植物化学物质强化的水的制作方法

文档序号:11158750阅读:404来源:国知局
本发明涉及增补过的水和饮料。具体来说,本发明提供了植物化学物质强化的水和饮料。
背景技术
:水是人体的主要成分,在成年人中占体重的60%,在儿童中占75%。水将营养物带到细胞,从重要脏器带走毒素,并为耳、鼻、喉和肠提供潮湿环境。医学研究院(TheinstituteofMedicine)(2004)推荐在正常条件下的每日流体摄入量,对男性来说为125盎司(15杯),对女性来说为91盎司(11杯)。对于从事锻炼、在炎热天气中或患有发烧、呕吐或腹泻疾病的人来说,流体摄入推荐值更高。约80%的流体摄入量来自饮用水和其他饮料,剩余的20%来自食物。由缺少充足的流体摄入造成的脱水是需要紧急护理、住院治疗的严重的健康护理问题,并且甚至可能引起死亡。老人、儿童、从事剧烈锻炼或运动的个体以及暴露于炎热天气的个体,特别容易脱水。老年人中的脱水可能使记忆功能恶化。健康护理专家鼓励通过提高水的消费量来确保充足的流体摄入。在自来水中检测到大量有害污染物和痕量药物。对自来水和井水的安全性和纯度的担忧导致瓶装水的广泛普及。预期在不远的将来瓶装水的销售将超过碳酸软饮料的销售(纽约时报(NewYorkTimes),2013年10月28日)。目前在市场上可以获得各种不同品牌的水。瓶装水工业主要是自我调节的,并且瓶装水通常含有许多与自来水中存在的相同的污染物。目前,瓶装水市场正快速增长,每年的销售额在美国为150亿美元,在全球为500亿美元。饮用水为最佳健康所需的矿物质摄入提供了重要来源。一些瓶装水可能缺乏必需的矿物质如钙、镁和钠(AzoulayA等,“自来水与瓶装水的矿物质含量比较”(Comparisonofthemineralcontentoftapwaterandbottledwaters),普通内科医学杂志(J.Gen.Intern.Med.)16:168-175,2001)。根据国际瓶装水协会(InternationalBottledWaterAssociation),存在几种类型的瓶装水:自来水或城市用水,泉水,矿泉水,井水,自流水,苏打水和纯净水。大多数天然瓶装水经过最低限度的处理。但是处理过的瓶装水使用多种纯化方法例如蒸馏、反渗透、过滤和卫生处理。此外,几种特殊瓶装水也在销售:碱性水,矿泉水,维生素水,能量水,纤维水(fiberwater),抗氧化水,能量水,加味水和其他具有天然和促进健康的成分的水。将植物用于康复可以追溯到最早的有记录的历史。在地球上的250,000种植物物种中,超过80,000种被用于各种的医学应用。发展中国家中约80%的人和发达国家中高达30%的人通常将植物来源的药物用于他们的健康护理。由于支付能力和相信草药这些天然药物与现代对症疗法药物相比可能具有更低的毒性和更少的副作用,草药的普及性正在增加。植物不仅是食物营养的主要来源,而且是生物活性植物化学物质的显著来源。植物化学物质在植物生长和发育的自然过程中产生,并充当植物对抗环境胁迫条件的防御机制,针对微生物、昆虫和食草动物提供保护。由于各种的健康益处,植物化学物质例如类胡萝卜素、酚、生物碱和有机硫化合物目前有售。正在评估来自许多本土植物的植物营养物的抗微生物、抗癌、免疫刺激、心脏保护和健脑效果。许多植物含有几种不同的植物化学物质,其可与多种生物靶相互作用并对人类产生大量健康益处。具有改善健康的植物化学物质的植物的非限制性实例包括假马齿苋(Bacopamonniera)、积雪草(Centellaasiatica)、香蒲(typhasup.)、浮萍(Lemnaminor)、柠檬草(Cymbopogoncitratus)、莲花、水生薄荷、石莲花(Hydrocotylespp)、芋艿(Colocasiaspp)、越南香菜、水芹、荸荠、空心菜、豆瓣菜和由Bhagyaleena和Gopalan所列出的大量其他植物(Bhagyaleena和Gopalan,印度喀拉拉邦Palakkad的池塘中的水生药用植物(AquaticmedicinalplantsinpondsofPalakkad,Kerala,India),IOSR药学和生物科学杂志(IOSRJournalofpharmacyandbiologicalsciences).2(3):29-35,2012)。此外已显示,纯化的单独的植物化学物质可能不具有整个植株的生物学益处。超过80%的当前使用的药物源自天然来源或天然产物的改良形式。植物来源的药物的实例包括阿司匹林、紫杉醇、尼古丁、他汀,但它们中的许多现在是合成的(Harvey,AL;药物发现中的天然产物(Naturalproductsindrugdiscovery),今日药物发现(Drugdiscoverytoday).13(19-20):894-901,2008)。类黄酮是最大的一组多酚化合物,具有超过2000种不同的已知类黄酮化合物。