展现出提供增强的芸苔粗粉营养价值的种子组成属性的芸苔种质的制作方法
【专利摘要】本发明关注以不含油的干物质为基础含有至少45%粗制蛋白质和不超过18%酸性去污剂纤维含量的芸苔种质。某些实施方案进一步包含一种或多种选自下组的性状：降低的多酚含量和增加的磷含量。在特定的实施方案中，本发明关注包含此类种质的芸苔植物和自其生成的植物商品(例如种子)。包含本发明种质的芸苔植物可以展现出有利的种子组成特征，该特征使它们作为芸苔粗粉的来源以及对于以不依赖于种皮颜色的方式对芸苔变种引入至少一种选自下组的性状的方法是特别有价值的：高蛋白质含量、低纤维含量、降低的多酚含量和增加的磷含量。
【专利说明】展现出提供增强的芸苔粗粉营养价值的种子组成属性的芸
苔种质
[0001]优先权要求
[0002]本申请要求2011年2月22日提交的美国临时申请N0.61/445，426，关于“CAN0LAGERMPLASM EXHIBITING SEED COMPOSITIONAL ATTRIBUTES THAT DELIVER ENHANCED CANOLAMEAL NUTRITIONAL VALUE” 的在 35U.S.C.§ 119(e)下的权益。
发明领域
[0003]本发明涉及芸苔(canola)种质和栽培种。在一些实施方案中，本发明涉及具有不依赖于种皮颜色修饰的粗粉组成属性(例如，降低的抗营养因子水平和升高的蛋白质水平)的芸苔种质。特定的实施方案涉及表明降低的抗营养因子(例如，酸性去污剂纤维(ADF)和多酚化合物)水平和升高的蛋白质和磷水平的芸苔种质。
[0004] 发明背景
[0005]“芸苔”指具有按重量计至多2%的芥酸(C22:l)含量(与种子的总脂肪酸含量相比)，并且(压碎后)生成含有每克脱脂(无油)粗粉(meal)小于30微摩尔(μ mol)芥子油苷(glucosinolate)的风干粗粉的油菜籽(rapeseed)(芸苔属物种(Brassica spp.))。与更传统的物种变种相比，这些类型的油菜籽以其可食性区别。由于芸苔油的低水平的饱和脂肪酸而认为其是卓越的可食用油。
[0006]虽然油菜籽粗粉是蛋白质相对较高的，但是其高纤维含量降低其消化率及其作为动物饲料的价值。与大豆粗粉相比，芸苔和含油种子油菜粗粉含有较高的膳食纤维价值和较低百分比的蛋白质。由于其高膳食纤维，芸苔粗粉比大豆粗粉具有小约20%的代谢能(ME)。因此，相对于其它含油种子粗粉诸如大豆粗粉，粗粉的价值保持较低，特别是在猪和家禽给粮中° Rakow(2004a)Canola meal quality improvement through the breedingof yellow-seeded varieties—an historical perspective, in AAFC SustainableProduction Systems Bulletin。另外，一些芸苔粗粉中芥子油苷的存在也降低其价值，这是由于这些化合物对家畜的生长和繁殖具有的有害影响所致。
[0007]芸苔变种部分以其种皮颜色区别。一般地，种皮颜色分成两大类:黄色和黑色(或荼褐色)。还观察到不同色调的这些颜色，诸如红棕色和黄棕色。已经广泛观察到具有较淡的种皮颜色的芸苔变种具有较薄的皮，如此比具有暗色种皮的变种具有更小的纤维和更多的油和蛋白质。Stringam et al.(1974)Chemical and morphologicalcharacteristics associated with seed coat color in rapeseed, in Proceedingsof the4th International Rapeseed Congress, Giessen, Germany,pp.99-108;BelI and Shires (1982)Can.J.Animal Science62:557-65;Shirzadegan and Robbelen(1985) Gotingen Fette Seifen Anstrichmittel87:235-7; Simbaya et al.(1995) J.Agr.Food Chem.43:2062-6;Rakow(2004b)Yellow-seeded Brassica napus canola for theCanadian canola Industry,in AAFC Sustainable Production Systems Bulletin。关于这点的一个可能的解释是芸苔植物可以将更多能量消耗到生成蛋白质和油，若它不需要所述能量生成种皮纤维组分的话。还已经报告了结黄色种子的芸苔系比结黑色种子的芸苔系具有更低的芥子油苷含量。Rakow et al.(1999b)Proc.1Oth Int.Rapeseed Congress, Canberra, Australia, Sep.26-29，1999, Poster#9。如此,在历史上,结黄色种子的芸苔变种的开发已经作为一种提高芸苔粗粉的饲料价值的潜在方式追踪。Bell (1995)Meal andby-product utilization in animal nutrition, in Brassica oilseeds, production andutilization.Eds.Kimber and McGregor, Cab International, Wallingford, Oxon, 0X108DE,UK, pp.301-37; Rakow (2004b),见上文;Rakow&Raney (2003)。
[0008]已经显示了与欧洲油菜(B.napus)(例如,芜青(B.rapa)和芥菜(B.juncea))紧密相关的芸苔(Brassica)物种的一些结黄色种子形式在其种子及随后的粗粉中具有较低水平的纤维。结黄色种子的欧洲油菜种质的开发已经证明可以经由整合来自相关芸苔物种的控制种子色素沉着的基因在欧洲油菜中降低纤维。然而，将来自相关芸苔物种的控制种子色素沉着的基因整合入有价值的含油种子芸苔变种，诸如芸苔变种中由于如下的事情而变得复杂，即多个隐性等位基因牵涉目前可用的结黄色种子系中黄色种皮的遗传。此外，“荚卷曲”也是在整合来自其它芸苔物种，诸如芥菜(juncea)和埃塞俄比亚芥(carinata)的黄色种皮颜色期间通常遇到的问题。
[0009]关于结暗色种子的欧洲油菜种质内的纤维有多少变化性可用非常少的信息，并且对已经开发出含有降低的抗营养因子(例如，纤维和多酚化合物)水平和升高的蛋白质水平的结暗色种子的芸苔尚未做出报告。
[0010]发明概述
[0011]本文中描述了芸苔(欧洲油菜)自由授粉栽培种(CL044864，CL065620)和杂种(CL166102H, CL121460H和CL121466H)，其包含提供已经显示影响营养价值的芸苔粗粉组成变化的新颖组合的种质。在一些实施方案中，包含本发明种质的芸苔植物可以生成具有例如蛋白质、纤维、和磷水平的新颖组合的种子，使得这些种子组分不依赖于种皮颜色。在特定的实施方案中，此类植物可以生成比标准芸苔类型具有更高的蛋白质和更低的纤维，以及与标准芸苔类型中的磷水平相似或比其更高的磷水平。在一些实施方案中，包含本发明种质的芸苔近交系和杂种在作为饲料或食物成分直接利用时和/或在作为原料利用以加工蛋白质分离物和浓缩物时可以提供营养增强的粗粉特性。此类种子可以是暗色的(例如，黑色、暗色、和杂色)或淡色的。
