本发明涉及饲料添加剂领域，且特别涉及一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物及其制备方法与应用。
背景技术：
目前，我国凡纳对虾等对虾产品主要以虾仁出口为主，因此在对虾的加工过程中会产生大量的低值小虾、虾头、虾壳、虾足等下脚料，约占整虾的30％-40％。这些下脚料含有丰富的甲壳素、虾青素、蛋白质、不饱和脂肪酸等营养物质，以及丰富的矿物质元素和人体必需的微量元素。在我国，由于加工技术的滞后，这些下脚料仅有少部分被加工成动物饲料加以利用，绝大部分被作为垃圾丢弃，不仅会造成环境污染，更是对资源的严重浪费。
硒作为谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)的组成成分，在生物体内能清除脂质过氧化自由基中间产物，防止生物膜的脂质过氧化，维持生物膜的正常结构和功能；硒还参与辅酶a和辅酶q的合成。硒以硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸两种形式存在于硒蛋白中，通过硒蛋白影响动物机体的自由基代谢，抗氧化功能、免疫功能、生殖功能、细胞凋亡和内分泌系统等而发挥其生物学功能。动物缺乏硒时，会发生营养型肌肉萎缩，初期可能表现为呼吸困难、骨骼肌僵硬，幼畜患白肌病，猪还会出现营养性肝坏死；成年动物缺乏硒时，会对疾病的易感性增高，母畜易出现繁殖机能障碍等。无机硒毒性大，吸收利用率低，而有机硒和纳米硒具有毒性小、易于吸收、高效、高活性等优势，是较好的补硒来源。
因此，需要一种能充分利用对虾加工后的下脚料，并能为机体高效补硒等营养物质的饲料添加剂。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物及其制备方法，将对虾下脚料酶解制备小肽和n-乙酰葡萄糖胺，与纳米硒络合制备虾壳蛋白肽纳米硒络合物，不仅能充分利用对虾加工后的下脚料，还能被机体高效吸收和利用，发挥抗氧化、促生长、免疫调节等作用。
本发明的另一目的在于提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物的应用，虾壳蛋白肽纳米硒络合物作为饲料添加剂添加至饲料中。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
本发明提出一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物的制备方法，其包括以下步骤：
将干燥后的对虾下脚料粉碎，添加去离子水，调节ph至8-9，水浴加热至50-60℃，得混合物，加入碱性蛋白酶进行第一次酶解；
水浴温度降至30-35℃，加入几丁质酶进行第二次酶解，灭酶、过滤得酶解液；
在酶解液中添加纳米硒，于水浴温度50-55℃搅拌1-2h，络合得反应液，将反应液干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
进一步地，在本发明较佳实施例中，按料液比1：3-7添加去离子水。
进一步地，在本发明较佳实施例中，碱性蛋白酶的加入量为混合物重量的0.01％-0.1％。
进一步地，在本发明较佳实施例中，第一次酶解4-6h。
进一步地，在本发明较佳实施例中，几丁质酶的加入量为混合物重量的0.01％-0.05％。
进一步地，在本发明较佳实施例中，第二次酶解2-4h。
进一步地，在本发明较佳实施例中，灭酶的方法为：于95-100℃灭酶15-20min。
进一步地，在本发明较佳实施例中，纳米硒的添加量为酶解液中蛋白质含量的1％-3％。
本发明提出一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用上述的虾壳蛋白肽纳米硒络合物的制备方法制得。
进一步地，在本发明较佳实施例中，虾壳蛋白肽纳米硒络合物作为饲料添加剂，虾壳蛋白肽纳米硒络合物在饲料中的添加量为0.1mg/kg-10mg/kg。