这些化合物可以在分子结构的基础上分类,例如花青素和花黄素,其中花黄素被进一步分成黄酮醇、黄烷、黄烷醇、黄酮和异黄酮(对于常见类黄酮化合物的名单,参见Ramassamy,多酚化合物在神经变性疾病治疗中的新兴作用:它们的细胞内靶点的综述(Emergingroleofpolyphenoliccompoundsinthetreatmentofneurodegenerativediseases:areviewoftheirintracellulartargets),欧洲药理学杂志(EurJPharmacol).2006年9月1日;545(1):51-64Epub2006年6月17日)。类黄酮化合物通常被羟基化、甲氧基化和/或被通常一个糖分子糖基化,尽管已经注意到多达3个糖分子(Ramassamy,多酚化合物在神经变性疾病治疗中的新兴作用:它们的细胞内靶点的综述(Emergingroleofpolyphenoliccompoundsinthetreatmentofneurodegenerativediseases:areviewoftheirintracellulartargets),欧洲药理学杂志.2006年9月1日;545(1):51-64Epub2006年6月17日)。在吸收后,来自植物来源的类黄酮化合物可以跨过血脑屏障以提供神经性益处(William和Spencer,类黄酮、认知和痴呆症:作用、机制和用于阿兹海默病的潜在治疗用途(Flavonoids,cognition,anddementia:Actions,mechanisms,andpotentialtherapeuticutilityforAlzheimerdisease),自由基生物学与医学(FreeRadicBiolMed.)2012年1月1日;52(1):35-45)。此外,已发现类黄酮事实上积累在脑的对于神经功能和记忆来说关键的区域中(Andres-Lacueva等,在喂食蓝莓的老年大鼠中花青素被集中发现并可能增强记忆(Anthocyaninsinagedblueberry-fedratsarefoundcentrallyandmayenhancememory),营养神经科学(NutrNeurosci.)2005年4月;8(2):111-20)。已提出,抗氧化活性可能不是类黄酮对中枢神经系统有益的唯一机制,而神经性益处也可能是由脑细胞中的细胞内信号传导途径的修改、对外周和脑血管系统的促进血液流动和营养物供应的效应和降低来自有毒化合物和炎性过程的神经元损伤的能力造成的。通过增强血管功能,类黄酮在脑健康中发挥关键作用,这是因为一些心血管风险因子与痴呆症相关。类黄酮促进内皮功能,增强氧化氮的生产,调节血压并降低炎症,所有这些都促进更好的脑血液流动和神经元功能。几项人类研究已证实了富含多酚的食物的消费与阿兹海默氏病的发作延迟之间的关联性(Ramassamy,多酚化合物在神经变性疾病治疗中的新兴作用:它们的细胞内靶点的综述(Emergingroleofpolyphenoliccompoundsinthetreatmentofneurodegenerativediseases:areviewoftheirintracellulartargets),欧洲药理学杂志.2006年9月1日;545(1):51-64Epub2006年6月17日)。皂苷是两亲性糖苷,这由它们当在水性溶液中振摇时具有的肥皂样发泡性质所定义。所述化合物具有结合到亲脂性三萜烯衍生物的至少一个亲水性糖苷部分,因此大多数皂苷容易溶解在水中。皂苷起到拒食剂作用,并保护植物以对抗微生物和真菌。在某些植物物种例如燕麦和菠菜中,皂苷增强营养吸收并有助于动物消化。在许多情况下,皂苷口味是苦的,即具有差的适口性,或者在特定浓度下可以具有威胁生命的动物毒性,例如昆虫、鱼和冷血生物毒性。有证据表明在传统医药制剂中存在皂苷。目前的膳食增补剂和营养品公司因皂苷的健康益处正在销售它们。积雪草(Centellaasiatica)(CA)是一种草本植物,其取决于物种,存在于亚洲、东欧、南非和热带和亚热带地区中的南太平洋中,或多岩高地中。CA的提取物已在民间医学中使用数千年,用于皮肤病例如麻风病、狼疮、静脉曲张性溃疡、湿疹、银屑病以及泌尿生殖系统疾病、腹泻、焦虑和认知改善(Gohil等,积雪草的药理学综述:潜在的万灵草药(PharmacologicalreviewonCentellaasiatica:apotentialherbalcure-all),印度药物科学杂志(IndianJPharmSci.)2010年9月;72(5):546-56)。然而,完整植株、特别是叶,可用于医药(Roy等,积雪草的最新更新:植物化学、药理学和传统用途(Currentupdatesoncentellaasiatica:phytochemistry,pharmacologyandtraditionaluses),药用植物研究(Medicinalplantresearch),3:20-36,2013)。