miR-125b在抗肿瘤中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及miR-125b在抗肿瘤中的应用。更具体地，本发明涉及构建体，抑制肿瘤细胞转移、降低肿瘤细胞耐药性或者诱导肿瘤细胞发生凋亡的方法，该构建体或者miR-125b在制备药物中的用途，以及用于治疗癌症的药物。其中，该构建体包括编码miR-125b的核酸分子，该miR-125b具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。利用该构建体，能够将编码miR-125b的核酸分子引入到肿瘤细胞中，进而可以通过在肿瘤细胞中过表达miR-125b，有效地抑制肿瘤细胞转移、诱导肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药性。
【专利说明】miR-125b在抗肿瘤中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物【技术领域】，特别是涉及miR-125b在抗肿瘤中的应用。具体地，涉 及miR-125b在抑制肿瘤细胞转移、降低肿瘤细胞耐药性和诱导肿瘤细胞发生凋亡中的应 用。更具体地，本发明涉及构建体，抑制肿瘤细胞转移、降低肿瘤细胞耐药性或者诱导肿瘤 细胞发生凋亡的方法，该构建体或者miR-125b在制备药物中的用途，以及用于治疗癌症的 药物。
【背景技术】
[0002] 原发性肝癌，超过90%是肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC)，是世界 上最为常见的恶性肿瘤之一，在世界范围内最为常见的癌症致死病因中排名第3,在中国 排名第2。目前肝癌的最有效治疗是切除肝癌组织，但手术后复发率很高，手术后5年肝 癌复发率高达61. 5%，究其原因，在于除非在肝癌早期进行手术，否则绝大多数病人的肝癌 细胞已经发生转移，因此无论是肝切除还是肝移植并不能根本治愈肝癌。近十年来，通过 建立高转移肝癌细胞系和动物模型，关于肝癌转移的研究取得了一系列进展，但是仍然有 很多问题尚未解决，关于原发性肝癌转移和复发的机制仍然存在争议。上皮-间质转化 (Epithelial-mesenchymal transition, EMT)是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质 表型细胞的生物学过程。通过EMT，上皮细胞失去了细胞极性，失去与基底膜的连接等上皮 表型，获得了较高的迁移与侵袭、抗凋亡和降解细胞外基质的能力等间质表型。EMT是上皮 细胞来源的恶性肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的重要生物学过程，已在乳腺癌模型中得到 了很好的验证和研究。由于不同类型肿瘤的发病原因有异同，因此在其它类型肿瘤中，EMT 是否也参与肿瘤的转移需要进一步验证。近年来，关于EMT在肝癌转移过程中的研究也逐 渐表明，在肝癌中，EMT也是引起肿瘤细胞高转移的主要原因。
[0003] 然而，目前抑制肿瘤转移、降低肿瘤细胞耐药性和诱导肿瘤细胞发生凋亡即抗肿 瘤的手段仍有待改进。
【发明内容】
[0004] 本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商 业选择。为此，本发明的一个目的在于提出一种能够有效抑制肿瘤细胞转移、降低肿瘤细胞 耐药性和诱导肿瘤细胞发生凋亡即抗肿瘤的手段。
[0005] 本发明是基于发明人的下列发现而完成的：通过在肿瘤细胞中过表达miR_125b， 可以有效地抑制肿瘤细胞转移、诱导肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药 性。
[0006] 在本发明的第一方面，本发明提出了一种构建体。根据本发明的实施例，该构建体 包括编码miR-125b的核酸分子，所述miR-125b具有SEQ ID N0:1所示的核苷酸序列。利 用该构建体，能够将编码miR-125b的核酸分子，引入到肿瘤细胞中，进而可以通过在肿瘤 细胞中过表达miR-125b,有效地抑制肿瘤细胞转移、诱导肿瘤细胞发生凋亡,或者降低肿瘤 细胞对药物的耐药性。
