级)、lg KH2PO4 (食品级)、lg MgSO4WH2O (食品级)、lg MnSO4 -H2O (食品级)、lg CaCl2 (食品级)、lg CuSO4 5H20 (食品级)、lg ZnSO4 7H20 (食品级)和 IgFeSO4 4H20 (食品级)，用蒸馏水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高温灭菌15min，备用。2、种子液的获得将活化后的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至种子培养基中 ，50°C、200rpm (摆振幅度25mm)振荡培养40h，获得种子液。3、发酵液的获得在250ml三角瓶中，将30ml上述2得到的种子液接种至200ml发酵培养基(即接种量为15%体积比)，得到发酵初始体系，发酵初始体系中酿酒酵母的浓度为1.5X106cfu/ml ;将发酵初始体系30°C静置发酵45h，得到发酵液。4、酵母培养物的获得将上述3得到的发酵液4000rpm离心5min (离心半径13. 5cm),收集上清液,将上清液用细菌过滤器(0. 22 ym)过滤，得到无细胞滤液(经平板检验无菌长出)，又称酵母培养物(无菌)。二、利用酵母培养物生产酸奶酵母培养物组将牛奶95°C加热处理5min后，迅速冷却至43°C，接入嗜热链球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (体积百分含量)上述一得到酵母培养物，于42°C恒温培养箱中进行发酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中进行后熟。酵母培养物组的凝固时间是4. 6h, pH值是4. 80，无乳清析出，组织形态良好。对照组按照上述的方法进行生产酸奶，与上述不同的是不加入上述一得到酵母培养物，结果为凝固时间是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，组织形态良好。
权利要求
1.一种酵母培养物在制备促进酸奶生产的产品中的应用； 所述酵母培养物是按照包括如下步骤的方法制备得到的将酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae) CGMCC No. 2. 1882进行液体发酵后，收集发酵液，除去所述发酵液中的所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC No. 2. 1882细胞得到的无菌液体，即得到所述酵母培养物。
2.根据权利要求I所述的应用，其特征在于所述液体发酵在如下条件下进行200C _50°C静置培养30小时-60小时。
3.根据权利要求I或2所述的应用，其特征在于所述液体发酵所使用的发酵培养基由溶质I和溶剂组成，所述溶剂为水，所述溶质I由如下I) -3)的物质组成 1)碳源,如下A)-C)中的任一种 A)葡萄糖和蔗糖； B)葡萄糖和糖蜜； C)葡萄糖、蔗糖和糖蜜中的任一种； 2)氮源，所述氮源为如下D)-F)中的任一种 D)酵母膏、蛋白胨和硫酸铵； E)酵母膏、蛋白胨和硫酸铵中的任两种； F)酵母膏、蛋白胨和硫酸铵中的任一种；3)无机盐，所述无机盐为KH2PO4^MgSO4 WH2CKMnSO4 .H20、CaCl2、CuS04 ·5Η20,ZnSO4 ·7Η20和 FeSO4 · 4Η20 ； 所述碳源在所述发酵培养基中的总浓度为20-200g/L ； 所述氮源在所述发酵培养基中的总浓度为5-300g/L ； 所述无机盐中的各组分在所述发酵培养基中的浓度分别为=KH2PO4 O. lg/L — 10g/L、MgSO4 · 7H20 O. lg/L—10g/L、MnSO4 · H2O 0. lg/L—4g/L、CaCl2 0. lg/L—4g/L、CuSO4 · 5H200. lg/L—4g/L、ZnSO4 · 7H20 0. lg/L—4g/L、FeSO4 · 4H20 0. lg/L—4g/L ； 所述发酵培养基的pH值为4. 0 — 6. 5。
4.根据权利要求1-3中任一所述的应用，其特征在于所述液体发酵按照包括如下步骤的方法进行将所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) CGMCC No. 2. 1882接种于种子培养基中，20-50°C、100-200转/分钟振荡培养18-40小时，获得种子液；再将所述种子液按照(1-30) 100的体积比接种于所述发酵培养基中按照所述液体发酵的条件进行发酵。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述种子培养基由溶质2和溶剂组成，所述溶剂为水，所述溶质2为葡萄糖、酵母粉、蛋白胨和MnSO4 · H2O,在所述种子培养基中各溶质的浓度分别为葡萄糖10g/L-40g/L、酵母粉5g/L-40g/L、蛋白胨10g/L_40g/L、MnSO4 · H2O O. lg/L-4g/L。
6.—种生产酸奶的方法，包括如下步骤将将嗜热链球菌(StreptococcusthermophiIus) CGMCC I. 2471、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillusdelbrueckiisubsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482和权利要求1-5中所述应用中的所述酵母培养物接种到牛奶中，发酵至凝固，即得到酸奶。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述发酵的温度为42°C。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于 所述酵母培养物均按照(O. 1-10) 100的体积比接种于所述牛奶中。
9.权利要求1-5中任一所述应用中所述酵母培养物在促进酸奶生产的中的应用； 或权利要求1_5中任一所述应用中所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCCNo. 2. 1882在制备促进酸奶生产的产品中的应用； 或权利要求1_5中任一所述应用中所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCCNo. 2. 1882在促进酸奶生产的中的应用。
10.一种用于发酵培养的培养基1，由权利要求3-5中任一所述应用中的所述溶质I和所述溶剂组成； 或一种用于发酵培养的培养基2，由权利要求5中所述应用中所述溶质2和所述溶剂组成。
全文摘要
本发明公开了一种酵母培养物在促进酸奶生产中的应用。本发明提供一种酵母培养物在制备促进酸奶生产的产品中的应用；所述酵母培养物是按照包括如下步骤的方法制备得到的将酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC No.2.1882进行液体发酵后，收集发酵液，除去所述发酵液中的所述酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CGMCC No.2.1882细胞得到的无菌液体即为所述酵母培养物。本发明的实验证明，本发明将酵母培养物应用于酸奶生产中，可获得显著减少发酵剂用量、缩短发酵时间同时使酸奶更加细滑的发酵增强剂。
文档编号C12R1/865GK102669269SQ201210170090
公开日2012年9月19日 申请日期2012年5月28日 优先权日2012年5月28日
发明者刑精精, 刘萍, 徐乐, 解洛香, 魏宏博 申请人:中国农业大学