抗酸染色液质控品制备方法
【专利摘要】本发明涉及生物医疗【技术领域】，提供一种抗酸染色液质控品制备方法，包含以下步骤：将H37Ra结核杆菌作为抗酸染色阳性菌株，与抗酸染色阴性菌株分别装在2支试管中，标为试样1和试样2，放在冰箱中；将试样1的H37Ra结核杆菌从培养基上用生理盐水洗下，取H37Ra结核杆菌菌液加入无菌组织研磨器中进行研磨，制成分支H37Ra结核杆菌；向试样2中加入生理盐水，将抗酸染色阴性菌株溶解，制备成菌悬液；向试样3中加入无菌生理盐水；分别向试样3中加入分支H37Ra结核杆菌、试样2的菌悬液，放在震荡器上混匀；取试样3的菌悬液滴在玻片上；将该玻片放在室温下自然干燥；将干燥的该玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过，固定菌膜。本发明提高工作人员的工作效率。
【专利说明】抗酸染色液质控品制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物医疗【技术领域】，特别涉及抗酸染色液质控品制备方法。
【背景技术】
[0002]抗酸染色法，是1882年由埃利希首创并经齐尔改进而创造出的细菌染色法。分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，包围在肽聚糖的外面，所以分枝杆菌一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后，就很难被酸性脱色剂脱色，故名抗酸染色。齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物，用盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后，分枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为蓝色。
[0003]抗酸染色法一般包括:初染、脱色、复染三个步骤，具体操作方法是:细菌涂片标本的制作和固定；用玻片夹夹持涂片标本，滴加石炭酸复红2-3滴，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，若染液蒸发减少，应再加染液，以免干涸，加热3-5分钟，待标本冷却后用水冲洗；加入3%盐酸酒精脱色30秒分钟，用水冲洗；用碱性美兰溶液复染I分钟，水洗，用吸水纸吸干后用油镜观察。
[0004]抗酸染色三步法效果很好，但操作比较复杂，工作人员每操作一次就要做一次细菌涂片标本，浪费时间，并且工作效率低，对染色液质量、染色时间长短、工作人员操作技术熟练程度都有很高的要求，但是目前市场没有任何一款预先制好的细菌涂片标本，供工作人员工作时直接拿来使用。
[0005]因此，生物医疗【技术领域】急需一种节省时间、操作简单、提高工作人员工作效率、能够检测染色液的质量、对工作人员起到监督作用的抗酸染色液质控品制备方法。
【发明内容】
[0006]本发明的抗酸染色液质控品制备方法，技术方案如下:
本发明的抗酸染色液质控品制备方法，其特征在于，包含以下步骤:
第一步，将H37Ra结核杆菌作为抗酸染色阳性菌株，与抗酸染色阴性菌株分别装在2支试管中，标为试样I和试样2,放在冰箱中冷冻、干燥保存；
第二步，从冰箱中取出试样I和试样2，将试样I的H37Ra结核杆菌，从培养基上用生理盐水洗下，并取H37Ra结核杆菌菌液加入无菌组织研磨器中进行研磨，制成分支H37Ra结核杆菌；向试样2中加入生理盐水，将抗酸染色阴性菌株溶解，制备成菌悬液；
第三步，重新拿取试管，标为试样3 ;首先，向试样3中加入无菌生理盐水；然后，分别向试样3中加入分支H37Ra结核杆菌、试样2的菌悬液，放在震荡器上混匀；
第四步，从试样3中取出稀释后的菌悬液，滴在玻片上；
第五步，将玻片放在室温下自然干燥；
第六步，将干燥的玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过，固定菌膜。
[0007]如上的抗酸染色液质控品制备方法，其中，抗酸染色阴性菌株为I种菌株。[0008]如上的抗酸染色液质控品制备方法，其中，抗酸染色阴性菌株为2种或者多种菌株的混合物。
[0009]如上的抗酸染色液质控品制备方法，其中，抗酸染色阴性菌株为球菌。
[0010]如上的抗酸染色液质控品制备方法，其中，抗酸染色阴性菌株为杆菌。
[0011]如上的抗酸染色液质控品制备方法，其中，抗酸染色阴性菌株为球菌和杆菌的混合物。
[0012]本发明的有益效果是:
通过制备好的抗酸染色质控品与新制作的涂片同时进行初染、脱色、复染的过程，可以检测出染色液是否过期。
[0013]通过制备好的抗酸染色质控品与新制作的涂片同时进行初染、脱色、复染的过程，能够对操作人员的操作步骤、熟练程度进行监督和检验。
[0014]本发明操作简单、节省时间。
[0015]本发明提高了操作人员的工作效率，从而提高了经济效益，具有更加广泛的适用性。