本发明实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物及其制备方法与应用的有益效果是：本发明实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物的制备方法主要是以对虾下脚料为原料，加入碱性蛋白酶进行酶解，再加入几丁质酶进行酶解，得到酶解液，添加纳米硒络合，得到虾壳蛋白肽纳米硒络合物，该方法酶解制备小肽和n-乙酰葡萄糖胺，与纳米硒络合制备虾壳蛋白肽纳米硒络合物，不仅能充分利用对虾加工后的下脚料，还能被机体高效吸收和利用，发挥抗氧化、促生长、免疫调节等作用；本发明实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物的应用主要是虾壳蛋白肽纳米硒络合物作为饲料添加剂添加至饲料中。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物及其制备方法与应用进行具体说明。
本发明实施例提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物的制备方法，其包括以下步骤：
s1、将干燥后的对虾下脚料虾壳粉碎，一般选用对虾加工后的虾头、虾足和虾壳为原料，优选采用凡纳对虾虾壳为原料，例如凡纳对虾虾壳，风干后，进行粉碎，过100目筛，然后按料液比1：3-7，还可为1：6-7添加去离子水，调节ph至8-9，还可为8-8.5，恒温水浴加热至50-60℃，还可以为50-55℃并持续恒温加热一段时间，一般1-4h得虾壳粉与水的混合物。
s2、加入碱性蛋白酶进行第一次酶解，碱性蛋白酶的加入量一般为混合物重量的0.01％-0.1％，还可为0.01％-0.03％，第一次酶解时间一般为4-6h，还可为5-6h。
s3、水浴温度降至30-35℃，加入几丁质酶进行第二次酶解，几丁质酶的加入量一般为混合物重量的0.01％-0.05％，还可为0.01％-0.02％，第二次酶解时间一般为2-4h，还可为3-4h，然后灭酶、离心过滤得酶解液，其中，灭酶的方法可以为：于95-100℃灭酶15-20min。
s4、在酶解液中添加纳米硒，纳米硒的添加量一般为酶解液中蛋白质含量的1％-3％，还可为1％-1.5％，于水浴温度50-55℃搅拌1-2h，还可为1-1.5h，络合得虾壳蛋白肽纳米硒的反应液，将反应液干燥，优选喷雾干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
本发明实施例采用两步酶解法对对虾下脚料进行酶解，具体是利用碱性蛋白酶酶解对虾虾壳中的蛋白质制备小肽这种虾壳蛋白，利用几丁质酶酶解对虾虾壳中的几丁质(即甲壳素、壳聚糖)制备n-乙酰葡萄糖胺，获得小肽的同时也获得了n-乙酰葡萄糖胺，该方法以对虾下脚料作为蛋白原料，实现对虾加工下脚料的高值化加工，提高其利用价值，同时也降低了其腐烂变质对环境的危害。对虾虾壳的酶解产物中的小肽与纳米硒络合制备虾壳蛋白肽纳米硒络合物，不仅能够被机体高效吸收和利用，还能发挥抗氧化、促生长、免疫调节等作用；n-乙酰葡萄糖胺具有改善肠道，增强免疫功能等作用。最重要的是，虾壳蛋白肽纳米硒络合物低毒性，优于无机硒、有机硒，是比较安全的硒制品。
本发明实施例还提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用上述的虾壳蛋白肽纳米硒络合物的制备方法制得。虾壳蛋白肽纳米硒络合物具有海洋蛋白小肽分子、n-乙酰葡萄糖胺以及纳米硒，既为牲畜提供易消化吸收的蛋白和微量元素硒，也具有抗氧化、改善肠道、增强免疫力等功能，且无任何副作用。
本发明实施例还提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物的应用，虾壳蛋白肽纳米硒络合物作为饲料添加剂添加至饲料中，尤其是猪饲料中(包括育肥猪饲料和断奶仔猪饲料)；虾壳蛋白肽纳米硒络合物在饲料中的添加量一般为0.1mg/kg-10mg/kg，虾壳蛋白肽纳米硒络合物在育肥猪饲料中的添加量一般为3mg/kg-10mg/kg，虾壳蛋白肽纳米硒络合物在断奶仔猪饲料中的添加量一般为0.1mg/kg-3mg/kg。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用以下制备方法制得：
将凡纳对虾虾壳风干，定量称取粉碎，按料液比1:3添加去离子水，ph调至9，恒温水浴加热至60℃，得混合物。