[0012]如此，本文中描述了芸苔种质，其可以用于以不依赖于种子颜色的方式获得具有期望的种子组成性状的芸苔植物。在一些实施方案中，可以使用包含此类种质的植物来生成具有期望的营养质量的芸苔粗粉。在特定的实施方案中，提供了包含本发明种质的近交芸苔系(及其植物)。在别的实施方案中，提供了具有包含本发明种质的近交芸苔植物的近交芸苔系(及其植物)作为亲本。本发明的芸苔变种包括例如但不限于:CL044864;CL065620;CL166102H;CL121460H;和 CL121466H。
[0013]本文中还描述了获自包含本发明种质的近交芸苔植物或杂种的植物商品。特定的实施方案包括获自此类近交芸苔植物或杂种的芸苔粗粉或种子。
[0014]还描述了用于改善芸苔粗粉的营养价值的方法。例如，描述了用于将芸苔粗粉组成特征的组合以不依赖于种子颜色的方式渐渗入芸苔种质中的方法。在特定的实施方案中，本发明的种质可以与以黄色种皮为特征的芸苔种质组合以生成如下的种质，其能够提供具有由每个种质赋予的期望特征的增强的芸苔粗粉。
[0015]从几个实施方案的以下详细描述看，上述和其它特征会变得更加显而易见，所述详细描述参照附图进行。
[0016]附图简述
[0017]图1包括具有暗色种皮颜色的几种芸苔变种的图像。
[0018]图2包括来自对某些欧洲油菜近交系和杂种的种子组成分析的数据。种子样品来自加拿大西部的重复试验。基于NIR预测种子组成数据，随后使用参照化学法证实。
[0019]发明详述
[0020]1.几个实施方案的概述
[0021]芸苔粗粉是油提取过程后剩余的芸苔种子级分。芸苔粗粉是蛋白质来源，因此在几种应用中利用，包括动物饲料配方和高价值蛋白质浓缩物和分离物的分离。在粗粉中终止的种皮，子叶和胚内的纤维限制单胃动物物种中芸苔粗粉的纳入率(inclusion rate),如此，芸苔粗粉通常不提供与从其它来源(例如大豆)制备的粗粉相同的营养价值。已经显示了与欧洲油菜(例如，芜青和芥菜)紧密相关的物种中的结黄色种子形式在其种子及随后的粗粉中具有较低水平的纤维。此观察结果已经激发尝试以黄色种子颜色依赖性方式将低种子纤维性状引入欧洲油菜中。所得结黄色种子欧洲油菜种质的开发已经证明了可以经由此方法在欧洲油菜中降低纤维。
[0022]在本发明前，不认为结暗色种子的芸苔变种会展现出与在结黄色种子变种中观察到一样低的种子纤维含量。此外，尚未描述含有降低水平的抗营养因子(例如，纤维和多酚化合物)，和升高的蛋白质和磷水平的结暗色种子芸苔系，其会代表改善的芸苔粗粉的来源。在一些实施方案中，本文中描述的芸苔种质提供不依赖于种皮颜色表达的几种关键增强粗粉组成属性的组合。在特定的实施方案中，从包含本发明种质的芸苔种子制备的芸苔粗粉可以实现较高的饮食纳入率，例如在猪和家禽饮食中。
[0023]可以使用本发明的种质(例如，经由选择性育种)来开发具有期望的种子组分性状及一种或多种别的期望性状(例如，改善的油组成、增加的油产量、经修饰的蛋白质组成、增加的蛋白质含量、疾病、寄生物抗性、除草剂抗性，等等)的芸苔。可以使用本发明的种质作为开始种质，可以对其引入种子组成的别的变化，使得可以开发出如下的芸苔系和杂种，其提供具有本文中描述的类型的改善升高的芸苔粗粉。
[0024]I1.缩写
[0025]ADF酸性去污剂纤维
[0026]ADL酸性去污剂木质素
[0027]AID表观回肠消化率
[0028]AME表观代谢能
[0029]BSC结黑色种子的芸苔
[0030]CP 粗制蛋白质百分比
[0031]DM 干物质浓度
[0032]ECM本发明的增强的芸苔粗粉
[0033]FAME脂肪酸/脂肪酸甲酯
[0034]GE 总能量[0035]HT “高温”加工
[0036]LT “低温”加工
[0037]NDF中性去污剂纤维
[0038]NMR核磁共振
[0039]NIR近红外线分光术
[0040]SAE芥子酸酯
[0041]SBM大豆粗粉
[0042]SER可溶性提取残留物
[0043]SID标准化回肠消化率
[0044]TAAA真氨基酸利用度
[0045]TDF总膳食纤维
[0046]TME真代谢能
[0047]WF 白色薄片(white flake)
[0048]II1.术语
[0049]回交:回交方法可以用于将核酸序列导入植物中。几十年以来已经广泛使用回交技术来将新性状引入植物中。Jensen, N.，Ed.Plant Breeding Methodology, John Wiley &Sons, Inc.，1988.。在一个典型的回交方案中，将感兴趣的初始品种(回归亲本)与携带要转移的感兴趣基因的第二品种(非回归亲本)杂交。然后，将来自此杂交的所得后代与回归亲本再次杂交，并重复该过程，直到获得如下的植物，其中在来自非回归亲本的转移基因夕卜，在转化植物中恢复回归植物的基本上所有期望的形态学和生理学特征。
[0050]芸苔油:芸苔油指自油菜籽的商业变种提取的油。为了生成芸苔油，通常将种子在谷物升运器分级并混合以生成一致得可接受的产品。然后，将混合的种子碾碎，并且通常用己烷提取油，随后精制。然后，可以出售所得的油供使用。通常以完全干燥的种子的百分比测量油含量，并且特定的油含量是不同芸苔变种特征性的。油含量可以使用多种分析技术或通过本领域技术人员广泛可用的其它方法容易地且常规测定，所述技术例如但不限于:NMR; NIR; Soxhlet 提取。参见Bailey, Industrial Oil&Fat Products (1996), 5th Ed.WileyInterscience Publication, New York, New York。通常，通过如下测定总脂肪酸的百分比组成，即从种子提取油样品，生成油样品中存在的脂肪酸甲酯，并使用气相层析分析样品中多种脂肪酸的比例。脂肪酸组成也可以是特定变种的区别性特征。
[0051]商业上有用的:如本文中使用的，术语“商业上有用的”指具有足够的植物活力和生育力，使得农民可以使用常规耕作设备生成植物系或杂种作物的植物系和杂种。在特定的实施方案中，可以从商业上有用的变种的植物或植物材料提取具有描述的组分和/或质量的植物商品。例如，包含期望的油组分的油可以使用常规的碾碎和提取设备从商业上有用的植物系或杂种的种子提取。在某些实施方案中，商业上有用的植物系是近交系或杂种系。“商业良种”系和杂种通常具有期望的特征；例如但不限于:改善的至少一种植物商品产率；成熟度；疾病抗性；和竖立性(standability)。
[0052]良种系:源自育种和选择卓越的农艺学性能的任何植物系。良种植物是来自良种系的任何植物。
