专利名称：卵磷脂酶反应干燥培养基的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种卵磷脂酶反应干燥培养基。
培养基在微生物领域中因其制备方法不同而分为干燥培养基和不可干燥培养基两大类。干燥培养基因其制备工艺简单、使用方便、可工业化生产而被广泛应用。随着微生物学的发展，许多不可干燥培养基也已被研制成为干燥培养基；但至今仍剩下血培养基和卵黄培养基因其有效成份遇热不稳定，极易破坏而仍无法将其制成干燥培养基，在使用前必须由实验人员临时配制。其中卵黄培养基由于具有特殊的卵磷脂酶反应功能而在微生物检验技术领域里有着重要的使用价值。但该培养基无法工业化生产、制造成本高、操作繁琐、实验结果误差大，且无法干燥。因此，寻求一种既可干燥、工业化生产且又具有卵磷脂酶反应功能的干燥培养基来替代卵黄培养基已成为国际上微生物检验领域中的一大难题。
本发明的目的是为了提供一种可替代卵黄培养基具卵磷脂酶反应功能、酶反应速度快、乳浊环清晰度高、可工业化生产、使用方便、成本低、实验结果误差小的卵磷脂酶反应干燥培养基。
本发明的目的可通过如下措施来实现一种卵磷脂酶反应干燥培养基是由下述重量百分含量的原料制成卵磷脂2-4％、增溶助溶剂5-13％、旦白胨10-20％、牛肉膏2-20％、氯化钠13-47％、葡萄糖4-10％、可溶性淀粉2-4％、亚硫酸氢钠1-2％、琼脂0-30％。
一种卵磷脂酶反应干燥培养基的制备方法是先将卵磷脂、增溶助溶剂用蒸馏水研磨均匀后，再加入旦白胨、牛肉膏、氯化钠、葡萄糖、可溶性淀粉、亚硫酸氢钠，搅拌使其充分溶解，然后加入琼脂搅拌均匀；将搅拌后的培养基在低温真空下干燥，再将其粉碎至100目即可。
本发明的目的还可通过如下措施来实现所述的卵磷脂可用硝酸甘油脂及脂类其他化合物代替；所述的增溶助溶剂可为烷基酚聚氧乙烯醚及其他非离子表面活性剂代替。
本发明相比现有技术具有如下优点1、本发明解决了微生物检验领域的一大难题，首先研制出了一种用卵磷脂酶反应干燥培养基替代不可干燥的卵黄培养基；该培养基与卵黄培养基相比，具有酶反应速度快、乳浊环清晰度高；其物理性质明显优于卵黄培养基，颜色为透明、浅黄色。
2、本发明的配方以琼脂或水为基质，在其中添加卵磷脂及其他甘油脂类化合物作为酶反应剂，再加入增溶助溶剂促进溶解，还加入且白胨、牛内膏、葡萄糖作为培养基的营养成份；加入可溶性淀粉改变该培养基的物理性质，增加酶反应效果；再加入亚硫酸氢钠促进酶反应效果。
3、本发明制备工艺简单、检验人员实验时不需临时配制可工业化生产、使用方便、成本低、实验结果误差小；可广泛用于药检、防疫、医院等微生物检验部门。
本发明还将结合实施例作进一步详述实施例一一种卵磷脂酶反应干燥培养基是由下述重量百分含量的原料制成卵磷脂2％、烷基酚聚氧乙烯醚8％、旦白胨10％、牛肉膏4％、氯化钠37％、葡萄糖10％、可溶性淀粉2％、亚硫酸氢钠2％、琼脂25％。
一种卵磷脂酶反应干燥培养基的制备方法是先将卵磷脂、烷基酚聚氧乙烯醚用蒸馏水研磨均匀后，再加入旦白胨、牛肉膏、氯化钠、葡萄糖、可溶性淀粉、亚硫酸氢钠，搅拌使其充分溶解，然后加入琼脂搅拌均匀；将搅拌后的培养基在低温真空下干燥，再将其粉碎至100目即可。
实施例二一种卵磷脂酶反应干燥培养基是由下述重量百分含量的原料制成硝酸甘油脂4％、平平加0 12％、旦白胨20％、牛肉膏7％、氯化钠17％、葡萄糖5％、可溶性淀粉4％、亚硫酸氢钠1％、琼脂30％。
其制备方法与例一同。
实施例三一种卵磷脂酶反应干燥培养基是由下述重量百分含量的原料制成甘油三丁酸脂3％、平平加20 5％、旦白胨15％、牛肉膏2％、氯化钠46％、葡萄糖6％、可溶性淀粉2％、亚硫酸氢钠1％、琼脂20％。
其制备方法与例一同。