[0007] 根据本发明的实施例，所述编码miR_125b的核酸分子即miR_125b的核酸前体序 列，具有如SEQ ID NO :2所示的核苷酸序列。由此，可以进一步提高miR-125b的表达效率， 进而进一步提高抑制肿瘤细胞转移、诱导肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的 耐药性的效率。
[0008] 在本发明的第二方面，本发明提出了一种抑制肿瘤细胞转移、耐药性或者诱导 肿瘤细胞发生凋亡的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：使所述肿瘤细胞过表达 miR-125b，所述miR-125b具有SEQ ID N0:1所示的核苷酸序列。由此，可以有效地抑制肿 瘤细胞转移，诱导肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药性，从而有效地提高 治疗癌症的效率。该方法也可以应用于非治疗目的的癌症细胞处理。
[0009] 根据本发明的实施例，该方法还可以进一步包括下列附加技术特征：
[0010] 在本发明的一个实施例中，使所述肿瘤细胞过表达miR-125b进一步包括：利用前 面所述的构建体，将编码miR-125b的核酸分子引入到所述肿瘤细胞中。由此，可以进一步 提高肿瘤细胞过表达miR-125b的效率，从而进一步提高抑制肿瘤细胞转移，诱导肿瘤细胞 发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药性的效率，进而更有效地提高治疗癌症的效率。 [0011] 在本发明的一个实施例中，所述肿瘤细胞为肝癌细胞。
[0012] 在本发明的第三方面，本发明提出了前面所述的构建体、或者miR-125b在制备药 物中的用途。根据本发明的实施例，该药物用于治疗癌症，且其作用靶点为miR-125b。根据 本发明的实施例，该药物可以用于抑制肿瘤细胞的转移、降低肿瘤细胞耐药性或诱导肿瘤 细胞发生凋亡。根据本发明的具体的实施例，该癌症为肝癌。
[0013] 在本发明的第四方面，本发明提出了一种用于治疗癌症的药物。该药物包括：适于 使肿瘤细胞过表达miR-125b的试剂。由此，可以通过使肿瘤细胞过表达miR-125b，从而抑 制肿瘤细胞转移，诱导肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药性。根据本发明 的实施例，该药物中适于使肿瘤细胞表达miR-125b的试剂为前面所述的构建体。由此，可 以进一步提高肿瘤细胞过表达miR-125b的效率，从而进一步提高抑制肿瘤细胞转移，诱导 肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药性的效率，更有效地提高治疗癌症的 效率。
[0014] 本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变 得明显，或通过本发明的实践了解到。
【专利附图】
【附图说明】
[0015] 本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变 得明显和容易理解，其中 ：
[0016] 图1显示了根据本发明一个实施例，人肝癌中miR_125b表达情况的检测结果，其 中，
[0017] 图IA为实时定量PCR检测miR_125b在人肝癌细胞系中的表达情况的结果，
[0018] 图IB为实时定量PCR检测miR-125b在20对人肝癌(癌旁）组织中的表达情况的 结果，
[0019] 图IC为饼状统计图分析人肝癌(癌旁）组织中miR_125b的表达情况的结果，
[0020] 图ID为对数统计图（Log2 (肝癌/癌旁））分析人肝癌(癌旁)组织中miR_125b的 表达情况的结果；
[0021] 图2显示了根据本发明一个实施例，miR-125b对人肝癌细胞EMT相关蛋白表达的 影响实验的结果，其中，
[0022] 图2A显示了利用慢病毒转染的方式过表达miR_125b后的肝癌细胞系及对照的细 胞形态，
[0023] 图2B显示了瞬转miR_125b抑制剂后人胎肝细胞系L02及对照中上皮标志 E-cadherin的表达情况的检测结果，