[0053]增强的芸苔粗粉:如本文中使用的，术语“增强的芸苔粗粉”意指源自芸苔种子加工的具有增强的组成的芸苔粗粉，所述芸苔种子具有升高的蛋白质含量和降低的至少一些抗营养组分水平。本发明的增强的芸苔粗粉可以在本文中不同称为"ECM"、"结黑色种子的芸苔ECM〃、〃BSC ECM〃或"DAS BSCECM"。然而，本发明并不意图限于仅结黑色种子的芸苔的ECM种质。
[0054]实质性(essentially)衍生的:在一些实施方案中，植物、种子或其部分的操作可以导致创建实质性衍生的变种。如本文中所使用的，术语“实质性衍生的”遵循International Union for the Protection of New Varieties of Plants (UPOV)列出的约定:
[0055][A]在如下情况时变种应当视为实质性源自另一种变种(“初始变种”)，
[0056](i)它主要源自初始变种，或者源自如下的变种，该变种自身主要源自初始变种，同时保留源自初始变种的基因型或基因型组合的实质特征的表达；
[0057](ii)它与初始变种明显可区别；和
[0058](iii)出列源自起源作用的差异外，它在源自初始变种的基因型或基因型组合的实质特征的表达上与初始变种一致。
[0059]UPOVj Sixth Meeting with International Organizations, Geneva, Oct.30, 1992(联盟办公室准备的文件)。
[0060]植物商品:如本文中使用的，术语“植物商品”指自特定植物或植物部分(例如，包含本发明种质的植物，和获自包含本发明种质的植物的植物部分)生成的商品。商品可以例如但不限于:谷物；粗粉；草料；蛋白质；分离的蛋白质；面粉；油；碾碎的或完整的谷物或种子；包含任何粗粉、油、或碾碎的或完整的谷物的任何食物产品；或青贮饲料。
[0061]植物系:如本文中使用的，“系”指在个体间在至少一种性状方面展现出很少的遗传变异(例如，没有遗传变异)的植物组。近交系可以通过自花传粉和选择的几个世代或者备选地通过使用组织或细胞培养技术自单一亲本的营养繁殖创建。如本文中使用的，术语“栽培种”、“变种”和“类型”是同义的，并且这些术语指用于商业生产的品系。
[0062]植物材料:如本文中使用的，术语“植物材料”指完全或部分源自植物的任何加工的或未加工的材料。例如但不限于，植物材料可以是植物部分、种子、果实、叶、根、植物组织、植物组织培养物、植物外植体、或植物细胞。
[0063]稳定性:如本文中使用的，术语“稳定性”或“稳定的”指可遗传且仅有多个种子世代以基本上相同的水平维持的给定植物组分或性状。例如，可以以基本上相同的水平将稳定的组分维持至少三个世代。在此背景中，术语“基本上相同”在一些实施方案中可以指两个不同世代间维持于25%内；20%内；15%内；10%内；5%内；3%内；2%内；和/或1%内的组分，及完全在两个不同世代间维持的组分。在一些实施方案中，稳定的植物组分可以是例如但不限于油组分；蛋白质组分；纤维组分；色素组分；芥子油苷组分；和木质素组分。组分的稳定性可以受到一种或多种环境因素影响。例如，油组分的稳定性可以受到例如但不限于温度；位置；应激；和种植时间影响。预期在田间条件下具有稳定组分的植物的后续世代会以类似的方式生成植物组分，例如如上文所列的。
[0064]性状或表型:术语“性状”和“表型”在本文中可互换使用。
[0065]变种或栽培种:术语“变种”或“栽培种”在本文中指在繁殖时在其特征上独特的、稳定的且一致的用于商业生产的植物系。在杂种变种或栽培种的情况中，亲本系在其特征上是独特的、稳定的、且一致的。
[0066]除非另有指示，如本文中使用的，术语“一个”和“一种”指至少一种。
[0067]IV.以不依赖于种子颜色的方式提供期望种子组分性状的芸苔种质
[0068]在一个优选的实施方案中，本发明提供了芸苔种质，其可以用于以不依赖于种子颜色的方式获得具有期望的种子组分性状的芸苔植物。还提供了包含此种质的具体的例示性芸苔近交系和杂种。
[0069]一般地，认为芸苔油对于人和动物消费两者而言是非常健康的油。然而，芸苔种子的粗粉组分(其是提取油组分后留下)劣于大豆粗粉，这是由于其高纤维含量和降低的营养价值。在一些实施方案中，包含本发明种质的芸苔植物可以减轻或克服这些缺陷，并且可以提供芸苔粗粉作为高度营养的且经济的动物饲料来源。芸苔粗粉是芸苔油生成的副产物，如此通过本发明提供的芸苔粗粉通过容许此副产物与其它粗粉竞争使用来节约有价值的资源。
[0070]先前认为黄色芸苔种子颜色本身是有意义的，因为认为它对应于在提取油后获得的粗粉组分的改善的营养特征。一些实施方案可以第一次提供结暗色种子的(例如结暗色、黑色、和杂色种子)低纤维芸苔的种质，其也提供卓越的高油酸和低亚麻酸，所述种质也提供具有改善的营养特征(例如，改善的种子组分)的芸苔粗粉。在一些实施方案中，令人惊讶地，包含本发明种质的植物可以进一步提供与其它有价值的性状(例如但不限于:卓越的产率、高蛋白质含量、高油含量、和高油质量)组合的这些性状。特定的实施方案中的暗色皮的种子可以比通过标准结暗色种子的芸苔变种生成的种子具有薄得相当多的种皮。与标准结暗色种子的变种中的油和蛋白质水平相比，较薄的种皮可以导致粗粉中降低的纤维含量，和种子油和蛋白质含量的增加。因此，包含本发明种质的植物生成的暗色种子可以比通过标准的结暗色种子芸苔植物生成的种子中的观察结果在其种子中可以具有更高的油和蛋白质浓度。
[0071]在实施方案中，包含本发明种质的植物没有展现出实质性农艺学和/或种子限制。例如，此类植物可以与由标准芸苔变种展现的特征展现出至少一样有利的农艺学和/或种子质量(例如，萌发；早期季节活力；种子处理的效果；种子收获和可存储性)。在特定的实施方案中，包含本发明种质的植物也可以包含一种或多种由先前存在的芸苔近交系展现出的别的有利性状，例如但不限于有利的脂肪酸概况。
[0072]在实施方案中，包含本发明种质的植物可以生成包含几种营养特征中至少一种的种子。在特定的实施方案中，由此类芸苔植物生成的种子可以包含至少一种选自下组的营养特征:有利的油概况；高蛋白质含量；低纤维含量(例如ADF和NDF(包括低多酚含量))；(低纤维和高蛋白质赋予较高的代谢能)；高磷含量；和低芥子酸酯(SAE)含量。在某些实施方案中，“高”或“低”组分含量指由包含本发明种质的参照植物和生成的种子和由标准芸苔变种生成的种子之间的比较。如此，生成具有“低”纤维含量的种子的植物可以生成比在由标准芸苔变种生成的种子中观察到的纤维含量具有更低纤维含量的种子。并且，生成具有“高”蛋白质含量的种子的植物可以生成比在由标准芸苔变种生成的种子中观察到的蛋白质具有更高蛋白质含量的种子。
[0073]在一些实施方案中，可以生成由芸苔植物生成的油菜籽的实质上一致的集聚，所述芸苔植物包含至少一种选自上述组的营养特征。此类种子可以用于生成实质上一致的油菜植物田地。特定的实施方案提供了芸苔种子，其包含鉴定前述特征的组合。例如，种子的组合总油和蛋白质含量可以是种子的有用测量和独特特征。
