专利名称：黄芩茎叶总黄酮及其野黄芩甙作为制备抗痴呆病药的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于药物开发技术领域，尤其涉及黄芩茎叶总黄酮及其野黄芩甙的医药新用途。
背景技术：
痴呆病属多病因参与的神经退行性疾病。目前，它已成为老年人群的常见病和多发病，是仅次于心、脑血管及肿瘤等的重大致死性疾病。八十年代以来，国内外出现一系列治疗痴呆的药物，其中尤以胆碱酯酶抑制剂(ChEI)Tacrine、E2020等合成药为代表，然而由于它们或因生物利用度低或毒副作用大而限制使用(Giacobini E，Cuadra G.Second and third generationcholinesterase inhibitorsfrom preclinical studies to clinical efficacy.InGiacobiniE，Becker R，editors.Alzheimer DiseaseTherapeutic Strategies.BostonBirkhauser 1994155～171)。面对老年性痴呆发病人数的急剧增加，研制、开发高效、低毒的抗痴呆药物是国际医药界、制药业关注的热点。
本申请通过多年研究，发现中草药黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)其茎叶总黄酮具有明显的抗痴呆作用。黄芩传统以根部入药，而产量为根部数倍的茎叶则长期废弃不用。据中国专利CN1260189A公开的“黄芩茎叶在制药中的应用”记载1991年河北省《科学技术研究成果公报》和第101期《中国技术成果大全》收录的关于“黄芩茎叶总黄酮的植化和药理研究”分别公开了黄芩茎叶的药用价值，证实黄芩茎叶的主要成分为黄酮类化合物，含量约5％；确定黄芩茎叶总黄酮的主要成分为野黄芩甙(Scutellarin)，含量约16％，并且与黄芩根所含黄酮(主要成分为黄芩甙，Baicalin)有明显差异；发现黄芩茎叶总黄酮具有降血脂、扩张心脑血管、增加心脑血管流量、抗心律失常及抗凝血、降血压等广泛的防治心脑血管疾病的作用。但是，关于黄芩茎叶有效成分具有镇痛、抗炎、解热之药理作用的研究尚未见有公开。因此，该项专利申请公开了黄芩茎叶或其总黄酮作为制取具有镇痛、抗炎、解热功能药物方面的应用技术。由此可见，关于黄芩茎叶在制取抗痴呆病药物中的应用，现有技术尚未见有公开。
发明内容
本发明的目的是针对现有抗痴呆病药物的缺陷和黄芩茎叶的开发潜力，提供一种以黄芩茎叶为原料，制取高效、低毒的抗痴呆病药物的新途径。
本发明的技术解决方案是黄芩茎叶总黄酮作为制备抗痴呆病药的应用，其特征是在黄芩茎叶提取物中，其总黄酮含量不小于50％，用于制备抗痴呆病药物。
黄芩茎叶野黄芩甙作为制备抗痴呆病药的应用，其特征是在黄芩茎叶提取物中，其野黄芩甙含量不小于90％，用于制备抗痴呆病药物。
本发明根据黄芩茎叶总黄酮特殊的多羟基结构具有较强的还原性能够对抗自由基的特点，预测通过神经保护测试试验来验证其是否具有抗痴呆作用，因而做了一系列科学试验，经过多年实验研究，取得如下成果1、药物抗缺氧作用①黄芩茎叶总黄酮抗小鼠缺氧作用，50、100和200mg/kg的总黄酮药物连续灌胃小鼠14天后，腹腔注射KCN 10mg/kg或200mg/kg NaNO2或节扎带迷走神经的双侧颈总动脉或断头，结果发现总黄酮明显延长上述条件下小鼠的存活时间，表明黄芩茎叶总黄酮具有明显对抗小鼠缺氧作用。
②野黄芩甙抗小鼠缺氧作用，37.5、75、150mg/kg的野黄芩甙皮下注射小鼠7天后，腹腔注射KCN 10mg/kg，结果发现野黄芩甙明显延长KCN引起小鼠死亡时间，表明野黄芩甙具有明显抗小鼠缺氧作用。
2、药物提高正常小鼠记忆①黄芩茎叶总黄酮提高小鼠记忆，50、100、200mg/kg的药物和脑复康(200mg/kg)连续灌胃小鼠7天后，进行水迷宫测试，发现药物三剂量组小鼠到达终点平台的潜伏期和进入盲端的次数明显降低，表明药物具有提高记忆作用，脑复康作用则不明显。
②37.5、75、150mg/kg的野黄芩甙皮下注射小鼠7天后，进行水迷宫测试，发现三剂量药物组小鼠到达终点平台的潜伏期和进入盲端的次数明显降低，表明药物具有提高记忆作用。