CA的分析显示,它的主要活性成分是皂苷和三萜烯皂草苷,包括积雪草皂苷、积雪草酸、羟基积雪草酸、玻热模苷(Brahmoside)和玻热米苷(Brahminoside)、异参枯尼苷(Isothankuniside)和参枯尼苷(Thankuniside)、centelloside以及甾醇和类黄酮、羟基积雪草苷和羟基积雪草酸。此外,还已鉴定到其他萜烯、类黄酮衍生物、多糖、多炔、酚酸(Orhan,积雪草:从传统药物到具有神经保护潜力的现代药物(Centellaasiaticaurban:fromtraditionalmedicinetomodernmedicinewithneuroprotectivepotential),《基于证据的补充与替代医学》(Evidence-basedcomplementaryandalternativemedicine),2012)。皂苷和皂苷配基与伤口愈合和血管效应有关。在小鼠模型上试验的CA提取物显示出在创伤位点处细胞增殖和胶原蛋白合成增加,支持伤口愈合的要求。其他CA植物化学物质在小鼠应激试验期间显示出抗抑郁活性,表明CA具有CNS和子宫松弛作用,并且已显示出抗惊厥效果(Gohil等,积雪草的药理学综述:潜在的万灵草药(PharmacologicalreviewonCentellaasiatica:apotentialherbalcure-all),印度药物科学杂志2010年9月;72(5):546-56)。研究还已显示,CA提取物可以提高集中力,降低氧化CNS应激,并减轻认知缺陷(Gohil等,积雪草的药理学综述:潜在的万灵草药(PharmacologicalreviewonCentellaasiatica:apotentialherbalcure-all),印度药物科学杂志2010年9月;72(5):546-56)。研究还已指出,来自CA提取物的化合物具有神经保护、抗氧化、抗炎、免疫刺激、抗溃疡、抗惊厥、抗焦虑、镇静、抗病毒、抗细菌、杀虫、抗真菌、心脏保护、抗癌和抗基因毒性和静脉缺陷作用(Shinomol等,探索婆罗米(假马齿苋和积雪草)在脑功能和治疗中的作用(ExploringtheroleofBrahmi(BacopaMonnieriandCentellaasiatica)inbrainfunctionandtherapy),关于内分泌、新陈代谢、免疫药物发现的最近的专利(Recentpatentsonendocrine,metabolicandimmunedrugdiscovery).5:33-49,2011;OrhanIE,积雪草:从传统药物到具有神经保护潜力的现代药物(Centellaasiaticaurban:fromtraditionalmedicinetomodernmedicinewithneuroprotectivepotential),《基于证据的补充与替代医学》(Evidence-basedcomplementaryandalternativemedicine),2012)。草药假马齿苋(Bacopamonniera)(假马齿苋,BM)和具有与假马齿苋一致的药理学属性的类似植物麦花草(Bacopafloribunda)(Gubbannavar等,假马齿苋和麦花草的茎和叶的比较生药学和初步生理化学分析(Acomparativepharmacognosticalandpreliminaryphysico-chemicalanalysisofstemandleafofBacopamonnieriandbacopafloribunda),Ayu34:95-102,2013)天然生长在热带和亚热带气候下的沼泽湿土中。整个植株可药用。在每一季中,与BM的下部和根中相比,在含有叶的枝条中中总皂苷的水平更高(Phrompittayarat等,季节、不同植物部分和植物生长阶段对假马齿苋中皂苷量和分布的影响(Influenceofseasons,differentplantparts,andplantgrowthstagesonsaponinquantityanddistributioninBacopamonnieri),33:193-199,2011)。BM在阿育吠陀医药体系中已被使用超过3000年,作为健脑药以增强记忆、学习和集中力,并治疗焦虑、癫痫、心脏病、呼吸系统问题、肠易激、和胃溃疡(Kongkeaw等,假马齿苋提取物的认知效果的随机受控试验的元分析(Meta-analysisofrandomizedcontrolledtrialsoncognitiveeffectsofBacopamonnieriextract),民族药物学杂志(J.ofEthnopharmacology)151:528-535,2014)。大量动物和人类研究已证实了BM在各种障碍中的效能,包括在成年人和儿童中的认知益处,焦虑、抑郁、癫痫、支气管炎、哮喘、肠易激、胃溃疡、心脏病、癌症、药物和重金属中毒的治疗。尽管婆罗米这一名称有时被用于描述积雪草(Centellaasiatica)(GotuKola)以及假马齿苋(Bacopamonniera),并且事实上这两种植物都对脑功能包括记忆具有保护效果,但在分类学上,假马齿苋(Bacopamonniera)(BM)和积雪草(Centellaasiatica)(CA)来自完全不同的植物科(分别为玄参科和伞形科)。