[0074]一些实施方案提供了包含本发明种质的芸苔(例如结暗色种子的芸苔)，其能够具有NATRE0N型油概况的芸苔油。“NATRE0N型”或“NATRE0N样”油概况可以表示范围为例如68-80%; 70-78%; 71-77%;和72-75%的油酸含量，其中alpha亚麻酸含量低于例如3%。在特定的实施方案中，从包含本发明种质的芸苔植物获得的种子可以产生如下的油，其具有超过70%、超过71%、超过71.5%、和/或超过72%(例如，72.4%或72.7%)油酸，同时具有小于2.4%、小于2%、小于1.9%、和/或小于1.8%(例如1.7%)的亚麻酸含量。在别的实施方案中，然而，包含本发明种质的芸苔可以生成具有例如大于80%的油酸含量的油。在某些实施方案中，自包含本发明种质的芸苔生成的芸苔油可以是天然稳定的(例如，没有人工氢化)。芸苔油的脂肪酸含量可以依照已知的方法容易且常规测定。
[0075]如此，一些实施方案提供了包含油级分和粗粉级分的芸苔种子(例如，暗色芸苔种子)，其中所述油级分可以具有例如3%或更小(相对于种子的总脂肪酸含量)的α-亚麻酸含量和例如68%或更多(相对于种子的总脂肪酸含量)的油酸含量。根据定义，此类种子的芥酸(C22:l)含量也可以小于2%(按重量计)(与种子的总脂肪酸含量相比)。在具体的例子中，芸苔种子的油含量可以包含48%-50%种子(按重量计)。
[0076]纤维是植物细胞壁的组分，并且包括碳水化合物聚合物(例如，纤维素(线性葡萄糖聚合链))；半纤维素(例如半乳糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖的异质共聚物的分支链，其中附着酚分子)；和果胶(半乳糖醛酸、木糖、阿拉伯糖的水溶性聚合物，具有不同程度的甲基化)。纤维素还包含多酚聚合酶(例如，木质素样聚合物和缩合鞣质)。在理论上，ADF纤维由纤维素和木质素组成。缩合鞣质通常包含在ADF级分中，但是缩合鞣质含量不依赖于ADF而变化。比较而言，TDF是已经除去蛋白质、可溶物和淀粉的粗粉，并且由不溶性细胞壁组分(例如，纤维素、半纤维素、多酚和木质素)组成。
[0077]在特定的实施方案中，与芸苔变种相比，包含本发明种质的芸苔植物(例如结暗色种子芸苔植物)的种子可以具有降低的ADF。在具体的例子中，芸苔粗粉(全种子，除去油，按干重量计)的纤维含量可以包括例如但不限于:小于约18%ADF(例如，约18%ADF、约17%ADF、约 16%ADF、约 15%ADF、约 14%ADF、约 13%ADF、约 12%ADF、约 11%ADF、和约 10%ADF 和/ 或小于约 22%NDF (例如约 22.0%NDF,约 21%NDF,约 20%NDF,约 19%NDF,约 18%NDF,和约17%NDF)。
[0078]在特定的实施方案中，与标准结暗色种子芸苔变种相比，包含本发明种质的芸苔植物的种子可以具有增加的蛋白质含量。在具体的例子中，芸苔粗粉(全种子，除去油，按干重量计)的蛋白质含量可以包括例如但不限于大于约45%(例如约45%,约46%,约47%,约 48%,约 49%,约 50%,约 51%,约 52%,约 53%,约 54%,约 55%,约 56%,约 57%,和约 58%)粗制蛋白质。不同芸苔变种以特定蛋白质含量为特征。蛋白质含量(％氮X6.25)可以使用多种公知的且常规的分析技术例如NIR和Kjeldahl测定。
[0079]也可以使用磷含量来限定芸苔变种的种子、植物和品系。在一些实施方案中.此类芸苔变种可以生成芸苔粗粉(全种子，除去油，按干重量计)，其在与自标准芸苔变种生成的粗粉相比时具有增加的磷含量。例如，本发明的芸苔粗粉可以具有超过1.2%;超过
1.3%;超过1.4%;超过1.5%;超过1.6%,超过1.7%,和/或超过1.8%的磷含量。[0080]上述性状的各种组合也可以在几个实施例中提供的近交芸苔系和杂种中鉴定，并且以几个实施例中提供的近交芸苔系和杂种例示。这些品系例示可以使用本发明的种质来提供并获得极其多种有利芸苔特征和/或性状的各种新组合。例如，可以将包含本发明种质的近交芸苔系与包含期望特征和/或性状的另一芸苔系杂交以引起包含本发明种质的近交系特征性的期望种子组分。种子组分(例如纤维含量、芥子油苷含量、油含量，等等)和其它植物性状的计算可以使用本领域中已知的且行业中公认的技术获得。通过选择和繁殖包含亲本变种的期望特征和/或性状的来自杂交的后代植物，可以创建新的变种，其包含特征和/或性状的期望组合。
[0081]具有改善的营养特征的芸苔粗粉
[0082]一些实施方案提供了包含芸苔种子的粗粉，其中所述芸苔种子具有油和粗粉特征，如上文讨论的。例如，一些实施方案包括经己烷提取的、风干的芸苔粗粉(白色薄片或WF)，其包含特征(例如种子组分)的新颖组合，如上文讨论的。特定的实施方案包括包含自包含本发明种质的植物生成的芸苔种子的粗粉,和含有包含本发明种质的植物后代的种子的粗粉。
[0083]在一些实施方案中，包含本发明种质的芸苔近交系和杂种在作为饲料或食物成分直接利用时和/或作为原料利用用于加工蛋白质分离物和浓缩物时可以提供营养增强的粗粉特性。例如，此类芸苔近交系和杂种可以提供优于标准芸苔粗粉的动物饲料。在一些实施方案中，可以利用芸苔粗粉组分(和包含它们的动物饲料)来为单胃动物(例如猪和家禽)提供良好的营养 。
[0084]在一些实施方案中，芸苔粗粉组分(和包含它们的动物饲料)可以进一步利用以为反刍类动物(例如，牛动物、绵羊、山羊和亚目反刍亚目(Ruminantia)的其它动物)提供良好的营养。反刍类的喂养呈现特殊的问题和特殊的机会性。特殊的机会性源自反刍类利用不溶性纤维素纤维的能力，所述不溶性纤维素纤维可以通过这些动物瘤胃中的某些微生物分解，并且一般是单胃哺乳动物诸如猪不可消化的。特殊的问题源自某些饲料抑制瘤胃中纤维消化的趋势，以及源自瘤胃限制某些饲料的一些组分，诸如脂肪和蛋白质的利用的趋势。
[0085]油提取性芸苔种子是一种在动物饲料中使用的高质量蛋白质的潜在来源。在油提取后，与大豆粗粉(其目前对于饲料和食物目的是广泛优选的)中的约44-48%相比，商品芸苔粗粉包含约37%蛋白质。芸苔中含有的蛋白质富含甲硫氨酸，并且含有足够数量的赖氨酸，这两者是大多数谷类和含油种子蛋白质中的限制性氨基酸。然而，使用芸苔粗粉作为蛋白质来源在某些动物饲料中是有些有限的，因为它含有不想要的组成诸如纤维、芥子油苷、和酌类(phenolics)。
[0086]衍生芸苔的油菜籽的一种营养方面是其高(30-55ymol/g)水平的芥子油苷，即一种基于硫的化合物。在碾碎芸苔叶或种子时，通过黑芥子酶对芥子油苷的作用生成异硫氰酸酯。这些产物抑制甲状腺的甲状腺素合成，并且具有其它抗代谢效应。Paul etal.(1986)Theor.Appl.Genet.72:706-9。如此，对于人食物使用，例如，应当降低或消除源自油菜籽粗粉的蛋白质的芥子油苷含量以提供产物安全性。