在混合物中加入混合物重量0.1％的碱性蛋白酶酶解4h。
水浴降温至35℃，加入混合物重量0.05％的几丁质酶酶解2h，于100℃灭酶20min，离心过滤得酶解液。
在酶解液中添加纳米硒络合，纳米硒的添加量为酶解液中蛋白质含量的3％，水浴温度55℃搅拌2h，得虾壳蛋白肽纳米硒反应液，将反应液进行喷雾干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
对虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的硒含量和蛋白含量进行检测，硒含量采用原子吸收分光光度法测定，蛋白含量采用gb/t6432-94方法测定；还对虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的n-乙酰葡萄糖胺进行定性和定量检测，具体采用比色法定性检测n-乙酰葡萄糖胺，采用柱层析方法测定n-乙酰葡萄糖胺含量，下同。
经检测，本实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的硒含量为络合物重量的0.225％；蛋白含量为络合物重量的85.43％；n-乙酰葡萄糖胺含量为络合物重量的6.35％。
实施例2
本实施例提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用以下制备方法制得：
将凡纳对虾虾壳风干，定量称取粉碎，按料液比为1:4添加去离子水，ph调至9，恒温水浴加热至60℃，得混合物。
在混合物中加入混合物重量0.08％的碱性蛋白酶酶解4h。
水浴降温至35℃，加入混合物重量0.04％的几丁质酶酶解2h，于100℃灭酶20min，离心过滤得酶解液。
在酶解液中添加纳米硒络合，纳米硒的添加量为酶解液中蛋白质含量的2.5％，水浴温度55℃搅拌2h，得虾壳蛋白肽纳米硒反应液，将反应液进行喷雾干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
经检测，本实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的硒含量为络合物重量的0.258％；蛋白含量为络合物重量的86.17％；n-乙酰葡萄糖胺含量为络合物重量的6.78％。
实施例3
本实施例提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用以下制备方法制得：
将凡纳对虾虾壳风干，定量称取粉碎，按料液比为1:5添加去离子水，ph调至8.5，恒温水浴加热至55℃，得混合物。
在混合物中加入混合物重量0.05％的碱性蛋白酶酶解5h。
水浴降温至35℃，加入混合物重量0.03％的几丁质酶酶解3h，于100℃灭酶18min，离心过滤得酶解液。
在酶解液中添加纳米硒络合，纳米硒的添加量为酶解液中蛋白质含量的2％，水浴温度55℃搅拌1.5h，得虾壳蛋白肽纳米硒反应液，将反应液进行喷雾干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
经检测，本实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的硒含量为络合物重量的0.185％；蛋白含量为络合物重量的83.66％；n-乙酰葡萄糖胺含量为络合物重量的5.95％。
实施例4
本实施例提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用以下制备方法制得：
将凡纳对虾虾壳风干，定量称取粉碎，按料液比为1:6添加去离子水，ph调至8.5，恒温水浴加热至55℃，得混合物。
在混合物中加入混合物重量0.03％的碱性蛋白酶酶解5h。
水浴降温至30℃，加入混合物重量0.02％的几丁质酶酶解3h，于100℃灭酶18min，离心过滤得酶解液。
在酶解液中添加纳米硒络合，纳米硒的添加量为酶解液中蛋白质含量的1.5％，水浴温度50℃搅拌1.5h，得虾壳蛋白肽纳米硒反应液，将反应液进行喷雾干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
