本发明涉及保健品领域，具体而言，涉及鲍鱼低聚肽提取物的制备方法、制备鲍鱼低聚肽和鲍鱼粉的方法、鲍鱼低聚肽及其应用。
背景技术
鲍鱼低聚肽易于被人体吸收，具有较高营养价值。现有技术中，鲍鱼低聚肽的提取方法通常会提取不充分或得到的低聚肽提取物口感一般。
鉴于此，特提出本申请。
技术实现要素：
本发明提供了一种鲍鱼低聚肽提取物的制备方法，旨在改善现有的提取方法对鲍鱼中低聚肽提取不充分、得到的低聚肽口感一般的问题。
本发明还提供了一种制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法，该方法能充分提取鲍鱼中的低聚肽，且使得制得的低聚肽口感好，同时还能制得具有较高营养价值的鲍鱼粉。
本发明提供了一种低聚肽提取物，其口感好，营养丰富。
本发明还提供了低聚肽提取物在制备鲍鱼低聚肽片中的应用，其应用于制备鲍鱼低聚肽片中时，使得制得的鲍鱼低聚肽片具有较高营养价值，且口感好。
本发明还提供了低聚肽提取物在制备鲍鱼低聚肽冲剂中的应用，其应用于制备鲍鱼低聚肽冲剂中时，使得制得的鲍鱼低聚肽冲击具有较高营养价值，且口感好。
本发明是这样实现的：
一种鲍鱼低聚肽提取物的制备方法，制备步骤包括：
制液：将鲍鱼肉糜与水混合制得鲍鱼肉糜液，鲍鱼肉糜与水的质量比为0.7～1:1；一次酶解：将鲍鱼肉糜液与混合蛋白酶以质量比1:0.6～1混合，调节混合液ph为7～8，反应105～115min得第一混合酶解液，混合蛋白酶包括质量比为1:0.8～1.2的碱性蛋白酶和胰蛋白酶，碱性蛋白酶和胰蛋白酶的活力均为2500～2600u/g；二次酶解：向第一混合酶解液中加入复合风味蛋白酶，复合风味蛋白酶的加入量与鲍鱼肉糜液的质量比为0.8～1:1，调节ph为5.5～6.5，反应60～70min得到第二混合酶解液，复合风味蛋白酶的活力为900～1000u/g；过滤：将第二混合酶解液过滤去除肉渣得滤液；超滤：采用超滤膜截留分子量为80～1000道尔顿的物质得到鲍鱼低聚肽提取物。
一种制备鲍鱼低聚肽提取物和鲍鱼粉的方法，包括上述的鲍鱼低聚肽提取物的制备方法和肉渣加工步骤，肉渣加工步骤为将过滤得到的肉渣经至少两次水洗后，烘干磨粉得到鲍鱼粉。
一种鲍鱼低聚肽提取物，其上述的鲍鱼低聚肽提取物的制备方法制得。
上述的鲍鱼低聚肽提取物在制备鲍鱼低聚肽片中的应用。
上述的鲍鱼低聚肽提取物在制备鲍鱼低聚肽冲剂中的应用。
本发明的有益效果是：本发明通过上述设计得到的鲍鱼低聚肽提取物的制备方法，由于采用由合适配比的碱性蛋白酶和胰蛋白酶进行一次水解，后采用复合风味蛋白酶进行二次水解，能够使得鲍鱼肉中的蛋白质充分水解为低聚肽，而且由于一次水解过程产生的少量苦味肽在二次水解中疏水性氨基酸被切除而使得最终产物中几乎无苦味肽，进而使得得到的低聚肽提取物的口感好，而且最终得到的某些低聚肽或复合风味蛋白酶能够与鲍鱼肉中的还原糖发生美拉德反应，进一步优化得到的鲍鱼低聚肽提取物的口感。
本发明通过上述设计得到的制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法，其不仅能够制得本发明提供的鲍鱼低聚肽提取物，还能制得同样具有营养价值的鲍鱼粉。
本发明通过上述设计得到的鲍鱼低聚肽提取物，由于其几乎全为低聚肽，因此其易于被人体吸收，具有较高的营养价值，同时其口感好。
本发明通过上述设计得到的鲍鱼低聚肽用于制备鲍鱼低聚肽片时，使得制得的鲍鱼低聚肽片中的营养物质易于被吸收。
