预防鸡雁小纲动物中坏死性肠炎的组合物的制作方法
【专利说明】预防鸡雁小纲动物中坏死性肠炎的组合物 发明领域
[0001] 本发明涉及至少一种短链脂肪酸的甘油酯组合物用于预防和/或缓解鸡雁小纲动 物(gal loanserans)的胃肠道中的坏死性肠炎的用途。该甘油酯组合物包含至少75 %重量 的三丁酸甘油酯、低于25%重量的二丁酸甘油酯和低于8%重量的一丁酸甘油酯。本发明还 涉及该组合物用于调节鸡雁小纲动物的肠道菌群(gut flora)的用途。
[0002] 发明背景
[0003] 坏死性肠炎是侵害鸡雁小纲动物的急性感染。鸡雁小纲动物分成如下亚组:鸡形 目（陆禽），如鸡、火鸡、松鸡和雉;和雁形目（水禽），如鸭、鹅和天鹅。坏死性肠炎已经成为新 出现的问题，尤其是在家禽中，且特征在于肠粘膜的严重性坏死。临床发病通常极短且通常 征兆仅为突发的死亡率增加。然而，还可以观察到具有抑郁、竖起的羽毛和腹泻的禽类。肉 眼损伤主要见于小肠(空肠），其可以膨胀、脆弱且包含恶臭气味的棕色流体。
[0004] 病原体是革兰氏阳性专性厌氧菌产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens)。存 在两种主要的产气荚膜梭菌类型A和C，它们与鸡雁小纲动物的坏死性肠炎相关。由该细菌 产生的毒素导致小肠损害，而且导致肝损伤和死亡率。
[0005] 产气荚膜梭菌是在土壤、粉尘、粪便、饲料和所用的家禽垃圾中易于见到的几乎遍 在的细菌。它还是健康鸡雁小纲动物的肠的正常栖居生物。坏死性肠炎的发生取决于存在 的倾向因素，例如由球虫病原体导致的粘膜损伤和包含高蛋白质水平的饲料。
[0006] 因为产气荚膜梭菌几乎遍在，所以重要的是预防球虫病和可以促进其生长的肠微 生物区系的改变。这在早期通过常规地向饲料中添加抗生素实现。然而，由于欧盟 (European Union)于2006年禁止用抗生素促进生长，所以坏死性肠炎已经变成例如家禽中 的新出现的疾病。对于抵抗这种疾病或机能障碍的可替代选择方法存在巨大需求。
[0007]通过抗生素抵抗有害菌如产气荚膜梭菌的可替代选择方法在于尝试平衡肠道菌 群或使其正常化。肠道菌群由生活在消化道中的复杂的微生物种类组成。在本文的上下文 中，肠与肠道和区系与微生物区系和微生物菌群是同义词。微生物执行众多的有用的功能， 例如发酵无用的能量底物、训练免疫系统、防止有害致病菌的生长、调节肠发育，产生宿主 用维生素和产生指导宿主储存脂肪的激素。然而，在一些条件下，认为一些种类能够通过产 生宿主感染或增加其癌症风险而导致疾病或机能障碍。
[0008] 本发明公开了甘油酯组合物用于预防和/或缓解鸡雁小纲动物如鸡和火鸡的胃肠 道中的坏死性肠炎的用途。还公开了该组合物用于调节鸡雁小纲动物的肠道菌群的用途。 本发明组合物的应用平衡了鸡雁小纲动物中的肠道菌群或使其正常化，按照这种方式，致 病菌种类的生长被抑制，且如坏死性肠炎这样的疾病得以预防。目前认为在这种作用后面 的一种机制在于有利于有益细菌的生长，且这可以通过竞争结肠上皮的营养和附着位点预 防致病菌种类的生长。
[0009] 长期以来已知丁酸对家禽和其它动物的肠健康的积极作用。还探究了丁酸的不同 分配形式，其中有以甘油酯形式的丁酸的分配。今年来，大量关注涉及作为饲料添加剂的一 丁酸甘油酯在促进动物肠健康中的用途。
[0010] 目前令人惊奇地发现主要包含三丁酸甘油酯的甘油酯组合物的应用与给予动物 一丁酸甘油酯形式的丁酸相比是预防鸡雁小纲动物例如肉鸡的坏死性肠炎的更有效方式。
[0011] 发明详述
[0012] 本发明涉及包含短链脂肪酸的甘油酯组合物的用途，已经证实其为预防鸡雁小纲 动物例如肉鸡的坏死性肠炎的有效方式。该甘油酯组合物包含至少75%重量的三丁酸甘油 酯、低于25%重量的二丁酸甘油酯和低于8%重量的一丁酸甘油酯。已知丁酸对鸡雁小纲动 物的肠健康具有积极作用。本发明显示分配主要作为三丁酸甘油酯的丁酸是预防鸡雁小纲 动物例如肉鸡的坏死性肠炎的有效方式，且证实它比分配主要为一丁酸甘油酯形式的丁酸 更有效。