[0087]在种子中具有例如有利的油概况和含量及低芥子油苷含量的改善的芸苔种子会显著降低氢化的需要。例如，此类油的较高的油酸和较低α-亚麻酸含量可以赋予升高的氧化稳定性，如此降低氢化和生成反式脂肪酸的需要。种子芥子油苷的降低会显著降低油中残留的硫含量。硫损害通常用于氢化的镍催化剂。Koseoglu et al., Chapter8, in Canolaand Rapeseed:Production, Chemistry, Nutrition, and Processing Technology, Ed.Shahidi, Van Nostrand Re inhold, N.Y., 1990, pp.123-48。另外，来自具有低种子芥子油苷的芸苔变种的油对于加氢会是不太昂贵的。
[0088]芸苔粗粉中的酚化合物赋予苦的口味，并且认为必然与最终蛋白质产物中暗色颜色有关。种子壳(其在标准芸苔粗粉中大量存在)对于人和其它单胃动物是难消化的，而且还提供难看的异质产物。
[0089]通过包含本发明种质的芸苔植物生成的种子的粗粉组分可以具有例如但不限于:高蛋白质；低纤维；较高的磷；和/或低SAE。不溶性纤维和多酚是抗营养的，并且损害蛋白质和氨基酸消化。如此，具有至少一种选自下组的种子组分特征的芸苔粗粉和包含芸苔粗粉的动物饲料在一些应用中可以是期望的:降低的纤维含量、增加的蛋白质含量、降低的多酚含量和增加的磷含量。
[0090]在具体的例子中，芸苔粗粉(无油，以干物质计)可以包含of至少约45%(例如约45%,约 46%,约 47%,约 48%,约 49%,约 50%,约 51%,约 52%, abo 约 53%,约 54%,约 55%,约56%，约57%，和约58%)的蛋白质含量。
[0091]与查找芸苔系相比，包含本发明种质的芸苔变种可以具有良好的产率，并且生成具有低得多的酸性去污剂纤维(ADF)的种子。在一些实施方案中，可以使用对由包含本发明种质的植物变种生成的种子的组分测定的任何经验数值，以限定植物变种的植物、种子、和油。在一些此类例子中，可以使用特定数目作为端点以限定高于、低于任何测定数值或者任何测定数值之间的范围。上文列出了油特征和其它种子组分的例示性范围。品系及其植物的种子也可以以此类范围的组合限定。例如，例如，与特征性纤维水平、多酚水平、芥子油苷水平、蛋白质水平、和磷水平一起在上文讨论的油特征可以用于限定特定品系及其种子。
[0092]不是所有前述特征(例如种子组分特征)是限定一些实施方案的品系和种子需要的，但是可以使用别的特征来限定此类品系和种子(例如但不限于代谢能、消化能量、生物能、和净能)。
[0093]V1.包含以不依赖于种子颜色的方式赋予期望的种子组分性状的种质的植物
[0094]可以将包含本发明种质的特定芸苔近交系和杂种的期望性状转移至其它类型的芸苔(经由常规的育种等等)，例如芜青和芥菜，所得的植物生成具有不依赖于种子颜色表达的期望特征(例如种子组分特征)的种子。如此，已经接受包含本发明种质的特定芸苔近交系或杂种的一种或多种期望性状转移的芸苔变种可以生成具有结黄色种子或结暗色种子的具有期望特征的种子。此类新的或经修饰的芸苔变种的粗粉和种子可以具有降低的种子纤维水平、升高的蛋白质水平、升高的磷水平、和/或降低的多酚水平。
[0095]一些实施方案不仅包括包含如本文中描述并例示的种质的芸苔的黄色和暗色种子，而且还包括自此类种子种植或以其它方式生成的植物，和主题芸苔植物的可再生细胞的组织培养物。例示性品系和杂种在没有遗传工程化及在没有诱变的情况中获得，由此证明所述种质在生成新的且经修饰的芸苔变中的效用。
[0096]在一些特定的实施方案中，提供了特定的例示性芸苔近交系和杂种。作为本公开内容的一部分，已经将 CL065620, CL044864, CL121460H, CL166102H 和 CL121466H 之每种的至少2500个种子保藏美国典型培养物保藏中心(ATCC)，Rockville, Md.20852，并且对公众可获得，服从专利权，但是在其它方面不受限制(除了 37C.F.R.§ 1.808(b)明确允许的那些限制外)。保藏物分别称为 ATCC 保藏物 N0.PTA-11697，PTA-11696，PTA-11698，PTA-12570，PTA-11699，保藏日为 2011 年 2 月 22 日(对于 PTAl 1696 到 PTAl 1699)和 2012 年 2 月21日(对于PTA-12570)。如上文所列出的，会将保藏物维持于ATCC保藏中心(其是公共保藏中心)一段30年的时间，或者在最近的要求后5年，或者持续专利的有效期，以较长者为准，并且保藏物在其在所述期间变得不能存活时会进行替换。
[0097]一些实施方案包括本文中公开的任何芸苔变种的种子。一些实施方案还包括由此类种子生成的芸苔植物，以及此类植物的可再生细胞的组织培养物。还包括从此类组织培养物再生的芸苔植物。在特定的实施方案中，此类植物可以能够表达例示性变种的所有形态学和生理学特性。特定的实施方案的芸苔植物可以已经鉴定自保藏种子培养的植物的生理学和/或形态学特征。
[0098]还提供了在上文描述的种子的后代的至少一个亲本中使用本发明的种质(例如，如本文中提供的例示性芸苔近交系和杂种中找到的)进行杂交的方法。例如，一些实施方案包括具有本文中例示的任何植物作为一个或两个亲本的F1杂种欧洲油菜植物。别的实施方案包括通过此类F1杂种生成的欧洲油菜杂种。在特定的实施方案中，用于生成F1杂种欧洲油菜种子的方法包括将例示性植物与不同近交植物芸苔植物杂交，并且收获所得的杂种种子。本发明的芸苔植物(例如,亲本芸苔植物、和通过用于生成F1杂种的此类方法生成的芸苔植物)可以是雌性或雄性植物。
[0099]在一些实施方案中，可以通过杂交本发明的植物与具有经修饰的特征(例如高油和蛋白质水平)的另一个品系进一步修饰和/或改善芸苔植物的特征(例如，油和蛋白质水平和/或概况)。同样地，可以通过注意考虑亲本植物改善其它特征。包含本发明种质的芸苔系对于将其期望的种子组分特征以不依赖于种子颜色的方式杂交到其它油菜或芸苔系中可以是有益的。本发明的种质容许通过常规植物育种技术，包括异花传粉和选择后代将这些性状转移至相同物种内的其它植物中。在一些实施方案中，可以使用牵涉花粉转移和选择的常规植物育种技术在物种间转移期望的性状。参见例如Brassica crops and wild allies biology and breeding, Eds.Tsunada et al., JapanScientific Press, Tokyo(1980) ;Physiological Potentials for Yield Improvementof Annual Oil and Protein Crops, Eds.Diepenbrock and Becker,BlackwellWissenschafts-Verlag Berlin,Vienna(1995);Canola and Rapeseed, Ed.Shahidi, VanNostrand ReinholdjN.Y.(1990);and Breeding Oilseed Brassicasj Eds.Labana etal.,Narosa PublishingHousej New Dehli (1993)。
