粪便样品稳定液及制备方法与应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及分子生物学领域，公开了一种粪便样品稳定液，稳定液中成分如下：0.02M-4M硫氰酸胍（Guanidinethiocyanate）、pH=5-10且浓度为2-20M的Tris-HCI、0.05-0.1mMNaCI、1-15mMEDTA。本发明可有效保持粪便样品中被检测成分的稳定性，使病人在家中自助样品提取成为可能，该粪便稳定液不会有碍下游检测（核酸提取和检测），粪便和稳定液的混合物可以直接进入检测流程，极大地方便了粪便样品的后续处理流程灵活性，有助于消化系统疾病的检测和治疗。
【专利说明】粪便样品稳定液及制备方法与应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及分子生物学领域，尤其涉及了一种粪便样品稳定液。
【背景技术】
[0002]目前，医院或体检中心的粪便化验，样品因不稳定而不能保存，必须立即送检。这给病人造成了一定的不便，给医护人员增加了工作负担，同时，也给检测实验室也增加了运作和及时提供结果的难度。因此病人配合提供样品的比例下降，使后续相关的医疗手段的有效性也受到影响。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供一种能够有效保持粪便样品中被检测成分的稳定性，无毒或腐蚀成分，不妨碍下游检测，操作安全方便的粪便样品稳定液。
[0004]为了解决上述技术问题，本发明通过下述技术方案得以解决:
一种粪便样品稳定液，所述的稳定液由Tris (三羟甲基氨基甲烷)、硫氰酸胍(Guanidine th1cyanate)、乙二胺四乙酸(EDTA)、氯化钠及水组成；所述硫氰酸胍的终浓度为0.02M-4M, Tris的终浓度为2_20mM，氯化钠的终浓度为0.05-0.1mM、乙二胺四乙酸的终浓度为l_15mM。
[0005]上述粪便样品稳定液的制备方法如下:
将Tris溶于水中，用盐酸调节pH为5-10，制得Tris-HCI溶液；将乙二胺四乙酸溶于水，用盐酸调节PH为5-10，制得EDTA溶液；将氯化钠溶于水中，并加入硫氰酸胍、Tris-HCI溶液、EDTA溶液混合后，杀菌，得到粪便样品稳定液。
[0006]取按照上述配比配制的粪便样品稳定液，加入与稳定液等体积的粪便样品，混匀；控制温度在50摄氏度以内，保存。
[0007]本发明由于采用了以上技术方案，具有显著的技术效果:
本发明可有效保持粪便样品中被检测成分的稳定性，使病人在家中自助样品提取成为可能，该粪便稳定液不会有碍下游检测(核酸提取和检测)，粪便和稳定液的混合物可以直接进入检测流程，极大地方便了粪便样品的后续处理流程灵活性，有助于消化系统疾病的检测和治疗。
【专利附图】
【附图说明】
[0008]图1是实施例1粪便样品与稳定液混合并提取核酸后，荧光实时PCR检测其中肌动蛋白基因(Actin)的曲线图。
【具体实施方式】
[0009]下面结合附图1与实施例对本发明作进一步详细描述:
实施例1配制粪便样品稳定液，配方如下:
0.02-4M 硫氰酸狐(Guanidine th1cyanate),2_20mM Tris-HCI(pH=5-10),0.05-0.1mMNaCI,l_15mM EDTA。
[0010]其制备方法如下:
将Tris溶于水中，用盐酸调节pH为5-10，制得Tris-HCI溶液；将乙二胺四乙酸溶于水，用盐酸调节PH为5-10，制得EDTA溶液；将氯化钠溶于水中，并加入硫氰酸胍、Tris-HCI溶液、EDTA溶液混合后，杀菌，得到粪便样品稳定液。
[0011]取配制好的粪便样品稳定液，加入与稳定液等体积的粪便样品，混匀；控制温度在50摄氏度以内，保存。
[0012]对比实验:不添加本发明粪便样品稳定液，室温条件下，不同保存天数，检测所提取的DNA含量,见下表:
【权利要求】
1.一种粪便样品稳定液，其特征在于:所述的稳定液由Tris、硫氰酸胍、乙二胺四乙酸、氯化钠及水组成；所述硫氰酸胍的终浓度为0.02M-4M，Tris的终浓度为2_20mM，氯化钠的终浓度为0.05-0.1禮、乙二胺四乙酸的终浓度为1-15禮。
2.—种如权利要求1所述的粪便样品稳定液的制备方法，其特征在于: 将Tris溶于水中，用盐酸调节pH为5-10，制得Tris-HCI溶液；将乙二胺四乙酸溶于水，用盐酸调节PH为5-10，制得EDTA溶液；将氯化钠溶于水中，并加入硫氰酸胍、Tris-HCI溶液、EDTA溶液混合后，杀菌，得到粪便样品稳定液。
3.—种如权利要求1所述的粪便样品稳定液的应用，其特征在于:取配制好的粪便样品稳定液，加入与稳定 液等体积的粪便样品，混匀；控制温度在50摄氏度以内，保存。
【文档编号】C12Q1/68GK104073564SQ201410334771
【公开日】2014年10月1日 申请日期:2014年7月15日 优先权日:2014年7月15日
【发明者】岳汉军, 陈一友, 吕宁 申请人:浙江诺辉生物技术有限公司