实施例四一种卵磷脂酶反应干燥培养基是由下述重量百分含量的原料制成甘油三亚油酸脂2.5％、聚氧乙烯月桂醚10.5％、旦白胨18％、牛肉膏6％、氯化钠32％、葡萄糖4％、可溶性淀粉2.5％、亚硫酸氢钠1.5％、琼脂23％。
其制备方法与例一同。
实施例五一种卵磷脂酶反应干燥培养基是由下述重量百分含量的原料制成胆固醇脂4％、烷基酚聚氧乙烯醚13％、旦白胨20％、牛肉膏20％、氯化钠30％、葡萄糖8％、可溶性淀粉3％、亚硫酸氢钠2％。
其制备方法与例一同。
实施例六
一种卵磷脂酶反应干燥培养基是由下述重量百分含量的原料制成乙酸乙脂4％、聚氧乙烯月桂醚12％、旦白胨18％、牛肉膏15％、氯化钠25％、葡萄糖10％、可溶性淀粉4％、亚硫酸氢钠2％琼脂10％。
其制备方法与例一同。
本发明的使用效果如下实验组采用卵磷脂酶反应培养基与对比组采用卵黄高盐琼脂培养基进行对比，做金黄色葡萄球菌的鉴别实验。实验结果表明，两种培养基的卵磷脂酶反应特征完全一致，实验结果相同，卵磷脂酶反应培养基完全可以取代卵黄培养基。现将结果报告如下一、材料与方法1、菌种金黄色葡萄球菌 CMCC(B)26003。
2、培养基(1)卵磷脂酶反应干燥培养基(其成份与制备方法见本发明说明书)。(2)卵黄高盐琼脂培养基。
3、实验方法将36℃±1℃培养的金黄色葡萄球菌肉汤，以接种环沾取1-2环，划线接种于卵磷脂酶反应培养基平板和卵黄高盐琼脂平板。置36℃±1℃培养24～72小时，观察结果。
二、实验结果与小结1、金黄色葡萄球菌在两种培养基上的菌落特征，见表1。实验结果表明两种培养基的菌落特征完全相同。
2、两种培养基的外观及物理特征比较，结果见表2。实验结果表明两培养基的外观及其物理特征完全一致，并且卵磷脂酶反应培养基平板的透明度优于卵黄高盐琼脂平板。
表1两种培养基的对比实验
表2 两种培养基平板的外观及物理性质的比较
注以“+”的多少，表示平板的透明程度3、上述结果表明卵磷脂酶反应培养基完全可以取代卵黄培养基；由于卵磷脂酶反应培养基平板的透明度优于卵黄琼脂平板；因此，有利于乳浊环的观察，其酶反应特征更加清晰。
上述结果表明用卵磷脂酶反应干燥培养基取代卵黄培养基，具有经济、简便、快速、准确的优点，便于推广应用。
权利要求
1.一种卵磷脂酶反应干燥培养基，其特征是它由下述重量百分含量的原料制成卵磷脂2-4％增溶助溶剂5-13％旦白胨10-20％牛肉膏 2-20％氯化钠13-47％葡萄糖 4-10％可溶性淀粉2-4％亚硫酸氢钠1-2％琼脂 0-30％。
2.如权利要求1所述的卵磷脂酶反应干燥培养基，其特征是所述的卵磷脂可用硝酸甘油脂及脂类其他化合物代替。
3.如权利要求1所述的卵磷脂酶反应干燥培养基，其特征是所述的增溶助溶剂可为烷基酚聚氧乙烯醚及其他非离子表面活性剂代替。
4.一种制备权利要求1所述的卵磷脂酶反应干燥培养基的方法，其特征是先将卵磷脂、增溶助溶剂用蒸馏水研磨均匀后，再加入旦白胨、牛肉膏、氯化钠、葡萄糖、可溶性淀粉、亚硫酸氢钠，搅拌使其充分溶解，然后加入琼脂搅拌均匀；将搅拌后的培养基在低温真空下干燥，再将其粉碎至100目即可。
全文摘要
本发明涉及一种卵磷脂酶反应干燥培养基是由下述重量百分含量的原料制成卵磷脂2-4％、增溶助溶剂5-13％、蛋白胨10-20％、牛肉膏2-20％、氯化钠13-47％、葡萄糖4-10％、可溶性淀粉2-4％、亚硫酸氢钠1-2％、琼脂0-30％；该培养基的制备方法是将上述各组份混合加水溶解后在低温真空下干燥，粉碎至100目即可；该培养基可替代卵黄培养基具卵磷脂酶反应功能、酶反应速度快、乳浊环清晰度高、可工业化生产、使用方便、成本低、实验结果误差小。
文档编号C12Q1/14GK1153824SQ95118979
公开日1997年7月9日 申请日期1995年12月6日 优先权日1995年12月6日
发明者宋京都, 张海平 申请人:宋京都, 张海平