另外这两种植物在物理特征和化学组成上不同。目前用于增强记忆的组合物和方法尚有不足。例如,用于阿兹海默氏病的药物已显示在患者中缺少效能,并且不能阻止记忆丧失。此外,这些化合物未被批准用于普通老年人群。天然化合物例如银杏,已被发现在增强记忆中无效。同样地,目前的饮用水组合物不能提供来自植物化学物质和任选地纤维、膳食矿物质和膳食增补剂的增强的健康益处。因此,需要的是促进水化并在同时改善消费者健康的新的流体组合物。技术实现要素:实验出人意料地发现,一些植物的带有叶的茎可以在没有根系的情况下在水中存活,并且特定储存条件引起有益化学物质的合成和释放增加。因此,提供了一种使用假马齿苋、积雪草或这两种植物的组合的部分制备植物化学物质强化的流体的方法。已发现,在一些实施方式中是所述植物的气生部分或叶片部分的植物材料分泌植物化学物质。所述假马齿苋或积雪草的气生部分任选地在距分枝的顶端8至10cm之间,例如8.25cm、8.5cm、8.75cm、9cm、9.25cm、9.5cm或9.75cm的距离处收集。因此,有用的范围可以来自任何所指明的值。任选地将所述假马齿苋或积雪草的气生或叶片部分以每100ml流体1g至4g之间的量添加到所述流体。非限制性实例包括1.25g、1.5g、1.75g、2g、2.25g、2.5g、2.75g、3g、3.25g、3.5g和3.75g。然而,本领域技术人员将会认识到,有用的范围可以来自任何所指明的值。将所述植物材料置于具有至少痕量矿物质的流体中,已发现所述痕量矿物质在实验期间增加植物存活率和寿命。有用的矿物质包括钠、钙和钾。试验显示,接近中性或碱性的pH例如至少6.5的pH提高植物存活率。有用的pH值的非限制性实例包括7至7.8之间的pH,例如7、7.2、7.4、7.5、7.6、7.8,以及这些值之间的范围例如7.2至7.6之间。由于在冰箱和低温下储存与室温储存相比增加植物存活时间并且出人意料地增加植物化学物质生产,因此将所述植物储存在约1.7℃例如1.6℃、1.75℃、1.8℃、2℃、2.5℃、3℃、3.5℃、4℃、4.5℃、5℃、5.5℃、6℃、6.5℃、7℃、7.5℃、8℃、8.5℃、9℃、9.5℃和10℃的流体中。因此,有用的范围可以来自任何所指明的值。这种储存引起已被显示出产生健康益处的植物化学物质从所述植物释放到所述储存流体例如水中。已发现,用天然防腐剂进行预处理增加存活时间。因此,在一些变化形式中,在添加到所述流体之前将所述植物材料用防腐剂进行处理。本发明可用于在动物、具体地在人类中增强记忆和健康。此外,所述强化的流体也提高警觉,这对于司机、飞行员、航空调度员、轮班工人和苦于时差的人来说是特别重要的。BM的药理效果已被归因于几种生物碱、皂苷和甾醇的存在。BM的生物学作用主要是由于主要成分如苦艾素(Bacoside)A3、假马齿苋皂苷(Bacopaside)II、假马齿苋皂苷X、BacosaponinC和假马齿苋皂苷I(Shinomol等,探索婆罗米(假马齿苋和积雪草)在脑功能和治疗中的作用(ExploringtheroleofBrahmi(BacopaMonnieriandCentellaasiatica)inbrainfunctionandtherapy),关于内分泌、新陈代谢、免疫药物发现的最近的专利.5:33-49,2011)。最初分离的苦艾素A是苦艾素A3、假马齿苋皂苷II、假马齿苋皂苷X和BacosaponinC的混合物。BM在推荐的剂量下是安全的,并且副作用尚未见报道。当腹腔给药到大鼠时,CA的醇提取物在350mg/kg的剂量下未显示出任何毒性。报道的副作用包括肠胃不适和恶心。由于其通经作用,在妊娠期间应该避免CA。所述植物化学物质任选地被提供为生药或提取物。推荐的生药剂量为每日0.5至6.0g。因此,一种或多种草药任选地以0.5g、1.0g、1.5g、2.0g、2.5g、3.0g、3.5g、4.0g、4.5g、5.0g、5.5g或6.0g的量添加。然而,本领域技术人员将理解,有用的范围可以来自任何所指明的值。对于积雪草皂苷、积雪草酸和羟基积雪草酸标准化的提取物的推荐剂量为60-120mg。例如,推荐的BM剂量为成年人每天5-12gBM粉末和儿童每天2.5-6gBM粉末,或成年人每天200-400mgBM提取物和儿童每天100-200mgBM提取物。口服给药到大鼠的BM提取物的LD50,对于水性提取物来说为5g/kg,对于醇提取物来说为17g/kg(Martis和Rao,假马齿苋的神经药理活性(NeuropharmacologicalactivityofHerpestismonniera),Fitotherapia1992;63:399-404)。CA提取物的典型剂量为约600mg干燥叶片或300-680mg胶囊(Gohil等,积雪草的药理学综述:潜在的万能草药(PharmacologicalreviewonCentellaasiatica:apotentialherbalcure-all),印度药物科学杂志2010年9月;72(5):546-56)。