[0024] 图2C显示了利用慢病毒转染的方式过表达miR_125b后的人肝癌细胞系及对照的 间质标志的表达情况的检测结果；
[0025] 图3显示了根据本发明一个实施例，mir_125b对人肝癌细胞的耐药性影响实验的 结果。
【具体实施方式】
[0026] 下面详细描述本发明的实施例，这些实施例旨在用于解释本发明，而不能理解为 对本发明的限制。
[0027] 需要说明的是，本发明是基于发明人在本领域的深入研究所完成的。发明人发现， 与正常肝脏组织相比，无论在人肝癌细胞还是在人肝癌临床标本中，miR_125b的表达均下 调。进而，发明人发现，通过在肿瘤细胞中过表达miR_125b，可以有效地抑制肿瘤细胞转移， 诱导肿瘤细胞发生凋亡，降低肿瘤细胞对药物的耐药性。由此，本发明提出了一种能够有效 抑制肿瘤细胞转移、降低肿瘤细胞耐药性和诱导肿瘤细胞发生凋亡即抗肿瘤的手段。
[0028] 构建体
[0029] 在本发明的第一方面，本发明提出了一种构建体。根据本发明的实施例，该 构建体包括编码miR-125b的核酸分子，该miR-125b具有如下所示的核苷酸序列： 5'-UCCCUGAGACCCUAACUUGUGA-3'（SEQ ID N0:1)。利用该构建体，能够将编码 miR-125b 的 核酸分子，引入到肿瘤细胞中，进而可以通过在肿瘤细胞中过表达miR-125b，有效地抑制肿 瘤细胞转移，诱导肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药性。根据本发明的实 施例，所述编码miR-125b的核酸分子具有如下所示的核苷酸序列：5' -GGGTCCCATTAACTGGC ATATAATCCTTCTTTAATGTAATAGAGGCTATGGTGTTGCTGTACAAATCTGCTAGAAGCAGATTTTAACCCATGTT TAGTCTCTTTCTTTGGATCTAATGGAATGACTCTTAACTGTTCATTGTCTGCATTGTTTCTCATATTCTTCATTATT TTAAGGTCTGGAATTAGTCTATAAATGGTCGTCGTGATTACTCAGCTCATCCTAACTTTTATATATCATATATATTT CTACTGAAGTATTTTAAATAGTATTTAGAGGTAAAAGTCTAAGTGAACCCAACTGTAATTTCTAAGCTATCCTTATT TCTGGAAGAAGAATTCTACCGCATCAAACCAGACTTTTCCTAGTCCCTGAGACCCTAACTTGTGAGGTATTTTAGTA ACATCACAAGTCAGGCTCTTGGGACCTAGGCGGAGGGGAACCAGCAGCTTTGGACCTTATTGATTGTCTGCAGTTAC CACCAGMCAAAAGAACATACATAGATTCTGCCTAGGAGAAMGAACAATGCTTTTCTTTATCATCAGCMCGTTTTC ACCATGACCCATCC-3'（SEQ ID N0:2)。由此，可以进一步提高miR-125b的表达效率，进而进 一步提高抑制肿瘤细胞转移，诱导肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药性 的效率。
[0030] 其中，在本文中所使用的术语"构建体"意指能够运输它已与之连接的另一种核酸 (目的核酸分子）的核酸分子。一种类型的构建体是"质粒"，它指外源过表达的DNA片段可 以连接到其内的环状双链DNA环上。另一种类型的构建体是病毒构建体，其中外源过表达 的DNA片段可以连接到病毒基因组内。某些构建体能够在它们已引入其内的宿主细胞中自 主复制(例如，具有细菌复制起点的细菌构建体和游离型哺乳动物构建体)。其他构建体(例 如非游离型哺乳动物构建体）在引入宿主细胞内后可以整合到宿主细胞基因组内，且因此 连同宿主基因组一起进行复制。此外，某些构建体能够指导它们与之可操作地连接的基因 表达。一般而言，在重组DNA技术中使用的表达构建体通常为质粒的形式。在本说明书中， "质粒"和"构建体"可以互换使用，因为质粒是最常用的构建体形式。然而，本发明预期包 括此类其他形式的表达构建体，例如提供等价功能的病毒构建体(例如复制缺陷型逆转录 病毒、腺病毒和腺伴随病毒)。在本发明中所使用的术语"核酸"可以是任何包含脱氧核糖 核苷酸或者核糖核苷酸的聚合物，包括但不限于经过修饰的或者未经修饰的DNA、RNA,其长 度不受任何特别限制。对于用于构建体的核酸类型，优选所述核酸为DNA，因为DNA相对于 RNA而言，其更稳定，并且易于操作。