本发明通过上述设计得到的鲍鱼低聚肽用于制备鲍鱼低聚肽冲剂时，使得制得的鲍鱼低聚肽冲剂中的营养物质易于被吸收。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例提供一种鲍鱼低聚肽提取物的制备方法、制备鲍鱼低聚肽提取物和鲍鱼粉的方法、鲍鱼低聚肽及其应用进行具体说明。
一种鲍鱼低聚肽提取物的制备方法，制备步骤包括：
s1、鲍鱼肉糜与水混合制得鲍鱼肉糜液，鲍鱼肉糜与水的质量比为0.7～1:1。
首先，选取新鲜鲍鱼或解冻后的冷藏鲍鱼清洗干净后，将鲍鱼切碎放入粉碎机中打碎，然后过40目筛，取筛下肉糜，筛上肉糜返回至粉碎机中继续打碎。过筛后的鲍鱼肉糜粒径小，便于后续酶与其中的蛋白质充分接触水解。过筛后的鲍鱼肉糜与水以质量比0.7～1:1混合均匀，混合时，可采用人工或机械搅拌10min左右得到鲍鱼肉糜液。
为了使鲍鱼肉糜能够与水更充分混匀，优选地，可以将鲍鱼肉糜液置于球磨机中混匀。需要说明的是，在本发明中也可以采用均质机使鲍鱼肉糜能均匀分散于水中。更有选地，为使鲍鱼肉糜能与水混合更充分，鲍鱼肉糜更充分均匀分散于水中，球磨时的温度为-12～-8摄氏度、频率50～80hz，球磨时间20～120min。
s2、一次酶解：将鲍鱼肉糜液与混合蛋白酶以质量比1:0.6～1混合，调节混合液ph为7～8，反应105～115min得第一混合酶解液，混合蛋白酶包括质量比为1:0.8～1.2的碱性蛋白酶和胰蛋白酶，碱性蛋白酶和胰蛋白酶的活力均为2500～2600u/g。
配置混合蛋白酶，将质量比为1:0.8～1.2，活力均为2500～2600u/g的碱性蛋白酶和胰蛋白酶混合均匀，得到混合蛋白酶。将s1制得的鲍鱼肉糜液与混合蛋白酶以质量比1:0.6～1混合，混合过程采用人工或者机械搅拌使两者混合均匀。加入混合蛋白酶后调节鲍鱼肉糜液的ph至6～7，ph的调节可采用氢氧化钠和盐酸。ph调节后使混合蛋白酶与鲍鱼肉糜液反应105～115min以保证混合蛋白酶能够充分使蛋白质水解得到第一混合酶解液。优选地，为保证混合蛋白酶活性和蛋白质水解效率均较高，一次酶解过程中，控制酶解温度为40～50℃。
s3、二次酶解：向第一混合酶解液中加入复合风味蛋白酶，复合风味蛋白酶的加入量与鲍鱼肉糜液的质量比为0.8～1:1，调节ph为5.5～6.5，反应60～70min，得到第二混合酶解液，复合风味蛋白酶的活力为900～1000u/g。
复合风味蛋白酶是利用米曲霉发酵，经先进的提取工艺微滤、超滤浓缩、干燥技术精制而得，再添加一些风味物质，筛选复配成复合风味蛋白酶。这种复合风味蛋白酶天然安全，可应用于各种动植物蛋白的水解，后期风味优化，去除苦味，改善口感，可以制取风味良好的动植物水解产品，提高产品质量，降低成本。
向s2得到的第一混合酶解液中加入复合风味蛋白酶进而二次酶解，二次酶解以一次酶解的产物第一混合酶解液为底物，进一步对已经被酶解的蛋白质或多肽再次水解。为使二次酶解更高效，酶解更充分进行，二次酶解中复合风味蛋白酶的加入量与鲍鱼肉糜液的质量比为0.8～1:1，二次酶解过程中调节ph为5.5～6.5，酶解反应时间为60～70min得到第二混合酶解液，该复合风味蛋白酶的活力为900～1000u/g。优选地，为保证复合风味蛋白酶活性和蛋白质及多肽的水解效率均较高，二次酶解过程中，控制酶解温度为45～55℃。
s4、过滤：将第二混合酶解液过滤去除肉渣得滤液。
具体地，采用60目以上的筛网过滤二次酶解产物，得到滤液，此时的滤液包括酶解过程中使用的各种酶、水、或者调节ph过程加入的盐酸或者氢氧化钠。
s5、超滤：采用超滤膜截留分子量为80～1000道尔顿的物质得到鲍鱼低聚肽提取物。
