专利名称：一种治疗急性咽炎、牙龈炎的中药组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物，特别涉及用于治疗急性咽炎、牙龈炎的中药组合物，同时涉及该组合物的制备方法和质量控制方法。
背景技术：
急性咽炎、牙龈炎都属于临床中的常见病、多发病，其中又以肺胃实热及风热之证最为常见。但临床上两证常相互兼挟，其病之初起，多因外感风热毒邪，循经上逆犯肺；或饮食不当，嗜烟好酒，熏灼肺胃；或嗜食辛辣炙博之品，化热化火；或肺胃素有积热，复因感受外邪，风火相煽而致。火为阳邪，其性上炎，故而热邪最易循经上扰。咽喉为肺之门户，热邪壅肺则呕喉疼痛或见红肿之象，胃络于龈，冒火循经上熏，热盛肉腐，气血壅滞，则牙龈红肿、疼痛；肺胃热毒，邪热壅盛传里，火热蒸腾，则疼痛可放射及耳根、颌下腮颊；肺胃热毒炽盛，迫血妄行，则可出观牙龈出血；风热犯表，热郁肌腠，则见身热，或微恶寒，大便干，小便黄赤，舌红，苔薄白或黄，脉浮滑数等也是肺胃实热兼挟风热之征。
发明内容
本发明的一个目的在于公开一种新的治疗急性咽炎、牙龈炎的中药组合物；本发明的另一个目的在于公开制备一种新的治疗急性咽炎、牙龈炎的中药组合物的方法；本发明目的还在于公开一种新的中药组合物的质量控制方法。
本发明药物组合物的原料药组成及配比如下(按重量份)大黄160-240重量份 熊胆粉5-18重量份 黄芩160-240重量份桔梗160-240重量份 白芷160-240重量份 鱼腥草350-450重量份薄荷60-140重量份。
所述大黄优选酒制大黄。
本发明上述组方药物，可加入赋型剂，按照常规的制剂工艺制备成常用的药物剂型，例如，片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、口服液体制剂、咀嚼剂、气雾剂、软胶囊、栓剂、滴丸等。
本药物组合物胶囊剂的制备方法以上七味，酒制大黄以60-85％乙醇适量浸润，60-80℃干燥，粉碎成细粉，熊胆粉粉碎成细粉，过筛备用；白芷、鱼腥草、薄荷加9-11倍水提取挥发油4-6小时，收集挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再用2-4倍量水洗涤1-3次，滤过，合并水溶液，备用；另取β-环糊精10.5重量份，加9-11倍水溶解，缓慢滴加上述挥发油的乙醇溶液，挥发油∶乙醇＝1-2∶1-2，在20-40KHz的超声波下超声1-2小时，冷藏过夜，抽滤，室温减压下干燥，过70-90目筛，备用；其余二味将黄芩切成小段，与桔梗加6-8倍水煎煮1-3次，每次1-2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述收集的水溶液合并，浓缩至70-85℃相对密度为1.10-1.15，喷雾干燥，得干浸膏粉；取干浸膏粉与酒制大黄粉，熊胆粉，以及挥发油β-环糊精包含物及0-20重量份淀粉，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。
本组合物制成药剂的质量控制方法包括鉴别和/或含量测定。
鉴别方法包括下列方法中的一种和/或几种a.取本组合物制剂1g，加甲醇20ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；取大黄对照药材粉末0.5g，同法操作制成对照药材溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以6-8∶2-4∶0.1-0.2苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b.取本组合物制剂2.5g加甲醇超声1-3次，每次30ml，10-20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加8-12％氢氧化钠溶液20ml超声使溶解，95-105℃加热水解1-3小时，放冷，用盐酸调pH值至2-3，用醋酸乙酌萃取2-4次，每次15ml，合并醋酸乙酯液，用水洗涤2-4次，每次40ml，醋酸乙酯液水浴蒸干，残渣用甲醇1ml使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液；另取鹅去氧胆酸及熊去氧胆酸对照品，分别加甲醇制成每1ml各含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以9-11∶4-6∶4-6∶2-4∶1-2异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以15-25％硫酸溶液，于100-110℃烘4-7分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c.取本组合物制剂4g，加甲醇40ml，超声15-25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调pH至3-4，加醋酸乙酯提取1-3次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一以1％醋酸钠制备的0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以4-6∶2-4∶1-2∶1-2醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；d.取本组合物制剂4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法(中国药典2000年版一部附录X D)连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流3-5小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；另取甲基正壬酮对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含10μg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以18-20∶1-2苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；e.取本组合物制剂4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法(中国药典2000年版一部附录X D)连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流3-5小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；取薄荷脑对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以7-10∶1-2正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-3∶7-9香草醛硫酸试液-乙醇的混合溶液，在95-110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定方法包括下列方法中的一种和/或几种a.大黄素、大黄酚照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；80-90∶10-20甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相；检测波长为254nm；理论板数按大黄素峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备，精密称取大黄素、大黄酚对照品各10mg，分别置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀作为大黄素，大黄酚对照品贮备液；分别精密量取大黄素对照品贮备液1ml、大黄酚对照品贮备液2ml，分别置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得大黄素每1ml中含4μg、大黄酚每1ml中含8μg；供试品溶液的制备，取本组合物制剂0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，于20-40KHz的超声波下超声处理1-2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补充减失的重量，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本组合物制剂每单位量含大黄以大黄素(C15H10O5)和大黄酚(C15H10O4)的总量计，不得少于6.5-8mg；b.黄芩苷照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；43-53∶50-58∶0.1-0.3甲醇-水-磷酸为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；对照品溶液的制备，精密称取在55-65℃减压干燥3-5小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含20μg溶液，即得；供试品溶液的制备，取本组合物制剂28.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，加45-55％乙醇适量，超声处理10-25分钟，放冷，加45-55％乙醇稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测淀法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本组合物制剂每单位量含黄芩按黄芩苷(C12H18O11)计，不得少于55-65mg。所述每单位量是指相当原药材13.1g的成品药剂量。
上述本组合物制剂进行鉴别、含量测定时所称取的重量为胶囊剂除去胶囊壳，片剂则去除包衣，液体制剂干燥成粉后的重量。