[0031] 另外，根据本发明的实施例的构建体还可以进一步包含其他的元件，从而为构建 体赋予额外的有益效果。本领域技术人员可以根据需要，选择这些元件在构建体上与编码 miR-125b的核酸分子的相对位置。既可以设置在编码miR-125b的核酸分子的上游，也可以 设置在编码miR-125b的核酸分子的下游，只要这些元件能够发挥其相应的功能即可。在本 发明中所使用的术语"5'侧"可以与"上游"互换使用，"3'侧"可以与"下游"互换使用。
[0032] 具体地，根据本发明的一个实施例，本发明的构建体可以进一步包含启动子序列， 所述启动子序列与所述编码miR_125b的核酸分子可操作地相连。在本发明中所使用的术 语"启动子"指的是这样一种核酸序列，其能够指导与其可操纵地连接的核酸分子的转录。 在本发明中所使用的术语"可操纵地"指的是核酸表达控制序列例如启动子、信号序列、增 强子等与目标核酸序列之间的功能连接，其中当合适的分子例如转录活化分子与表达控制 序列结合时，表达控制序列影响着对应于目标核酸序列的核酸的转录和/或翻译。由此，可 以直接通过表达构建体在动物细胞中引入特定的启动子，并且该启动子可以用于启动编码 miR-125b的核酸分子的转录和表达，由此，可以提高所获得的重组细胞中编码miR-125b的 核酸分子的表达效率。根据本发明的具体实例，所述启动子为CMV启动子。发明人发现，当 采用该启动子时，可以有效地在肿瘤细胞中过表达miR-125b。
[0033] 根据本发明的一个实施例，本发明的构建体(在本文中有时也称为"表达构建体"） 可以进一步包括编码报告蛋白的序列。在本发明中所使用的术语"报告蛋白"是指这样的一 种蛋白质，其在表达后，能够产生可以直接或者间接检测的信号，进而能够反映表达构建体 所携带的外源核酸序列是否已经在细胞中被成功表达。根据本发明的实施例，报告蛋白的 种类并不受特别限制，只要其具有可检测的活性即可。根据本发明的实施例，报告蛋白可以 是一种能够产生光学信号的蛋白质例如发光蛋白或者荧光蛋白例如绿色荧光蛋白等。或者 报告蛋白可以是一种能够与底物相互作用以产生可检测信号的酶，例如IacZ基因编码的 β-半乳糖苷酶。β -半乳糖苷酶能催化一系列底物转化成极易检测的不同颜色的产物。但 是IacZ在细胞内本底表达较高，并且检测需要破碎细胞壁，从而限制了其应用。因而，根据 本发明的一些实施例，报告蛋白可以为选自发光蛋白、荧光蛋白、酶的至少一种。由此，可以 根据常规的方法，对所述报告蛋白进行监测。例如可以采用：比色法、荧光法、生物发光法、 化学发光法、酶联免疫法（ELISA)及原位染色法对报告蛋白进行检测。这其中，优选发光蛋 白，因为发光蛋白能够发出特定波长的光，因而能够容易对发光蛋白进行检测，并且容易对 其进行定量检测。根据本发明的一个实施例，报告蛋白为绿色荧光蛋白。由此，可以便捷地 通过荧光显微镜，就能够确定表达构建体所携带的外源核酸序列是否已经在细胞中被成功 表达。
[0034] 根据本发明的一个实施例，表达构建体可以进一步包括筛选标记基因。在本发明 中所使用的术语"筛选标记基因"指的是这样的一种基因，其编码的产物能够赋予连同构建 体接受该基因的细胞一种特殊的性质，该特殊的性质使得接受该基因的细胞与未接受该基 因的细胞很容易被区分开。由此，便于筛选接受表达构建体的细胞。根据本发明的实施例， 筛选标记基因的类型不受特别限制，根据本发明的一些示例，所述筛选标记基因为药物抗 性基因。由此，容易地通过接受外源表达构建体的重组细胞的抗药性来进行筛选，例如在培 养基中添加抗生素，则相应连同构建体接受并表达抗生素抗性基因的细胞将在培养基上能 够存活下来。根据本发明的具体示例，所述筛选标记基因为新霉素抗性基因。由此，能够进 一步提高筛选接受外源表达构建体的重组细胞的效率。
[0035] miR-125b 的用途
