一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法及该方法制备的致香物质的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，步骤如下：1）将绿茶置于加入容器中，加入水，加热收集茶香，将茶香导入含有液氮的收集瓶内，茶汤经过微沸后停止加热；取茶汤倒入收集瓶内，合并圆底烧瓶内的茶汤与收集瓶内的绿茶香气组分，得到上固相萃取柱前的绿茶水；2）取绿茶水，以去离子水按照一定的稀释倍数稀释后上样LiChrolutEN固相萃取柱，上样完成后用超纯水洗脱固相萃取柱；将固相萃取柱于真空下抽后用二氯甲烷洗脱萃取柱中的挥发性组分；二氯甲烷洗脱液经干燥后浓缩，即为最终的绿茶茶香精油。本发明的方法，提取的致香物质中无溶剂残留，无特殊异味，香气新鲜、浓郁，提取率更高。
【专利说明】一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法及该方法制备的致香物质
【技术领域】
[0001]本发明属于天然活性成分提取【技术领域】，尤其涉及一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法及该方法制备的致香物质。
【背景技术】
[0002]茶叶树茶属双子叶植物，约30属，500种，分布于热带和亚热带地区。我国有14属，397种，主产长江以南各地，其中茶属Camellia和何树属Schima等均极富经济价值。作为世界三大饮料之一的茶叶，不仅是优良的保健饮料，也是一种良好的中药；其中，不发酵的茶(发酵度为零)的茶叶称为绿茶，已探明的绿茶中含有300多种化学成分，如茶多酚类、氨基酸、咖啡碱、维生素、果胶素、有机酸、脂多糖、蛋白质、芳香族化合物、矿物质、糖类、酶类、色素等，可以起到防暑消褥、提神、养胃、防癌、减肥、健美等功能。
[0003]除水之外，绿茶水中主要有效成分是大量不挥发性物质如茶多酚类、糖类、色素、氨基酸、咖啡碱、维生素等。一般而言，香气物质的总含量不超过茶水本体的2%，绿茶研究资料显示的香气组分中包含了近600多种香气物质，且这些香气物质含量分布从ng/L级到g/L级不等。在这些微量的香气物质组成中，99%是绿茶水中常见的醇、酸及酯类物质，而剩余的决定了茶叶香气特征的1%组分是由近百种含量在μ g/L甚至是ng/L的香气物质组成。这些对绿茶水特征香气有重要贡献的微量甚至痕量香气物质的选择性收集是目前茶叶样品前处理技术中最困难的部分。
[0004]目前，常见的茶叶香气物质收集方法包括液液萃取、固相萃取，顶空取样，固相微萃取，搅拌棒吸附萃取等。在这些方法的比较研究中，可以看出其各有优缺点。液液萃取是香气研究中使用最广泛的萃取技术，其具有处理量大、溶剂选择多样、浓缩倍数更高的优点，多用于茶叶香气化合物的定性分析；由于液液萃取工作量极大、有机溶剂使用量多及定量准确性比较差等缺点，目前急需更方便、安全、高效的萃取收集香气的技术。顶空取样、固相微萃取和搅拌棒吸附萃取具有操作简单，快速、无溶剂、易于自动化操作的特点，适合于大量样品的定量分析，但由于吸附材料的选择性偏好差异，容易造成某些类型香气物质的损失，这些方法很难实现对茶叶香气物质的全面萃取、富集。固相萃取是目前使用最为广泛的样品前处理技术，广泛用于食品、药品、烟草、环境等领域样品的分析。固相萃取具有操作灵活，吸附材料种类多样，溶剂使用量少，浓缩倍数高等特点特别适合于茶叶类微量及痕量重要香气化合物的分离、富集。由于绿茶水香气组分种类、性质的复杂性，香气化合物的浓度含量跨度大，目前还没有一种满足所有需求的前处理方法，并一次性完成对所有香气物质的富集浓缩。
【发明内容】
[0005]为了解决上述的技术问题，本发明的第一目的是提供一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法及该方法。本发明的第二目的是提供上述的方法制备的致香物质。本发明的方法，更适合于萃取茶叶中成分极少且香气化合物的浓度含量跨度大的香气物质成分，提取的致香物质中无溶剂残留，无特殊异味，香气新鲜、浓郁，提取率更高。
[0006]为了实现上述的第一个目的，本发明采用了以下的技术方案:
一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，该方法包括以下的步骤:
