一株能生物合成1,2-二氢睾内酯(testololactone)的简单青霉及合成方法
【专利摘要】本发明公开了一株简单青霉(Penicillium simplicissimum)WY134-2及用该菌发酵转化C21或C19甾体化合物生产1,2-二氢睾内酯(testololactone)的方法。该菌株在2013年8月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC NO.8017。生产方法为：采用简单青霉(Penicillium simplicissimum)WY134-2为菌种，经过一级种子培养和二级发酵扩大培养，在菌体发酵液中投入粉碎的甾体化合物，经酸化、有机溶剂萃取、硅胶柱层析分离得到产物1,2-二氢睾内酯，产率为56-96％。该方法简单方便、条件温和、副产物少，并且不对环境产生污染。CGMCC No801720130812
【专利说明】-株能生物合成1,2-二氢睾内酯（testololactone)的简 单青霉及合成方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物工程领域，本发明涉及一种生物合成1，2_二氢睾内酯 (testololactone)的菌株及合成方法。
【背景技术】
[0002]
【权利要求】
1. 简单青霉（Penicillium simplicissimum)WY134-2,保藏于中国微生物菌种保藏管 理委员会普通微生物中也，保藏号；CGMCC No. 8017。
2. 权利要求1所述菌株的发酵培养方法，其包括W下步骤： 1) 种子培养 将简单青霉（Penicillium simplicissimum)WY134-2接入灭菌后的种子液体培养基 中，于30°C，200?300r / min培养16h?20h，得到种子液， 液体培养基的配制如下；葡萄糖30g / L玉米浆干粉lOg / LNaN〇32g / L，KC10. 5g / L，K2HPO4 ? 3H2〇2g / L，K&POJg / L，M拆〇4 ? ?&00. 5g / L，FeS〇4 ? ?&00. 02g / L，抑6. 2 ; 2) 发酵培养 将步骤（1)得到的种子液体按接种量3?5%接种到发酵培养基中进行发酵培养，培养 条件；3(TC，摇床转速200?25化/ min,发酵时间16?20h，即得到菌体的发酵液， 所述发酵培养基的成分为：葡萄糖30g / L玉米浆干粉lOg / LNaN〇32g /心 KC10. 5g / L，K2HP〇4*3H2〇2g / L'K&POJg / L，M拆〇4*7&00. 5g / L，FeS〇4*7H2〇0. 02g / L,抑8. 0。
3. -种制备1，2-二氨睾内醋（testololactone)的生物合成方法，其特征是，W具有 4-帰-3-丽或5-帰-3-醇的C21和C19类留体化合物为底物，利用权利要求1所述简单青 霉菌株通过如下步骤实现1,2-二氨睾内醋的制备；将1?3g / L留体底物加入到简单青 霉菌发酵液中，于28?3rC，250r / min条件下，转化24?4她终止反应，加入浓盐酸调 节抑至1. 0?2. 0,4(TC，振荡2化，用己酸己醋萃取发酵液数次，合并萃取液，干燥，减压浓 缩，浓缩后采用娃胶色谱柱分离得到1,2-二氨睾内醋。
4. 根据权利要求3所述的生物合成方法，其特征在于，所述的C21或C19留体底物为具 有如下结构通式和结构式的化合物：
其中Ri为撰基、轻基或目-己醜基，R2为撰基或目-己醜基。
【文档编号】C12P33/20GK104419646SQ201310400600
【公开日】2015年3月18日 申请日期:2013年9月4日 优先权日:2013年9月4日
【发明者】吴洽庆, 王玉, 杨贝贝, 陈曦, 朱敦明, 马延和 申请人:中国科学院天津工业生物技术研究所