经检测，本实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的硒含量为络合物重量的0.213％；蛋白含量为络合物重量的84.52％；n-乙酰葡萄糖胺含量为络合物重量的6.07％。
实施例5
本实施例提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用以下制备方法制得：
将凡纳对虾虾壳风干，定量称取粉碎，按料液比为1:7添加去离子水，ph调至8，恒温水浴加热至50℃，得混合物。
在混合物中加入混合物重量0.01％的碱性蛋白酶酶解6h。
水浴降温至30℃，加入混合物重量0.01％的几丁质酶酶解4h，于100℃灭酶15min，离心过滤得酶解液。
在酶解液中添加纳米硒络合，纳米硒的添加量为酶解液中蛋白质含量的1％，水浴温度50℃搅拌1h，得虾壳蛋白肽纳米硒反应液，将反应液进行喷雾干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
经检测，本实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的硒含量为络合物重量的0.159％；蛋白含量为络合物重量的80.64％；n-乙酰葡萄糖胺含量为络合物重量的6.44％。
实施例6
本实施例提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用以下制备方法制得：
将凡纳对虾虾壳风干，定量称取粉碎，按料液比为1:6添加去离子水，ph调至8，恒温水浴加热至50℃，得混合物。
在混合物中加入混合物重量0.01％的碱性蛋白酶酶解6h。
水浴降温至30℃，加入混合物重量0.01％的几丁质酶酶解4h，于100℃灭酶15min，离心过滤得酶解液。
在酶解液中添加纳米硒络合，纳米硒的添加量为酶解液中蛋白质含量的1％，水浴温度50℃搅拌1h，得虾壳蛋白肽纳米硒反应液，将反应液进行喷雾干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
经检测，本实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的硒含量为络合物重量的0.168％；蛋白含量为络合物重量的81.75％；n-乙酰葡萄糖胺含量为络合物重量的6.23％。
实施例7
本实施例提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用以下制备方法制得：
将凡纳对虾虾壳风干，定量称取粉碎，按料液比为1:5添加去离子水，ph调至8.5，恒温水浴加热至55℃，得混合物。
在混合物中加入混合物重量0.03％的碱性蛋白酶酶解5h。
水浴降温至35℃，加入混合物重量0.03％的几丁质酶酶解3h，于100℃灭酶18min，离心过滤得酶解液。
在酶解液中添加纳米硒络合，纳米硒的添加量为酶解液中蛋白质含量的2％，水浴温度55℃搅拌1.5h，得虾壳蛋白肽纳米硒反应液，将反应液进行喷雾干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
经检测，本实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的硒含量为络合物重量的0.178％；蛋白含量为络合物重量的82.46％；n-乙酰葡萄糖胺含量为络合物重量的6.67％。
实施例8
本实施例提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用以下制备方法制得：
将凡纳对虾虾壳风干，定量称取粉碎，按料液比为1:4添加去离子水，ph调至9，恒温水浴加热至60℃，得混合物。
在混合物中加入混合物重量0.05％的碱性蛋白酶酶解4h。
水浴降温至35℃，加入混合物重量0.05％的几丁质酶酶解2h，于100℃灭酶20min，离心过滤得酶解液。
添加纳米硒络合，纳米硒的添加量为酶解液中蛋白质含量的2.5％，水浴温度55℃搅拌2h，得虾壳蛋白肽纳米硒反应液，将反应液进行喷雾干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