1)将绿茶置于加入容器中，加入水，加热收集茶香，将茶香导入含有液氮的收集瓶内，茶汤经过f 1min微沸后停止加热；取一定量的茶汤倒入收集瓶内，合并圆底烧瓶内的茶汤与收集瓶内的绿茶香气组分，得到上固相萃取柱前的绿茶水；
2)取绿茶水，以去离子水按照一定的稀释倍数稀释后上样LiCh1lutEN固相萃取柱，控制过程中上样流速不高于5.0 mL/min，上样完成后用超纯水洗脱固相萃取柱；将固相萃取柱于真空下抽后用二氯甲烷洗脱萃取柱中的挥发性组分；二氯甲烷洗脱液经干燥后浓缩，即为最终的绿茶茶香精油。
[0007]作为优选，所述的绿茶选用明前绿茶。
[0008]作为优选，所述的步骤I)中绿茶进行前处理:称取一定量的干燥绿茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近绝干，然后将真空干燥箱温度调至105°C烘至恒重，粉碎，过筛后，备用。
[0009]作为优选，所述的绿茶过筛后粒度为4(Γ80目。
[0010]作为优选，所述的步骤I)中绿茶与水的料液比选择在l:l(Tl:30。
[0011]作为优选，所述的步骤I)中微沸时间为2飞min。
[0012]作为优选，所述的步骤2)中LiChrolut EN固相萃取柱上样前先分别采用用20 mL二氯甲烷，20 mL甲醇和30mL超纯水进行活化处理。
[0013]作为优选，所述的步骤2)中上样稀释倍数为f 5倍。
[0014]作为优选，所述的步骤2)中上样流速为1.(Γ3.0 mL/min。
[0015]为了实现上述的第二个目的，本发明采用了以下的技术方案:
上述任意一项技术方案所述的方法制备得到的绿茶茶叶中的致香物质。
[0016]由于茶叶不属于芳香类植物，其所含的香气物质成分极少且香气化合物的浓度含量跨度大，提取茶叶香原料香气非常具有挑战性。本发明采用LiCh1lut EN树脂的选择性吸附，对于香气化合物有较好的吸附作用，而对样品中含量更丰富的的茶多酚类、糖类、色素、氨基酸、咖啡碱、维生素等吸附效果较差，工艺过程能尽量减少目标致香成分的损失，最后得到天然的茶香提取物。成品绿茶茶香精油无溶剂残留，无特殊异味，香气新鲜、浓郁，提取率更高。本发明测定所得明前绿茶茶香精油的提取率最高可达到8.26%、在DPPH自由基体系中，明前绿茶茶香精油的IC5tl为51.23μ g/mL。
【具体实施方式】
[0017]以下给出实施例，对本发明作进一步说明。
[0018]实施例1
一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，该方法包括以下的步骤:
(1)固相萃取的填装:自行填装对茶香具有良好吸附功能的德国默克密理博公司LiChrolut EN (1000 mg)固相萃取柱；
(2)LiChrolut EN固相萃取柱的活化处理:上样前先分别采用20 mL 二氯甲烷，20 mL甲醇和30mL超纯水进行活化处理
(3)明前绿茶(浙江产区)前处理:称取一定量的干燥明前绿茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近绝干，然后将真空干燥箱温度调至105°C烘至恒重，并分别按一定明前绿茶粒度选择要求过筛后，备用；
(4)茶水的制备:准确称取60目的明前绿茶，将其置于套在电热套的1000mL圆底烧瓶中，根据1:20的料液比值加入沸水，将圆底烧瓶内排出的茶香以玻璃管导入含有液氮的收集瓶内，茶汤经过4min微沸时间后撤去圆底烧瓶装置；取一定量的茶汤倒入收集瓶内，合并圆底烧瓶内的茶汤与收集瓶内的绿茶香气组分，得到上固相萃取柱前的明前绿茶水；
(5)上样:取一定量的明前绿茶水，以去离子水按照2倍的稀释倍数稀释后上样LiChrolut EN固相萃取柱，控制过程中上样流速为2.0 mL/min，上样完成后用50mL超纯水洗脱固相萃取柱中残留的明前绿茶水、色素、糖分等物质。将固相萃取柱于真空度为0.1MPa下抽干10 min后用20mL 二氯甲烷洗脱萃取柱中的挥发性组分；二氯甲烷洗脱液经无水硫酸钠干燥后氮吹浓缩至0.5mL,即为最终的明前绿茶茶香精油。
[0019]测定所得明前绿茶茶香精油的提取率为8.26%、在DPPH自由基体系中，明前绿茶茶香精油的IC5tl为51.23 μ g/mL。
[0020]实施例2
