含有乳酸片球菌j9的保健食品及其制备方法
【专利摘要】公开了一种通过共培养乳酸片球菌与芽孢杆菌制备的食品组合物以及制备该食品组合物的方法。所述食品组合物含有细菌素，从而提高了食品的稳定性和寿命。更具体地，公开了通过所述方法生产的大酱或者清麴酱，以及生产所述大酱或者清麴酱的方法。
【专利说明】含有乳酸片球菌J9的保健食品及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种含有乳酸片球菌J9的保健食品。
【背景技术】
[0002] 乳酸片球菌产生细菌素（美国专利No. 5260212和No. 5175252)，而细菌素被认为 是一种相当广泛使用的抗菌剂。含有细菌素的酸奶登记在美国专利No. 5445835的专利中。 然而，乳酸片球菌与芽孢杆菌不容易共培养。
[0003] 由乳酸菌产生的乳酸被认为能增加肠内酸性（PH)以加强小肠的蠕动，从而促进 消化和吸收，并且能控制大肠的蠕动，从而防止便秘和腹泻。
[0004] 通过给牛奶接种乳酸菌，随后发酵并固化来生产酸奶和饮料，作为市售的发酵乳。
[0005] 用于生产酸奶的乳酸菌的例子包括保加利亚乳酸菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌等。 通过分别在低温下培养这些乳酸菌并适当地混合其中的两种或三种来赋予发酵乳产品独 特的风味。这些发酵乳产品不能经受高温和低PH的环境，因此，这些发酵乳产品不能到达 人类的肠道中。
[0006] 市售的谷物发酵的含酶产品通过利用被称为"米曲霉"的单菌种在30°C到35°C发 酵获得。
[0007] 韩国建国大学利用从美国阿肯色大学获得的乳酸片球菌进行了研究和实验，结果 发现由乳酸片球菌产生的细菌素（一种天然抗生素物质）破坏了引起食物中毒的李斯特菌 (Listeriamonocytogenes)的细胞壁，并在6小时之后细菌的数量减少了 LOXlO5倍。
[0008] 然而，还没开发出含有乳酸片球菌利用谷物产生的细菌素的保健食品。
[0009] 本发明的发明人发现当共培养乳酸片球菌和芽孢杆菌时，容易对PH进行控制，从 而进一步促进食品发酵，并且发明人基于此发现完成了本发明。通常，共培养乳酸片球菌和 芽孢杆菌是困难的。然而，基于本发明人新分离出的乳酸片球菌能够很好的与芽孢杆菌共 培养这一发现，完成了本发明。
【发明内容】
[0010] 技术问题
[0011] 因此，考虑到以上问题完成了本发明，并且本发明的一个目标是提供通过共培养 乳酸片球菌和芽孢杆菌制备的食物组合物。
[0012] 本发明的另一个目标是提供包括共培养的乳酸片球菌和芽孢杆菌的保健食品的 生产方法。
[0013] 技术方案
[0014] 依照本发明的一方面，可以通过提供保健食品来实现以上目标和其他目标。所述 保健食品通过以下方法来产生，所述方法包括：准备至少一种A类谷物，所述A类谷物选自 于由糙米和大豆组成的组，以及至少一种B类谷物，所述B类谷物选自于由黑米、大麦，和高 粱组成的组；通过将所述A类谷物和所述B类谷物的混合物浸入水中来将其浸泡；利用蒸 汽来蒸煮通过浸入水中获得的所述浸透后的谷物；冷却所述蒸煮后的谷物；将预先培养好 的乳酸片球菌J9和芽孢杆菌属菌株添加到所述冷却后的谷物中；将所产生的谷物加到固 体存储容器中，并在40°C至45°C的温度和50 %至70 %的湿度下固体培养微生物，培养时 间为20至48小时；在40°C至45°C的温度和20 %至40 %的湿度下进一步固体培养所述固 体培养产物，培养时间为30至60小时；并且干燥所产生的固体培养产物，然后研磨。
[0015] 为了鉴定源自于韩国传统的豆瓣酱（清麴酱）的显示了优越的耐热性的乳酸菌， 通过分子生物学方法对根据本发明的乳酸片球菌J9的16s rRNA碱基序列进行了分析。利 用NCBI的BLAST程序对筛选的菌株的碱基序列的同质性进行了比较。结果，乳酸片球菌的 同质性被鉴定为99 %，而这种菌株被称为"乳酸片球菌J9"。根据本发明的乳酸片球菌具 有针对tae的抗菌活性，其中tae是菌血症和中耳炎的病原体，并且是社区获得性肺炎最 主要的病原体。因此，根据本发明的乳酸片球菌J9存放于韩国微生物保藏中心，检索号为 KCCM-I1320P。
