本发明属于益生菌领域，具体涉及一种益生菌沙棘果泥胶冻及其制备方法。
背景技术：
益生菌是一类通过改善肠道微生物从而对宿主产生有益影响的微生物。它可通过参与肠道微生物平衡来抑制病原菌生长，避免了长期使用抗生素产生的耐药性和二重感染，因此，益生菌产品近年来备受人们的关注。
目前，益生菌剂产品处于便于销售、运输以及储存的目前，其常规产品多以粉剂的形式呈现。
如申请号201410123174.7的发明专利“一种全燕麦固态混菌发酵生产益生菌活菌粉剂及制备方法”公开了一种利用多种益生菌直投剂混菌固态发酵全燕麦获得三联益生菌活菌粉剂及其制备方法，所述三联益生菌活菌粉剂中含有乳双歧杆菌v9，植物乳杆菌p8和干酪乳杆菌zhang，以燕麦全粉为发酵基质制备而得,具有优异的抗胃肠道消化液耐受能力；改善人体肠道菌群结构的能力；调节血脂代谢；提高肠道抗致病菌感染能力；有效预防缓解腹泻、便秘、腹痛、腹胀等肠易激综合症。
申请号“201510284945.5”的发明专利“一种益生菌谷物饮料与粉剂及其制备方法”，其特征在于，所述益生菌谷物饮料为每1000ml水中活性成分的原料组成为：谷物8-12％，淀粉酶40-50u/ml，蛋白酶100-120u/ml，接种至少一种益生菌，且每种益生菌的接菌量均为106-107cfu/ml，将谷物等按一定的比例混合后清洗粉碎，经酶解之后进行灭菌，灭菌后接入益生菌进行发酵，将发酵后的产物进行离心，上清液经无菌调配、罐装即得产品，而离心所得到的益生菌等沉淀物质可经复配、真空冷冻干燥制成益生菌粉剂，所得益生菌谷物饮料中总活菌数可达108-109cfu/ml，益生菌粉剂中总活菌数可达1010-1011cfu/g。
然而不可忽视的是，针对于益生菌粉剂产品，益生菌在制作成粉剂的过程中，往往会因为常规益生菌干燥过程中的热、氧化、冷冻、干燥而对益生菌造成活性损失。另一方面，在长期储存过程中，同样会造成益生菌活性的损失。
由此，目前更需要一种有效的益生菌剂型制备方法，不仅有效减少常规益生菌干燥过程中的热、氧化、干燥损伤等问题，同时可以达到益生菌长期保存的目的，于此同时有效防止益生菌的活力损失。
技术实现要素：
本发明的目的是针对目前存在的问题，提供一种益生菌沙棘果泥胶冻及其制备方法，将沙棘果泥胶冻作为益生菌的载体，利用沙棘果泥中的蛋白质、多糖等成分，同时结合胶类物质与双歧杆菌、乳酸杆菌等菌体混合，形成沙棘果泥益生菌胶冻，有效减少益生菌因常规干燥过程中的热、氧化、干燥所带来的损伤，达到益生菌长期保存的目的，同时起到抗氧化损伤的目的，有效防止菌种在储存过程中的活力损失，并且提高了益生菌的附加营养值，适用于食品工业。
为了实现上述目的，本发明采用技术方案如下：
本发明的目的在于提供一种益生菌沙棘果泥胶冻，以沙棘果泥以及食用胶作为胶冻基质，通过添加益生菌制备得到益生菌沙棘果泥胶冻。
进一步地，所述益生菌沙棘果泥胶冻由以下重量份数的原料组成：沙棘果泥20-45份，益生菌泥1-3份，食用胶0.4-1.2份，益生元10-30份，甜味剂5-15份，水15-45份。
优选地，所述益生菌泥的活菌数为(2-9)×(108-1010)cfu/g。