本发明组合物制剂具有泻火解毒，疏风散热功效，对急性咽炎，牙龈炎(肺胃实热兼挟风热)所致咽痛、咽干灼热或牙龈肿痛、口渴、身热或微恶寒、大便干、小便黄等症有很很好的效果，且服用安全。
下面实验例用于进一步说明本发明。下述实验例所用本发明组合物制剂为比拜克药粉。
实验例1抗细菌作用1体外抗菌试验1.1实验材料1.1.1药物(1)比拜克药粉由四川金辉药业有限公司提供，棕色粉末，批号990222，每克比拜克药粉相当于原生药2.789克。试验时称取20克比拜克药粉，加至融化的50℃m-H琼脂培养基66.8ml混匀后，即成1000mg/ml浓度，再取出40ml该药液用于试验。即从40ml中吸出20ml含药培养基倾倒平皿，余下的20ml含药培养基中再添加20ml无药培养基稀释，混匀后再吸出20ml倾倒平皿，依次类推，即以此二倍稀释法制备含有比拜克药粉终浓度(以生药量计)为1000mg/ml、500、250、125、62.5、31.2、15.6、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.06、0.03mg/ml的一系列合药平皿待用。
(2)注射用头孢哌酮钠规格1.0g/瓶，含量88％，批号65835061。辉瑞制药有限公司，中国·大连。试验时用无菌水溶解配制，终浓度为128、64、32、16、8、4，2、1、0.5、0.25、0.125、0.06、0.03、0.015、0.008μg/ml系列含药平皿待用。
(3)替硝唑注射液规格0.5g/250ml，由四川奇力制药有限公司生产，批号970417。配制成终浓度为128、64、32、16.8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.06、0.03、0.015、0.008、0.004μg/ml的系列含药琼脂平皿待用。
1.1.2细菌(1)临床分离菌株试验所用菌株均为1998.1-1999.4从成都华西医科大学附一院、附二院收集的临床致病菌，并经常规检验方法重新鉴定。
金黄色葡萄球菌26株，凝固酶阴性葡萄球菌2株(模仿葡萄球菌1株、玉米葡萄球菌1株)、表皮葡萄球菌22株、绿脓杆菌10株、克氏肺炎杆菌10株、变形杆菌10株(奇异变形杆菌4株、普通变形杆菌6株)、大肠杆菌6株、不动杆菌8株(琼氏不动杆菌3株、落菲不动杆菌5株)、厌氧菌5株(脆弱拟杆菌3株、丙酸杆菌2株)。
(2)标准质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠杆菌ATCC25922、绿脓杆菌NCTC10662为四川抗菌素工业研究所保存菌株。
1.1.3培养基(1)M-H培养基水解酪蛋白17.5g、牛肉粉5g、可溶性淀粉1.5g，加蒸馏水1000ml，pH7.2。固体培养基中加15g琼脂粉。用于革兰氏阳性、阴性需氧菌。
(2)厌氧菌培养基市售厌氧菌专用培养基。上海生物制品研究所生产，批号980501，用于厌氧菌。
1.2实验方法采用琼脂二倍稀释法测定比拜克药粉的最低抑菌浓度。用多点接种仪将细菌接种于含不同药物浓度的琼脂平皿表面上，每点含菌量约为105CFU/ml，37℃孵育18-20小时(厌氧菌置入37℃厌氧培养箱(浙江义乌冷冻机总厂制造)培养48小时)观察结果，以无细菌生长平皿培养基中所合药物的最低浓度为药物对该菌的最低抑菌浓度(MIC值)。
1.3实验结果实验结果见表1、表2。
1.4结论由表1中可见，比拜克药粉对所试革兰氏阳性、阴性细菌均有一定的抑菌活力。比拜克药粉对金葡球菌的MIC范围为2-125mg/ml，对表葡球菌的MIC值范围在4-500mg/ml；比拜克药粉对绿脓杆菌的抑苗活力较对金葡球菌、表葡球菌强，MIC值范围在0.06-62.5mg/ml，对克氏肺炎杆菌的MIC位范围在0.06-62.5mg/ml，对变形杆菌和不动杆菌的抑菌活力亦强，共MIC值均为0.06mg/ml-0.25mg/ml。比拜克药粉对所试厌氧菌也具有一定抑苗活力，MIC为15.6-62.5mg/ml，见表2。
表1 比拜克药粉体外抗菌活性细菌(株数) 比拜克(mg/ml) 头孢哌酮(μg/ml)金黄色葡萄球菌(26)MICRange2-125 0.06->128MIC5015.6 32MIC9062.5 64表葡菌(22)MICRange4-500 0.5-64MIC5015.6 4MIC9012532凝固酶阴性葡萄球菌(2) MICRange15.6 32(玉米葡萄球菌1株)(模仿葡球菌1株)绿脓杆菌(10) MICRange0.06-62.5 0.5-4MIC500.06 4MIC9015.6 4克氏肺炎杆菌(10) MICRange0.06-62.5 0.06->128MIC5062.5 0.5MIC9062.5 128变形杆菌属(10)MICRange0.25 0.125-4MIC500.06 0.5MIC900.06 1不动杆菌(10) MICRange0.06 0.06-16MIC500.06 0.06MIC900.06 8大肠杆菌(5) MICRange15.6-62.5 0.5-4MIC5031.2 1MIC9062.5 4MTC质控菌株比拜克(mg/ml) 头孢哌酮(μg/ml)大肠杆菌ATCC2592215.6 0.25绿脓杆菌NCTC106620.06 0.5金葡球菌ATCC2592315.6 32
表2 比拜克药粉对厌氧菌的抗菌作用MTC细菌比拜克(生药mg/ml)替硝唑(μg/ml)脆弱拟杆菌BfATCC27285 31.2 0.25脆弱拟杆菌Bf961 15.6 0.125脆弱拟杆菌Bf965 15.6 0.06丙酸杆菌62.5 0.5颗粒丙酸杆菌62.5 22体内保护试验2.1实验材料1、实验动物选用健康昆明种小鼠，体重18-22克，雌雄各半，由四川抗菌素工业研究所动物繁殖室提供。动物合格证号川实动管质第85号。
2、实验药品比拜克药粉，由四川金辉药业有限公司提供，棕色粉末，批号990222，每克比拜充药粉相当于原生药2.789克。
氟哌酸胶囊浙江医药股份有限公司仙居制药厂生产，批号981104规格0.1g/粒。
3、实验菌种用于感染动物的细菌为金黄色葡萄球菌991915、大肠杆菌9912，系1999年从成都地区收集的临床分离致病菌。
2.2实验方法1、试验菌液的制备将试验菌株接种于MH子肉汤中，37℃培养18小时，用5％灭菌干酵母液适当稀释备用。
2、最小致死菌量(MLD)的测定取健康昆明种小鼠，体重18-22克，随机分组，每组10只小鼠，雌雄各半，吸取上述不同稀释度的菌液分别腹腔注射入小鼠体内，每鼠0.5ml，感染后连续观察7天，并记录小鼠死亡数，以引起小鼠100％死亡的最低菌量作为最小致死菌量(MLD)。用该菌量作为体内保护试验的感染菌量。
3、药液的配制试验用药均用0.5％CMC及生理盐水配制，比拜克药粉配制成浓度为235.8mg/ml、15.2mg/ml、78.6mg/ml、39.3mg/ml、19.65mg/ml的药液(以生药量计)、氟哌酸的浓度为2.80mg/ml、2.24mg/ml、1.8mg/ml、1.44mg/ml、1.15mg/ml、0.92mg/ml、0.74mg/ml。
4、感染及治疗实验将实验动物按性别、体重随机均匀分组，雌雄各半，每组10只小鼠，各组分别给药剂量为5895mg/kg、3930mg/kg、1965mg/kg、983mg/kg、491mg/kg(以生药量计，分别为临床成人日用量的30、20、10、5、2.5倍。临床日用量196.5mg(生药)/kg)，阳性对照药氟哌酸胶囊的给药剂量为70mg/kg、56mg/kg、45mg/kg、36mg/kg、28.8mg/kg、23.0mg/kg、18.5mg/kg。
小鼠灌胃比拜克药粉，每日一次，连续给药四天，每只小鼠0.5ml/次20g，于第五天给药后各组小鼠腹腔感染受试菌液，每鼠感染菌量为0.5ml(1MLD)。氟哌酸胶囊于感染菌液后即刻及4小时后各灌胃给药一次，同时设感染对照组，记录感染后七天内小鼠死亡数，根据感染后七天动物存活数计算其半数有效剂量(ED50)及其95％可信限。
5、实验数据处理比拜克药粉与对照药氟哌酸胶囊，对金黄色葡萄球菌991915、大肠杆菌9912感染小鼠体内保护作用的半数有效剂量ED50其95％可信限均按Bliss法运用中国医学科学院编制的程序软件，使用计算机进行计算和统计学处理。
2.3实验结果比拜克药粉、氟哌酸胶囊灌胃给药对小鼠体内感染的保护作用结果见表3、表4，比拜克药粉、氟哌酸胶囊分别灌胃给药对金黄色葡萄球菌991915感染小鼠的ED50。值分别为2027mg/kg和28.67mg/kg，对大肠杆菌9912感染小鼠的ED50分别为4162mg/kg和45.87mg/kg。
2.4结论从以上的实验结果可看出，比拜克药粉也呈现出一定的体内抗菌作用，对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌感染小鼠的ED50。分别为2027mg{生药}/kg和4162mg(生药)/kg。
表3 比拜克药粉和氟哌酸胶囊对小鼠体内感染的保护作用(金葡球菌)感染菌株(菌株 死亡率(只)号) 给药剂量死亡率 ED50及95％可信限药物(致毒菌量) (mg/kg)动物数(只) ％ (mg/kg)(CFU/ml)金黄色葡萄球菌 比拜克药 58591/10 10No.991915 粉(按生 39304/10 40(5.2×107) 药量计19655/10 50算) 983 7/10 70 2027491 9/10 90(1208-3466)45.00 1/10 1036.00 3/10 30氟哌酸28.80 5/10 50胶囊23.07/10 70 28.6718.59/10 90(24.22-33.97)对照组----10/10100表4 比拜克药粉和氟哌酸胶囊对小鼠体内感染的保护作用(大肠杆菌)感染菌株(菌株 死亡率(只)号) 给药剂量 死亡率 ED50及95％可信限药物(致毒菌量)(mg/kg) 动物数(只)％(mg/kg)(CFU/ml)大肠杆菌 比拜克5859 3/1030No.9912 药粉(按 3930 6/1060(2.2×104) 生药量1965 8/1080计算) 9839/1090 416249110/10 100 (2782-9010)70.00 1/101056.00 3/1030氟哌酸45.00 6/1060胶囊36.00 7/1070 45.8728.80 9/1090 (38.94-54.61)对照组 ----10/10 100