苦艾素A3的剂量任选为每100ml水0.40至0.60mg,例如0.0043mg/ml、0.0045mg/ml、0.00475mg/ml、0.0050mg/ml、0.00525mg/ml、0.0055mg/ml、0.0056mg/ml、0.00575mg/ml或0.0060mg/ml。假马齿苋皂苷II任选地以每100ml水1.75至2.50mg的量提供,例如0.020mg/ml、0.0215mg/ml、0.022mg/ml、0.0225mg/ml、0.023mg/ml、0.0235mg/ml、0.024mg/ml、0.0243mg/ml、0.025mg/ml。假马齿苋皂苷X任选地以每100ml0.30至0.85mg的量提供,例如0.0032mg/ml、0.00325mg/ml、0.0035mg/ml、0.00375mg/ml、0.0040mg/ml、0.00425mg/ml、0.0045mg/ml、0.00475mg/ml、0.005mg/ml、0.00525mg/ml、0.0055mg/ml、0.00575mg/ml、0.006mg/ml、0.00625mg/ml、0.0065mg/ml、0.00675mg/ml、0.0070mg/ml、0.00725mg/ml、0.0075mg/ml、0.008mg/ml、0.0081mg/ml或0.0085mg/ml。BacosaporinC任选地以每100ml水0.70至1.0mg的量提供。剂量的非限制性实例包括0.0070mg/ml、0.0072mg/ml、0.00725mg/ml、0.0075mg/ml、0.00775mg/ml、0.0080mg/ml、0.00825mg/ml、0.0085mg/ml、0.00875mg/ml、0.0090mg/ml、0.00925mg/ml、0.0095mg/ml、0.0096mg/ml、0.00975mg/ml和1.0mg/ml。本领域技术人员将理解,有用的范围可以落于任何所指示的值之内。本发明的强化流体可以通过在从植物材料提取化学物质后,向流体添加至少一种处理过的植物化学物质源来进一步增强。有用的处理过的植物化学物质源包括粉末化的假马齿苋、粉末化的积雪草、粉末化的假马齿苋的气生植株部分、粉末化的积雪草的气生植株部分、假马齿苋的水提取物、积雪草的水提取物、假马齿苋的醇提取物、积雪草的醇提取物、干燥的假马齿苋气生植株部分和干燥的积雪草气生植株部分。在一些变化形式中,饮料可以被调味。调味剂的非限制性实例包括浆果香料、水果香料、辛香料、咖啡香料和茶香料。在一些特定实施方式中,调味剂可以用人造或天然甜味剂、维生素、矿物质、纤维和香辛料增强。人造甜味剂的非限制性实例包括三氯蔗糖、阿斯巴甜、葡萄糖天冬酰胺与麦芽糖糊精的组合、环己基氨基磺酸盐、糖精、纽甜、乙酰磺胺酸钾、阿力甜、环己基氨基磺酸钠、甜素和D-塔格糖。天然甜味剂的实例包括罗汉果苷、甜叶菊或其他甜菊糖苷、蔗糖、甘露糖醇、brassein、仙茅甜蛋白、赤藓糖醇、甘油、甘草甜素(clycrrhizin)、菊粉、异麦芽糖醇、乳糖醇、神秘果蛋白(miraculin)、莫纳甜、应乐果甜蛋白(monellin)、倍他丁(pentadin)、山梨糖醇、奇异果甜蛋白(thaumain)、木糖醇和蜂蜜,但其不限制本发明的范围。在使用人造甜味剂的实施方式中,人造甜味剂的浓度任选为1x105至2x101g/L。当使用天然甜味剂时,甜味剂的浓度任选地高达1.46x101M。任选地添加一种或多种盐,例如至少一种无毒性矿物盐。非限制性实例包括与氯、硫酸根、碘、溴、碳酸氢根离子或本领域中已知的其他离子结合的矿物质Ca、Na、Mg、V、K、Cr、Mn、Co、Cu、Zn、As、Mo和Se。实例包括氯化钠、硫化锌、碘化钾。盐任选地在1x101mg/L至2x102mg/L之间。浓度的非限制性实例包括最高500mg/L。任选地,例如通过将二氧化碳溶解在饮料中将饮料碳酸化。强化流体被设计成促进例如动物以及更特别是人类摄入足够的水和流体。附图说明为了更全面地理解本发明,应结合随附的图参考下面的详细描述,在附图中:图1是示出了假马齿苋植株在室温(72℉,22.2℃)或低温(35℉,1.7℃;在冰箱中)下的存活率的图。在所示的各个不同时间评估植株在pH7.0下的存活率。图2是示出了积雪草植株在室温(72℉,22.2℃)或低温(35℉,1.7℃;在冰箱中)下的存活率的图。在所示的各个不同时间评估植株在pH7.0下的存活率。植株在室温下的存活率明显更低。图3是示出了假马齿苋在不同pH下的存活率的图。植株在酸性pH下的存活率不良。中性或碱性pH提高植株存活率。图4是示出了在冰箱(35℉,1.7℃)中在不同pH水平下保持后,假马齿苋植物材料中的假马齿苋皂苷水平(对照的%)的图。使用未处理的植物材料皂苷水平作为对照值。图5是示出了在室温(72℉,22.2℃)或冰箱(35℉,1.7℃)下保持后,在除去植物材料后水中的假马齿苋皂苷水平(μg/100ml)的图。