一种抗抑郁玫瑰酵素的制备方法与流程

本发明属于食品领域，涉及一种酵素，具体来说是一种抗抑郁玫瑰酵素的制备方法。

背景技术：

随着社会现代化的程度加快，人们的生活压力也越来越大，免疫功能下降、内分泌失调是健康问题中一种普遍存在的现象。据中国卫生部统计失眠抑郁的病症已占中国疾病负担的第二位，严重困扰着人们正常工作、学习和生活。

玫瑰属于一种集观赏、医药、食品和日用化工等价值于一身的蔷薇科植物资源。其中大马士革玫瑰是保加利亚种植的主要的玫瑰品种，也是世界公认的优质玫瑰品种，其富含多种维生素、葡萄糖、果糖、柠檬酸、苹果酸、三萜类化合物等数百种有益于人体健康的物质。而平阴玫瑰具有理气活血，花大瓣厚，香味浓郁的特点，被称为中国传统玫瑰的代表。五味子、酸枣仁、合欢花、花生藤、柏子仁、远志中含有的木脂素和黄酮类活性物质有解郁安神，生津补肝，镇静催眠，抗菌消炎、缓解失眠健忘、神经衰弱等症状。并且与玫瑰花瓣中的有益成分相配合，更加相得益彰。

“酵素”是一种具有一定保健功能，包含了酶及其产酶微生物和发酵生成的生理活性物质所构成的微生态整体。其所含益生菌可以调理肠道，抑制大肠中的腐败和胺类等毒素的生成。通过发酵原料组织受到微生物酶的作用而崩解，原料细胞中的功能性成分得以充分释放并发生小分子化而变得容易为人体吸收。另外因通过不同微生物的复配制成的发酵剂可以赋予产品芳香，提高产品风味，减少或替代化学添加物香精、香料在产品中的添加，从而使产品更趋于天然而易于被消费者接受。

技术实现要素：

针对现有技术中的上述技术问题，本发明提供了一种可食用的抗抑郁玫瑰酵素的制备方法，所述制备方法通过对全身的酶系调理，使得中药成分的药效更加得以显现，辅助解决抑郁效果，符合现代人们的健康理念。

本发明提供了一种抗抑郁玫瑰酵素的制备方法，包括如下步骤：

1)将玫瑰花瓣进行清洗，用打浆机搅碎制备玫瑰匀浆液，或烘干粉碎成玫瑰粉；将玫瑰匀浆液或者玫瑰花粉末与无菌水按质量比1:5-20混合成玫瑰粉悬浊液；

2)按照质量比称取五味子、酸枣仁、合欢花、花生藤、柏子仁、远志，所述的五味子、酸枣仁、合欢花、花生藤、柏子仁和远志的质量比为1:1:0.5-1:0-1:0-1:0-1，将五味子、酸枣仁、合欢花、花生藤、柏子仁、远志胶体混合后研磨成中药粉末；

3)将步骤1）中的玫瑰粉悬浊液、2）中的中药粉末加入到平底发酵罐，再加入蜂蜜、糖、抗坏血酸，灭菌，加入发酵菌剂发酵1-6个月；所述的玫瑰匀浆液或玫瑰粉的质量为发酵体系质量的10wt%-30wt%，所述的中药粉末的质量为发酵体系质量的3wt%-10wt%，所述的蜂蜜的质量为发酵体系质量的2wt%-20wt%，所述的糖的质量为发酵体系质量的2wt%-20wt%，所述的抗坏血酸的质量为发酵体系质量的0.0005wt%-0.002wt%，所述的发酵菌剂为红茶菌、酿酒酵母、木醋杆菌、乳酸菌、或者植物乳杆菌的任意一种或者两种以上的混合，所述的发酵菌剂质量为发酵体系质量的2wt%-10wt%，余量为水；

4)将步骤3）中所得发酵液，加入不同发酵周期的酵素液、食用添加剂或红糖或木糖醇中的任意一种或者两种以上的成分进行调配，得到抗抑郁玫瑰酵素。

进一步的，所述的玫瑰花为大马士革玫瑰、平阴玫瑰、或二者杂交品种。

进一步的，所述的蜂蜜为天然蜂蜜。

进一步的，所述的糖为红糖、果糖、麦芽糖或者白糖中的任意一种或者两种以上的混合。

进一步的，所述的灭菌条件为105℃灭菌5min或者紫外线灭菌。

进一步的，所述的发酵温度为20-30℃。

进一步的，所述的不同发酵周期的酵素液包括发酵了1-2个月的初期酵素、发酵了3-4个月的中期酵素，初期酵素和中期酵素的加入量为发酵体系质量的5wt%-80wt%。

进一步的，所述食品添加剂为黄原胶、明胶、魔芋胶中的任意一种和山梨糖醇按不同比例的混合物，所述的食品添加剂的加入量为发酵体系质量的0.5wt%-5wt%.