实验例2抗病毒作用实验材料1、比拜克药粉 棕色粉末，由四川金辉药业有限公司提供，批号990222，1g粉末相当原生药2.789g。
2、阳性对照药 病毒唑(三氮唑核苷)注射液，规格100mg/ml，批号980605，宜昌市三峡制药厂生产。
3、病毒株 腺病毒(AdV)3型、7型，呼吸道合胞病毒(Rsv)均从首都儿科研究所引进，四川省人民医院病毒室传代培养，实验前分别测定Rsv、Adv3、7型TCID50。
4、细胞株 HeLa和Hep-2细胞分别由成都生物制品研究所和四川省卫生防疫站提供，四川省人民医院病毒室复苏传代，生长液为10％小牛血清Eagles液。
2实验方法1、细胞毒性试验用Hanks液将受试药和阳性对照药(病毒唑)从1∶10-1∶160作倍比稀释(受试药比拜克药粉浓度分别为10、5、2，5、1.25、0.625mg/ml，对照药病毒唑浓度分别为1、0.5、0.25、0.125、0.0625mg/ml)。取比拜克药粉和病毒唑1∶10-1∶160药液，分别接种子HeLa细胞和Hep-2细胞管各2支，待细胞吸附1小时后，分别于各细胞管加入2％小牛血清Eagles维持液，置37℃恒温箱培养，逐日观察细胞毒性反应，同时设细胞对照。
2、抗病毒试验取比拜克药粉和病毒唑各1∶10-1∶80药液，分别与100TCID50Rsv和Adv3、7型等量混合，置室温直接作用1小时后，分别取各混合液接种HeLa细胞和Hep-2细胞管各2支，待细胞吸附1小时后，加2％小牛血清Eagles维持液(同步设各病毒对照、细胞对照、空白对照)置37℃恒温箱培养。抗Rsv细胞管37℃培养24小时后，移放35℃旋转培养箱培养(10-12转/小时)，逐日观察抗Rsv、抗Adv3、7型细胞病变。当病毒对照出现3+(+++)，细胞对照为(-)时，可终止试验。当试验细胞管出现2+(++)病变时，可判断为药物对该病毒无抑制作用。
实验结果1、细胞毒性试验结果受试药比拜克药粉1∶10-1∶160药液对Hela细胞无任何毒性反应。除1∶10药液可致部分Hep-2细胞圆缩外，1∶20-1∶160药液对Hep-2细胞无任何毒性反应。阳性对照药(病毒唑)1∶10-1∶160药液及空白对照(Hanks液代替药物)对HeLa和Hep-2细胞均无毒性。见表5。
2、抗病毒结果比拜克药粉1∶10药液可抑制Rsv细胞内病变，该浓度药液中极少部分细胞出现圆缩是为药物毒性所致，1∶40药液可抑制Adv3型、1∶10药液可抑制Adv7型细胞内病变。1∶20-1∶80药液对Rsv、1∶80对Adv3型、1∶20-1∶80药液对Adv7型均不能抑制细胞病变。
病变唑1∶40药液可抑制Rsv细胞内病变，1∶10药液可抑制Adv3型细胞内病变，1∶10-1∶80药液不能抑制Adv7型细胞内病变。空白对照均不能抑制细胞病变。见表6。
表5 细胞毒性试验结果药物浓度药物 细胞 细胞对照1∶101∶201∶401∶801∶160比拜克HeLa ----- -Hep-2 +---- -病毒唑HeLa ----- -Hep-2 ----- -空白对照 HeLa ----- -Hep-2 ----- -注“-”表示2管细胞无毒性，“+”表示部分细胞圆缩。
比拜克药粉以实际重量计。
表6 体外抗病毒试验结果药物 病毒 药物浓度 病毒对照 细胞对照1∶101∶201∶401∶80Adv3 -± ± +++ +++ -比拜克Adv7 -++ ++ +++ +++ -Rsv ± ++ ++ +++ +++ -Adv3 -++ ++ +++ +++ -病毒唑Adv7 ++ ++ ++ +++ +++ -Rsv ---+++ +++ -Adv3 +++ +++ +++ +++ +++ -空白对照 Adv7 +++ +++ +++ +++ +++ -Rsv +++ +++ +++ +++ +++ -注“-”表示细胞无病变，“±”表示部分细胞圆缩，“++”-“+++”表示细胞病变程度。
比拜克药粉以实际重量计。
结论比拜克药粉1∶10-1∶40浓度(10-2.5mg/ml)对Adv3型、1∶10浓度(10mg/ml)还对Adv7型和Rsv有抑制作用。阳性对照药病毒唑1∶10-1∶40浓度(1.0-0.25mg/ml)对Rsv、1∶10浓度(1.0mg/ml)还对Adv3型有抑制作用，但1∶10-1∶40浓度(1-0.125mg/ml)对Adv7型均不能抑制细胞内病变。空白对照均不能抑制细胞内病变。受试药比拜克药粉对Adv3型和Adv7型的抑制作用略优于病毒唑，病毒唑对Rsv的抑制作用较优于比拜克药粉。
实验例3 抗炎作用1小鼠二甲苯耳肿胀试验大鼠角叉菜胶足跖肿胀试验1、实验材料药物比拜克药粉，棕色粉末，每克相当于2.789g生药，由四川金辉药 业有限公司提供，批号990222。用蒸馏水配制成35.2、70.4、140.9mg/ml(分别相当98.2、196.3、393.0mg(生药)/ml)供低、中，高剂量组用。
阿司匹林肠溶片，白色片剂，50mg/片。海南碧凯药业有限公司生产，批号970915。用蒸馏水配制成50mg/ml备用。
角叉菜胶，由辽宁省药物研究所提供，配制成1％的浓度备用。
动物SD大鼠，雌雄各半，170-300g，由成都中医药大学实验动物中心提供，合格证号川实动管质第8号。
2、实验方法大鼠58只，依性别体重随机分为5组(见表7)，比拜克药粉低、中、高剂量组分别灌胃给予0.98、1.96、3.93g(生药)/kg(分别相当于临床日用量的5倍、10倍、20倍)，给药体积为1ml/100g，阴性组以等容量蒸馏水代替，每日一次，连续7日，阳性组灌胃给予阿司匹林肠溶片1g/kg(相当于临床抗风湿日用量的20倍)，给药体积为2ml/100g，每日一次，连续三日。末次给药后半小时用1％角叉菜肤0.1ml/只大鼠左后足跖中部皮下注射致炎，分别用容量法测定致炎前和后5分钟、30分钟、1小时、2小时、4小时、6小时足跖体积，以致炎前后足跖体积之差作为肿胀度，比较各组与蒸馏水组的差异。
3、实验结果结果见表7。
表中结果显示阿司匹林和比拜克药粉高剂量均具有明显的抗炎作用，比拜克药粉中剂量和低剂量抗炎作用不明显。
4、结论比拜克药粉对角叉某胶致大鼠足跖炎症在高剂量(3.93g(生药)/kg)时具有明显的抗炎作用。
表7 比拜克药粉对角叉菜胶大鼠足跖致炎作用的影响动物剂量分组 数 足跖肿胀度(ml，X±SD)(g/kg)(只)530 60120240 360(分)蒸馏水 --120.14±0.110.30±0.16 0.42±0.19 0.69±0.29 0.74±0.280.76±0.31阿司匹1 100.07±0.070.12±0.12** 0.10±0.10*** 0.19±0.19*** 0.28±0.31** 0.35±0.33**林比拜克 3.93 120.08±0.090.09±0.09*** 0.10±0.10*** 0.44±0.21*0.47±0.21* 0.49±0.24*比拜克 1.96 120.12±0.120.27±0.21 0.39±0.21 0.46±0.28 0.63±0.310.73±0.25比拜克 0.98 120.15±0.150.26±0.20 0.32±0.16 0.52±0.29 0.70±0.220.72±0.31注和蒸馏水相比，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001比拜克剂量为生药量。
实验例4 镇痛作用1扭体法1.1实验材料药物比拜克药粉，棕色粉末，每克相当于2.789g生药，由四川金辉药业有限公司提供，批号990222。用蒸馏水配制成17.5、35.0、70.5mg/ml(分别相当48.8、97.6、196.7mg(生药)/ml)供低、中、高剂量组用。
盐酸哌替啶注射液，无色透明液体，1ml/支，每支含盐酸哌替啶0.05g，批号950606，青海制药厂生产。用生理盐水配制成1.67mg/ml备用。
动物昆明种小鼠，雌雄各半，18-22g，由华西医科大学实验动物中心提供，合格证号川实动管质第67号。
1.2实验方法小鼠50只，依性别体重随机分为5组(见表8)，比拜克药粉低、中、高剂量组分别灌胃给予0.98、1.95、3.93g(生药)/kg(分别相当于临床日用量的5倍、10倍、20倍)，给药体积均为0.4ml/20g，阴性组以等容量的蒸馏水代替，每天给药一次，连续给药3天，阳性组仅在实验当日腹腔注射盐酸哌替啶注射液0.033g/kg(相当于临床日用量的20倍)一次，给药体积为0.4ml/20g，末次给药后半小时给小鼠腹腔注射0.6％的醋酸0.2ml/只，记录注射醋酸后15分钟内小鼠扭体次数，比较各纽与蒸馏水组的差异。
1.3实验结果结果见表8。
结果表明盐酸哌替啶和比拜克药粉低剂量能明显减少醋酸引起的扭体次数而具有显著的镇痛作用，比拜克药粉高、中剂量有镇痛作用的趋势，但与蒸馏水组比无显著差异。
表8 比拜克药粉对醋酸致小鼠疼痛的影响组别 剂量(g/kg) 动物数(只)扭体次数(X±SD)蒸馏水 - 1047.2±10.8盐酸哌替啶0.033104.7±6.7***比拜克3.93 1034.7±16.5比拜克1.95 1040.4±10.0比拜克0.98 1036.6±10.1*注和蒸馏水相比，*p＜0.05，***p＜0.001比拜克剂量为生药量1.4结论比拜克药粉低剂量(0.98g(生药)/kg)对小鼠醋酸引起的疼痛有显著的镇痛作用。
5 解热作用1大鼠2，4-二硝基酚致热试验1.1实验材料药物比拜克药粉，棕色粉末，每克相当于3.62g生药，由四川金辉药业有限公司提供，批号990521。用蒸馏水配制成27.1、54.3、108.6mg/ml(分别相当98.2、196.5、393.0mg(生药)/ml)供低、中、高剂量组用。
阿司匹林肠溶片，白色片剂，0.3g/片。西北第二合成药厂生产，批号981201。用蒸馏水配制成60mg/ml备用。
2，4-二硝基酚，黄色晶体，上海试剂三厂，以无水乙醇配制成1.25％的溶液备用。
动物SD大鼠，雌雄各半，200-290g，由成都中医药大学实验动物中心提供，合格证号川实动管质第8号。
仪器WMZ-03温度指示仪，上海医用仪表厂。