[0036] 在本发明的第二方面，本发明提出了一种抑制肿瘤细胞转移、降低肿瘤细胞耐药 性或者诱导肿瘤细胞发生凋亡的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：使所述肿瘤细胞 过表达miR-125b，所述miR-125b具有SEQ ID N0:1所示的核苷酸序列。由此，可以有效地 抑制肿瘤细胞转移，诱导肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药性，从而有效 地提商治疗癌症的效率。
[0037] 根据本发明的实施例，使所述肿瘤细胞过表达miR_125b的方法并不受特别限制。 可以通过向细胞中引入可以表达miR-125b的核酸分子，也可以直接将miR-125b引入到细 胞中来实现。根据本发明的实施例，可以利用前面所述的构建体，将编码miR-125b的核酸 分子引入到所要处理的肿瘤细胞中。由此，根据本发明的具体实施例，使所述肿瘤细胞过表 达miR-125b的方法进一步包括：利用前面所述的构建体，将编码miR-125b的核酸分子引入 到所述肿瘤细胞中。由此，可以进一步提高肿瘤细胞过表达miR-125b的效率，从而进一步 提高抑制肿瘤细胞转移，诱导肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药性的效 率，进而能够更有效地提1?治疗癌症的效率。
[0038] 根据本发明的实施例，可以利用本发明的手段处理的肿瘤细胞的类型并不受特别 限制。在本发明的一个实施例中，所述肿瘤细胞可以为选自肺癌、肝癌、胃癌、食管癌、结直 肠癌、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、肾癌、卵巢癌、宫颈癌、甲状腺癌、鼻咽癌和脑胶质瘤的至少 一种的细胞。根据本发明的具体实施例，优选肝癌细胞。
[0039] 在本发明的第三方面，本发明提出了前面所述的构建体、或者miR_125b在制备药 物中的用途。根据本发明的实施例，该药物用于治疗癌症。根据本发明的实施例，该药物可 以用于抑制肿瘤细胞的转移、耐药性或者使所述肿瘤细胞发生凋亡。根据具体的实施例，该 癌症可以为肝癌。
[0040] 在本发明的第四方面，本发明提出了一种用于治疗癌症的药物。该药物包括：适 于使肿瘤细胞过表达miR-125b的试剂。由此，可以人为通过使肿瘤细胞过表达miR-125b， 从而抑制肿瘤细胞转移，诱导肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药性。根据 本发明的实施例，该药物中适于使肿瘤细胞过表达miR-125b的试剂为前面所述的构建体。 由此，可以进一步提商肿瘤细胞过表达miR-125b的效率，从而进一步提商抑制肿瘤细胞转 移，诱导肿瘤细胞发生凋亡，或者降低肿瘤细胞对药物的耐药性的效率，更有效地提高治疗 癌症的效率。
[0041] 下面参考具体实施例，对本发明进行说明，需要说明的是，这些实施例仅是说明性 的，而不能理解为对本发明的限制。
[0042] 若未特别指明，实施例中所采用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手 段，可以参照《分子克隆实验指南》第三版或者相关产品（例如《Molecular Cloning:A Laboratory Manual)), Sambrook, J. ,Russell,David ff. ,Molecular Cloning:A Laboratory Manual，3rd edition，2001，NY，Cold Spring Harbor，通过参照将其全文并入本文）进行， 所采用的试剂和产品也均为可商业获得的。未详细描述的各种过程和方法是本领域中公 知的常规方法，所用试剂的来源、商品名以及有必要列出其组成成分者，均在首次出现时标 明，其后所用相同试剂如无特殊说明，均以首次标明的内容相同。
[0043] 其中，所述百分比浓度如无特别说明均为质量/体积（W/V)百分比浓度或体积/ 体积（V/V)百分比浓度。所用引物、DNA序列合成及DNA序列测定均由上海英骏公司完成。
[0044] 实施例1人肝癌中miR_125b的表达情况
[0045] 按照以下步骤进行试验，以检测人肝癌中miR_125b的表达情况：
[0046] 一、肝癌细胞/组织cDNA模板的制备
[0047] 1、细胞总RNA的提取
[0048] 提取RNA之前用1%。DEPC水处理枪头和Eppendorf管，高压灭菌，烤干备用。