一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，该方法包括以下的步骤:
(1)固相萃取的填装:自行填装对茶香具有良好吸附功能的德国默克密理博公司LiChrolut EN (1000 mg)固相萃取柱；
(2)LiChrolut EN固相萃取柱的活化处理:上样前先分别采用用20 mL 二氯甲烷，20mL甲醇和30mL超纯水进行活化处理
(3)明前绿茶(浙江产区)前处理:称取一定量的干燥明前绿茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近绝干，然后将真空干燥箱温度调至105°C烘至恒重，并分别按一定明前绿茶粒度选择要求过筛后，备用；
(4)茶水的制备:准确称取40目的明前绿茶，将其置于套在电热套的1000mL圆底烧瓶中，根据1:10的料液比值加入沸水，将圆底烧瓶内排出的茶香以玻璃管导入含有液氮的收集瓶内，茶汤经过6min微沸时间后撤去圆底烧瓶装置；取一定量的茶汤倒入收集瓶内，合并圆底烧瓶内的茶汤与收集瓶内的绿茶香气组分，得到上固相萃取柱前的明前绿茶水；
(5)上样:取一定量的明前绿茶水，以去离子水按照5倍的稀释倍数稀释后上样LiChrolut EN固相萃取柱，控制过程中上样流速为3.0 mL/min，上样完成后用50mL超纯水洗脱固相萃取柱中残留的明前绿茶水、色素、糖分等物质。将固相萃取柱于真空度为0.1MPa下抽干10 min后用20mL 二氯甲烷洗脱萃取柱中的挥发性组分；二氯甲烷洗脱液经无水硫酸钠干燥后氮吹浓缩至0.5mL,即为最终的明前绿茶茶香精油。
[0021]测定所得明前绿茶茶香精油的提取率为7.76%、在DPPH自由基体系中，明前绿茶茶香精油的IC5tl为52.05 μ g/mL。
[0022]实施例3
一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，该方法包括以下的步骤:
(I)固相萃取的填装:自行填装对茶香具有良好吸附功能的德国默克密理博公司LiChrolut EN (1000 mg)固相萃取柱； (2)LiChrolut EN固相萃取柱的活化处理:上样前先分别采用用20 mL 二氯甲烷，20mL甲醇和30mL超纯水进行活化处理
(3)明前绿茶(浙江产区)前处理:称取一定量的干燥明前绿茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近绝干，然后将真空干燥箱温度调至105°C烘至恒重，并分别按一定明前绿茶粒度选择要求过筛后，备用；
(4)茶水的制备:准确称取80目的明前绿茶，将其置于套在电热套的1000mL圆底烧瓶中，根据1:30的料液比值加入沸水，将圆底烧瓶内排出的茶香以玻璃管导入含有液氮的收集瓶内，茶汤经过2min微沸时间后撤去圆底烧瓶装置；取一定量的茶汤倒入收集瓶内，合并圆底烧瓶内的茶汤与收集瓶内的绿茶香气组分，得到上固相萃取柱前的明前绿茶水；
(5)上样:取一定量的明前绿茶水，以去离子水按照3倍的稀释倍数稀释后上样LiChrolut EN固相萃取柱，控制过程中上样流速为1.0 mL/min，上样完成后用50mL超纯水洗脱固相萃取柱中残留的明前绿茶水、色素、糖分等物质。将固相萃取柱于真空度为0.1MPa下抽干10 min后用20mL 二氯甲烷洗脱萃取柱中的挥发性组分；二氯甲烷洗脱液经无水硫酸钠干燥后氮吹浓缩至0.5mL,即为最终的明前绿茶茶香精油。
[0023]测定所得明前绿茶茶香精油的提取率为7.88%、在DPPH自由基体系中，明前绿茶茶香精油的IC5tl为52.38 μ g/mL。
[0024]实施例4
一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，该方法包括以下的步骤:
(1)固相萃取的填装:自行填装对茶香具有良好吸附功能的德国默克密理博公司LiChrolut EN (1000 mg)固相萃取柱；
(2)LiChrolut EN固相萃取柱的活化处理:上样前先分别采用用20 mL 二氯甲烷，20mL甲醇和30mL超纯水进行活化处理
(3)明前绿茶(浙江产区)前处理:称取一定量的干燥明前绿茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近绝干，然后将真空干燥箱温度调至105°C烘至恒重，并分别按一定明前绿茶粒度选择要求过筛后，备用；