采用超滤膜对s4得到的滤液进行处理，截留分子量为80～1000道尔顿的多肽和经美拉德反应产生的风味物质。具体地，超滤过程分两次，首先采用截留分子量为80以上的超滤膜对滤液进行一次超滤处理，膜下滤液为水、盐酸或者氢氧化钠，膜上为过膜部分则回收进行二次超滤，二次超滤采用截留分子量为1000以上的超滤膜，膜下滤液则为本发明提供的鲍鱼低聚肽提取物，膜上未过膜部分则为水解过程中使用的各种酶。可将膜上截留的各种酶回收后分离重复利用。
碱性蛋白酶具有酶活力大、水解程度大的特点，但通过其酶解的蛋白质易于产生苦味肽，而胰蛋白酶具有三氯乙酸溶解指数高的特性。故第一阶段将两者进行混合酶解，可减少苦味肽的生成。而复合风味蛋白酶是混和酶，作用多肽分子氨基或羧基末端的肽键，游离出氨基酸，酶水解物基本无苦味。复合风味酶以碱性蛋白酶水解生成的产物为底物，苦味随苦味肽的疏水性氨基酸被切除而基本消除。
因此，本发明提供的鲍鱼低聚肽提取物的制备方法，通过一次水解和二次水解能够使得鲍鱼肉中的蛋白质充分水解为低聚肽，而且由于一次水解过程产生的少量苦味肽在二次水解中疏水性氨基酸被切除而使得最终产物中几乎无苦味肽，进而使得得到的低聚肽提取物的口感好。而且最终得到的某些低聚肽或复合风味蛋白酶能够与鲍鱼肉中的还原糖发生美拉德反应，进一步优化得到的提取物的口感。
本发明还提供了一种制备鲍鱼低聚肽提取物和鲍鱼粉的方法，其包括本发明提供的鲍鱼低聚肽提取物的制备方法和肉渣加工步骤，该肉渣加工步骤为将上述s4步骤中过滤得到的肉渣经至少两次水洗后，烘干磨粉得到鲍鱼粉。
s4步骤中过滤得到的鲍鱼肉渣中虽然大部分蛋白质被分解，但是肉渣中还可能存在一些糖类和酯类以及部分没有被分解的蛋白质，因此其同样具有较高的营养价值。
本发明提供了一种鲍鱼低聚肽提取物，采用本发明提供的鲍鱼低聚肽提取物的制备方法制得。
本发明提供的鲍鱼低聚肽提取物可用于制备鲍鱼低聚肽片。
本发明提供的鲍鱼低聚肽提取物可用于制备鲍鱼低聚肽冲剂。
以下结合具体实施例对本发明提供的制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法进行具体说明。
实施例1
本实施例提供了一种制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法以及通过此方法制得的鲍鱼低聚肽。
一种制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法，包括如下步骤：
将新鲜鲍鱼打碎过40目筛制成鲍鱼肉糜，然后将鲍鱼肉糜与水按质量比为0.7:1进行混合搅拌10min制成鲍鱼肉糜液；将鲍鱼肉糜液置于球磨机中，控制球磨温度为-12摄氏度，球磨频率为50hz，球磨时间20min。
将球磨后的鲍鱼肉糜液与混合蛋白酶以质量比1：0.6进行混合，其中混合蛋白酶由质量比为1:0.8，活力均为2500～2600u/g的碱性蛋白酶和胰蛋白酶混合得到，将混合蛋白酶与鲍鱼肉糜液混合搅拌均匀，然后控制混合液ph至6～7，温度为40℃，酶解105min得到第一混合酶解液。
向第一酶解混合液中加入复合风味蛋白酶，复合风味蛋白酶的加入量与鲍鱼肉糜液的质量比为0.8:1，搅拌均匀后，调节ph为5.5～6.5，温度为45℃，反应60min得到第二混合酶解液，其中加入的复合风味蛋白酶的活力为900～1000u/g。
将第二混合酶解液通过60目筛网过滤去除肉渣得到滤液。
将滤液通过超滤膜截留分子量为80～1000道尔顿的物质得到鲍鱼低聚肽提取物，超滤具体操作方式如上述s5步骤所述。