经检测，本实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的硒含量为络合物重量的0.192％；蛋白含量为络合物重量的84.93％；n-乙酰葡萄糖胺含量为络合物重量的6.51％。
实施例9
本实施例提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用以下制备方法制得：
将凡纳对虾虾壳风干，定量称取粉碎，按料液比为1:3添加去离子水，ph调至8.5，恒温水浴加热至55℃，得混合物。
在混合物中加入混合物重量0.07％的碱性蛋白酶酶解5h。
水浴降温至30℃，加入混合物重量0.03％的几丁质酶酶解3h，于100℃灭酶18min，离心过滤得酶解液。
添加纳米硒络合，纳米硒的添加量为酶解液中蛋白质含量的2.5％，水浴温度50℃搅拌1.5h，得虾壳蛋白肽纳米硒反应液，将反应液进行喷雾干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
经检测，本实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的硒含量为络合物重量的0.231％；蛋白含量为络合物重量的86.05％；n-乙酰葡萄糖胺含量为络合物重量的6.80％。
对比例1
本对比例提供一种虾壳蛋白肽纳米硒络合物，其采用以下制备方法制得：
1、制备磁性固定化碱性蛋白酶：
1.1、将0.1g磁性壳聚糖微球加入25mlph＝10的硼砂缓冲液中，再加入1ml32000u/ml的碱性蛋白酶，在4℃下反应3h，得到混合产物；
1.2、向混合产物中加入500μl戊二醛(纯度为50％)，在4℃下反应3h，过滤，将滤渣反复用硼砂缓冲液洗涤，冷冻干燥，得到磁性固定化碱性蛋白酶；
2、制备虾壳粉：
去除全部肉质取虾壳，将虾壳用蒸馏水反复清洗，直至没有悬浮的杂质物质，然后置于鼓风干燥箱中，在100℃下烘干24小时，再将干燥好的虾壳用粉碎机进行粉碎，过100目筛，贮存备用；
3、提取虾壳中的蛋白：
3.1、将0.5g虾壳粉加入到5ml50g/l乙酸溶液中，在65℃下反应3h，得混合液；
3.2、将混合液过滤，向滤渣中加入0.5mol/l氢氧化钠溶液调节ph值为7，过滤，再用蒸馏水洗涤滤渣，干燥，得改性虾壳粉；
3.3、测定改性虾壳粉中虾壳蛋白的含量，测得虾壳蛋白的质量分数为53.98％；
3.4、将0.2g改性虾壳粉加入到10mlph为10的硼砂缓冲液中，接着按照15u/mg的酶底比加入磁性固定化碱性蛋白酶(事先将磁性固定化碱性蛋白酶在ph为10的硼砂缓冲液中溶胀过夜)，在酶解温度为55℃、转速为100r/min下搅拌酶解3小时，酶解结束后，过滤得酶解液。
4、制备虾壳蛋白肽纳米硒络合物
在酶解液中添加纳米硒络合，纳米硒的添加量为酶解液中蛋白质含量的3％，水浴温度55℃搅拌2h，得虾壳蛋白肽纳米硒反应液，将反应液进行喷雾干燥，即得虾壳蛋白肽纳米硒络合物。
经检测，本实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物中的硒含量为络合物重量的0.164％；蛋白含量为络合物重量的75.9％，未检测到n-乙酰葡萄糖胺。
对比例2
本对比例提供一种大豆小肽纳米硒螯合物，其采用以下制备方法制得：
(1)豆粕粉碎：称取100kg脱脂豆粕粉(粗蛋白含量45％)碎过100目筛，得豆粕粉100kg；
(2)酶解：将步骤(1)得到的豆粕粉加水去离子水460l，搅拌均匀，配制成蛋白浓度为8％(w/w)的豆粕液，调节豆粕液ph值至8.0，加入豆粕液中蛋白质量1.0％的蛋白酶，在52℃温度下酶解6h后，将酶解液升温至85℃灭酶10分钟，即得到豆粕酶解液；
(3)压滤：将步骤(2)得到的豆粕酶解液经板框压滤机压滤，滤布目数为200目，得到压滤液和滤饼，滤饼经干燥粉碎后可制成豆渣饲料；
(4)超滤：将步骤(3)得到的压滤液经截留分子量为1000da的超滤膜装置进行超滤，收集透过液，得到大豆小肽溶液292l；
(5)螯合反应：向步骤(4)得到的大豆小肽溶液中加入其蛋白肽量(以蛋白质含量计)1.5％的纳米硒，所述纳米硒为将亚硒酸钠和柠檬酸按质量比为1:2混合后研磨制备所得，将溶液的ph值调整到8.0，在45℃下搅拌反应1.5小时，得到大豆小肽纳米硒螯合反应液285l；
