本发明公开了一种动物保健用蜂王胎益生菌口服液，属于饲料添加剂及动物养殖领域。
背景技术：
蜂王胎又称蜂王幼虫，是蜜蜂的受精卵经工蜂喂饲新鲜王浆生长发育而成的幼虫体。营养学研究表明蜂王胎富含蛋白质、氨基酸、几丁多糖、维生素、微量元素、酶、核酸、黄酮等，营养价值极高。生物活性研究表明，蜂王胎具有抑制或延缓细胞衰老、增强生物体免疫功能等保健功效。因此，是一种值得大力开发的天然保健资源。
我国是历史悠久的养蜂大国，蜂群数及蜂产品产量均为世界前列，目前已拥有800多万群蜜蜂，蜂王胎年产量可达数千吨。但是作为生产蜂王浆的副产品，全国每年被加工利用的蜂王胎只有50吨左右，造成资源的极大浪费。在食品加工领域，目前已有少数对蜂王胎的开发研究，如福建农林大学刘秀娟和朱海波等也对蜂王胎口服液和口含片的制备进行了相应研究。国内专利 ZL93100883.2和CN01107658.5分别公布了蜂王胎酒的相关发明。而将蜂王胎用于饲料领域，尚未见相关报道。
本发明公布了一种以发酵蜂王胎为主的动物保健用蜂王胎益生菌口服液。蜂王胎被发酵后，蛋白质被分解为小分子肽跟氨基酸，更有利于人体消化吸收，并且克服了蜂王胎蛋白质易热变性的问题。更重要的是，发酵能使过敏原的酰胺键断裂，减少它的分子质量，进而降低过敏性；发酵也可改变过敏原表位的三级结构，使其被掩盖或消除从而降低致敏性。此外，蜂王胎益生菌口服液还有两个重要的功能保证仔猪肠道健康、减少腹泻：1）其中的芽孢杆菌在动物体内尤其是肠道后段能产生大量内源酶，可以将肠道前段未消化完全的养分充分进行二次消化，以提高养分的消化吸收，避免了肠后段（如结肠、直肠）的富营养化，避免有害菌在此繁殖产生毒素，影响机体健康；2）蜂王胎蛋白水解后产生肽类抗菌物质，可以直接杀死如产气荚膜梭菌等有害菌，保证肠道健康。
对于动物益生菌对动物的保健功能，目前学术界已达成共识。研究表明，动物益生菌进入动物肠道后，一方面能促进肠道内固有有益菌的增殖，另一方面能有效的抑制葡萄球菌、念珠菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、痢疾杆菌和伤寒沙门菌等致病菌和腐败菌的繁殖，从而保障动物肠道健康。因此，人们开发出一系列治疗或预防肠道疾病的各类动物益生菌制剂。但目前尚未见以蜂王胎蛋白为发酵底物的动物益生菌产品的研发。
技术实现要素：
为充分开发蜂王胎资源并发挥其保健作用与生物学特性，本发明提供一种动物保健用蜂王胎益生菌口服液，其制备步骤如下：
1 向蜂王胎匀浆液中添加乳糖，混匀后进行巴氏灭菌。其中乳糖添加量按质量比为：蜂王胎匀浆液:乳糖=100:1~100:2；巴氏灭菌参数为55-60℃，时间25-30 分钟。
2每毫升经预处理的蜂王胎匀浆液加入动物益生菌按菌落总数计105~107 CFU。动物益生菌包括芽孢杆菌（好氧）类的地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌，以及乳酸菌（厌氧）类的粪肠球菌、乳酸肠球菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、动物双歧杆菌。使用中发酵菌种为上述芽孢杆菌和乳酸菌的组合，即发酵菌种中至少包括一种芽孢杆菌和一种乳酸菌。
3 进行好氧发酵，发酵容器密闭保温，本阶段不另外通气，芽孢菌（好氧）利用并消耗掉发酵容器内的氧气，为下一阶段造成厌氧环境。发酵温度30~35℃，发酵时间16~24h。
4 进行厌氧发酵，乳酸菌（厌氧）在前期已被消耗掉氧气的发酵容器内进行厌氧发酵。发酵温度35~37℃，发酵时间18~20h。