图6是用于将植物材料保持在流体中的第一实施方式设计的图示。植物材料自由漂浮在流体中。图7(A)和(B)是用于将植物材料保持在流体中的第二实施方式设计的图示。(A)将植物材料捕获在可自由漂浮的袋子中;(B)将植物材料捕获在与瓶盖相连的袋子中。图8是用于将植物材料保持在流体中的第三实施方式设计的图示。植物材料被瓶底上的网材料捕获。图9是用于将植物材料保持在流体中的第四实施方式设计的图示。使用挂钩将植物材料附连到瓶子。用于附连的手段包括细绳或其他材料、植株上的孔。图10是用于将植物材料保持在流体中的第五实施方式设计的图示。将材料钮附着到瓶底,并附连植物材料。图11是用于将植物材料保持在流体中的第六实施方式设计的图示。将植物材料自由漂浮在流体中,并使用筛或网状锥体保持在瓶中。图12(A)和(B)是用于将植物材料保持在流体中的第六实施方式设计的图示。(A)将植物材料自由漂浮在流体中,并使用网状盖保持。(B)所述网状盖的展开图,被示出为夹在瓶子的边缘上。优选实施方式的详细描述当在本文中使用时,“假马齿苋”或“BM”是指假马齿苋(Bacopamonnieri),一种具有大量分枝、小的肉质椭圆形叶和浅紫色花的小型匍匐草本植物。它在热带地区的潮湿多沙区域中生长。植物的常用名包括婆罗米、假马齿苋和水海索草。该术语在其最广泛的意义上意味着包括Bacopamonnieri(L.)Wettst.、Bacopamonniera(L.)Pennellyes、HerpestismonnieraL.Kunth、LysimachiamonnieriL.Cent、Gratiolamonnieri(L.)L和/或MonnieracuneifoliaMichaux。当在本文中使用时,“积雪草”或“CA”是指积雪草(Centellaasiatica),一种在潮湿的热带和亚热带地区发现的小型匍匐多年生草本植物。植物具有细长的茎,并具有圆形叶和略带红色的绿色匍匐枝。该草药也被称为印度(或亚洲)石莲花、雷公根、老虎草(tigerherb)、sarswathiaku、muththil、kudangal、thankuni、mandukaparni、ondelaga、vallaarai、brahmibooti(或brahmabuti)以及各种的其他地方名称。当在本文中使用时,“痕量”是指浓度为至少0.01mg/L至约300mg/L的化合物。当在本文中使用时,“矿物质”是指天然存在的,在室温下通常为晶体且稳定,并且为活生物体生长或保持所需的元素或化学化合物。当在本文中使用时,“分枝的顶端”意味着分枝的尖端、即最末端或生长点。当在本文中使用时,“基本上”意味着指定值的大部分(如果不是全部的话),但是与指定值非常接近使得差异不显著,并且这些差异对项的功能性质的影响不超出本领域技术人员容许的正常公差。在一些实施方式中,“基本上”意味着差异的变化不超过10%或更少。当在本文中使用时,“约”意味着大约或接近于,并且在叙述数值或范围的情形中,意味着数值的±15%。实施例1从商业供应商获得BM和CA的幼苗。植物在美国佛罗里达州的夏季多雨季节(5月-9月)中鉴定并生长。幼苗在装填有清洁、无污染物的土壤的容器中生长,并充分供应水和日照。如有需要添加水以保持土壤潮湿和湿润。在4月龄时,使用无菌剪刀切下含有叶的BM嫩枝(距顶端8-10cm处的气生部分)。对于CA来说,剪下带有5cm茎的叶片。检查植物样品,用自来水漂洗5次以除去附着的土壤和其他外部粒子。将植物材料用无菌蒸馏水漂洗两次。将水排干,将植物材料用无菌蒸馏水再次漂洗,铺在纸巾上并轻柔吸水,以除去任何附着的水分。将植物样品立即称重,并使用无菌镊子置于瓶装饮用水中。实施例2将假马齿苋(BM)和积雪草(CA)样品的新鲜收集并清洁的样品的称重的样品如实施例1中处理,或者如实施例1中处理然后在0.2%山梨酸(被批准用于食品处理的天然抗细菌剂)中浸泡15分钟,以证实抗细菌处理不影响植物化学物质。将假马齿苋(BM)和积雪草(CA)以每100ml1-4g的量添加到瓶子中的蒸馏水或其他试验水样品。将瓶子盖上盖,并在室温(72℉,22.2℃)下或冰箱中(35℉,1.7℃)保持16周,或直至植物样品死亡。定期检查植物材料的存活。植物存活率通过物理和形态特征(叶和茎的颜色:绿色,黄色,棕色;脱落的叶片数目;气味,和水的澄清度)来评估。植物在蒸馏水中的存活不良,坚持不到两周。在水中存在少量微量元素即2-20mg/L钙、4-15mg/L镁、5-20mg/L钠、0.2-6.0mg/L钾、5-15mg/L氯化物和100-200mg/L碳酸氢盐的情况下,存活最佳。试验显示,大多数品牌的瓶装饮用水具有与这些量相当的电解质水平。用天然抗细菌剂山梨酸处理,不显著提高植物在水中的存活率。假马齿苋样品在22.2℃下的储存,显示出从第4周开始存活率急剧下降,其中存活率降低到60%,正如在图1中看到的。到第8周,存活率进一步降低到低于20%,并且到第12周,植物完全死亡。