【具体实施方式】
[0016]为了使本发明的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体示例，进一步阐述本发明。
[0017]实施例一:
本发明的具体实施步骤如下:
第一步，将H37Ra结核杆菌作为抗酸染色阳性菌株，与抗酸染色阴性菌株分别装在2支试管中，标为试样I和试样2,放在冰箱中冷冻、干燥保存；
第二步，从冰箱中取出试样I和试样2，将试样I的H37Ra结核杆菌，从培养基上用Iml生理盐水洗下，并取lmlH37Ra结核杆菌菌液加入无菌组织研磨器中进行研磨，制成分支H37Ra结核杆菌；向试样2中加入0.5ml生理盐水，将抗酸染色阴性菌株溶解，制备成菌悬液；
第三步，重新拿取试管，标为试样3 ;首先，向试样3中加入Iml无菌生理盐水；然后，分别向试样3中加入0.1ml研磨后的分支H37Ra结核杆菌、0.05ml试样2的菌悬液，放在震荡器上混匀；
第四步，从试样3中取出0.1ml稀释后的菌悬液，滴在玻片上；
第五步，将玻片放在室温下自然干燥；
第六步，将干燥的玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过三次，固定菌膜。
[0018]实施例二:
本发明的具体实施步骤如下:
第一步，将H37Ra结核杆菌作为抗酸染色阳性菌株，与抗酸染色阴性菌株分别装在2支试管中，标为试样I和试样2,放在冰箱中冷冻、干燥保存；
第二步，从冰箱中取出试样I和试样2，将试样I的H37Ra结核杆菌，从培养基上用2ml生理盐水洗下，并取lmlH37Ra结核杆菌菌液加入无菌组织研磨器中进行研磨；向试样2中加入0.4ml生理盐水，将抗酸染色阴性菌株溶解，制备成菌悬液；第三步，重新拿取试管，标为试样3 ;首先，向试样3中加入2ml无菌生理盐水；然后，分别向试样3中加入0.2ml研磨后的分支H37Ra结核杆菌、0.1ml试样2的菌悬液，放在震荡器上混匀；
第四步，从试样3中取出0.2ml稀释后的菌悬液，滴在玻片上；
第五步，将玻片放在室温下自然干燥；
第六步，将干燥的玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过4次，固定菌膜。
[0019]如上对本发明的描述中，具体量取试剂的体积均为一个示例，本领域技术人员可以选择其他的体积。
[0020]抗酸染色阴性菌株为I种菌株或2种或者多种菌株的混合物。
[0021]抗酸染色阴性菌株为球菌、杆菌或球菌与杆菌的混合物。
[0022]本发明的有益效果是:通过制备好的抗酸染色液质控品与新制作的涂片同时进行初染、脱色、复染的过程，可以检测出染色液是否过期。
[0023]通过制备好的抗酸染色液质控品与新制作的涂片同时进行初染、脱色、复染的过程，能够对操作人员的操作步骤、熟练程度进行监督和检验。
[0024]本发明操作简单、节省时间。
[0025]本发明提高了操作人员的工作效率，从而提高了经济效益，具有更加广泛的适用性。
[0026]以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。
【权利要求】
1.抗酸染色液质控品制备方法，其特征在于，包含以下步骤: 第一步，将H37Ra结核杆菌作为抗酸染色阳性菌株，与抗酸染色阴性菌株分别装在2支试管中，标为试样I和试样2,放在冰箱中冷冻、干燥保存； 第二步，从冰箱中取出该试样I和试样2，将该试样I的H37Ra结核杆菌，从培养基上用生理盐水洗下，并取H37Ra结核杆菌菌液加入无菌组织研磨器中进行研磨，制成分支H37Ra结核杆菌；向试样2中加入生理盐水，将抗酸染色阴性菌株溶解，制备成菌悬液； 第三步，重新拿取试管，标为试样3 ;首先，向试样3中加入无菌生理盐水；然后，分别向试样3中加入该分支H37Ra结核杆菌、试样2的菌悬液，放在震荡器上混匀； 第四步，从试样3中取出稀释后的菌悬液，滴在玻片上； 第五步，将该玻片放在室温下自然干燥； 第六步，将干燥的该玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过，固定菌膜。
2.如权利要求1所述的抗酸染色液质控品制备方法，其特征在于，该抗酸染色阴性菌株为I种菌株。
3.如权利要求1所述的抗酸染色液质控品制备方法，其特征在于，该抗酸染色阴性菌株为2种以上菌株的混合物。
4.如权利要求1所述的抗酸染色液质控品制备方法，其特征在于，该抗酸染色阴性菌株为球菌。
5.如权利要求1所 述的抗酸染色液质控品制备方法，其特征在于，该抗酸染色阴性菌株为杆菌。
6.如权利要求1所述的抗酸染色液质控品制备方法，其特征在于，该抗酸染色阴性菌株为球菌和杆菌的混合物。
【文档编号】C12Q1/00GK103451260SQ201310403881
【公开日】2013年12月18日 申请日期:2013年9月9日 优先权日:2013年9月9日
【发明者】娄峥 申请人:上海兰卫临床检验有限公司