[0049] (1)细胞铺满瓶底80%时终止培养，吸弃细胞培养液，加入PBS洗涤一次；
[0050] (2)每瓶细胞加入Iml TRIzoI，反复吹打使细胞破碎溶解；
[0051] (3)将液体转移到I. 5ml的EP管中，室温静置5?IOmin ;
[0052] (4)加入0· 2ml氯仿/ml TRIzol,剧烈振荡混勻15s，室温静置IOmin ;
[0053] (5) 12000rpm，4。。，离心 15min ;
[0054] (6)离心后液体分为三层，从下至上依次为酚/氯仿层、中间蛋白层、上层无色水 相。RNA存于上层水相中；
[0055] (7)吸取上层水相至新的EP管中，注意避免将中间蛋白吸出；
[0056] (8)加入预冷的异丙醇0. 5ml/ml TRIzol,颠倒混勻，室温静置IOmin ;
[0057] (9) 12000rpm，4°C，离心 IOmin ;
[0058] (10)弃上清，RNA沉淀用75 %乙醇（750 μ 1无水乙醇，250 μ I DEPC水现配)洗涤， 12, OOOrpm，4°C，离心 5min ;
[0059] (11)弃上清，超净台中鼓风干燥3分钟左右，RNA呈半透明状；
[0060] (12)加入15-20 μ 11 %。DEPC水溶解RNA沉淀，紫外分光光度计测定浓度及OD 值，-70°C保存或直接用于逆转录反应。
[0061] 注意：操作过程中戴口罩、手套并注意更换，以防止RNA被RNA酶降解。
[0062] 2.组织总RNA的提取
[0063] (1)切取IOOmg新鲜组织放入匀浆管中，管中加入Iml Trizol ;
[0064] (2)每块组织匀浆前先用75%乙醇和1%。的DEPC水清洗匀浆机转头，将匀浆管置 于冰盒上匀浆，组织经反复匀浆直至无明显沉淀后，将匀浆液转入I. 5ml EP管中，室温静置 5分钟；以下步骤同细胞总RNA的提取。
[0065] 3. RNA 反转录成 cDNA
[0066] 细胞及组织中提取的总RNA，使用miScript反转录试剂盒进行反转录，反应体系 (20 μ 1)构成及反应条件如下：
[0067]
【权利要求】
1. 一种构建体，其特征在于，包括编码miR-125b的核酸分子，所述miR-125b具有SEQ ID NO :1所示的核苷酸序列。
2. 根据权利要求1所述的构建体，其特征在于，所述编码miR-125b的核酸分子具有如 SEQ ID N0:2所示的核苷酸序列。
3. -种抑制肿瘤细胞转移、降低肿瘤细胞耐药性或者诱导肿瘤细胞发生凋亡的方法， 其特征在于，包括： 使所述肿瘤细胞过表达miR-125b，所述miR-125b具有SEQ ID NO : 1所示的核苷酸序 列。
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，使所述肿瘤细胞过表达miR-125b进一步 包括： 利用权利要求1或2所述的构建体，将编码miR-125b的核酸分子引入到所述肿瘤细胞 中。
5. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述肿瘤细胞为肝癌细胞。
6. 权利要求1或2所述的构建体、或者miR-125b在制备药物中的用途，所述药物用于 治疗癌症。
7. 根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述药物用于抑制肿瘤细胞的转移、降低 肿瘤细胞耐药性或者使所述肿瘤细胞发生凋亡。
8. 根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述癌症为肝癌。
9. 一种用于治疗癌症的药物，其特征在于，包括：适于使肿瘤细胞过表达miR-125b的 试剂。
10. 根据权利要求9所述的药物，其特征在于，所述适于使肿瘤细胞过表达miR-125b的 试剂为权利要求1或2所述的构建体。
【文档编号】C12N5/10GK104419715SQ201310410006
【公开日】2015年3月18日 申请日期:2013年9月10日 优先权日:2013年9月10日
【发明者】裴雪涛, 岳 文, 周军年, 曾泉, 李思霆, 谢小燕, 姚海雷 申请人:中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所