专利名称：一种海洋红酵母培养物的发酵方法
技术领域：
本发明涉及的是一种微生物培养物的发酵方法，具体地说是一种海洋红酵母培养 物的生产方法。
背景技术：
海洋红酵母(Phodotorula benthica)是海洋中存在的一类抗逆性很强的天然真 菌。菌体圆形或卵圆形，菌落色红，亮丽。富含蛋白质、氨基酸、维生素，不饱和脂肪酸、肝糖、 类胡萝卜素、虾青素和各种未知营养因子等生物活性物质。海洋红酵母抗氧化能力极强，被 誉为“超级维生素E”，并具有增食、益生肠道和抗病功效，多用于水产养殖业。如何降低海 洋红酵母的生产成本，使其更广泛应用于畜禽水产动物的养殖，具有重要的实践意义。申请号为200610047848的中国专利申请文件中公开了一种海参用海洋胶红酵 母的生产方法，目的是获取活的一种在海参上应用效果好的海洋红酵母菌。申请号为 200810238710的中国专利申请文件中公开了一种海洋红酵母发酵饲料的制备方法，是一种 海洋红酵母和乳酸菌混合发酵的制备方法。对固体发酵和固体发酵阶段对海洋红酵母培养 物的破壁过程等生产过程没见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种充分产海洋红酵母代谢产物、酵母细胞壁和酵母内容 物的发酵方法。本发明的目的是这样实现的包括如下步骤(1)将海洋红酵母菌菌种分离、筛选与纯化；(2)纯化后的海洋红酵母菌进行液体发酵扩繁与转化；(3)经液体发酵扩繁与转化海洋红酵母菌进行固体有氧发酵以及固体厌氧发酵海 洋红酵母破壁；(4)低温干燥。本发明还可以包括1、所述液体发酵扩繁与转化，是在重量百分比为葡萄糖1 3%、蛋白胨0.5 1.2%、酵母膏0.2 0.5%、硫酸铵0.5 1.0%、磷酸氢二钾0. 1 0.3%、磷酸二氢钾 0. 1 0. 3%、硫酸镁0. 1 0. 5%、余量为海水或半海水构成的液体发酵培养基中，发酵转 化72 100小时。2、所述固体发酵培养基是由葡萄糖、蔗糖、油脂、豆粕、棉粕、菜粕、花生粕、胡麻 粕、甜菜粕、麦麸、稻糠、次粉、木薯粉、大豆皮、玉米酒精糟、玉米或大米一种或者是两种或 两种以上的混合物组成的固体发酵培养基；液体发酵扩繁与转化后的转化液与固体发酵培 养基的重量比为比例为1 2 1 3。3、所述固体厌氧发酵是在不超45°C的温度下发酵36小时；所述固体厌氧发酵海洋红酵母破壁是在50 60°C温度下，发酵12 24小时。本发明方法所得产品，具有独特的芳香气味。经破壁后红酵母细胞壁、内容物等益 生成分，可发挥活菌所不具备或体现不充分的增食、抗氧化、吸附毒素、肠道益生等功效，按 0. 01% 20%添加比例生产猪、牛、羊、禽类、水产动物、毛皮动物饲料。本发明的产品与方法相对于现有技术的优点(1)本发明吸取有关微生物制剂生产方法的优点，采用已知的海洋红酵母为菌种， 以蔗糖、豆粕(饼)、棉粕(饼)、菜粕(饼)、花生粕(饼)、胡麻粕(饼)等为原料，来源广 泛，方法过程简单，产品价格低廉。(2)本发明采用微生物液体-固体两相发酵新方法，通过大剂量接种，能够解决固 体发酵过程中，发酵周期长，容易污染等问题，生产的产品质量稳定。(3)本发明采用微生物液体_固体两相发酵新方法，还通过破壁产生大量酵母培 养物成分，具有益生饲料的特点。(4)本发明生产出的海洋红酵母培养物用于畜禽水产毛皮动物饲料，可以提高动 物抗应激能力，提高增重速度，改善母畜繁殖性能，提升肉、蛋、奶、水产品品质。(5)本发明所有培养菌液均混入固体料，继续发酵制成成品，无废液废渣排放，完 全符合环保要求。(6)本产品低温干燥，极大保护了生物学效价，具有发酵香味，从而增加了饲料的 适口性。
具体实施例方式下面举例对本发明做更详细地描述实施例11、菌种本发明所述酵母为海洋红酵母。菌种分离、筛选与纯化步骤中，可在海水 或半海水特定的红酵母培养基中，表现出脂溶性艳丽红色色素的特定特征，以此确定所用 菌株。2、培养基葡萄糖3.0%、蛋白胨1.0%、酵母膏1.0%、硫酸铵0.5、磷酸氢二钾 0. 1%、磷酸二氢钾0. 1%、硫酸镁0. 1%、琼脂2%、余量为海水或半海水。pH 6.8，培养4811， 确认菌种能在上述培养液中保持生长良好。3、斜面培养基与培养条件葡萄糖3.0%、蛋白胨1.0%、酵母膏1.0%、磷酸氢二钾0. 1%、磷酸二氢钾0. 1%, 硫酸镁0. 1%、琼脂2. 0%、余量为海水或半海水，PH 6. 8、115°C灭菌18分钟。