进一步的，所述的红糖或木糖醇的加入量为发酵体系质量的5wt%-50wt%。

本发明包括先将新鲜玫瑰花瓣采摘、清洗、保存，然后进行发酵前处理，玫瑰花瓣均质、干燥、超微粉碎、过筛、护色，五味子、酸枣仁、合欢花、花生藤、柏子仁、远志胶体研磨，利用发酵菌剂混合发酵，后期复配调和。本发明在制备的过程中严格控制糖度、发酵温度和时间，所用发酵菌剂包括红茶菌、酵母菌、木醋杆菌、植物乳杆菌等益生菌，以玫瑰、五味子、酸枣仁、合欢花、花生藤、柏子仁、远志、蜂蜜、糖等为原料，混合发酵1-6个月，后期加入一定量不同发酵周期的酵素液、山梨糖醇、抗坏血酸、黄原胶、明胶和魔芋胶等食品添加剂进行调配。

本发明利用益生菌如红茶菌、酵母、乳酸菌、醋酸菌和植物乳杆菌等，以蜂蜜、红糖、白糖等为辅料，以大马士革、平阴玫瑰及其杂交玫瑰为主料，配以一定比例的药食同源中药材五味子、酸枣仁、合欢花、花生藤、柏子仁、远志经过1-6个月的发酵生成酵素半固状饮品。

本发明和已有技术相比，其技术进步是显著的。本发明制备得到的玫瑰安神酵素具有抗氧化、抗衰老、调理肠道功能、从整体上对身体进行功能调节，对抗抑郁和失眠有有着非常重要的作用。本发明符合现代人们的健康理念，酵素作为一种功能性产品在全球大规模兴起，酸甜口感更易于被人们接受，相比于药物人们的接受度更高，且食用安全方便。

附图说明

图1是实施例1-4的实施例方法获得的酵素的dpph清除自由基能力。

图2是实施例1-4的实施例方法获得的酵素的黄酮浓度。

图3是实施例1-4的实施例方法获得的酵素的木脂素浓度。

图4是实施例1-4的实施例方法获得的酵素的有机酸浓度。

图5是实施例1-4的实施例方法获得的酵素的总酚浓度。

具体实施方式

实施例1

将采摘开放且新鲜的大马士革玫瑰花的花瓣与花蕊分离，并用打浆机进行粉碎或烘干粉碎，得到20目左右的玫瑰花花瓣或粉末。加入发酵体系质量的10wt%玫瑰花粉末，8wt%蜂蜜、2wt%红糖、0.01wt%抗坏血酸（vc）和1wt%的药食同源中药；其中中药成分五味子、酸枣仁、合欢花、花生藤、柏子仁、远志按1:1:0.5：0:0.1:0.1的配比，余量为水，搅拌混合制成发酵培养基，105℃灭菌5min；在上述培养基中，接入发酵体系质量的10wt%红茶菌，用灭菌的八层纱布封口，在30℃并且遮光条件下发酵90天，hplc定期检测成分含量变化；待酵素取出后，加入发酵体系质量的2wt%山梨糖醇和2wt%果胶复配。

实施例2

将采摘开放且新鲜的平阴玫瑰花瓣，并将花瓣与花蕊分离，并用打浆机进行粉碎，得到20目左右的玫瑰花花瓣或粉末。加入发酵体系质量的20wt%玫瑰花粉末，20wt%蜂蜜、20wt%混合糖、1wt%抗坏血酸（vc）和1wt%的药食同源中药；其中中药成分五味子、酸枣仁、合欢花、花生藤、柏子仁、远志按1:1:0.5：0.1:0:0.1的配比，余量为水，搅拌混合制成发酵培养基，105℃灭菌5min；在上述培养基中，接入发酵体系质量的5wt%乳酸菌和5wt%酵母菌，用灭菌的八层纱布封口，在30℃并且遮光条件下发酵90天，hplc定期检测成分含量变化；待酵素取出后，加入发酵体系质量的0.5wt%山梨糖醇复配。

实施例3

将采摘开放且新鲜的大马士革玫瑰花的花瓣与花蕊分离，并用打浆机进行粉碎或烘干粉碎，得到20目左右的玫瑰花花瓣或粉末。加入发酵体系质量的10wt%玫瑰花粉末，8wt%蜂蜜、2wt%红糖、0.01wt%抗坏血酸（vc）和3wt%的药食同源中药；其中中药成分五味子、酸枣仁、合欢花、花生藤、柏子仁、远志按1:1:0.5：0:0:0的配比，余量为水，搅拌混合制成发酵培养基，105℃灭菌5min；在上述培养基中，接入发酵体系质量的10wt%红茶菌，用灭菌的八层纱布封口，在30℃并且遮光条件下发酵90天，hplc定期检测成分含量变化；待酵素取出后，加入发酵体系质量的2wt%红糖和2wt%果胶复配。