优选地，所述益生菌为乳酸菌或双歧杆菌中的至少一种。
更优选地，所述乳酸菌为嗜酸乳杆菌。
更优选地，所述双歧杆菌为乳双歧杆菌。
优选地，所述益生元为低聚果糖或菊粉中的至少一种。
优选地，所述食用胶为琼脂或果胶中的至少一种。
优选地，所述食用胶为果胶，在添加果胶同时配合添加氯化钙，所述氯化钙的添加量为50-60mg/g果胶。
优选地，所述甜味剂为蔗糖或甜菊糖中的至少一种。
本发明的另一目的在于提供一种益生菌沙棘果泥胶冻的制备方法，具体步骤如下：
(1)将沙棘鲜果经清洗、打浆、离心得到粗果泥沉淀，再经60-85mpa均质，制得果泥，将果泥经高温灭菌后，冷却备用，得到沙棘果泥，所述沙棘果泥的固形物含量：20％-45％(质量百分比)，ph自然；
(2)将益生菌进行高密度发酵培养，得到发酵液，经过离心后，获得益生菌泥，所述发酵液的活菌数为：109-1011cfu/ml；
(3)将食用胶、甜味剂、益生元干粉按重量份数比例混合，同时按比例加水浸泡0-2h，于55-98℃下加热10-120min，充分溶解，过胶体磨60-120目筛，再经105-145℃，1-25min加热灭菌，冷却至35-65℃，得到胶冻基质；
(4)将沙棘果泥、益生菌泥与胶冻基质混合，搅拌混匀，无菌灌装；于2-10℃下静置直至形成凝胶。
优选地，所述步骤(1)中，离心速度为6500-8000×g。
优选地，所述步骤(1)中，加热处理条件为：95-145℃，加热1-25min。
优选地，所述步骤(1)中，沙棘果泥经高温灭菌后冷却至20-45℃。
所述步骤(1)中，沙棘果泥经高温处理后，其黄酮含量不低于7.2mg/g，更利于菌体的活性。
所述步骤(1)中，沙棘果泥经高温处理后，其黄酮含量为7.2-12.25mg/g。
优选地，所述步骤(2)中，嗜酸乳杆菌以及乳双歧杆菌的发酵培养步骤为：以mrs作为培养基，30-37℃，静置培养12-24小时，离心收集菌体，得到益生菌泥备用。
有益效果
1、本发明的制备方法有效取代益生菌的干粉剂型，利用胶冻有效替代。双歧杆菌、乳酸杆菌等菌粉通常要经干燥过程，不管是冷冻干燥还是喷雾干燥，菌体在干燥和储藏过程中要经受氧化、脱水、高温等逆境的处理，造成活菌率下降，使用时菌体还需要经历复水活化过程。在益生菌凝胶制作过程中，菌体在高密度培养之后，益生菌泥以凝胶的半干湿状态存在，在加工过程中活菌数的减少小于100.5cfu/g，提高了益生菌的活菌率。通常的菌体干燥过程中，菌体活菌数下降为101cfu/g-102cfu/g及以上，高温干燥的活菌数下降甚至超过103cfu/g。
2、本发明将沙棘果泥胶冻作为益生菌的载体，利用沙棘果泥中富含的沙棘黄酮等多酚类物质，沙棘黄酮具有抗氧化等作用，能够对双歧杆菌、乳酸杆菌等益生菌在加工和储藏过程中起到抗氧化损伤的保护作用。沙棘果泥中同时含有蛋白质、多糖等成分，结合胶类物质与双歧杆菌、乳酸杆菌等菌体混合，形成沙棘果泥益生菌胶冻，减少常规益生菌干燥过程中的热、氧化、干燥损伤，达到益生菌长期保存的目的，并且实现了益生菌与植物黄酮的结合及产品的多样化，适用于食品工业。同时，本发明中的黄酮类物质对双歧杆菌、乳酸菌具有显著的生长促进作用，可以显著提高其菌剂性能的发挥。