[0013] 根据本发明的一个实施方案，所述甘油酯组合物包含至少80%重量的三丁酸甘油 酯、低于20%重量的二丁酸甘油酯和低于5%重量的一丁酸甘油酯。
[0014] 根据本发明的一个优选的实施方案，所述甘油酯组合物包含至少85%重量的三丁 酸甘油酯、低于15%重量的二丁酸甘油酯和低于4%重量的一丁酸甘油酯。
[0015] 根据本发明的一个更优选的实施方案，所述甘油酯组合物包含至少90%重量的三 丁酸甘油酯、低于10%重量的二丁酸甘油酯和低于2.5%重量的一丁酸甘油酯。
[0016] 游离丁酸具有非常令人不愉快的气味，其导致处理问题。这些问题可以通过以甘 油酯形式分配丁酸来避免。根据本发明的一个实施方案，甘油酯组合物中游离丁酸的量低 于1%，优选低于0.5%，且最优选低于0.2%重量。控制游离丁酸的量还确保甘油酯组合物 中的pH保持在这样的水平，其中甘油酯不会水解成甘油和游离酸，由此产物保持稳定。
[0017] 根据本发明的一个实施方案，所述甘油酯组合物被吸附在惰性载体例如二氧化硅 载体上。这使得该组合物作为干燥产品被分配。这类二氧化硅载体优选包含具有20-70μπι平 均粒度的二氧化硅颗粒。根据本发明的一个实施方案，所述甘油酯组合物以50-80%甘油酯 与20-50 %二氧化硅颗粒的重量比被吸附在二氧化硅颗粒上。
[0018] 可以将本发明的甘油酯组合物添加到任何用于鸡雁小纲动物的商购饲料中。可以 将该甘油酯组合物直接掺入到商购饲料中或作为补充加入商购饲料。
[0019] 根据本发明的一个实施方案，饲喂给鸡雁小纲动物的甘油酯组合物的量为0.05-1.5%重量，优选0.1-1.0%重量的鸡雁小纲动物每日饲料配给量。
[0020] 根据本发明的另一个实施方案，将所述甘油酯组合物的用量在5-10天的时间间隔 施用并且在1-5周期限内减少。
[0021] 根据本发明的另一个实施方案，所述用量的减少为在上述间隔期间给予的用量的 20-50% 〇
[0022]实施方案的实施例
[0023] 丁酸甘油酯在控制肉鸡中产气荚膜梭菌-诱发的坏死性肠炎中的效能的体内试 验。
[0024] 菌株和疫苗
[0025] 用于体内试验的攻击性菌株产气荚膜梭菌菌株56分离自存在体重增加问题的群 居的具有坏死性损伤的肉鸡的肠，并且已经在体内试验中证实为早期有高度毒力的。将该 菌株分类为Α型菌株（netB阳性，β-2和肠毒素阴性）并且在体外产生中等量的α毒素 (Gholamiandehkordi等人，2006)。
[0026] 为了接种，使该菌株在脑心浸液肉汤（BHI，0xoid，Basingstoke，England)中生长 Ml 〇
[0027] 包含活的减毒堆形艾美耳球虫(Eimeria(E. )acervulina) (2个品系）、布氏艾美耳 球虫(E.brunetti)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、早熟艾美 耳球虫(E.praecox)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)和柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)的卵囊的 10倍剂量的抗球虫疫苗ParaCOX? _8(Schering-Plough Animal Health，Brussels， Belgium)用于本研究。
[0028] 在饮用水中给予Nobilis Gumboro D 78疫苗（Schering-Plough Animal Health， Brussels，Belgium)〇
[0029] 动物和居室
[0030] 在本实验中，使用114只混合性别的肉鸡。它们在1日龄时得自商业孵卵所。在试验 前，用 Me ta tec ty 1 ? (Cl im ' oMediC)和商品抗球虫消毒剂（B:i-00-Cy S tBi01 ink Ltd，York，UK)给全部房间去除污染。将禽类分入4个l，5m2的笼子中，在木肩上。随意给予它 们饮用水和饲料。施加23h/lh光照黑暗程序。
[0031] 实验研