(6)喷雾干燥：将步骤(5)得到的大豆小肽纳米硒螯合反应液进行喷雾干燥，进风口温度为200℃，出风口温度为80℃，得到大豆小肽纳米硒螯合物37.2kg，检测硒含量为0.177％，粗蛋白含量为78.4％，未检测到n-乙酰葡萄糖胺。
以下通过饲喂试验对本实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物的效果进行检测。
试验一
试验选择福建傲农生物科技集团股份有限公司下属养殖基地平均体重为72kg左右的健康育肥猪180头，经统计分析体重差异不显著。随机分成12组(每组3个重复，每个重复5头)，分别为3个对照组和9个试验组。试验组(试验组1-试验组)对应给予添加了实施例1-9制得的虾壳蛋白肽纳米硒络合物的饲料(添加量为5mg/kg)；对照组分为空白对照组和对照组1、对照组2，空白对照组不添加任何添加剂，其他同试验组，对照组1给与添加了对比例1制得的大豆小肽纳米硒螯合物的饲料(添加量为5mg/kg)，对照组2给与添加了对比例2制得的虾壳蛋白肽纳米硒络合物的饲料(添加量为5mg/kg)。
育肥猪自由采食和饮水，按常规进行免疫及驱虫，44天后结料并称重，计算日增重、采食量、料重比；将空腹12h的试验猪，每个重复中随机挑选3头进行前腔静脉采血5ml，将静置离心出的血清转移至ep管中，冷冻送检，测量t-aoc、gsh-px、sod、cat和mda等指标。试验结果见表1和表2。
表1虾壳蛋白肽纳米硒络合物对育肥猪生长性能的影响
表2虾壳蛋白肽纳米硒络合物对育肥猪血清抗氧化指标的影响
由表1与表2结果分析可知，虾壳蛋白肽纳米硒络合物能有效改善育肥猪生长性能，具有较好的抗氧化效果。
在生长性能方面，与空白对照组相比，试验组的效果明显优于空白对照组，尤其试验组4效果最为显著，日均采食量及日增重相比于空白对照组分别提高12.23％和22.60％，料重比降低8.53％；在抗氧化方面，试验组的效果明显优于空白对照组，其中试验组4总抗氧化能力(t-aoc)达到1.95v/ml，比空白对照组提高25.81％，谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)、超氧化物歧化酶(sod)和过氧化氢酶(cat)均表现出较强活力，分别比空白对照组提高20.48％、20.12％和35.73％，丙二醛降低22.52％。
在生长性能方面，与对照组1、对照组2相比，试验组的综合效果要略优于对照组1和对照组2；在抗氧化方面，试验组的综合效果要略优于对照组1和对照组2。
试验二
试验选择福建傲农生物科技集团股份有限公司下属养殖基地平均体重为8.5kg左右的健康断奶仔猪180头，经统计分析体重差异不显著。随机分成12组(每组3个重复，每个重复5头)，分别为3个对照组和9个试验组。试验组(试验组1-试验组)对应给予添加了实施例1-9制得的虾壳蛋白肽纳米硒络合物的饲料(添加量为0.5mg/kg)；对照组分为空白对照组和对照组1、对照组2，空白对照组不添加任何添加剂，其他同试验组，对照组1给与添加了对比例1制得的大豆小肽纳米硒螯合物的饲料(添加量为0.5mg/kg)，对照组2给与添加了对比例2制得的虾壳蛋白肽纳米硒络合物的饲料(添加量为0.5mg/kg)。
断奶仔猪自由采食和饮水，按常规进行免疫及驱虫，30天后结料并称重，计算日增重、采食量、料重比；
表3虾壳蛋白肽纳米硒络合物对断奶仔猪生长性能的影响
由表3结果分析可知，与空白对照组相比，试验组明显提高了断奶仔猪的生长性能，其中试验组8的采食量提高了8.33％，试验组4的日增重提高21.05％，料肉比降低11.89％；且试验组效果优于对照组1和对照组2。
综上所述，本发明实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物的制备方法是将对虾下脚料酶解制备小肽和n-乙酰葡萄糖胺，与纳米硒络合制备虾壳蛋白肽纳米硒络合物，不仅能充分利用对虾加工后的下脚料，还能被机体高效吸收和利用，发挥抗氧化、促生长、免疫调节等作用；本发明实施例的虾壳蛋白肽纳米硒络合物的应用主要是虾壳蛋白肽纳米硒络合物作为饲料添加剂添加至饲料中。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。