本发明制备的沙棘果泥胶冻可在常温条件下保存6-9个月及以上。
所述双歧杆菌如动物双歧杆菌在沙棘果泥胶冻加工过程中活菌数下降低于101cfu/g，在3个月的储藏过程中活菌数下降低于100.5cfu/g。乳酸杆菌如嗜酸乳杆菌在加工成沙棘果泥胶冻过程中活菌数下降低于100.5cfu/g，在3个月的储藏过程中活菌数下降低于100.5cfu/g。
3.益生菌的健康作用日益受到重视，常见的活性益生菌产品包括益生菌乳饮料、乳基益生菌片剂、乳基益生菌粉、益生菌酸奶等。益生菌沙棘果泥胶冻的制备一方面将黄酮与益生菌结合起来发挥协同的生理作用，表现在一方面乳酸菌可以代谢黄酮类物质，形成更有生理活性的代谢物质如雌马酚；另一方面黄酮能够作为益生元促进乳酸菌的生长；第三，益生菌与沙棘组合形成纯水果风味的食品，产生出活性益生菌剂型的新载体新风味。
具体实施方式
实施例1沙棘果泥嗜酸乳杆菌胶冻的制备
本例以嗜酸乳杆菌为例，来说明本发明凝胶的制备方法
按照以下重量份数称取原料：沙棘果泥30份，益生菌泥1份，琼脂0.9份，蔗糖10份，低聚果糖10份，菊粉10份，甜菊糖1份。
(1)将沙棘清洗、打浆、脱脂、离心得到的粗果泥再经均质，制得果泥，果泥经105℃，5min加热处理后，冷却至45℃，得到沙棘果泥，备用；沙棘果泥固形物含量为25％,ph为2.5，黄酮含量为12.25mg/g。
(2)菌种：将嗜酸乳杆菌cgmcc1084(中国微生物菌种保藏管理委员会)以mrs培养基37℃培养24小时，离心收集菌体，得到益生菌泥备用；益生菌泥活菌数为5.3×1010cfu/g。
(3)琼脂、蔗糖、低聚果糖、菊粉、甜菊糖按比例称量，混合，溶于45份加热到80℃搅拌充分溶解，过80目筛，溶液经121℃15min灭菌，冷却至40℃，得到胶冻基质，将其与沙棘果泥以及益生菌泥按比例混合均匀，无菌包装；于4℃下静置直至形成凝胶。
(4)所得沙棘果泥嗜酸乳杆菌胶冻酸甜可口，加工过程中活菌数下降100.2cfu/g，在3个月的储藏过程中活菌数下降100.2cfu/g。得到的沙棘果泥嗜酸乳杆菌胶冻在4℃储藏9个月，活菌数仍能达到108cfu/g以上。
实施例2沙棘果泥乳双歧杆菌胶冻的制备
本例以乳双歧杆菌为例，来说明本发明凝胶的制备方法
按照以下重量份数称取原料：沙棘果泥40份,益生菌泥1份，果胶0.5份，氯化钙55mg/g果胶、琼脂0.5份，蔗糖5份，低聚果糖15份，菊粉15份，甜菊糖2份。
其中，果胶为低酯果胶。
(1)a液沙棘清洗、打浆、离心得到的粗果泥再经均质，制得果泥，果泥经95℃5min加热处理后，冷却至40℃，得到沙棘果泥，备用；其特征在于沙棘果泥固形物含量为30％,ph为2.8，黄酮含量为8.18mg/g。
(2)菌种：将乳双歧杆菌以mrs培养基37℃培养24小时，离心收集菌体，得到益生菌泥备用；益生菌泥活菌数为8.7×1010cfu/g。
