一种蛋鸡用益生菌发酵中草药饲料添加剂的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明专利属于饲料生产加工领域，具体涉及一种蛋鸡用饲料添加剂的制备方 法，特别涉及一种蛋鸡用益生菌发酵中草药饲料添加剂的制备方法。
【背景技术】
[0002] 抗生素在畜禽生产过程中长期使用所带来的负面效应备受关注，开发绿色、安全、 高效的新型饲料添加剂来替代抗生素势在必行。中草药作为植物性资源，既具有药理作用， 又有营养功能，同时具有毒副作用小、无残留、无耐药性的优点，一直以来受到了畜牧业工 作者的青睐。
[0003] 中草药作为植物性资源，既具有药理作用，又有营养功能，同时具有毒副作用小、 无残留、无耐药性的优点，一直以来受到了畜牧业工作者的青睐。女贞子作为中草药的一 种，具有保肝护肝、增强免疫、抗菌抗病毒、抗氧化、降血糖血脂等功效。在蛋鸡的研究中表 明，添加女贞子粉有促进生产性能和提高免疫机能的作用。但是，目前来看要达到女贞子的 作用效果需要在日粮中添加不低于1.0%的量，这无形中增加了饲料成本和添加难度。因 此，通过一系列方式来提高女贞子中活性成分在饲料中的浓度是降低女贞子添加量的重要 措施。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种蛋鸡用益生菌发酵中草药饲料添加剂的制备方法，从而 提高女贞子中的活性成分在饲料添加剂中的有效浓度，进而在保证女贞子在促进蛋鸡生产 性能和提高免疫机能作用的同时，能够起到降低女贞子的添加量的作用，从而减少饲料的 成本与女贞子的添加难度。
[0005] 为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种蛋鸡用益生菌发酵中草 药饲料添加剂的制备方法，所用益生菌为乳酸菌和枯草芽孢杆菌，所用的中草药为女贞子， 包括如下步骤： (1) 益生菌的种子培养 将乳酸菌培养于MRS液体培养基上，培养至对数生长中后期，待检测活菌数不低于 I X 10s cfu/mL时，停止培养，备用； 将枯草芽孢杆菌培养于牛肉膏蛋白胨液体培养基中，培养至稳定生产期，待检测活菌 数不低于IX IO9 cfu/mL时，停止培养，备用； (2) 发酵用益生菌种子液的制备 a. 培养液制备 收取啤酒生产过程中产生的啤酒糖化液，按照IL啤酒糖化液中添加尿素2. 5g、葡萄糖 5. 0g、吐温SOmL的比例，向所收取的啤酒糖化液中添加尿素、葡萄糖与吐温，搅拌均匀即制 成培养液备用； b. 乳酸菌种子液制备 按照5%的接种比例将经步骤（I)培养后的乳酸菌接种于所制备的培养液中，调整pH为 6. 3~6. 5后，进行培养18~24h，以获取乳酸菌种子液； c.枯草芽孢杆菌种子液制备 按照5%的接种比例将经步骤（1)培养后的枯草芽孢杆菌接种于所制备的培养液中，调 整pH至7. 2~7. 5后，进行培养18~24h，以获取枯草芽孢杆菌种子液； (3) 制作发酵物料 将女贞子表面消毒后，制成女贞子粉，然后取80份女贞子粉、10份麸皮、5份玉米面、 4. 5份豆柏粉、0. 5份蔗糖混合均匀制成100份固体发酵物料，然后将所制得固体发酵物料 与灭菌蒸馏水混合，调整pH至7. 2,制得发酵物料； (4) 添加益生菌发酵 分两步先后向步骤（3)所制得的发酵物料中加入步骤（2)所制备的益生菌种子液，具 体的加入方法为：首先将枯草芽孢杆菌种子液按照5%的比例加入发酵物料中，调整pH为 7. 2~7. 5,然后在发酵罐中进行密封发酵；当发酵至5~6h时，再将乳酸菌种子液按照10%的 比例加入发酵罐中的发酵物料中，搅拌均匀，并再次调整pH至6. 3~6. 5,继续进行密封发 酵，整个发酵过程的时间为36~48h，发酵的温度为37. 0~37. 5 °C ; (5) 发酵后物料的处理 将步骤（4)发酵完成后所得的物料于65°C ~70°C温度下烘干，烘干后进行粉碎，过60 目筛，然后以500g为单位，用复合薄膜进行真空包装，即得到用于蛋鸡的发酵中草药饲料 添加剂。