1.2实验方法实验前测大鼠肛温两次(温度指示仪探头插入肛门2cm处)，选择正常体温大鼠60只依性别体重随机分成5组(见表11)，比拜克药粉低、中、高剂量组分别灌胃给予0.98、1.96、3.93g(生药)/kg(分别相当于临床日用量的5倍、10倍、20倍)，阳性组灌胃给予阿司匹林0.6g/kg(相当于临床日用量的20倍)，给药体积均为1ml/100g，阴性组以等容量的蒸馏水代替，给药后半小时于大鼠背部皮下注射2，4-二硝基酚25mg/kg(体积0.2ml/100g)致热，分别测定致热后0.5、1、2、2.5、3小时的肛温，以致热前后肛温差值(致热后肛温-致热前肛温)作为观察指标，比较各组与蒸馏水组的差异。
1.3实验结果结果见表9。
表9 比拜克药粉对大鼠2，4-二硝基酚致热作用的影响动物数 - 肛温差值剂量组别(℃，X±SD)(g/kg) (只)0.5 1.0 2.02.5 3.0小时蒸馏-- 121.0±0.4 1.6±0.5 1.6±0.5 1.9±0.4 1.8±0.4水阿司0.6 120.3±0.3*** 0.8±0.7** 2.0±0.9 2.1±1.1 2.1±1.2※匹林比拜3.9312 0.5±0.3**0.7±0.4***1.0±0.8* 1.2±0.4***1.1±0.4***克比拜1.9612 0.6±0.3* 0.8±0.4***0.7±0.5***1.0±0.6***0.9±0.5***克比拜0.9812 0.4±0.3*** 0.4±0.4***0.9±0.9* 1.3±0.8* 1.4±0.7克注和蒸馏水相比，*P＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001比拜克剂量为生药量※180分钟时有两只雄性大鼠死亡，此时的动物数为10只结果显示阿司匹林在注射2，4-二硝基酚后0.5和1小时表现出解热作用，比拜克药粉高、中剂量在注射2，4-二硝基酚后0.5、1、2、2.5、3小时均表现为解热作用，比拜克药粉低剂量在注射2，4-二硝基酚后0.5、1、2、2.5小时也表现有解热作用。
1.4结论比拜克药粉高、中、低剂量对2，4-二硝基酚致热大鼠具有显著的解热作用，且较阿司匹林的解热作用维持时间更长。
2家兔蛋白胨致热试验2.1实验材料药物比拜克药粉，棕色粉末，每克相当于3.62g生药，由四川金辉药业有限公司提供，批号390521。用蒸馏水配制成54.1、108.3、216.6mg/ml(分别相当196、392、784mg(生药)/ml)供低、中、高剂量组用。
阿司匹林肠溶片，白色片剂，0.3g/片，西北第二合成药厂生产，批号9812022。用蒸馏水配制成120mg/ml备用。
蛋白胨F403，中国医药集团上海化学试剂公司，批号F990812。用蒸馏水配制成10％备用。
动物日本大耳白家兔，1.6-2.95kg，由成都中医药大学实验动物中心提供。
仪器欧姆龙MC-3B型电脑数字式体温计，欧姆龙大连有限公司产品。
2.2实验方法实验前测家兔肛温两次(温度计插入肛门2cm处)，选择正常体温家兔随机分成6组(见表10)，于大腿肌肉注射10％蛋白胨F403 10ml/kg致热，1小时后，比拜克药粉低、中、高剂量组分别灌胃给予0.98.1.96、3.92g(生药)/kg(分别相当于临床日用量的5倍、10倍、20倍)，阳性组灌胃给予阿司匹林。
表10 比拜克药粉对家兔蛋白胨致热作用的影响(℃，X±SD)动物数给药后肝温差值剂量组别(只)(♀，正常体温(g/kg) 1 2 3 45 6h♂)蒸馏水-- 7(3，4) 38.8±0.20.7±0.31.0±0.41.3±0.31.3±0.31.1±0.61.1±0.5阿司匹 0.2±0.4** 0.3±0.5* 0.4±0.3*0.6 9(5，4) 38.6±0.30.2±0.4* 0.6±0.71.0±0.6林 * ** **比拜克3.92 8(4，4) 38.9±0.30.0±0.7* 0.4±0.8* 0.7±0.91.0±0.51.0±0.51.0±0.5比拜克1.96 8(5，3) 38.6±0.20.1±0.5* 0.7±0.4* 0.9±0.51.0±0.51.2±0.61.3±0.5比拜克0.98 8(5，3) 38.7±0.20.4±0.50.6±0.50.8±0.61.0±0.61.1±0.61.1±0.6注和蒸馏水相比，*P＜0.05，***P＜0.001比拜克剂量为生药量0.6g/kg(相当于临床日用量的20倍)，给药体积均为5ml/kg，阴性组以等容量的蒸馏水代替，分别测定给药后1、2、3、4、5、6小时肛温，计算与正常体温的差值，比较各组与蒸馏水组的差异。
2.3实验结果结果见表10。
结果显示阿司匹林在给药后)1、2、3、4小时能使蛋白胨致热的家兔肛温显著降低，具有明显的解热作用，比拜克药粉高、中剂量组在给药后1小时表现出明显解热作用，其余时间点和低剂量组在给药后4小时以前仅有解热趋势，与蒸馏水组比较，无显著性差异。
2.4结论比拜克药粉高、中剂量对蛋白胨致热家兔有一定解热作用。
实验例6 通便作用1小肠推进试验1.1实验材料药物比拜克药粉，棕色粉末，每克相当于2.789g生药，由四川金辉药业有限公司提供，批号990222。用10％炭末混悬液配制成17.5、35.0、70.5mg/ml(分别相当48.8、97.6、196.7mg(生药)/ml)供低、中，高剂量组用。
大黄碳酸氢钠片，棕黄色片剂，0.15g/片。四川光大精益制药有限公司生产，批号970335。用10％炭末混悬液配制成0.45g/20ml备用。
动物昆明种小鼠，18-22g，由华西医科大学实验动物中心提供，合格证号川实动管质第67号。
1.2实验方法昆明种小鼠52只，依性别体重随机分为5组(见表11)，阳性组灌胃给予大黄碳酸氢钠片0.45g/kg(相当于临床日用量的20倍)，比拜克药粉低、中、高剂量组分别灌胃给予0.98、1.95、3.93g(生药)/kg(分别相当于临床日用量的5倍、10倍、20倍)，给药体积均为0.4ml/20g，阴牲组以等容量的10％。
表11 比拜克药粉对小鼠小肠推进的影响组别剂量(g/kg) 动物数(只，♀，♂) 炭末推进率％阴性组 ----11(6，5) 49.8±10.1大黄碳酸氢钠0.4510(5，5) 79.8±19.3***比拜克 3.9310(5，5) 74.3±22.1**比拜克 1.9511(6，5) 67.1±10.2***比拜克 0.9810(5，5) 57.6±15.6注与阴性组比较**p＜0.01，***p＜0.001比拜克剂量为生药量炭末混悬液代替，给药后15分钟，断颈处死，解剖，分离出幽门至回盲部的小肠，测定幽门至回盲部的小肠全长和幽门至炭末最前端的长度，计算小肠推进率＝炭末前端与幽门距离(cm)/小肠全长(cm)×100％。
1.3实验结果结果见表11。
1.4结论比拜克药粉高、中剂量能显著促进小鼠小肠推进功能，而低剂量促进小肠推进功能不明显。
2小鼠粪性腹膜炎模型试验2.1实验材料药物比拜克药粉，棕色粉末，每克相当于2.789g生药，由四川金辉药业有限公司提供，批号990222。用10％炭末混悬液配制成17.5、35.0，70.5mg/ml(分别相当48.8、97.6、196.7mg(生药)/ml)供低、中、高剂量组用。
大黄碳酸氢钠片，棕黄色片剂，0.15g/片。四川光大精益制药有限公司生产，批号970335。用10％炭末混悬液配制成0.45g/20ml备用。
动物昆明种小鼠，雌雄各半，18-22g，由华西医科大学实验动物中心提供，合格证号川实动管质第67号。
2.2实验方法取小鼠自家粪少许，磨碎，加生理盐水混悬，以四层纱布滤去渣滓，取此种滤液每只小鼠腹腔注射0.5ml，18小时后可见小鼠竖毛，卷曲少动，不吃食，解剖2只见腹腔内有少许液体，部分肠管充血，多数充气膨胀，部分痉挛。取50只此种小鼠，随机分为5组，另10只小鼠不给粪液作正常对照(见表12)，阳性组灌胃给予大黄碳酸氢钠片0.45g/kg(相当于临床日用量的20倍)，比拜克药低、中、高剂量组分别灌胃给予0.98、1.96，3.93g(生药)/kg(分别相当于临床日用量的5倍、10倍、20倍)，给药体积均为0.4ml/20g，模型组和正常对照组以等容量的10％炭末混悬液代替，记录首次排黑粪的时间(超过7小时以7小时计)和7小时内排粪粒数，并比较各组与模型组的差异。
表12 比拜克药粉对粪性腹膜炎小鼠炭末粪排出时间及粪粒数的影响(X±SD)组别 剂量(g/kg)动物数(只)黑粪出现时间(分 7小时内排粪粒钟) 数(粒)正常对照组 ---- 10 148.0±36.6***6.8±2.6***模型组 ---- 10 305.1±91.2 2.4±2.3大黄碳酸氢 0.45 10 199.5±96.6***7.3±4.8***钠比拜克 3.93 10 210.7±91.6***6.9±4.3***比拜克 1.95 10 261.4±87.0** 3.6±3.2**比拜克 0.98 10 313.9±105.2 2.10±2.8注与模型组比较**P＜0.01，***P＜0.001比拜克剂量为生药量2.3实验结果结是果见表12。
模型组与正常对照组比较，黑粪出现时间显著延长，7小时内粪粒数显著减少，表明造模成功。大黄碳酸氢钠片和比拜克药粉高、中剂量能使粪性腹膜炎小鼠的黑粪出现时间提前，使7小时内粪粒数增加，具有显著的通便作用。
2.4结论比拜克药粉高、中剂量对粪性腹膜炎小鼠具有显著的通便作用。
下述实施例均能实现上述实验例的效果。
实施例1 胶囊剂大黄(酒制)200g 熊胆粉10g 黄芩200g桔梗200g白芷200g鱼腥草400g 薄荷100g以上七味，酒制大黄以75％乙醇适量浸润，70±5℃干燥，粉碎成细粉，熊胆粉粉碎成细粉，过筛备用；白芷、鱼腥草、薄荷加10倍水提取挥发油5小时，收集挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再用3倍量水洗涤2次，滤过，合并3次水溶液，备用；另取β-环糊精10.5g，加10倍水溶解，缓慢滴加上述挥发油的乙醇溶液，挥发油∶乙醇＝1∶1，在30±2KHz的超声波下超声1小时，冷藏过夜，抽滤，室温减压下干燥，过80目筛，备用；其余二味将黄芩切成小段，与桔梗加水煎煮两次，第一次加8倍量沸水，第二次加6倍量水，每次1.5小时，合并煎液，滤过。滤液与上述收集的水溶液合并，浓缩至80℃相对密度为1.10-1.15，喷雾干燥，得干浸膏粉。取干浸膏粉与酒制大黄粉，熊胆粉，以及挥发油β-环糊精包含物及适量淀粉，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。