(3)将果胶、氯化钙、琼脂、蔗糖、低聚果糖、菊粉、甜菊糖按比例称量，干粉混合，溶于35份加热到90℃搅拌充分溶解，过胶体磨，过80目筛，溶液经121℃15min灭菌，冷却至40℃，得到胶冻基质，将其与沙棘果泥以及益生菌泥按比例混合均匀，无菌包装；于4℃下静置直至形成凝胶。
(4)所得沙棘果泥双歧杆菌胶冻酸甜可口，加工过程中活菌数下降100.3cfu/g，在3个月的储藏过程中活菌数下降100.3cfu/g。得到的沙棘果泥双歧乳杆菌胶冻在4℃储藏6个月，活菌数仍能达到108cfu/g以上。
实施例3沙棘果泥混合乳酸菌胶冻的制备
本例以混合乳酸菌菌为例，来说明本发明凝胶的制备方法
按照以下重量份数称取原料：沙棘果泥45份、益生菌泥2份，琼脂0.8份，蔗糖10份，低聚果糖15份，菊粉5份。
(1)a液沙棘清洗、打浆、离心得到的粗果泥再经均质，制得果泥，果泥经100℃5min加热处理后，冷却至40℃，得到沙棘果泥，备用；其特征在于沙棘果泥固形物含量为35％，ph为2.9，黄酮含量为9.3mg/g。
(2)菌种：将嗜酸乳杆菌和乳双歧杆菌分别以mrs培养基37℃培养24小时，离心收集菌体，得到益生菌泥备用；将1份嗜酸乳杆菌菌泥和1份乳双歧杆菌菌泥进行混合，益生菌泥活菌数为9×1010cfu/g。
(3)将琼脂蔗糖、低聚果糖、菊粉按比例称量，干粉混合，溶于40份加热到90℃搅拌充分溶解，过胶体磨，过80目筛，溶液经121℃15min灭菌，冷却至40℃，得到胶冻基质，将其与沙棘果泥以及2份益生菌泥混合均匀，无菌包装；于4℃下静置直至形成凝胶。
所得沙棘果泥双歧杆菌胶冻酸甜可口，加工过程中活菌数下降100.2cfu/g，在3个月的储藏过程中活菌数下降100.3cfu/g。得到的沙棘果泥双歧乳杆菌胶冻在4℃储藏6个月，活菌数仍能达到108cfu/g以上。
实施例4沙棘果泥嗜酸乳杆菌粉的制备
利用实施例1的步骤(1)方法制备的沙棘果泥以及步骤(2)方法制备的嗜酸乳杆菌益生菌泥，按照沙棘果泥30份、益生菌泥1份进行混合，利用真空冷冻干燥机进行干燥，制成粉剂；将实施例1步骤(3)的琼脂、低聚果糖、菊粉、蔗糖、甜菊糖、菊粉按照等比例混合进行干粉混合(不加水)，进行干热灭菌后，与上述粉剂进行无菌混合，真空包装。加工过程中活菌数下降100.8cfu/g，在3个月的储藏过程中活菌数继续下降100.4cfu/g。
而实施例1中制备沙棘果泥嗜酸乳杆菌胶冻加工过程中活菌数下降100.2cfu/g，在4℃储藏6个月，活菌数下降100.2cfu/g。
实施例5沙棘果泥乳双歧杆菌粉的制备
利用实施例2的步骤(1)方法制备的沙棘果泥液以及步骤(2)方法制备的乳双歧乳杆菌益生菌泥，按照沙棘果泥40份、益生菌泥1份进行混合，将混合物进行喷雾干燥，制成粉剂。将实施例2步骤(3)中的琼脂、低置果胶、氯化钙、低聚果糖、菊粉、蔗糖、甜菊糖、菊粉按照相同比例混合进行干粉混合(不加水)，经过干热灭菌后，与上述粉剂无菌混合真空包装。加工过程中活菌数下降101.7cfu/g，在3个月室温储藏过程中活菌数继续下降100.4cfu/g。
沙棘果泥乳双歧乳杆菌胶冻加工过程中活菌数下降100.3cfu/g，在4℃储藏6个月，活菌数下降100.3cfu/g。