实施例4

将采摘开放且新鲜的杂交玫瑰花瓣，并将花瓣与花蕊分离，并用打浆机进行粉碎，得到200目左右的玫瑰花花瓣或粉末。加入发酵体系质量的30wt%玫瑰花粉末，15%蜂蜜、2%混合糖、1wt%抗坏血酸（vc）和3%的药食同源中药；其中中药成分五味子、酸枣仁、合欢花、花生藤、柏子仁、远志按1:1:0.5：0.1:0.1:0.1的配比，余量为水，搅拌混合制成发酵培养基，紫外灭菌5min；在上述培养基中，接入发酵体系质量的7wt%红茶菌，用灭菌的八层纱布封口，在30℃并且遮光条件下发酵90天，hplc定期检测成分含量变化；待酵素取出后，加入发酵体系质量的1.5wt%木糖醇和2.5wt%果胶复配。

本发明的酵素中的木脂素和黄酮类化合物是起安神作用的主要有效成分，其含量的多少代表了安神效果的强弱，同时酵素中含有的有机酸和酚类化合物具有抗氧化、清除自由基的功效，以上各实施例中的具体数据图1-5所示。

检测方法如下：

1、dpph清除自由基能力

1）将3ul,6ul,9ul,12ul,15ul样品分别加去离子水至2ml；

2）再加入4ml0.1mmol/ldpph-甲醇溶液；

3）再加入450ul50mmol/ltris-hclbuffer(7.4)25℃下恒温水浴30min；

4）以去离子水为参比溶液，以vc为对照，在517nm下测吸光度。

dpph自由基清除能力（%）=【(a0-(a1-a2))/a0】*100

a0为空白対照液吸光度；a1样品测定管吸光度；a2样品本底管吸光度

2、黄酮浓度

1)标准溶液配制：精密称取芦丁对照品10.03mg,加60%甲醇适量,置水浴中加热溶解,放冷,以60%甲醇定容于100ml容量瓶中,摇匀备用,配成芦丁含量为0.103mg/ml的工作液,备用。

2）最佳检测波长选择：取芦丁标准溶液于400～600nm范围内进行扫描,确定黄酮的最大吸收波长。

3）标准曲线建立：取芦丁标液0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml分别加入25ml容量瓶,加入1ml5%nano3,静置5min,加入1ml10%al（no3)3静置6min，加入4ml10%naoh静置6min，分别用10%naoh定容。于温水浴中加热10min取出,用1cm玻璃比色皿在芦丁最大吸收波长处测定吸光度a,同时以未加标准芦丁的溶液作空白参比。以吸光度对芦丁浓度作图。

4）样品测定：将3）中芦丁标液换为5ml样液其余试剂相同。于温水浴中加热10min,取出,同时作试剂空白,以试剂空白为对照,于芦丁最大吸光值处测定吸光度a,查标准曲线,即得所取样液中黄酮含量。

3、木脂素浓度

1）对照品溶液制备：精密称取五味子酯甲对照品5mg加甲醇溶于10ml容量瓶中，得浓度0.5mg·ml^-1的对照品溶液。

2）标准曲线制：精确吸取20，40，60，80，100μl对照品溶液置具塞试管中。另取一试管加甲醇10μl作空白，待溶剂挥发完后，依次加入10％变色酸水溶液0.5ml，浓硫酸3ml，蒸馏水1.5ml，在沸水浴中放置30min，取出用流水冷却，于570nm处测吸光度，测定3次。横坐标为五味子酯甲浓度纵坐标为吸光度做标准曲线，得回归方程。总木脂素含量按五味子酯甲计算。

3）样品中总木脂素含量的测定：分别精密吸取供试品溶液10µl置具塞试管内，按总木脂素标准曲线项下操作测定吸光度，测定3次。由回归方程计算含量计算木脂素含量。

4、有机酸浓度

1）称取25g待测样液置于100ml烧杯中，用约80℃煮沸过的水将烧杯中的内容物转移到250ml容量瓶，置于沸水浴中煮沸30min(摇动2到3次使待测样中有机酸全部溶于溶液)，取出，冷却至室温，用煮沸过的水定容到250ml。用滤纸过滤，收集滤液进行测定。

2）称取15g待测样液置于250ml三角瓶，加50ml水及0.2ml1%酚酞指示剂，用0.1mol/l氢氧化钠标准滴定溶液滴定至微红色30s不褪色，记录消耗0.1mol/l氢氧化钠标准滴定溶液的体积数值（v1）。同一被测样品滴定2次。

3）空白样液，用水代替待测样液，按2）步骤，记录消耗0.1mol/l氢氧化钠标准滴定溶液的体积数值（v2）

4）结果计算

总酸含量以质量分数x计，数值以（g/kg）表示

x=c*(v1^_v2)k*f/m*1000

c氢氧化钠标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为mol/l

v1滴定待测样液时消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积数值，单位为ml

v2空白试验时消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积数值，单位为ml

k酸的换算系数

f待测样液稀释倍数

m待测样液质量数值，单位为g

5、总酚浓度

取两个25ml容量瓶，分别标识空白样品、检测样品，分别加入10ml样品，再加入8ml羧甲基纤维素溶液，充分混匀。

将检测样品中内加入0.5ml铁试剂，充分混匀。

将空白样品、检测样品内分别加入0.5ml氨水（1:2），用蒸馏水稀释至刻度，充分混匀。

将空白样品和检测样品于常温下静止10min，用10mm玻璃比色皿，以空白样品调零，测定检测样品吸光度。