作为比较,储存在1.7℃下的植物显示出存活率的降低少,在第4周约90%的植物存活,与此相比当储存在22.2℃时为60%,并且直到第16周当试验完成时,存活率为80%。因此,在1.7℃下的储存将植物存活率显著提高到80%,而在室温(22.2℃)下的储存导致在试验期间全部植物死亡。积雪草的试验显示出与假马齿苋相似的结果。到第4周,储存在22.2℃下的植物样品显示出存活率降低到约50%,与此相比,在1.7℃下的储存显示出约90%的存活率,正如在图2中看到的。到第12周,储存在22.2℃下的样品完全死亡,而1.7℃下的样品仍表现出约82-85%的存活率,并在16周试验结束时仍保持约80%的存活率。实施例3-植物存活率与pH将假马齿苋(BM)和积雪草(CA)样品的新鲜收集并清洁的样品的称重的样品(每100ml1-4g)添加到装有pH6、7或7.8的水的瓶子。将瓶子盖上盖,并在冰箱中(35℉,1.7℃)保持16周。在2周、8周和16周时定期检查存活率。植物存活率通过物理和形态特征(叶和茎的颜色:绿色,黄色,棕色;脱落的叶片数目;气味,和水的澄清度)来评估。pH试验的结果显示,假马齿苋样品对pH敏感,正如在图3中看到的。植物样品在pH6下的储存显示出在第2周时存活率降低,为50%左右,其到第8周进一步降低到20%,并在第16周降低到约5%。作为比较,在pH7下的储存在第2周表现出100%存活率,到第8周约90%存活,到第16周约85%存活。假马齿苋在微碱性pH下也显示出良好的存活,当在pH7.8下储存时,在第2周存活率约为90%,在第8周存活率为80%,在第16周存活率为70%。因此,将植物材料储存在略微酸性至微碱性pH下,最好储存在中性pH下。由于植物的相似性,预期积雪草样品以相似的方式做出响应。实施例4将假马齿苋(BM)和积雪草(CA)样品的新鲜收集并清洁的样品的称重的样品以每100ml1-4gm的量添加到瓶子中的pH7的电解质-水。将瓶子盖上盖,并在室温(72℉,22.2℃)下或冰箱中(35℉,1.7℃)保持16周,正如在表1中所指示的。在各种条件下储存后,将植物材料从水中取出。将植物材料和来自瓶子的水样品立即冷冻直至进行分析。为了进行分析,将植物材料冷冻干燥并粉末化。将称重的样品(120-150mg)在15ml离心管中与1ml乙醇混合。在涡旋振荡后,使用超声波发生器将样品分散。将样品离心10分钟,并将上清液转移到5ml容量瓶中。将提取、超声和离心再重复三次。将提取物合并并将体积调整到5ml。在混合后,将样品用0.45μmPTEF过滤器过滤,并进行液相色谱分析。为了分析,将液体样品(50-200ml)冷冻干燥。将材料重新溶解在8ml甲醇中,并转移到10ml容量瓶。将容器用2ml甲醇再次清洗。将合并的溶液调整到10ml体积,充分混合,并使用0.45μmPTEF过滤器过滤。对过滤的样品进行液相色谱分析。通过以前描述过的HPLC方法来定量植物化学物质水平(PhrompittayaratW,JetiyanonK等,季节、不同植物部分和植物生长阶段对假马齿苋中皂苷量和分布的影响(Influenceofseasons,differentplantparts,andplantgrowthstagesonsaponinquantityanddistributioninBacopamonnieri),Songklanakarin科学技术杂志(SongklanakarinJ.Sci.Technol.)33(2),193-199,2011)。验证HPLC方法的线性、检测极限、精度和准确性。通过分析添加已知量的标准皂苷后制备的样品来确定方法的准确性。在植物材料中检测到的主要植物化学物质是皂苷:假马齿苋皂苷A3,假马齿苋皂苷X,假马齿苋皂苷II,BacosaponinC以及少量的假马齿苋皂苷IV和假马齿苋皂苷V,正如在表1中看到的。水中皂苷的水平随着在冰箱中的储存时间而增加。约2-4%的植物皂苷被释放到水中。水中低的皂苷水平确保了安全性。表1.未处理的植物材料(对照)和在室温(72℉,22.2℃)或低温(35℉,1.7℃,冰箱)下在水中保持后的植物材料中的假马齿苋皂苷水平。将植物材料在各种的时间长度后取出,并分析假马齿苋皂苷水平。值表示3个值的平均值(mg/100ml)。植物对胁迫条件做出响应增加特定植物化学物质的生产。当暴露于低温时假马齿苋水平的提高可能是对胁迫的自然响应。这与人类在暴露于寒冷时应激激素皮质醇的水平提高相似(Geliebter等,在夜间进食或未进食的超重个体中冷压力试验后的皮质醇和胃饥饿素浓度(CortisolandGhrelinconcentrationsfollowingacoldpressortestinoverweightindividualswithandwithoutnighteating),国际肥胖杂志(Int’lJObesity)(Lond),37:1104-1108,2013)。对假马齿苋进行的植物化学物质随时间释放的试验表明,对于苦艾素A3和假马齿苋皂苷II来说,植物样品稳定地增加植物化学物质释放,正如在图4中看到的。