实施例2 颗粒剂大黄(酒制)230g 熊胆粉15g 黄芩230g桔梗230g白芷230g鱼腥草440g 薄荷130g以上七味，酒制大黄以70％乙醇适量浸润，80℃干燥，粉碎成细粉，熊胆粉粉碎成细粉，过筛备用；白芷、鱼腥草、薄荷加11倍水提取挥发油5小时，收集挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再用3倍量水洗涤2次，滤过，合并3次水溶液，备用；另取β-环糊精10.5g，加10倍水溶解，缓慢滴加上述挥发油的乙醇溶液，挥发油∶乙醇＝1∶1，在35KHz的超声波下超声1小时，冷藏过夜，抽滤，室温减压下干燥，过85目筛，备用；其余二味将黄芩切成小段，与桔梗加水煎煮两次，第一次加8倍量沸水，第二次加6倍量水，每次1.5小时，合并煎液，滤过。滤液与上述收集的水溶液合并，浓缩至80℃相对密度为1.10-1.15，喷雾干燥，得干浸膏粉。取干浸膏粉与酒制大黄粉，熊胆粉，以及挥发油β-环糊精包含物及适量淀粉，制成颗粒剂380g。
实施例3片剂大黄(酒制)180g 熊胆粉8g黄芩180g桔梗180g白芷180g鱼腥草380g 薄荷80g以上七味，酒制大黄以78％乙醇适量浸润，65℃干燥，粉碎成细粉，熊胆粉粉碎成细粉，过筛备用；白芷、鱼腥草、薄荷加9倍水提取挥发油5小时，收集挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再用3倍量水洗涤2次，滤过，合并3次水溶液，备用；另取β-环糊精10.5g，加10倍水溶解，缓慢滴加上述挥发油的乙醇溶液，挥发油∶乙醇＝1∶1，在25KHz的超声波下超声1.5小时，冷藏过夜，抽滤，室温减压下干燥，过75目筛，备用；其余二味将黄芩切成小段，与桔梗加水煎煮两次，第一次加8倍量沸水，第二次加6倍量水，每次1.5小时，合并煎液，滤过。滤液与上述收集的水溶液合并，浓缩至80℃相对密度为1.10-1.15，喷雾干燥，得干浸膏粉。取干浸膏粉与酒制大黄粉，熊胆粉，以及挥发油β-环糊精包含物及适量淀粉，经常规制成片剂1000片。
实施例4胶囊剂的质量控制方法鉴别a.取本品内容物1g，加甲醇20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；取大黄对照药材粉末0.5g，同法操作制成对照药材溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以7∶3∶0.1苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b.取本品内容物2.5g加甲醇超声2次，每次30ml，15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加10％氢氧化钠溶液20ml超声使溶解，100℃加热水解2小时，放冷，用盐酸调pH值至2-3，用醋酸乙酌萃取3次，每次15ml，合并醋酸乙酯液，用水洗涤3次，每次40ml，醋酸乙酯液水浴蒸干，残渣用甲醇1ml使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液；另取鹅去氧胆酸及熊去氧胆酸对照品，分别加甲醇制成每1ml各含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以10∶5∶5∶3∶1异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20％硫酸溶液，于105℃烘5分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c.取本品内容物4g，加甲醇40ml，超声20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调pH至3-4，加醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一以1％醋酸钠制备的0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以5∶3∶1∶1醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；d.取本品内容物4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法甲法(中国药典2000年版一部附录X D)连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流4小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；另取甲基正壬酮对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含10μg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以19∶1苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；e.取本品内容物4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法甲法(中国药典2000年版一部附录X D)连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流4小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；取薄荷脑对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以9∶1正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2∶8香草醛硫酸试液-乙醇的混合溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定a.大黄素、大黄酚照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；85∶15甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相；检测波长为254nm；理论板数按大黄素峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备，精密称取大黄素、大黄酚对照品各10mg，分别置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；作为大黄素，大黄酚对照品贮备液；分别精密量取大黄素对照品贮备液1ml、大黄酚对照品贮备液2ml，分别置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得大黄素每1ml中含4μg、大黄酚每1ml中含8μg；供试品溶液的制备，取本品装量差异项下的内容物，混匀，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，于30±2KHz的超声波下超声处理1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补充减失的重量，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每粒含大黄以大黄素(C15H10O5)和大黄酚(C15H10O4)的总量计，不得少于0.7mg；b.黄芩苷照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；47∶53∶0.2甲醇-水-磷酸为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；对照品溶液的制备，精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含20μg溶液，即得；供试品溶液的制备，取装量差异项下的内容物，混匀，取28.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，加50％乙醇适量，超声处理15分钟，放冷，加50％乙醇稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测淀法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每粒含黄芩按黄芩苷(C12H18O11)计，不得少于6.0mg。
权利要求
1.一种治疗急性咽炎、牙龈炎的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下述原料药制成的大黄160-240重量份熊胆粉5-18重量份 黄 芩160-240重量份桔梗160-240重量份白 芷160-240重量份 鱼腥草350-450重量份薄荷60-140重量份。
2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下述原料药制成的大黄200重量份熊胆粉10重量份 黄芩200重量份 桔梗200重量份白芷200重量份鱼腥草400重量份 薄荷100重量份。
3.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下述原料药制成的大黄230重量份熊胆粉15重量份 黄芩230重量份 桔梗230重量份白芷230重量份鱼腥草440重量份 薄荷130重量份。
4.如权利要求1-3所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物中大黄优选酒制大黄。
5.如权利要求4所述的中药组合物，其特征在于该组合物加入赋型剂制备成片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、口服液体制剂、咀嚼剂、气雾剂、软胶囊中的一种。