将肉渣经两次水洗后烘干磨粉得到鲍鱼粉。
实施例2
本实施例提供了一种制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法以及通过此方法制得的鲍鱼低聚肽。
一种制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法，包括如下步骤：
将新鲜鲍鱼打碎过40目筛制成鲍鱼肉糜，然后将鲍鱼肉糜与水按质量比为1:1进行混合搅拌10min制成鲍鱼肉糜液；将鲍鱼肉糜液置于球磨机中，控制球磨温度为-8摄氏度，球磨频率为80hz，球磨时间120min。
将球磨后的鲍鱼肉糜液与混合蛋白酶以质量比1：1进行混合，其中混合蛋白酶由质量比为1:1.2，活力均为2500～2600u/g的碱性蛋白酶和胰蛋白酶混合得到，将混合蛋白酶与鲍鱼肉糜液混合搅拌均匀，然后控制混合液ph至6～7，温度为50℃，酶解115min得到第一混合酶解液。
向第一酶解混合液中加入复合风味蛋白酶，复合风味蛋白酶的加入量与鲍鱼肉糜液的质量比为1:1，搅拌均匀后，调节ph为5.5～6.5，温度为55℃，反应70min得到第二混合酶解液，其中加入的复合风味蛋白酶的活力为900～1000u/g。
将第二混合酶解液通过60目筛网过滤去除肉渣得到滤液。
将滤液通过超滤膜截留分子量为80～1000道尔顿的物质得到鲍鱼低聚肽提取物，超滤具体操作方式如上述s5步骤所述。
将肉渣经两次水洗后烘干磨粉得到鲍鱼粉。
实施例3
本实施例提供了一种制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法以及通过此方法制得的鲍鱼低聚肽。
一种制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法，包括如下步骤：
将新鲜鲍鱼打碎过40目筛制成鲍鱼肉糜，然后将鲍鱼肉糜与水按质量比为0.8:1进行混合搅拌10min制成鲍鱼肉糜液；将鲍鱼肉糜液置于球磨机中，控制球磨温度为-10摄氏度，球磨频率为60hz，球磨时间40min。
将球磨后的鲍鱼肉糜液与混合蛋白酶以质量比1：0.7进行混合，其中混合蛋白酶由质量比为1:0.9，活力均为2500～2600u/g的碱性蛋白酶和胰蛋白酶混合得到，将混合蛋白酶与鲍鱼肉糜液混合搅拌均匀，然后控制混合液ph至6～7，温度为45℃，酶解110min得到第一混合酶解液。
向第一酶解混合液中加入复合风味蛋白酶，复合风味蛋白酶的加入量与鲍鱼肉糜液的质量比为0.9:1，搅拌均匀后，调节ph为5.5～6.5，温度为50℃，反应65min得到第二混合酶解液，其中加入的复合风味蛋白酶的活力为900～1000u/g。
将第二混合酶解液通过60目筛网过滤去除肉渣得到滤液。
将滤液通过超滤膜截留分子量为80～1000道尔顿的物质得到鲍鱼低聚肽提取物，超滤具体操作方式如上述s5步骤所述。
将肉渣经两次水洗后烘干磨粉得到鲍鱼粉。
实施例4
本实施例提供了一种制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法以及通过此方法制得的鲍鱼低聚肽。
一种制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法，包括如下步骤：
将新鲜鲍鱼打碎过40目筛制成鲍鱼肉糜，然后将鲍鱼肉糜与水按质量比为0.9:1进行混合搅拌10min制成鲍鱼肉糜液；将鲍鱼肉糜液置于球磨机中，控制球磨温度为-11摄氏度，球磨频率为70hz，球磨时间70min。
