一种rna基团鉴定的方法

文档序号:457452阅读:904来源:国知局
一种rna基团鉴定的方法
【专利摘要】本发明公开了一种RNA基团鉴定的方法,包括以下步骤:水解RNA、嘌呤碱基的检查、磷酸的检查、戊糖的检查,其中所述嘌呤碱基的检查、所述磷酸的检查和所述戊糖的检查均为单独检测,不分先后顺序。采用本发明提供的方法可简单,快速,有效的鉴定RNA基团。
【专利说明】—种RNA基团鉴定的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物【技术领域】,尤其涉及一种RNA基团鉴定的方法。【背景技术】
核糖核酸(缩写为RNAjP Ribonucleic Acid),存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。由至少几十个核糖核苷酸通过磷酸二酯键连接而成的一类核酸,因含核糖而得名,简称RNA。RNA普遍存在于动物、植物、微生物及某些病毒和噬菌体内。RNA和蛋白质生物合成有密切的关系。在RNA病毒和噬菌体内,RNA是遗传信息的载体。
[0002]RNA由核糖核苷酸经磷酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤、G鸟嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了 DNA中的核糖核酸。
[0003]T胸腺嘧啶而成为RNA的特征碱基。与DNA不同,RNA 一般为单链长分子,不形成双螺旋结构,但是很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。RNA的碱基配对规则基本和DNA相同,不过除了 A-U、G-C配对外,G-U也可以配对。在细胞中根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA (转运RNA),rRNA (核糖体RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白质的模板,内容按照细胞核中的DNA所转录;tRNA是mRNA上碱基序列(即 遗传密码子)的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的组分,是蛋白质合成的工作场所。
[0004]在病毒方面,很多病毒只以RNA作为其唯一的遗传信息载体(有别于细胞生物普遍用双链DNA作载体)。1982年以来,研究表明,不少RNA,如1、11型内含子,RNase P, HDV,核糖体大亚基RNA等等有催化生化反应过程的活性,即具有酶的活性,这类RNA被称为核酶(ribozyme)。20世纪90年代以来,又发现了 RNAi (RNA interference, RNA干扰)等等现象,证明RNA在基因表达调控中起到重要作用。
[0005]在RNA病毒中,RNA是遗传物质,植物病毒总是含RNA。近些年在植物中陆续发现一些比病毒还小得多的浸染性致病因子,叫做类病毒。类病毒是不含蛋白质的闭环单链RNA分子,此外,真核细胞中还有两类RNA,即不均一核RNA (hnRNA)和小核RNA (snRNA)。hnRNA是mRNA的前体;snRNA参与hnRNA的剪接(一种加工过程)。自1965年酵母丙氨酸tRNA的碱基序列确定以后,RNA序列测定方法不断得到改进。除多种tRNA、5SrRNA、5.8SrRNA等较小的RNA外,尚有一些病毒RNA、mRNA及较大RNA的一级结构测定已完成,如噬菌体MS2RNA含3569个核苷酸。