[0006] 所述MRS液体培养基的制作方法为：取牛肉蛋白粉10g、牛肉浸膏10g、酵母浸膏 5g、葡萄糖20g、醋酸钠5g、柠檬酸二铵2g、吐温80 0.1 mU硫酸镁0. 58g、硫酸锰0. 28g、 蒸溜水1000 mL混合均匀，用高压灭菌锅在121°C灭菌20min-30min，然后调节pH至6. 3,即 可制得MRS液体培养基。
[0007] 所述的牛肉膏蛋白胨液体培养基的制作方法为：取牛肉膏5g、蛋白胨IOg与氯化 钠5g加入1000 mL蒸馏水中，搅拌均匀，然后调整pH至7. 2~7. 5,即可制得牛肉膏蛋白胨液 体培养基。
[0008] 本发明具有以下有益效果： 第一，本发明所述的方法提高了女贞子中的活性成分在饲料添加剂中的有效浓度，进 而在保证女贞子在促进蛋鸡生产性能和提高免疫机能作用的同时，能够起到降低女贞子的 添加量的作用，从而减少饲料的成本与女贞子的添加难度； 第二，本发明所采用益生菌进行中草药发酵，既提高了中草药的有效成分，又增加了添 加剂中益生菌的菌体蛋白及其有益代谢产物，如酶类等； 第三，在添加益生菌进行发酵时，采用分步进行，先添加枯草芽孢杆菌，发酵一段时间 后，再添加乳酸菌发酵，这样做的目的是在发酵前期物料中存在空气，而枯草芽孢杆菌是好 氧菌，这样有利于枯草芽孢杆菌的充分繁殖，随后进入厌氧环境，乳酸菌为厌氧菌，更有利 于乳酸菌的生长繁殖。
【具体实施方式】
[0009] 下面通过具体实施例以及试验例对本发明所述的方法作进一步的说明。
[0010] 实施例1 : 一种蛋鸡用益生菌发酵中草药饲料添加剂的制备方法，所用益生菌为乳酸菌和枯草芽 孢杆菌，所用的中草药为女贞子，包括如下步骤： 1、 益生菌的种子培养 将乳酸菌培养于MRS液体培养基上，培养至对数生长中后期，待检测活菌数不低于 IXlO8 cfu/mL时，停止培养，备用；将枯草芽孢杆菌培养于牛肉膏蛋白胨液体培养基中，培 养至稳定生产期，待检测活菌数不低于IX IO9 cfu/mL时，停止培养，备用； 其中，所述的MRS液体培养基的制作方法为：取牛肉蛋白粉10g、牛肉浸膏10g、酵母 浸膏5g、葡萄糖20g、醋酸钠5g、梓檬酸二铵2g、吐温80 0.1 mU硫酸镁0. 58g、硫酸猛0. 28g、蒸溜水1000 mL混合均勾，用高压灭菌锅在121°C灭菌20min-30min，然后调节pH至6. 5 即可； 所述的牛肉膏蛋白胨液体培养基的制作方法为：取牛肉膏5g、蛋白胨IOg与氯化钠5g 加入1000 mL蒸馏水中，搅拌均匀，然后调整pH至7. 2即可； 2、 发酵用益生菌种子液的制备 2. 1、培养液制备 收取啤酒生产过程中产生的啤酒糖化液，按照IL啤酒糖化液中添加尿素2. 5g、葡萄糖 5. 0g、吐温SOmL的比例，向所收取的啤酒糖化液中添加尿素、葡萄糖与吐温，搅拌均匀即制 成培养液备用； 2. 2、乳酸菌种子液制备 按照5%的接种比例将经步骤1培养后的乳酸菌接种于所制备的培养液中，调整pH为 6. 3后，进行培养18h，以获取乳酸菌种子液； 2、 3、枯草芽孢杆菌种子液制备 按照5%的接种比例将经步骤（1)培养后的枯草芽孢杆菌接种于所制备的培养液中，调 整pH至7. 2后，进行培养18h，以获取枯草芽孢杆菌种子液； 3、 制作发酵物料 将女贞子表面消毒后，制成女贞子粉，然后取80份女贞子粉、10份麸皮、5份玉米面、 4. 5份豆柏粉、0. 5份蔗糖混合均匀制成100份固体发酵物料，然后将所制得固体发酵物料 与灭菌蒸馏水混合，调整pH至7. 2,制得发酵物料； 4、 添加益生菌发酵 分两步先后向步骤3所制得的发酵物料中加入步骤2所制备的益生菌种子液，具体的 加入方法为：首先将枯草芽孢杆菌种子液按照5%的比例加入发酵物料中，调整pH为7. 2， 然后在发酵罐中进行密封发酵；当发酵至5~6h时，再将乳