[0100]在一些实施方案中，用于以不依赖于种子颜色的方式转移至少一种期望的种子组分特征的方法包括在种间杂交后，将F1世代的成员自花传粉以生成F2种子。然后，可以进行回交以获得展现出期望的种子组分特征的品系。另外，原生质体融合和核移植方法可以用于将性状从一种物种转移至另一种。参见例如，Ruesink，“Fusion of Higher PlantProtoplasts, ” Methods in Enzymologyj Vol.LVI11，Eds.Jakoby and Pastan，AcademicPress,Inc., New York, N.Y.(1979)，and the references cited therein;and Carlson etal.(1972)Proc.Natl.Acad Sc1.USA 69:2292。[0101]获得并生成包含本发明种质的例示性芸苔系，现在可以通过如上文列出的常规植物育种技术将暗色种皮颜色与期望的种子组分特征一起容易地转移到其它芸苔物种中。例如，现在可以将暗色种皮颜色与期望的种子组分特征一起容易地转移到商品化芜青变种，例如但不限于Tobin, Horizon和Colt。应当理解,暗色种子颜色不必与种子的其它特征一起转移。
[0102]给予一种例示性的变种作为起始点，双链技术人员在不偏离本发明范围的前提下可以以多种方式操作该变种提供的特定益处。例如，可以通过常规植物育种技术将例示性变种中存在的种子油概况转移至农艺学期望的欧洲油菜变种中，所述常规植物育种技术牵涉异花传粉和选择后代，例如其中将例示性变种的种质掺入其它农艺学期望的变种中。
[0103]特定的实施方案可以包括欧洲油菜的例示性变种，及已经实质性源自至少一种例示变体的实质性衍生的变体。另外，本发明的实施方案可以包括至少一种例示变体的植物、此类实质性衍生变体的植物、和/或从自其生成的植物或组织(包括花粉、种子和细胞)再生的油菜植物。
[0104]可以选择能够再生的植物材料，例如种子、小孢子、胚珠、花粉、营养部分、和小孢子。一般地，此类植物细胞可以选自任何芸苔变种，包括那些具有期望农艺学性状的。
[0105]再生技术是本领域中已知的。最初可以从选择的植物或变种选择能够再生的细胞(例如种子、小孢子、胚珠、花粉、和营养部分)。任选地，可以将这些细胞进行诱变。然后，可以使用基于细胞类型(并且不论它们是否诱变)的再生、传粉、和/或生长技术从细胞形成植物。植物或种子或其部分的操作可以导致实质上衍生的变体的创建。
[0106]在一些实施方案中，可以将包含本发明种质的植物展现的期望种子组分特征以不依赖于种子颜色的方式导入包含多个别的期望性状的植物中，以生成具有期望的种子组分特征和多种期望性状两者的植物。将期望的种子组分特征以不依赖于种子颜色的方式导入包含一种或多种期望性状的植物中的方法称为这些性状的“叠加(stacking) ”。在一些例子中，期望种子组分特征与多种期望性状的叠加可以导致种子组分特征的进一步改善。在一些例子中，期望种子组分特征与多种期望性状的叠加可以生成如下的芸苔植物，其在所述多种期望性状中的一种或多种(例如所有)外还具有期望的种子组分特征。
[0107]对于与期望的种子组分特征的组合可以期望的性状的例子包括例如但不限于:植物疾病抗性基因(参见例如Jones等(1994) Science266:789 (对叶霉菌(Cladosporiumfulvum)的抗性的番爺 Cf-9 基因)；Martin 等(1993) Science262:1432 (对 丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)的抗性的番爺 Pto 基因)；及 Mindrinos 等(1994)Cell78:1089(对丁香假单胞菌的抗性的RSP2基因))；赋予对有害生物的抗性的基因；苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)蛋白、其衍生物或以其为模型的合成多肽(参见例如Geiser等(1986) Gene48:109 (Bt δ -内毒素基因；编码δ -内毒素基因的DNA分子可以例如以ATCC保藏号40098; 67136; 31995;和31998购自美国典型培养物保藏中心(Manassas, VA)));凝集素(参见例如 Van Damme 等(1994)Plant Molec.Biol.24:25(君子兰(Clivia miniata)甘露糖结合凝集素基因))；维生素结合蛋白，例如亲合素(参见国际PCT公开文本US93/06487(使用亲合素和亲合素同系物作为针对昆虫有害生物的杀幼虫剂))；酶抑制剂；蛋白酶或蛋白水解酶抑制剂(参见例如Abe等(1987) J.Biol.Chem.262:16793 (稻半胱氨酸蛋白酶抑制剂);Huub 等(1993) Plant Molec.Biol.21:985(烟草蛋白酶抑制剂I;及美国专利N0.5，494，813);淀粉酶抑制剂(参见 Sumitani 等(1993) Biosc1.Biotech.Biochem.57:1243 (硝抱链霉菌(Streptomycesnitrosporeus) alpha-淀粉酶抑制剂))；昆虫特异性激素或信息素，例如脱化类固醇(ecdysteroid)或保幼激素、其变体、基于其的模拟物，或其拮抗剂或激动剂(参见例如Hammock等(1990) Nature344:458 (保幼激素的灭活剂))；昆虫特异性肽或神经肽，其破坏受到影响的有害生物的生理学(参见例如Regan(1994) J.Biol.Chem.269:9(昆虫利尿激素受体)；Pratt 等(1989) Biochem.Biophys.Res.Comm.163:1243 (来自太平洋折翅爐(Diploptera puntata)的抑咽侧体神经肽(allostatin));美国专利 N0.5，266，317 (昆虫特异性麻痹性神经毒素))；在自然界中由蛇、黄蜂、或其它生物体生成的昆虫特异性毒液(参见例如Pang等(1992)Genell6:165(蝎昆虫毒性肽))；负责超积累单萜、倍半萜、类固醇、氧肟酸、类苯丙烷衍生物或另一种具有杀虫活性的非蛋白质分子的酶；牵涉生物学活性分子修饰(包括翻译后修饰)的酶，例如糖酵解酶；蛋白水解酶；脂肪分解酶；核酸酶；环化酶；转氨酶；酯酶；水解酶；磷酸酶；激酶；磷酸化酶；聚合酶；弹性蛋白酶；几丁质酶；或葡聚糖酶，无论是天然的还是合成的(参见国际PCT公开文本W093/02197(纤维二糖酶(callase)基因)；含有几丁质酶编码序列的DNA分子(例如来自ATCC,在保藏号Nos.39637 和 67152 下);Kramer 等(1993) Insect Biochem.Molec.Biol.23:691 (烟草天蛾幼虫(hornworm)几丁质酶)；及 Kawalleck 等(1993)Plant Molec.Biol.21:673 (欧芹ubi4-2多聚泛素基因)；刺激信号转导的分子(参见例如Botella等(1994)PlantMolec.Biol.24:757( I丐调蛋白)；及 Griess 等(1994)Plant Physiol.104:1467(玉米隹丐调蛋白)；疏水矩肽(hydrophobic moment peptide)(参见例如国际PCT公开文本TO95/16776 (Tachyplesin的肽衍生物，其抑制真菌植物病原体)；和国际PCT公开文本TO95/18855(赋予疾病抗性的合成的抗微生物肽))；膜通透酶、通道形成剂、或通道阻断剂(参见例如Jaynes等(1993)Plant Sci89:43 (使转基因植物对青枯假单胞菌(Pseudomonas solanacearum)有抗性的杀菌妝-β 溶胞妝类似物(cecropin-β Iyticpeptide analog);病毒侵入蛋白或自其衍生的复合毒素(参见例如Beachy等(1990)Ann.rev.Phytopathol.28:451 (针对苜蓿花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草线条病毒、马铃薯X病毒、马铃薯Y病毒、烟草蚀刻病毒、烟草脆裂病毒和烟草花叶病毒的外壳蛋白介导的抗性));昆虫特异性抗体或自其衍生的免疫毒素(参见例如Taylor等，摘要#497，SeventhInt’l Symposiumon Molecular Plant-Microbe Interactions(Edinburgh,Scotland)(1994)(经由生成单链抗体片段进行的酶促失活)；病毒特异性抗体(参见例如Tavladoraki等(1993) Nature366:469 (用于针对病毒攻击提供保护的重组抗体基因))；在自然界由病原体或寄生物生成的发育阻滞蛋白(developmental-arrestive protein)(参见例如Lamb等(1992)Bio/TechnologylO:1436(真菌内α-1，4-D-多聚半乳糖醛酸酶通过溶解植物细胞壁同-et-1，4-D-半乳糖醒酸酶(galacturonase)来促进真菌定殖(colonization)和植物营养物释放；Toubart等(1992)Plant J.2:367(内多聚半乳糖醒酸酶抑制蛋白))；和在自然界由植物生成的发育阻滞蛋白(参见例如Logemann等(1992)Bio/Technology 10:305(大麦核糖体失活基因，其提供升高的对真菌疾病的抗性))。
[0108]对于与期望的种子组分特征的组合可以期望的性状的其它例子包括例如但不限于:赋予对除草剂的抗性的基因(Lee等(1988)EMBO J.7:1241 (突变体 ALS 酶)；Miki 等(1990) Theor.Appl.Genet.80:449 (突变体 AHAS 酶)；美国专利N0.4，940，835和6，248，876 (提供草甘膦抗性的突变体5-烯醇丙酮酰莽草酸(enolpyruvylshikimate)-3-憐酸合酶(EPSP)基因)；美国专利 N0.4, 769, 061 和 ATCC保藏号39256 (aroA基因)；草甘膦乙酰基转移酶基因(草甘膦抗性)；来自链霉菌属物种(Streptomyces species),包括吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)和绿色产色链霉菌(Streptomyces viridichromogenes)的其它膦酰基化合物)，诸如那些记载于欧洲申请 N0.0 242 246 和 DeGreef 等(1989) Bio/Technology7:61 的(提供草甘膦抗性的草铵膦膦丝菌素乙酰基转移酶(PAT)基因)；吡啶氧基或苯氧基丙酸和环己酮(草甘膦抗性)；欧洲专利申请N0.0 333 033和美国专利N0.4，975，374(提供对除草剂诸如L-膦丝菌素的抗性的谷氨酰胺合成酶基因)!Marshall等(1992)Theor.Appl.Genet.83:435 (Accl-Sl, Accl_S2,和Accl_S3基因，其提供对苯氧基丙酸和环己酮，诸如稀禾定(sethoxydim)和吡氟氯禾灵(haloxyfop)的抗性)；W02005012515 (提供草甘膦抗性的GAT基因)；W02005107437 (赋予对2，4_D、fop和吡啶基氧基生长素除草剂的抗性的基因)；和抑制光合作用的除草剂，诸如三嗪(psbA和gs+基因)或苯基氰(腈水解酶基因)(参见例如Przibila等(1991) Plant Cell3:169 (突变体psbA基因)；腈水解酶基因的核苷酸序列披露于美国专利N0.4，810，648，且含有这些基因的DNA分子以ATCC保藏号53435，67441，和 67442 可获得；及 Hayes 等(1992) Biochem.J.285:173 (谷胱甘肽 S-转移酶))。
[0109]对于与期望的种子组分特征的组合可以期望的性状的其它例子包括例如但不限于:赋予或促成增值(value-added)性状的基因，例如，经修饰的脂肪酸代谢(参见例如Knultzon 等(1992) Proc.Natl.Acad.Sc1.U.S.A.89:2624(增加植物的硬脂酸含量的硬脂酰-ACP去饱和酶的反义基因))；降低的肌醇六磷酸盐含量(参见例如Van Hartingsveldt等(1993)Genel27:87(黑曲霉(Aspergillus niger)肌醇六磷酸酶基因增强肌醇六磷酸的分解，对经转化的植物添加更多游离的磷酸根);及Raboy等(1990)Maydica35:383 (与负责具有低水平的肌醇六磷酸的玉米突变体的等位基因有关的DNA的克隆和再导入))；和例如通过用编码改变淀粉分支样式的酶的基因转化植物来实现的经修饰的碳水化合物组成(参见例如 Shiroza 等(1988) J.Bacteol.170:810(链球菌(Streptococcus)突变体果糖基转移酶基因);Steinmetz 等(1985) Mol.Gen.Genet.20:220 (果聚糖鹿糖酶(Ievansucrase)基因);Pen 等(1992) Bio/TechnologylO: 292 ( α -淀粉酶);Elliot 等(1993) Plant Molec.Biol.21:515(番茄转化酶基因);Sogaard 等(1993) J.Biol.Chem.268:22480 (大麦 α-淀粉酶基因)；及Fisher等(1993) Plant Physiol.102:1045 (玉米胚乳淀粉分支酶II))。
[0110]在此通过提及将本文中引用的所有参考文献，包括出版物、专利、和专利申请以它们不与本公开内容的明确详细不一致的程度收录，并且因此以与每篇参考文献个别且明确指示通过提及收录并完整列出相同的程度收录。本文中讨论的参考文献仅提供其在本申请提交日前的公开内容。本文中没有内容应当解释为承认凭借在先发明，发明人没有资格早于此类公开内容。