(4)茶水的制备:准确称取60目的明前绿茶，将其置于套在电热套的1000mL圆底烧瓶中，根据1:20的料液比值加入沸水，将圆底烧瓶内排出的茶香以玻璃管导入含有液氮的收集瓶内，茶汤经过2min微沸时间后撤去圆底烧瓶装置；取一定量的茶汤倒入收集瓶内，合并圆底烧瓶内的茶汤与收集瓶内的绿茶香气组分，得到上固相萃取柱前的明前绿茶水；
(5)上样:取一定量的明前绿茶水，以去离子水按照2倍的稀释倍数稀释后上样LiChrolut EN固相萃取柱，控制过程中上样流速为3.0 mL/min，上样完成后用50mL超纯水洗脱固相萃取柱中残留的明前绿茶水、色素、糖分等物质。将固相萃取柱于真空度为0.1MPa下抽干10 min后用20mL 二氯甲烷洗脱萃取柱中的挥发性组分；二氯甲烷洗脱液经无水硫酸钠干燥后氮吹浓缩至0.5mL,即为最终的明前绿茶茶香精油。
[0025]测定所得明前绿茶茶香精油的提取率为8.17%、在DPPH自由基体系中，明前绿茶茶香精油的IC5tl为55.02 μ g/mL。
【权利要求】
1.一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，其特征在于该方法包括以下的步骤: 1)将绿茶置于加入容器中，加入水，加热收集茶香，将茶香导入含有液氮的收集瓶内，茶汤经过f 1min微沸后停止加热；取一定量的茶汤倒入收集瓶内，合并圆底烧瓶内的茶汤与收集瓶内的绿茶香气组分，得到上固相萃取柱前的绿茶水； 2)取绿茶水，以去离子水按照一定的稀释倍数稀释后上样LiCh1lutEN固相萃取柱，控制过程中上样流速不高于5.0 mL/min，上样完成后用超纯水洗脱固相萃取柱；将固相萃取柱于真空下抽后用二氯甲烷洗脱萃取柱中的挥发性组分；二氯甲烷洗脱液经干燥后浓缩，即为最终的绿茶茶香精油。
2.根据权利要求1所述的一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，其特征在于:绿茶选用明前绿茶。
3.根据权利要求1或2所述的一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，其特征在于:步骤I)中绿茶进行前处理:称取一定量的干燥绿茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近绝干，然后将真空干燥箱温度调至105 °C烘至恒重，粉碎，过筛后，备用。
4.根据权利要求3所述的一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，其特征在于:绿茶过筛后粒度为40?80目。
5.根据权利要求1或2所述的一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，其特征在于:步骤I)中绿茶与水的料液比选择在1: l(Tl:30。
6.根据权利要求1或2所述的一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，其特征在于:步骤I)中微沸时间为2飞min。
7.根据权利要求1所述的一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，其特征在于:步骤2)中LiChrolut EN固相萃取柱上样前先分别采用用20 mL 二氯甲烷，20 mL甲醇和30mL超纯水进行活化处理。
8.根据权利要求1或7所述的一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，其特征在于:步骤2)中上样稀释倍数为广5倍。
9.根据权利要求1或7所述的一种选择收集绿茶茶叶中致香成分的方法，其特征在于:步骤2)中上样流速为1.(Γ3.0 mL/min。
10.权利要求1、任意一项权利要求所述的方法制备得到的绿茶茶叶中的致香物质。
【文档编号】A23F3/42GK104351444SQ201410565048
【公开日】2015年2月18日 申请日期:2014年10月22日 优先权日:2014年10月22日
【发明者】高阳, 赵生, 储国海, 张丽娜, 许式强, 许利平, 徐清泉, 王韵 申请人:浙江中烟工业有限责任公司