将试管菌种 扩繁至培养皿，放入30°C恒温培养箱中培养36h。4、摇瓶种子培养基与培养条件葡萄糖3.0%、蛋白胨1.0%、酵母膏1.0%、硫酸铵0.5%、磷酸氢二钾0. 1%、磷酸 二氢钾0. 1%、硫酸镁0. 1%、余量为海水或半海水、起始pH 6.8、115°C灭菌18分钟。将培 养皿菌种接入摇瓶，放入30°C恒温摇床中，200r/min振荡培养36h。5、一级种子罐扩繁培养基与培养条件培养基豆粕1.0%、玉米0.5%、蔗糖3.0%、蛋白胨1.0%、酵母膏1.0%、硫酸铵 0. 5 %、磷酸二氢钾0. 1 %、硫酸铵0.2%、氯化钠0. 05 %、硫酸镁0.05%、消泡剂0. 05 %。起
4始pH 6. 8、121°C灭菌30分钟。摇瓶到种子罐接种量按10%接种，种子罐培养时间为24h。6、二级种子罐扩繁转化培养基与培养条件二级种子罐扩繁培养基与上述培养基配方相同，培养条件种的培养时间为72h。7、固体发酵将二级种子罐扩繁转化培养液与固体发酵料按照1 2比例混合；固体培养基于 含有葡萄糖或蔗糖；含有豆粕(饼)、棉粕(饼)、菜粕(饼)、玉米、麦麸中的两种或多种混 合物；调整固体含水量达到45%开始发酵。对发酵物料温度进行监控，使温度不超45°C;有 氧发酵36h后进入厌氧发酵，温度达到50°C以上，发酵6 10小时破壁，之后在低于80°C 条件下干燥。干燥好的发酵料具有发酵香味，呈微酸性。实施例2 将本发明生产出的海洋红酵母培养物按每吨母猪全价饲料添加1kg，将饲料喂给 哺乳母猪，分组测定采食量，结果使用本发明产品组，母猪日采食量提高200克以上，仔猪 断奶窝重日提高130克以上。实施例3将本发明生产出的海洋红酵母培养物按每吨乳猪全价饲料添加1kg，将饲料喂给 断奶10天后的乳猪，分组测定采食量，结果使用本发明产品组，乳猪日采食量比对照组提 高30克以上。本发明产品测定结果按国标方法进行测定，类胡萝卜素含量> 20yg/kg;酵母细胞壁多糖> IOOmg/ kg，粗蛋白含量10% 50% ；黄曲霉毒素< 30yg/kg。
权利要求
一种海洋红酵母培养物的发酵方法，其特征是包括如下步骤(1)将海洋红酵母菌菌种分离、筛选与纯化；(2)纯化后的海洋红酵母菌进行液体发酵扩繁与转化；(3)经液体发酵扩繁与转化海洋红酵母菌进行固体有氧发酵以及固体厌氧发酵海洋红酵母破壁；(4)低温干燥。
2.根据权利要求1所述的海洋红酵母培养物的发酵方法，其特征是所述液体发酵扩 繁与转化，是在重量百分比为葡萄糖1 3%、蛋白胨0. 5 1. 2%、酵母膏0. 2 0. 5%, 硫酸铵0.5 1.0%、磷酸氢二钾0. 1 0. 3%、磷酸二氢钾0. 1 0.3%、硫酸镁0. 1 0. 5%、余量为海水或半海水构成的液体发酵培养基中，发酵转化72 100小时。
3.根据权利要求1或2所述的海洋红酵母培养物的发酵方法，其特征是所述固体发 酵培养基是由葡萄糖、蔗糖、油脂、豆粕、棉粕、菜粕、花生粕、胡麻粕、甜菜粕、麦麸、稻糠、次 粉、木薯粉、大豆皮、玉米酒精糟、玉米或大米一种或者是两种或两种以上的混合物组成的 固体发酵培养基；液体发酵扩繁与转化后的转化液与固体发酵培养基的重量比为比例为 1 2 1 3。
4.根据权利要求1或2所述的海洋红酵母培养物的发酵方法，其特征是所述固体厌 氧发酵是在不超45°C的温度下发酵36小时；所述固体厌氧发酵海洋红酵母破壁是在50 60°C温度下，发酵12 24小时。
5.根据权利要求3所述的海洋红酵母培养物的发酵方法，其特征是所述固体厌氧发 酵是在不超45°C的温度下发酵36小时；所述固体厌氧发酵海洋红酵母破壁是在50 60°C 温度下，发酵12 24小时。
全文摘要
本发明提供的是一种海洋红酵母培养物的发酵方法。包括如下步骤(1)将海洋红酵母菌菌种分离、筛选与纯化；(2)纯化后的海洋红酵母菌进行液体发酵扩繁与转化；(3)经液体发酵扩繁与转化海洋红酵母菌进行固体有氧发酵以及固体厌氧发酵海洋红酵母破壁；(4)低温干燥。本发明具有生产工艺简单，周期短，成本低，产品质量稳定等特点。本发明的方法得到的产品具有很好的增食、肠道益生、抗氧化作用，可作为饲料原料或饲料添加剂用于畜禽水产毛皮动物的饲养。
文档编号C12N1/16GK101914460SQ201010226038
公开日2010年12月15日 申请日期2010年7月13日 优先权日2010年7月13日
发明者刘娜, 张伟强, 潘军, 薛德林 申请人:广州市博善生物饲料有限公司