6.如权利要求5所述的中药组合物胶囊剂的制备方法，其特征在于该方法为酒制大黄以60-85％乙醇适量浸润，60-80℃干燥，粉碎成细粉，熊胆粉粉碎成细粉，过筛备用；白芷、鱼腥草、薄荷加9-11倍水提取挥发油4-6小时，收集挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再用2-4倍量水洗涤1-3次，滤过，合并水溶液，备用；另取β-环糊精10.5重量份，加9-11倍水溶解，缓慢滴加上述挥发油的乙醇溶液，挥发油∶乙醇＝1-2∶1-2，在20-40KHz的超声波下超声1-2小时，冷藏过夜，抽滤，室温减压下干燥，过70-90目筛，备用；其余二味将黄芩切成小段，与桔梗加6-8倍水煎煮1-3次，每次1-2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述收集的水溶液合并，浓缩至70-85℃相对密度为1.10-1.15，喷雾干燥，得干浸膏粉；取干浸膏粉与酒制大黄粉，熊胆粉，以及挥发油β-环糊精包含物及适量0-20重量份淀粉，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。
7.如权利要求6所述的中药组合物胶囊剂的制备方法，其特征在于该方法为酒制大黄以75％乙醇适量浸润，65-75℃干燥，粉碎成细粉，熊胆粉粉碎成细粉，过筛备用；白芷、鱼腥草、薄荷加10倍水提取挥发油5小时，收集挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣再用3倍量水洗涤2次，滤过，合并3次水溶液，备用；另取β-环糊精10.5重量份，加10倍水溶解，缓慢滴加上述挥发油的乙醇溶液，挥发油∶乙醇＝1∶1，在28-32KHz的超声波下超声1小时，冷藏过夜，抽滤，室温减压下干燥，过80目筛，备用；其余二味将黄芩切成小段，与桔梗加水煎煮两次，第一次加8倍量沸水，第二次加6倍量水，每次1.5小时，合并煎液，滤过；滤液与上述收集的水溶液合并，浓缩至80℃相对密度为1.10-1.15，喷雾干燥，得干浸膏粉；取干浸膏粉与酒制大黄粉，熊胆粉，以及挥发油β-环糊精包含物及适量淀粉，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。
8.如利要求5所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种a.取本组合物制剂1g，加甲醇20ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；取大黄对照药材粉末0.5g，同法操作制成对照药材溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以6-8∶2-4∶0.1-0.2苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b.取本组合物制剂2.5g加甲醇超声1-3次，每次30ml，10-20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加8-12％氢氧化钠溶液20ml超声使溶解，95-105℃加热水解1-3小时，放冷，用盐酸调pH值至2-3，用醋酸乙酌萃取2-4次，每次15ml，合并醋酸乙酯液，用水洗涤2-4次，每次40ml，醋酸乙酯液水浴蒸干，残渣用甲醇1ml使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液；另取鹅去氧胆酸及熊去氧胆酸对照品，分别加甲醇制成每1ml各含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以9-11∶4-6∶4-6∶2-4∶1-2异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以15-25％硫酸溶液，于100-110℃烘4-7分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c.取本组合物制剂4g，加甲醇40ml，超声15-25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调pH至3-4，加醋酸乙酯提取1-3次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一以1％醋酸钠制备的0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以4-6∶2-4∶1-2∶1-2醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；d.取本组合物制剂4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法中国药典2000年版一部附录XD连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流3-5小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；另取甲基正壬酮对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含10μg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以18-20∶1-2苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；e.取本组合物制剂4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法中国药典2000年版一部附录XD连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流3-5小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；取薄荷脑对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以7-10∶1-2正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-3∶7-9香草醛硫酸试液-乙醇的混合溶液，在95-110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
9.如利要求8所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于胶囊剂的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种a.取本品内容物1g，加甲醇20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；取大黄对照药材粉末0.5g，同法操作制成对照药材溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以7∶3∶0.1苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b.取本品内容物2.5g加甲醇超声2次，每次30ml，15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加10％氢氧化钠溶液20ml超声使溶解，100℃加热水解2小时，放冷，用盐酸调pH值至2-3，用醋酸乙酌萃取3次，每次15ml，合并醋酸乙酯液，用水洗涤3次，每次40ml，醋酸乙酯液水浴蒸干，残渣用甲醇1ml使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液；另取鹅去氧胆酸及熊去氧胆酸对照品，分别加甲醇制成每1ml各含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以10∶5∶5∶3∶1异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20％硫酸溶液，于105℃烘5分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c.取本品内容物4g，加甲醇40ml，超声20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调pH至3-4，加醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一以1％醋酸钠制备的0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以5∶3∶1∶1醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；d.取本品内容物4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法甲法连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流4小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；另取甲基正壬酮对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含10μg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以19∶1苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；e.取本品内容物4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法甲法连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流4小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；取薄荷脑对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，取上述两种溶液与上述对照品溶液各10μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以9∶1正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2∶8香草醛硫酸试液-乙醇的混合溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