[0016] 芽孢杆菌属细菌可以是枯草芽孢杆菌或短小芽孢杆菌。将芽胞杆菌属细菌的PH 保持在适合培养乳酸片球菌J9的水平，以便提高发酵效率。对于食品并没有限制，食物可 以是大酱或者清麴酱。
[0017] 培养周期、培养温度和培养湿度的上限考虚到培养微生物所需要的成本和时间来 确定，其下限以满足获得培养周期、培养程度、和培养效率的充分条件来确定。
[0018] 使用糙米和大豆作为主要原料的原因是利用乳酸片球菌J9(KCCM11320P)和枯草 芽孢杆菌的对PH的控制能力。乳酸菌的增值引起乳酸（来自葡萄糖的有机酸）的形成，从 而降低PH浓度并导致酸化。然而，枯草芽孢杆菌在发酵期间增加 PH值以将PH值保持在 6. 0的中性水平上，从而促进乳酸菌的增长。
[0019] 当将谷物接种了乳酸菌、乳酸片球菌J9,并高温发酵时，完全不能观察到引发食物 中毒的李斯特菌。发酵之后，乳酸菌在谷物中增值并且细菌的数量达到1.2X10 9CFU/g。乳 酸菌的有益作用是抑制人体肠道中的有害细菌的增长，加强肠道蠕动，从而促进排便。
[0020] 依照本发明的另一方面，提供一种产生保健食品的方法。该方法包括：准备至少一 种A类谷物，所述A类谷物选自于由糙米和大豆组成的组，以及至少一种B类谷物，所述B 类谷物选自于由黑米、大麦，和高粱组成的组；通过将所述A类谷物和所述B类谷物的混合 物浸入水中来将其浸泡；利用蒸汽来蒸煮通过浸入水中获得的所述浸泡后的谷物；冷却所 述蒸煮后的谷物；将预先培养好的乳酸片球菌J9和芽孢杆菌属菌株添加到所述冷却后谷 物中；将所产生的谷物加到固体存储容器中，并在40°C至45°C的温度和50 %至70 %的湿 度下固体培养微生物，培养时间为20至48小时；在40°C至45°C的温度和20 %至40 %的 湿度下进一步固体培养所述固体培养产物，培养时间为30至60小时；并且干燥所产生的固 体培养产物，然后研磨。
[0021] 芽孢杆菌属细菌可以是枯草芽孢杆菌或短小芽孢杆菌。将芽胞杆菌属细菌的PH 保持在适合培养乳酸片球菌J9的水平，以便提高发酵效率。对于食品并没有限制，食品可 以是大酱或者清麴酱。
[0022] 依照本发明的另一方面，提供了乳酸片球菌J9(KCCM 11320P)，其能与芽孢杆菌很 好地共培养。从随后将描述的实例2中可以看出，乳酸片球菌J9是能与芽孢杆菌很好地共 培养，并具有优越的PH值稳定性和耐强酸性的菌株（参照以下实例3)。
[0023] 有益效果
[0024] 根据本发明的食品组合物含有乳酸片球菌，并通过微生物的影响来抑制对谷物发 酵广品的损害，从而提商广品的稳定性和寿命。
[0025] 依照根据本发明生产食品组合物的方法，由于通过芽孢杆菌控制PH，从而高效地 培养乳酸片球菌J9,并提高细菌素的产量，从而增加了生产出的食品组合物的稳定性和寿 命。
[0026] 从以上可以看出，由于发酵期间乳酸片球菌J9在高温下增值，含有乳酸片球菌J9 的食品组合物能防止被其他微生物污染，并且由于在发酵期间，表面干燥改善了浸入到谷 物中的微生物的醣酵解。另外，由于乳酸片球菌J9和属杆菌微生物之间相互的PH缓冲行 为，这些微生物被高效地增值。含有乳酸片球菌J9的食品组合物具有与益生菌相同的作 用，例如，促进肠道蠕动的作用（其是乳酸菌固有的作用），抑制有害细菌并提高免疫力的 作用。另外，根据在学术界中与乳酸片球菌物种相关的最新研究，作为在微生物发酵中产生 的天然抗生素的细菌素和乳酸据称出表现出对引起消化性溃疡，比如胃溃疡或者十二指肠 溃疡的幽门螺旋菌的抗菌活性以及对引起食物中毒的细菌的抑制活性。根据本发明的乳酸 片球菌表现出对作为引起肺炎的细菌--肺炎链球菌的抑制活性。因此，含有乳酸片球菌 J9的食品组合物有望提高国民健康。
[0027] [最佳实施例]
[0028] 以下，将参照实例更详细地描述本发明。本发明保护的范围由权利要求书限定，并 不限于这些实例。本发明可以由与本发明主题相关领域的技术人员以不同的实施例实现， 并且本发明的这些不同的实施例同样落入由本发明的权利要求书限定的权利范围内。
[0029] (实例1)利用乳酸片球菌J9菌株（KCCM 11320P)生产食品