[0111]提供以下实施例以例示要求保护的发明的某些特定特征和/或方面。这些实施例不应解释为将公开内容限于描述的具体特征或方面。实施例
[0112]实施例1:增强的芸苔粗粉(ECM)和常规芸苔粗粉的平均营养物组成和数值。
[0113]在2009年和2012年之间进行几个分析性和功能性研究以评估本发明的ECM系和杂种的营养物组成和价值。对完整的未加工的种子、部分加工的粗粉和完全加工的粗粉进行测试以解释对营养物组成和数值的可能的加工影响。在伊利诺斯州、密苏里州、乔治亚州和马尼托巴省的大学分析样品。使用此组成信息以使用标准预测方程评估增强的芸苔粗粉对常规芸苔粗粉的能量值。伊利诺斯州和乔治亚州的大学完成对样品生物学评估家禽能量和氨基酸消化率。在伊利诺斯州大学进行对样品生物学评估猪能量和氨基酸消化率。表1中显示了 ECM系(范围或平均值)和常规芸苔粗粉之间的汇总营养物组成差异。在随后的实施例中概述了相关规程和研究的详情。
[0114]表1:ECM和常规芸苔粗粉的平均营养物组成。
[0115]
【权利要求】
1.一种芸苔种质，其对芸苔种子赋予至少约45%粗制蛋白质含量和不超过约18%酸性去污剂纤维，如通过以无油干物质计的参照化学测定的。
2.权利要求1的芸苔种子，其进一步包含以无油干物质计至少约45%粗制蛋白质含量。
3.权利要求1的芸苔种子，其进一步包含以无油干物质计不超过约18%酸性去污剂纤维含量。
4.权利要求1的芸苔种子，其进一步包含至少一种选自下组的别的性状:降低的多酚含量和增加的磷含量。
5.权利要求1的芸苔种子，其进一步包含至少两种选自下组的别的性状:降低的多酚含量和增加的磷含量。
6.包含权利要求1的芸苔种质的芸苔植物。
7.权利要求6的芸苔植物，其进一步包含至少一种选自下组的别的性状:降低的多酚含量和增加的磷含量。
8.权利要求6的芸苔植物，其进一步包含至少两种选自下组的别的性状:降低的多酚含量和增加的磷含量。
9.权利要求6的芸苔植物，其中所述芸苔植物生成包含至少43%油的种子。
10.权利要求6的芸苔植物，其中所述芸苔植物生成包含降低的抗营养组分的种子。
11.包含权利要求6的芸苔植物的田地，其中所述芸苔植物产生每公顷至少1700千克种子的平均值。
12.权利要求6的芸苔植物，其中所述芸苔植物选自下组:CL065620，CL044864,CL121460H, CL166102H和 CL121466H。
13.权利要求6的芸苔植物，其中所述植物是CL044864。
14.权利要求6的芸苔植物，其中所述植物在没有遗传工程化或诱变的情况下生成。
15.权利要求6的芸苔植物，其中所述芸苔植物生成包含以无油干物质计超过1.3%的磷含量的种子。
16.由权利要求6到15的芸苔植物生成的种子。
17.自权利要求16的种子培养的后代植物。
18.由权利要求6的芸苔植物生成的种子，其中所述种子在选自下组的ATCC保藏号下可获得:PTA11696, PTAl 1697, PTAl 1698, PTAl 1699 或 PTA-12570。
19.自权利要求16的一个或多个种子生成的芸苔粗粉。
20.权利要求19的芸苔粗粉，其中所述芸苔粗粉具有至少2200kcal/kg的家禽均值真代谢能。
21.权利要求19的芸苔粗粉，其中所述芸苔粗粉具有至少1800kcal/kg的猪均值净能。
22.权利要求19的芸苔粗粉，其中所述芸苔粗粉在猪中具有有利的氨基酸消化率概况(profile)。
23.权利要求19的芸苔粗粉，其中所述芸苔粗粉在家禽中具有有利的氨基酸消化率概况。
24.权利要求19的芸苔粗粉，其中所述芸苔粗粉包含占大豆粗粉(10%含湿量)氨基酸消化率至少约90%的氨基酸消化率。
25.权利要求19的芸苔粗粉，其中所述芸苔粗粉包含占大豆粗粉消化能量含量或代谢能含量至少约80%的消化能量含量或代谢能含量。
26.一种在生成粗粉方面遗传稳定的芸苔种子，其包含至少约45%粗制蛋白质含量和不超过约18%酸性去污剂纤维，如通过以无油干物质计的参照化学测定的，其中所述芸苔种子自良种芸苔栽培种生成。
27.权利要求26的芸苔种子，其进一步包含以无油干物质计至少约45%粗制蛋白质含量。
28.权利要求26的芸苔种子，其进一步包含不超过约18%酸性去污剂纤维含量。
29.权利要求26的芸苔种子，其中所述芸苔种子对于包含至少一种选自下组的别的性状是遗传稳定的:降低的多酚含量和增加的磷含量。
30.权利要求27的芸苔种子，其中所述芸苔种子对于包含至少两种选自下组的别的性状是遗传稳定的:降低的多酚含量和增加的磷含量。
31.自权利要求26到30中任一项的种子生成的芸苔粗粉。
32.—种以不依赖于种皮颜色的方式将至少一种选自下组的期望性状引入芸苔栽培种中的方法:高蛋白质含量、低ADF含量、高磷含量、和低多酚，其中所述方法包括: 将权利要求7的植物与第二不同芸苔栽培种植物杂交以生成Fl后代植物； 选择一个或多个具有所述期望性状的后代植物以生成选择的后代植物； 将所述选择的后代植物与权利要求7的植物回交以生成回交后代植物； 选择回交后代植物以生成选择的回交后代植物，所述回交后代植物具有所述期望的性状和所述第二不同芸苔栽培种的生理学和形态学特征；并 将所述回交和选择步骤重复三次或更多次以生成包含所述期望性状的近交选择的第四或更高代的回交后代植物。
33.依照权利要求32的方法，其中所述期望的性状包含高蛋白质含量、低ADF含量、高磷含量、和低多酹含量。
34.通过依照权利要求32的方法生成的植物。
35.从权利要求6到10、13到15、17或34的芸苔植物获得的植物商品。
36.一种自芸苔种子直接可获得的增强的芸苔粗粉，所述芸苔种子包含至少约45%粗制蛋白质含量和不超过约18%酸性去污剂纤维，如通过以无油干物质计的参照化学测定的。
37.权利要求36的增强的芸苔粗粉，其进一步包含至少约45%粗制蛋白质含量。
38.权利要求36的增强的芸苔粗粉，其进一步包含不超过约18%酸性去污剂纤维含量。
39.权利要求36的增强的芸苔粗粉，其中所述芸苔种子对于包含至少一种选自下组的别的性状是遗传稳定的:降低的多酚含量和增加的磷含量。
40.权利要求36的增强的芸苔粗粉，其中所述芸苔种子对于包含至少两种选自下组的别的性状是遗传稳定的:降低的多酚含量和增加的磷含量。
41.权利要求36的增强的芸苔粗粉，其中所述芸苔种子进一步包含降低的抗营养因子水平。
42.权利要求36的增强的芸苔粗粉，其中所述增强的芸苔粗粉可以替换另一不同的常规芸苔粗粉或大豆粗粉作为家禽、猪、或反刍类饮食中的蛋白质或能量补充物。
43.权利要求6的芸苔植物，其中所述植物是CL166102H。
44.选自下组的芸苔植物:C`L065620, CL044864, CL121460H, CL166102H 和 CL121466H。
【文档编号】A23J1/14GK103491798SQ201280019719
【公开日】2014年1月1日 申请日期:2012年2月21日 优先权日:2011年2月22日
【发明者】T.J.库比克, G.R.金格拉, V.L.里普利, M.E.比艾思, T.G.帕特森 申请人:农业基因遗传学有限公司