用于北极海洋放线菌Streptomyces sp.生产大环四重内酯类化合物的培养基的制作方法
【专利摘要】本发明涉及用于北极海洋放线菌Streptomyces?sp.生产大环四重内酯类化合物的培养基。本发明培养基适于北极放线菌的生长，且可大大提高大环四重内酯类化合物Dinactin的产量。
【专利说明】用于北极海洋放线菌Streptomyces sp.生产大环四重内
酯类化合物的培养基
【技术领域】
[0001]本发明属于生物【技术领域】，更具体地，本发明涉及用于北极海洋放线菌Streptomyces sp.(更佳地是Streptomyces sp.R-527F)生产大环四重内酯类化合物(更佳地是Dinactin)的培养基及其制备方法。
【背景技术】
[0002]天然来源的放线菌能产生种类丰富的次级代谢产物，具有新颖独特结构和潜在生物活性的抗菌剂如链霉素、红霉素、四环素等都是由放线菌产生的。因此，放线菌作为天然药物资源先导化合物的优良资源被广泛研究。海洋微生物在新药开发、新型酶制剂研制等生物【技术领域】具有广阔的前景。
[0003]远洋和极地地区地域辽阔，覆盖了地球系统的低温、高盐、高压、寡营养、巨幅变化的光辐射等多种特殊环境，这些特殊环境造就了微生物在基因结构、遗传、适应、代谢及产物等方面的独特性和多样性，蕴涵着生命进化历程的丰富信息，是生物遗传和功能多样性非常丰富的资源宝藏。开展极地和极端药源微生物资源的挖掘、储备和功能研究，获得该资源【技术领域】更多自主知识产权具有重要价值。统计表明，新发现的嗜冷菌77%的新种和83%的新属来自极地环境，因此极地地区是嗜冷菌等重要极端微生物资源的主要源地。
[0004]北极海洋放线菌Streptomyces sp.R-527F是由中国极地研究中心自北冰洋73° N以北海域沉积物中分离得到。在该菌株的发酵液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、白色念珠菌(Candida `albicans)等均具有抑制活性,并从中分离得到多种大环四重内脂类化合物，其中Dinactin的生物活性较显著。
[0005]然而，Streptomyces sp.R-527F在原始培养基中生长大环四重内脂化合物的产量很低，成为各项药物活性评价研究的瓶颈。因此，通过系统地培养基优化及其培养环境、发酵工艺以期实现高产发酵是亟待解决的问题。因此开发一种促进北极海洋放线菌Streptomyces sp.R-527F合成Dinactin的新型培养基是实现大规模高效发酵生产的重
要基础。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供用于北极海洋放线菌Streptomyces sp.生产大环四重内酯类化合物的培养基及其制备方法。
[0007]在本发明的第一方面,提供一种北极海洋放线菌Streptomyces sp.的培养基,所述培养基包括以下组分:
[0008](a)葡萄糖 5_20g/L ；
[0009](b)黄豆粉 0.5-12g/L ；
[0010](a)和(b)的组分溶于人工海水中；其中,所述的人工海水含有:
【权利要求】
1.一种北极海洋放线菌Streptomyces sp.的培养基,其特征在于,所述培养基包括以下组分: (a)葡萄糖5-20g/L ； (b)黄豆粉0.5-12g/L ； (a)和(b)的组分溶于人工海水中；其中，所述的人工海水含有:
2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基中，葡萄糖和黄豆粉的浓度是: (a)葡萄糖4-18g/L ； (b)黄豆粉l-10g/L ； 所述的人工海水含有:
3.如权利要求2所述的培养基，其特征在于，所述培养基中，葡萄糖和黄豆粉的浓度是: (a)葡萄糖9-18g/L ； (b)黄豆粉l_6g/L ； 所述的人工海水含有:
4.如权利要求1-3任一所述的培养基，其特征在于，所述方法包括:分别称取葡萄糖、黄豆粉，溶于所述的人工海水中，使得它们在培养基中的终浓度分别为5-20g/L、0.5-12g/L ;和/或所述培养基的pH值5.0-6.0。
5.权利要求1-4任一所述的培养基的用途,用于培养北极海洋放线菌Streptomycessp.,生产大环四重内酯类化 合物Dinactin。
6.一种制备权利要求1-4任一所述的北极海洋放线菌Streptomyces sp.的培养基的方法，其特征在于，所述方法包括: (a)将所述氯化钠、硫酸钠、碳酸氢钠、溴化钾、硼酸、六水氯化镁、七水硫酸镁、一水硫酸锰、无水氯化钙逐一溶解，混合均匀； (b)将所述黄豆粉用少量温水溶解，搅拌均匀，溶于人工海水； (C)将葡萄糖溶于(b)的混合液中； (d)将(C)混合液与(a)混合液均匀混合，获得所述的培养基； 其中，各组分的用量按照权利要求1-4任一所述。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法还包括:将所述的培养基调节至pH值 5.0-6.0。
8.—种利用北极海洋放线菌Streptomyces sp.生产大环四重内脂类化合物Dinactin的方法，其特征在于，所述方法包括:利用权利要求1-4任一所述的培养基培养北极海洋放线菌Streptomyces sp.,从而生产大环四重内酯类化合物Dinactin。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,将北极海洋放线菌Streptomycessp.按照体积以3-10%的接种量接入权利要求1-4任一所述的培养基，发酵培养5-8天，获得发酵液，其中含有大环四重内脂类化合物Dinactin。
10.一种用于培养北极海洋放线菌Streptomyces sp.的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中包括:权利要求1-4任一所述的培养基。
【文档编号】C12P17/08GK103555619SQ201310504941
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年10月23日 优先权日:2013年10月23日
【发明者】蔡孟浩, 周娇, 周祥山, 张元兴 申请人:华东理工大学