10.如利要求5所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法包括如下含量测定中的一种或两种a.大黄素、大黄酚照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；80-90∶10-20甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相；检测波长为254nm；理论板数按大黄素峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备，精密称取大黄素、大黄酚对照品各10mg，分别置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀作为大黄素，大黄酚对照品贮备液；分别精密量取大黄素对照品贮备液1ml、大黄酚对照品贮备液2ml，分别置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得大黄素每1ml中含4μg、大黄酚每1ml中含8μg；供试品溶液的制备，取本组合物制剂0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，于20-40KHz的超声波下超声处理1-2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补充减失的重量，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本组合物制剂每单位量含大黄以大黄素和大黄酚的总量计，不得少于6.5-8mg；b.黄芩苷照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；43-53∶50-58∶0.1-0.3甲醇-水-磷酸为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；对照品溶液的制备，精密称取在55-65℃减压干燥3-5小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含20μg溶液，即得；供试品溶液的制备，取本组合物制剂28.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，加45-55％乙醇适量，超声处理10-25分钟，放冷，加45-55％乙醇稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测淀法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本组合物制剂每单位量含黄芩按黄芩苷计，不得少于55-65mg。
11.如利要求10所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于胶囊剂的含量测定方法包括如下含量测定中的一种或两种a.大黄素、大黄酚照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；85∶15甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相；检测波长为254nm；理论板数按大黄素峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备，精密称取大黄素、大黄酚对照品各10mg，分别置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；作为大黄素，大黄酚对照品贮备液；分别精密量取大黄素对照品贮备液1ml、大黄酚对照品贮备液2ml，分别置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得大黄素每1ml中含4μg、大黄酚每1ml中含8μg；供试品溶液的制备，取本品装量差异项下的内容物，混匀，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，于30±2KHz的超声波下超声处理1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补充减失的重量，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每粒含大黄以大黄素和大黄酚的总量计，不得少于0.7mg；b.黄芩苷照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；47∶53∶0.2甲醇-水-磷酸为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；对照品溶液的制备，精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含20μg溶液，即得；供试品溶液的制备，取装量差异项下的内容物，混匀，取28.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，加50％乙醇适量，超声处理15分钟，放冷，加50％乙醇稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测淀法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每粒含黄芩按黄芩苷计，不得少于6.0mg。
12.如权利要求5所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法包括以下步骤鉴别a.取本组合物制剂1g，加甲醇20ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；取大黄对照药材粉末0.5g，同法操作制成对照药材溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以6-8∶2-4∶0.1-0.2苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b.取本组合物制剂2.5g加甲醇超声1-3次，每次30ml，10-20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加8-12％氢氧化钠溶液20ml超声使溶解，95-105℃加热水解1-3小时，放冷，用盐酸调pH值至2-3，用醋酸乙酌萃取2-4次，每次15ml，合并醋酸乙酯液，用水洗涤2-4次，每次40ml，醋酸乙酯液水浴蒸干，残渣用甲醇1ml使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液；另取鹅去氧胆酸及熊去氧胆酸对照品，分别加甲醇制成每1ml各含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以9-11∶4-6∶4-6∶2-4∶1-2异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以15-25％硫酸溶液，于100-110℃烘4-7分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c.取本组合物制剂4g，加甲醇40ml，超声15-25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调pH至3-4，加醋酸乙酯提取1-3次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一以1％醋酸钠制备的0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以4-6∶2-4∶1-2∶1-2醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；d.取本组合物制剂4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法中国药典2000年版一部附录XD连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流3-5小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；另取甲基正壬酮对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含10μg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以18-20∶1-2苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；e.取本组合物制剂4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法中国药典2000年版一部附录XD连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流3-5小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；取薄荷脑对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以0.4-0.6％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以7-10∶1-2正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-3∶7-9香草醛硫酸试液-乙醇的混合溶液，在95-110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定f.