专利名称：一种治疗和预防骨质疏松症的中药及其制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗和预防骨质疏松症的药物，特别是涉及一种治疗和预防骨质疏松症的中药，本发明还涉及该药物的制备工艺。
背景技术：
骨质疏松症是绝经后妇女和老年人的一种常见病及多发病，目前已成为人类最常见的疾病之一。随着人口的不断增长及老龄化社会的到来，骨质疏松症及其引起的骨折已成为一个严重的社会问题，影响了人类的健康。许多人因此长期遭受肉体上的痛苦，甚至伤残及早逝，且高额的医疗费用也给患者家庭和社会带来了巨大的精神压力和沉重的经济负担。因此，骨质疏松症的防治已成为全社会关注的热点。Manners等报道，美国每年由骨质疏松症引起骨折的病人约为150万例，治疗费用高达150-300亿美元，骨质疏松患者估计有1000万例。日本1990年统计，全国65岁以上1500万老年人中约有1/3的人数患有骨质疏松症。至2000年我国60岁以上的老人已达1.3亿，患骨质疏松症约为6000-8000万人，这些均为治疗骨质疏松类药提供了广阔的市场。
目前对骨质疏松症的治疗主要依靠药物治疗，大体包括雌激素替代治疗(尼乐雌醇、利维爱)、降钙素(益盖宁、密钙息)、VD(罗钙全、阿法骨化醇)及钙制剂等。但这些药物大多价格昂贵，且有较明显的副作用。由于患者钙吸收能力的差异，有关药物的疗效尚难确定，而其他疗法(光线、运动、营养疗法等)只能作为辅助性治疗。因此，积极研制开发治疗骨质疏松症的药物十分必要。
发明内容
本发明的目的是提供一种副作用少、疗效好的治疗和预防骨质疏松症的中药。
本发明的另一目的是提供该药的制备工艺。
本发明的技术方案是利用中医学在本病中具有的明显优势。中药复方通过多种药物的有机配伍，标本兼治，既可通过补益作用延缓衰老，减少骨量丢失，又可促进钙的吸收和利用，还能有效止痛，迅速缓解患者的痛苦，比单纯的化合物和生物制剂具有更多的优势，且中药为天然产物，毒副作用小，用药更加安全，更能为患者所接受。
本发明由淫羊藿、骨碎补、炒杜仲、制首乌、怀牛膝、土鳖虫等六味中药组成，药味辛、苦、酸、甘相合，补肾、益精、通络、祛风、活血止痛并收；药性有温有寒，无温燥耗阴、苦寒败胃之弊，阴阳互补，标本兼治。其中君药淫羊藿禀性辛温，专入肝肾，功擅补肾壮阳，强健筋骨，兼能祛风通络，散寒除湿，既能扶正又能祛邪，标本兼治。骨碎补、炒杜仲均味苦性温，专入肝肾，既有补肝肾、强筋骨之功，又有通血脉、祛寒邪之长，二者均能加强淫羊藿补益肝肾，强健筋骨、祛风通络之力，均用为臣药。佐以制首乌补血滋阴，填精益髓，除加强上述三味补益肝肾，强筋健骨之力外，又有兼制淫羊藿辛温耗伤阴液之弊，从而共收阴阳共补之效。土鳖虫咸寒，专入肝经，破血逐瘀、续筋接骨，与上述诸药相伍，有补有通，动静结合，故亦用为佐药。怀牛膝苦酸性平，专入肝肾二经，既能补益肝肾、强健筋骨，又能活血通络、引血下行，在标本兼治的同时，且能引诸药直达病所，故用为使药。
本发明的目的可以通过下列措施实现的一种治疗和预防骨质疏松症的中药，它是主要由下列重量份的原料药制成淫羊藿8-12份、骨碎补4-6份、炒杜仲4-6份、制首乌4-6份、怀牛膝3-5份、土鳖虫2-4份。
本发明的目的还可以通过下列措施实现的所述的中药，各重量份的原料药优选淫羊藿10份、骨碎补5份、炒杜仲5份、制首乌5份、怀牛膝4份、土鳖虫3份。
所述中药的药剂是任何一种药剂学上所说的剂型。
所述中药的药剂可以是丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、滴丸剂、糖浆剂、酒剂、口服液剂、气雾剂。
一种治疗和预防骨质疏松症的中药的制备工艺，包含下列步骤a.按配方取原料药淫羊藿、骨碎补、炒杜仲、制首乌、怀牛膝用10-15倍量的50-60％乙醇回流提取3次，每次1-3小时，滤过，滤液合并；b.药渣与土鳖虫合并加6-10倍量水煎煮1-3次，每次1-2小时，滤过，滤液合并；c.将步骤b所得的滤液浓缩至密度为1.1至1.3；d.加乙醇至醇浓度达到50～70％，静置冷藏24-48小时，离心，滤过；e.a的滤液与d的滤液合并，回收乙醇至无醇味，加水至生药量的5-7倍，冷藏24-48小时，离心，滤除沉淀后加入矫味剂，混匀，加水至每毫升含生药1.0-1.2克，滤过，灌封，灭菌，制成液体制剂。