有趣的是,在1.7℃下储存期间,直至第8周假马齿苋皂苷X的释放减少,然后在第16周出现尖峰。然而,尚不清楚这是由所需的储存时间长度造成的还是试验的人为假象。对于苦艾素A3、假马齿苋皂苷II和假马齿苋皂苷C来说,在1.7℃下储存导致在相同时间点即第2周时与22.2℃下的储存相比植物化学物质的释放更高。在第16周时,与对照和储存在22.2℃下的样品两者相比,在1.7℃下所有植物化学物质在水中显示出更高的水平。水中的植物化学物质量的化学分析显示,在22.2℃和1.7℃下储存期间,假马齿苋主要释放假马齿苋皂苷II,其他植物化学物质苦艾素A3、假马齿苋皂苷X和假马齿苋皂苷C的水平近似相同。值得注意的是,从第2周直至第8周,在1.7℃下的储存显示出除了假马齿苋皂苷X之外的植物化学物质的更高释放,正如在图5中看到的。到第16周,所有试验的植物化学物质的水平都比22.2℃样品中的水平高。由于植物的相似性,预期积雪草样品以相似的方式做出响应并以相似的水平产生相似类型的植物化学物质。实施例5将假马齿苋(BM)和积雪草(CA)的新鲜收集并清洁的样品以每100ml1-4gm的量添加到瓶子中的pH7的电解质-水。植物可以自由漂浮地保持在流体中,或者可以包封在塑料网状管中以防止将植物意外吞下。在图6至12中示出实例。将植物材料2置于水瓶1中并浸没在流体3中。然后将网状滤器4固定到瓶1的颈部,由此防止植物材料2离开瓶1的主体,正如在图6中看到的。或者,将植物材料2置于网状袋8内并放置在瓶1中,正如在图7(A)中看到的。网状袋8可以任选地通过绳索9附连到瓶1的盖子,正如在图7(B)中看到的。也可以将植物材料2置于瓶1中并使用网状滤器12包含在瓶1的底部中,正如在图8中看到的。任选地通过热密封、压力配合或卡扣将网状滤器12固定在位。然后向瓶1添加流体3,并使得从植物材料2提取植物化学物质。或者,瓶1可以包括使用本领域中已知的手段固定到瓶底的挂钩15。非限制性实例包括热焊接和声焊接。将植物材料2附连到挂钩15并向瓶1添加流体3,正如在图9中示出的。或者,在瓶1的底上形成固定座20,正如在图10中看到的。固定座20可以在瓶1的制造期间形成,或者可以通过诸如热焊接或声焊接的手段附连。在一些变化形式中,在将固定座20安装到瓶1之前将植物材料2包埋在固定座20中。或者可以通过漏斗或圆锥形网25将植物材料2包含在瓶1中,正如在图11中看到的。最后,可以将可固定的网30附连到瓶1,正如在图12中看到的。可固定的网30包含网状滤器,其具有适合于卡扣在瓶口28上的夹子31,正如在图12(A)和(B)中看到的。这允许用户在消费之前施加网。将瓶子盖上盖并在足以允许提取植物化学物质的温度下储存。在具体实施方式中,将瓶子储存在35℉(1.7℃)下。在储存期间,允许BM或CA植物材料或其组合在水中浸泡至少2周。实施例6通过使消费者与液体一起摄入植物材料,可以将植物化学物质的水平从实施例1-5中获得的水平进一步提高。如实施例5中描述的制备强化液体。在消费强化液体期间,消费者从容器中收集植物材料并咀嚼所述植物材料,由此释放出植物中另外的植物化学物质。或者,可以在即将消费之前将植物材料与液体均质化。将植物材料任选地使用混合机、其他桨式混合机或其他均质装置例如超声波发生器和超声波处理进行均质化。有利地,将混合机桨叶可旋转地固定到瓶1底部。正如在图13中看到的,将均质器桨叶40通过密封的轴固定到电动马达41。正如对于本领域技术人员来说显然的,电池44被电连接到电动马达41。将激活按钮42或本领域中已知的其他手段配置在电路中电池44与电动马达41之间,允许消费者通过闭合电路来激活均质器桨叶40。或者,将瓶1置于马达驱动装置例如混合机、食品加工机或似装置上,通过其他机械手段例如通过手动曲柄来操作均质器桨叶40。实施例7消费量水平的分析表明,带有植物化学物质的强化饮用流体是安全的。例如,消费5瓶各500ml的流体将导致皂苷摄入量低于推荐水平,并且不引起任何毒性,正如在表2中看到的。表2.在各种的水消费量水平下假马齿苋皂苷摄入量(μg)的计算。每天消费多达5瓶500ml瓶装水仅提供少量皂苷,并且不引起任何毒性。苦艾素100ml500ml5x500ml苦艾素A319.6098.00490.00假马齿苋皂苷II60.75303.751518.75假马齿苋皂苷X24.30121.50607.50假马齿苋皂苷C23.10115.50577.50在前述说明书中,公开的所有文献、法令或信息并不表明承认文献、法令或信息或其任何组合在优先权时间时是可公开获得的、为公众所知的、是本领域常识的一部分或者已知与解决任何问题相关。上面引用的所有出版物的公开内容各自通过参考以其整体并入本文,其程度等同于每个出版物被单独地通过参考并入本文。还应该理解,权利要求书旨在覆盖本文描述的发明的所有通用和具体特点,以及在语言上可能被说成是落于其间的本发明的范围的所有陈述。当前第1页1 2 3 
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