本发明所依据的原理是：将蜂王胎匀浆后添加适量可发酵糖类（乳糖），使用农业部《饲料添加剂品种目录》中公布的动物益生菌对预处理后的蜂王胎匀浆液进行发酵，前期好氧发酵时，芽孢杆菌将蛋白质分解成小分子肽，生成生物活性肽，同时降解过敏性蛋白。在厌氧条件下，乳酸菌能在其中生长繁殖，使其发酵，将糖类水解成乳酸等，去除虫体腥味。同时，乳酸菌本身就是一种重要的肠道益生菌，摄入后到达动物肠道部位，有调节肠道菌群平衡的作用。
与传统单纯动物益生菌制剂相比，本发明的有益效果有以下几点：
（1）蜂王胎蛋白经过发酵后，其中的蛋白被分解成氨基酸和小肽，更容易被动物所吸收；
（2）蜂王胎本身所含的生物活性物质如几丁多糖、维生素、微量元素、核酸、黄酮等得以保留并成为益生元的一部分。
（3）先好氧再厌氧的双段发酵法，一方面让芽孢菌和乳酸菌都得到充分的生长代谢，另一方面节省了额外的厌氧环境调控，降低了制备成本。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步阐述。
实施例1
本实施例提供了一种动物保健用蜂王胎益生菌口服液，本实施例的步骤如下：
（1）预处理：称重6kg蜂王胎匀浆液，加入97g乳糖，混匀后55℃下巴氏杀菌30分钟。
（2）将预处理后的蜂王胎匀浆液降温至40℃以下，加入6g 1.5×106 CFU/g的动物双歧杆菌粉末、3 g 3.2×106 CFU/g乳酸肠球菌粉末与4g 1×107CFU/g的枯草芽孢杆菌，搅拌均匀。
（3）将接种后的蜂王胎匀浆液倒入密闭的发酵容器中，在34℃环境下发酵20h。然后调节温度至37℃，进行厌氧发酵18h，得到动物保健用蜂王胎益生口服液成品。
实施例2
本实施例提供了本发明公布的动物保健用蜂王胎益生菌口服液在仔猪喂养上的应用
1材料与方法
1.1 试验材料
蜂王胎益生菌口服液，主要成分蜂王胎蛋白发酵液、含动物双歧杆菌、乳酸肠球菌和枯草芽孢杆菌，总活菌数5.0×1011 CFU/L。
试验动物：体重约5.0kg的健康三元杂交猪44头，整体看猪健康状况良好。
1.2 试验设计
44 头试验猪胎次相近、体重相近，公母各半的原则分为2 组，每组3 个重复，每重复6~8 头。对照组饲喂基础日粮（原有配方）；试验组（蜂王胎益生菌口服液组）另外喂饮用100mL /kg体重蜂王胎益生菌口服液。试验设计方案见表1。
1.3 试验日粮
试验日粮为仔猪教槽料，饲料组成及营养水平（略）。
1.4 饲养管理
试验共进行10 天。试验开始直接进入正试期，不做过渡，投喂试验料。常规饲养管理，自由采食和饮水，免疫消毒程序按照猪场常规方法进行。试验期间，每天观察各组猪群采食和健康情况，准确记录采食量和腹泻情况。试验结束时，按重复空腹称重。计算平均日增重、均日采食、料重比和腹泻率。
1.5 数据处理
采用SPSS统计软件进行数据处理和统计分析，试验结果以平均值±标准差表示，显著性检验采用新复极差法。
2试验结果与分析
蜂王胎益生菌口服液对断奶仔猪生产性能和腹泻率的影响试验结果见表2
由表2 可知：对照组相比，蜂王胎益生菌口服液组料重比和钱肉比分别降低了15%（P< 0.01)和9.11%(P< 0.01)，腹泻率显著降低了41.78%(P< 0.01)，平均日增重升高19.2%(P< 0.05)。
3．结论
本试验结果表明，以蜂王胎益生菌口服液替代对照组，显著提高了仔猪的平均日增重，料重比和钱肉比显著降低，仔猪腹泻显著减少。
最后应说明的是：以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域的技术人员在本发明的相关条件下进行各种修改和改进，均应包含在本发明的保护范围之内。