大黄素、大黄酚照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；80-90∶10-20甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相；检测波长为254nm；理论板数按大黄素峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备，精密称取大黄素、大黄酚对照品各10mg，分别置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀作为大黄素，大黄酚对照品贮备液；分别精密量取大黄素对照品贮备液1ml、大黄酚对照品贮备液2ml，分别置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得大黄素每1ml中含4μg、大黄酚每1ml中含8μg；供试品溶液的制备，取本组合物制剂0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，于20-40KHz的超声波下超声处理1-2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补充减失的重量，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本组合物制剂每单位量含大黄以大黄素和大黄酚的总量计，不得少于6.5-8mg；g.黄芩苷照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；43-53∶50-58∶0.1-0.3甲醇-水-磷酸为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；对照品溶液的制备，精密称取在55-65℃减压干燥3-5小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含20μg溶液，即得；供试品溶液的制备，取本组合物制剂28.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，加45-55％乙醇适量，超声处理10-25分钟，放冷，加45-55％乙醇稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测淀法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本组合物制剂每单位量含黄芩按黄芩苷计，不得少于55-65mg。
13.如权利要求12所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于胶囊剂方法包括以下步骤鉴别a.取本品内容物1g，加甲醇20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；取大黄对照药材粉末0.5g，同法操作制成对照药材溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以7∶3∶0.1苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b.取本品内容物2.5g加甲醇超声2次，每次30ml，15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加10％氢氧化钠溶液20ml超声使溶解，100℃加热水解2小时，放冷，用盐酸调pH值至2-3，用醋酸乙酌萃取3次，每次15ml，合并醋酸乙酯液，用水洗涤3次，每次40ml，醋酸乙酯液水浴蒸干，残渣用甲醇1ml使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液；另取鹅去氧胆酸及熊去氧胆酸对照品，分别加甲醇制成每1ml各含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5-8μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以10∶5∶5∶3∶1异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20％硫酸溶液，于105℃烘5分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c.取本品内容物4g，加甲醇40ml，超声20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调pH至3-4，加醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一以1％醋酸钠制备的0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以5∶3∶1∶1醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；d.取本品内容物4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法甲法连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流4小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；另取甲基正壬酮对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含10μg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以19∶1苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；e.取本品内容物4g，置圆底烧瓶中，加水250ml，照挥发油提取法甲法连接挥发油测定器；自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯0.5ml，连接回流冷凝管，加热回流4小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液；取薄荷脑对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以9∶1正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2∶8香草醛硫酸试液-乙醇的混合溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定f.大黄素、大黄酚照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；85∶15甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相；检测波长为254nm；理论板数按大黄素峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备，精密称取大黄素、大黄酚对照品各10mg，分别置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；作为大黄素，大黄酚对照品贮备液；分别精密量取大黄素对照品贮备液1ml、大黄酚对照品贮备液2ml，分别置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得大黄素每1ml中含4μg、大黄酚每1ml中含8μg；供试品溶液的制备，取本品装量差异项下的内容物，混匀，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，于30±2KHz的超声波下超声处理1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补充减失的重量，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每粒含大黄以大黄素和大黄酚的总量计，不得少于0.7mg；g.黄芩苷照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；47∶53∶0.2甲醇-水-磷酸为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；对照品溶液的制备，精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含20μg溶液，即得；供试品溶液的制备，取装量差异项下的内容物，混匀，取28.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，加50％乙醇适量，超声处理15分钟，放冷，加50％乙醇稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；测淀法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每粒含黄芩按黄芩苷计，不得少于6.0mg。
全文摘要
本发明公开了一种治疗急性咽炎、牙龈炎的中药组合物及其制备方法和质量控制方法。该组合物由大黄、熊胆粉、黄芩、桔梗、白芷、鱼腥草、薄荷组成。该中药组合物制备时采用煎煮、蒸馏、乙醇提取方法，达到使有效药物的充分发挥，同时本发明还提供了对该组合物进行成分鉴别、含量测定的质量控制方法。本组合物有很好的泻火解毒，疏风散热功效。
文档编号A61P11/04GK1565613SQ03148878
公开日2005年1月19日 申请日期2003年6月16日 优先权日2003年6月16日
发明者钱辉, 鞠晓蓉, 何祖兴 申请人:四川金辉药业有限公司