将球磨后的鲍鱼肉糜液与混合蛋白酶以质量比1：0.8进行混合，其中混合蛋白酶由质量比为1:0.85，活力均为2500～2600u/g的碱性蛋白酶和胰蛋白酶混合得到，将混合蛋白酶与鲍鱼肉糜液混合搅拌均匀，然后控制混合液ph至6～7，温度为42℃，酶解108min得到第一混合酶解液。
向第一酶解混合液中加入复合风味蛋白酶，复合风味蛋白酶的加入量与鲍鱼肉糜液的质量比为0.85:1，搅拌均匀后，调节ph为5.5～6.5，温度为48℃，反应63min得到第二混合酶解液，其中加入的复合风味蛋白酶的活力为900～1000u/g。
将第二混合酶解液通过60目筛网过滤去除肉渣得到滤液。
将滤液通过超滤膜截留分子量为80～1000道尔顿的物质得到鲍鱼低聚肽提取物，超滤具体操作方式如上述s5步骤所述。
将肉渣经两次水洗后烘干磨粉得到鲍鱼粉。
实施例5
本实施例提供了一种制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法以及通过此方法制得的鲍鱼低聚肽。
一种制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法，包括如下步骤：
将新鲜鲍鱼打碎过40目筛制成鲍鱼肉糜，然后将鲍鱼肉糜与水按质量比为0.85:1进行混合搅拌10min制成鲍鱼肉糜液；将鲍鱼肉糜液置于球磨机中，控制球磨温度为-9摄氏度，球磨频率为65hz，球磨时间100min。
将球磨后的鲍鱼肉糜液与混合蛋白酶以质量比1：0.9进行混合，其中混合蛋白酶由质量比为1:1.1，活力均为2500～2600u/g的碱性蛋白酶和胰蛋白酶混合得到，将混合蛋白酶与鲍鱼肉糜液混合搅拌均匀，然后控制混合液ph至6～7，温度为48℃，酶解112min得到第一混合酶解液。
向第一酶解混合液中加入复合风味蛋白酶，复合风味蛋白酶的加入量与鲍鱼肉糜液的质量比为0.8:1，搅拌均匀后，调节ph为5.5～6.5，温度为52℃，反应68min得到第二混合酶解液，其中加入的复合风味蛋白酶的活力为900～1000u/g。
将第二混合酶解液通过60目筛网过滤去除肉渣得到滤液。
将滤液通过超滤膜截留分子量为80～1000道尔顿的物质得到鲍鱼低聚肽提取物，超滤具体操作方式如上述s5步骤所述。
将肉渣经两次水洗后烘干磨粉得到鲍鱼粉。
综上所述，本发明提供的鲍鱼低聚肽提取物的制备方法，由于采用由合适配比的碱性蛋白酶和胰蛋白酶进行一次水解，后采用复合风味蛋白酶进行二次水解，能够使得鲍鱼肉中的蛋白质充分水解为低聚肽，而且由于一次水解过程产生的少量苦味肽在二次水解中疏水性氨基酸被切除而使得最终产物中几乎无苦味肽，进而使得得到的低聚肽提取物的口感好，而且最终得到的某些低聚肽或复合风味蛋白酶能够与鲍鱼肉中的还原糖发生美拉德反应，进一步优化得到的鲍鱼低聚肽提取物的口感。
本发明提供的制备鲍鱼低聚肽提取物及鲍鱼粉的方法，由于包括本发明提供的鲍鱼低聚肽提取物的制备方法，其不仅能够制得本发明提供的鲍鱼低聚肽提取物，还能制得同样具有营养价值的鲍鱼粉，将鲍鱼肉充分完全利用，节约资源。
本发明提供的鲍鱼低聚肽提取物，由于其几乎全为低聚肽，因此其易于被人体吸收，具有较高的营养价值，且口感好。
本发明提供的鲍鱼低聚肽用于制备鲍鱼低聚肽片时，使得制得的鲍鱼低聚肽片中的营养物质易于被吸收。
本发明提供的鲍鱼低聚肽用于制备鲍鱼低聚肽冲剂时，使得制得的鲍鱼低聚肽冲剂中的营养物质易于被吸收。
以上所述仅为本发明的优选实施方式而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。