[0030] 通过接种乳酸片球菌J9 (KCCM 11320P)菌株来生产谷物发酵的含酶产品的过程 如下：用作为主要材料的谷物是60 %的糙米和大豆，为了改善口味，添加了黑稻、大麦和 高粱，使得谷物的总重量为200kg。将谷物浸泡在水中12小时。洗涤后将谷物放在蒸煮 机中在蒸汽下蒸煮大约40分钟。将蒸煮好的谷物冷却。以相对于谷物总重量的0. 1 %的 量来烧瓶培养乳酸片球菌J9、枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌。将各微生物的数量调整为 I. OX 109CFU/g。将微生物培养液与2L蒸馏水混合，并且用此混合剂给蒸煮后的谷物接种。 将接种过的谷物堆放在塑料盒中，然后，在温度为42°C，湿度为60 %的环境下在发酵设备 中固体培养24小时。然后，将接种过的作物在内部温度为42°C，湿度为40 %或以下的环 境下进行表面干燥48小时，以将微生物渗入到谷物中，从而促进醣酵解。表面干燥后将接 种过的谷物在干燥器中强力干燥以停止发酵。在研磨机中将干燥后的谷物均匀地研磨至50 目。
[0031] (实例2)测量增值的乳酸片球菌J9和芽孢杆菌属微生物的数量
[0032] 将每Img的样本中加入9ml的无菌生理盐水并以KT7的比例稀释，利用带有BCP 的平板计数琼脂培养70小时后，通过数黄色的菌落数目来测量乳酸片球菌J9的数量。将 芽孢杆菌属微生物培养在营养肉汤琼脂培养基中，照以上同样的方式，数白色的菌落进行 计数。细菌的数目如以下表1所示。
[0033] 表 1
[0034]
【权利要求】
1. 通过以下方法生产的一种保健食品，包括： 准备至少一种A类谷物，所述A类谷物选自由糙米和大豆组成的组，并且准备至少一种 B类谷物，所述B类谷物选自由黑米、大麦和高粱组成的组； 通过将所述A类谷物和所述B类谷物的混合物浸入水中来将其浸泡； 利用蒸汽蒸煮通过浸入水中获得的所述浸泡后的谷物； 冷却所述蒸煮后的谷物； 将预先培养好的乳酸片球菌J9和芽孢杆菌属菌株添加到所述冷却后的谷物中； 将所产生的谷物加入固体存储容器中，并在40°C至45°C的温度和50 %至70 %的湿度 下固体培养微生物，培养时间为20至48小时； 在40°C至45°C的温度和20 %至40 %的湿度下进一步固体培养所述固体培养产物，培 养时间为30至60小时；以及 干燥所产生的固体培养产物，然后研磨。
2. 根据权利要求1所述的保健食品，其中，芽孢杆菌属细菌是枯草芽孢杆菌或者短小 芽孢杆菌。
3. 根据权利要求1所述的保健食品，其中，所述食品是大酱。
4. 根据权利要求1所述的保健食品，其中，所述食品是清麴酱。
5. -种生产保健食品的方法，所述方法包括： 准备至少一种A类谷物，所述A类谷物选自由糙米和大豆组成的组，并且准备至少一种 B类谷物，所述B类谷物选自由黑米、大麦和高粱组成的组； 通过将所述A类和所述B类谷物的混合物浸入水中来将其浸泡； 利用蒸汽蒸煮通过浸入水中获得的所述浸泡后的谷物； 冷却所述蒸煮后的谷物； 将预先培养好的乳酸片球菌J9和芽孢杆菌属菌株添加到所述冷却后的谷物中； 将所产生的谷物加入固体存储容器中，并在40°C至45°C的温度和50 %至70 %的湿度 下固体培养微生物，培养时间为20至48小时； 在40°C至45°C的温度和20 %至40 %的湿度下进一步固体培养所述固体培养产物，培 养时间为30至60小时；以及 干燥所产生的固体培养产物，然后研磨。
6. 根据权利要求5所述的方法，其中，芽孢杆菌属细菌是枯草芽孢杆菌或者短小芽孢 杆菌。
7. 根据权利要求5所述的方法，其中，所述食品是大酱。
8. 根据权利要求5所述的方法，其中，所述食品是清麴酱。
9. 乳酸片球菌J9 (KCCM 11320P)具有针对肺炎链球菌的抗菌活性；与所述芽孢杆菌属 菌株共培养时，其可以快速地增长；并且将其添加到食品中时，可提高食品的稳定性。
【文档编号】A23L1/30GK104320980SQ201380022519
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2013年11月11日 优先权日:2012年11月28日
【发明者】李钟九 申请人:J9生物农业协会公司