【发明内容】

[0006]本发明的目的是提供了一种RNA基团鉴定的方法,已解决现有技术中的问题。
[0007]为实现上述目的,本发明采用以下技术方案:
一种RNA基团鉴定的方法,包括以下步骤:
A、水解RNA;
B、嘌呤碱基的检查;
C、磷酸的检查;D、戊糖的检查。
[0008]所述水解RNA,向干净的空锥形瓶中加入0.02克的提取的RNA再加入10%硫酸溶液2ml。放在沸水浴中加热水解约10分钟,制成RNA的水解液,待用。
[0009]所述嘌呤碱基的检查,取I支试管,加入0.5ml的水解液在向其中加入5%硝酸银
0.5ml,再逐滴加I mol/1氨水至沉淀消失。放置片刻,观察有无白色嘌呤碱基的银化物沉淀产生。
[0010]所述磷酸的检查,取Iml的水解液放入I支试管中,加入2—3滴浓硝酸和0.5ml钥酸铵溶液后,在沸水浴中加热5 —10分钟,冷却静置,观察有无黄色磷钥酸铵沉淀。
[0011]所述戊糖的检查,取0.5ml的水解液放入I支试管中,加入0.5ml的地衣酚试剂,放在沸水浴中加热15分钟。观察试管中的颜色变化。
[0012]所述嘌呤碱基的检查、所述磷酸的检查和所述戊糖的检查均为单独检测,不分先后顺序。
[0013]本发明的有益效果:采用本发明提供的方法可简单,快速,有效的鉴定RNA基团。【具体实施方式】
[0014]为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
[0015]实施例:
一种RNA基团鉴定的方法,包括以下步骤:
A、水解RNA;
B、嘌呤碱基的检查;
C、磷酸的检查;
D、戊糖的检查。
[0016]水解RNA,向干净的空锥形瓶中加入0.02克的提取的RNA再加入10%硫酸溶液2ml。放在沸水浴中加热水解约10分钟,制成RNA的水解液,待用。
[0017]嘌呤碱基的检查,取I支试管,加入0.5ml的水解液在向其中加入5%硝酸银
0.5ml,再逐滴加I mol/1氨水至沉淀消失。放置片刻,观察有无白色嘌呤碱基的银化物沉淀产生。
[0018]磷酸的检查,取Iml的水解液放入I支试管中,加入2—3滴浓硝酸和0.5ml钥酸铵溶液后,在沸水浴中加热5 —10分钟,冷却静置,观察有无黄色磷钥酸铵沉淀。
[0019]戊糖的检查,取0.5ml的水解液放入I支试管中,加入0.5ml的地衣酚试剂,放在沸水浴中加热15分钟。观察试管中的颜色变化。
[0020]嘌呤碱基的检查、磷酸的检查和戊糖的检查均为单独鉴定,不分先后顺序。
[0021]上述虽然结合实施例对本发明的【具体实施方式】进行了描述,但并非对本发明保护范围的限制,所属领域技术人员应该明白,在本发明的技术方案的基础上,本领域技术人员不需要付出创造性的劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种RNA基团鉴定的方法,其特征包括以下步骤: A、水解RNA; B、嘌呤碱基的检查; C、磷酸的检查; D、戊糖的检查。
2.根据权利要求1所述的一种RNA基团鉴定的方法,其特征在于:所述水解RNA,向干净的空锥形瓶中加入0.02克的提取的RNA再加入10%硫酸溶液2ml,放在沸水浴中加热水解约10分钟,制成RNA的水解液,待用。
3.根据权利要求1所述的一种RNA基团鉴定的方法,其特征在于:所述嘌呤碱基的检查,取I支试管,加入0.5ml的水解液在向其中加入5%硝酸银0.5ml,再逐滴加I mol/Ι氨水至沉淀消失,放置片刻,观察有无白色嘌呤碱基的银化物沉淀产生。
4.根据权利要求1所述的一种RNA基团鉴定的方法,其特征在于:所述磷酸的检查,取Iml的水解液放入1支试管中,加入2—3滴浓硝酸和0.5ml钥酸铵溶液后,在沸水浴中加热5 —10分钟,冷却静置,观察有无黄色磷钥酸铵沉淀。
5.根据权利要求1所述的一种RNA基团鉴定的方法,其特征在于: 所述戊糖的检查,取0.5ml的水解液放入I支试管中,加入0.5ml的地衣酚试剂,放在沸水浴中加热15分钟,观察试管中的颜色变化。
6.根据权利要求3、4和5所述的一种RNA基团鉴定的方法,其特征在于:所述嘌呤碱基的检查、所述磷酸的检查和所述戊糖的检查均为单独检测,不分先后顺序。
【文档编号】C12Q1/68GK103642905SQ201310592047
【公开日】2014年3月19日 申请日期:2013年11月22日 优先权日:2013年11月22日
【发明者】简玉君 申请人:简玉君
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