3、黄芩茎叶总黄酮药物改善戊巴比妥钠产生小鼠记忆获得障碍和亚硝酸钠引起小鼠记忆保持障碍50、100、200mg/kg的黄芩茎叶总黄酮药物连续灌胃小鼠7天，从第8天开始，在水迷宫测试60min前灌喂各药，30min前空腹注射戊巴比妥钠15mg/kg，水迷宫测试结果药物组小鼠到达终点平台的潜伏期和进入盲端的次数明显比模型组降低，表明药物具有改善戊巴比妥钠产生的小鼠记忆获得障碍的作用。同上药物50，100和200mg/kg灌胃小鼠7天(日一次)，第8次给药后1h，进行水迷宫训练(继续给药)，每天训练两次，当所有小鼠到达平台的潜伏期＜20s，进入盲端的次数＜2时，即小鼠训练达标方可进行记忆巩固障碍实验。达标的小鼠在训练后，立即腹腔注射120mg/kg NaNO2，24h后，进行水迷宫测试，结果发现药物组小鼠到达终点潜伏期时间和进入盲端的次数明显比模型组降低，表明药物具有改善亚硝酸钠引起小鼠记忆保持障碍的作用。
4、黄芩茎叶总黄酮药物对抗小鼠自然衰老、d-半乳糖引起衰老的作用老年小鼠记忆减退、免疫力降低、神经细胞病理改变、自由基系统异常变化。老年小鼠灌胃药50、100和200mg/kg 21天后，进行水迷宫测试，发现药物组小鼠到达终点平台潜伏期和进入盲端次数比老年模型组小鼠显著降低；与模型组小鼠比较，药物组小鼠皮层、海马和血清中MDA降低，SOD活性升高；药物组小鼠皮层、海马神经锥体细胞饱满、呈多样状态、神经纤维变长、核居中浅染等；药物组小鼠胸腺比老年小鼠胸腺重量增加。表明药物具有对抗自然衰老引起的一系列异常变化。
50、100、200mg/kg药物灌胃小鼠，同时腹腔注射D-半乳糖120mg/kg42天，从43天开始进行水迷宫测试(继续给D-半乳糖和药物)，连续5天，同上作皮层细胞观察、脾指数测定，结果发现药物组小鼠到达终点潜伏期和进入盲端次数明显比模型组降低；皮层锥体细胞饱满呈多种状态、神经纤维变长、核居中浅染等；脾指数增加。表明药物具有对抗D-半乳糖引起衰老的作用。
与现有技术相比，黄芩茎叶总黄酮作为治疗痴呆病的药物，不仅药理作用突出，临床疗效肯定，安全低毒，而且资源丰富，成本低廉，整体效果预计超过目前已有的抗老年性痴呆的药物。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作详细说明。
实施例1，黄芩茎叶总黄酮药的制备取洁净干燥黄芩茎叶，10倍水煮1hr，过滤，药渣8倍水再煮1hr，过滤，合并两次滤液，适当浓缩后离心，上清液调PH2左右，大孔树脂吸附，水洗数次除杂质，装层析柱，高于85％乙醇洗脱，洗脱液减压回收乙醇，干燥即得黄芩茎叶总黄酮，其中总黄酮含量不小于50％。然后采用常规技术制成片剂、胶囊、滴丸、口服液以及注射剂等。
实施例2，黄芩茎叶野黄芩甙的制备将总黄酮用甲醇进行多次重结晶，得野黄芩甙，其野黄芩甙含量不小于90％。
采用上述方案制备的黄芩茎叶总黄酮及野黄芩甙药物用于治疗痴呆病。
权利要求
1.黄芩茎叶总黄酮作为制备抗痴呆病药的应用，其特征是在黄芩茎叶提取物中，其总黄酮含量不小于50％，用于制备抗痴呆病药物。
2.黄芩茎叶野黄芩甙作为制备抗痴呆病药的应用，其特征是在黄芩茎叶提取物中，其野黄芩甙含量不小于90％，用于制备抗痴呆病药物。
全文摘要
本发明公开了黄芩茎叶总黄酮及其野黄芩甙的医药新用途,即用黄芩茎叶制成总黄酮含量不小于50%的提取物作为治疗痴呆病的药物,以及用黄芩茎叶制成野黄芩甙含量不小于98%的提取物作为治疗痴呆病的药物,两种药物其药剂形式均可以是片剂、胶囊、滴丸、口服液以及注射剂等。本发明利用黄芩茎叶总黄酮特殊的多羟基结构具有较强的还原性能够对抗自由基的特点,通过多年动物实验研究,取得明显医疗效果,证明其具有可靠的抗痴呆作用。本发明不仅病理作用突出,临床疗效肯定,安全低毒,而且资源丰富,成本低廉,整体效果预计超过目前已有的抗老年性痴呆药物。
文档编号A61K31/7048GK1383818SQ0210223
公开日2002年12月11日 申请日期2002年1月5日 优先权日2002年1月5日
发明者商亚珍, 康少文, 陈四平, 周晓霞 申请人:承德医学院中药研究所