所述的制备工艺中步骤e是将合并后的滤液浓缩，干燥，粉碎，加入常用辅料混和均匀，制成固体制剂。
本发明的优点本发明提供的中药组方精当，标本兼治，疗效好，且中药为天然产物，毒副作用小，用药更加安全，更能为患者所接受。
本发明的药效学试验试验中本发明药物均按实施例1制备。
药效学试验采用两种大鼠骨质疏松症模型维甲酸诱导及老龄大鼠卵巢摘除模型，以骨生物力学、骨形态计量学、骨密度及血清学指标观察、评价本发明药物对实验性骨质疏松症的预防和治疗作用。
实验1、本发明药物对维甲酸造模大鼠骨参数的影响1、实验方法SD大鼠，雄性，3月龄，将大鼠随机分组，正常对照组大鼠灌胃给予水10ml/kg；其余大鼠灌胃给予维甲酸70mg/kg，共45天，然后大鼠腹腔注射(ip)0.7％戊巴比妥钠35mg/kg麻醉，测定活体全身骨密度。结果表明造模大鼠体重下降，全身骨矿含量、骨面积及骨密度皆明显降低，与正常大鼠之间有显著性差异，表明造模成功。随即将造模成功大鼠随机分为5组，其中一组作为模型对照组，另外4组为给药组，加上正常对照组共6组。灌胃给药如下正常对照组及模型对照组给予水10ml/kg；给药组本发明低、中、高剂量组分别给予本发明药物1.5、3.0、6.0g生药/kg，阳性药组灌胃依替膦酸二钠片50mg/kg，连续给药45天。除正常对照组外，其余各组给药期间，每周2次灌胃维甲酸70mg/kg。末次给药后，大鼠股动脉放血处死，收集血液分离血清测定热不稳定性碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)；分离大鼠双侧股骨、胫骨，取股骨进行骨密度测量。
2、实验结果造模大鼠体重下降，全身骨矿含量、骨面积及骨密度皆明显降低，表明造模成功，结果见表1。
表1.维甲酸对大鼠全身骨参数的影响(造模45天)(n＝10，x±SD)组别 体重(g) 骨矿含量(g) 扫描面积(cm2) 骨密度(g/cm2)正常对照组 347±19 5.350±0.646 15.214±1.451 0.354±0.010造模组 300±35**3.653±0.617***10.616±1.704***0.344±0.009*
与正常对照组比较*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001给药45天后，模型对照组大鼠体重下降，离体股骨骨矿含量、骨面积及骨密度皆明显降低。本发明药物高剂量组骨密度有升高趋势，结果见表2。
表2.本发明药物对维甲酸造模大鼠股骨参数的影响(造模90天)(n＝10，x±SD)剂量 扫描面积骨密度组别 体重(g)骨矿含量(g)(g/kg)(cm2)(g/cm2)正常对照组 388±230.147±0.040 0.475±0.135 0.309±0.009模型对照组 344±33*0.082±0.023***0.280±0.076*0.294±0.013*阳性药组343±280.106±0.033 0.358±0.110 0.295±0.017本发明药物组 1.5 347±300.105±0.038 0.366±0.130 0.287±0.0143.0 354±230.102±0.024 0.346±0.074 0.294±0.0166.0 359±380.096±0.027 0.319±0.093 0.303±0.008与正常对照组比较*p＜0.05，***P＜0.001实验结果表明发明药物6.0g生药/kg组对于维甲酸诱导的大鼠骨质疏松症的骨密度降低有升高作用，对大鼠血清热不稳定性碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)有一定程度降低，见表3，显示了改善大鼠维甲酸诱导骨质疏松症的趋势。
表3.本发明对维甲酸造模大鼠血清学指标的影响(造模90天)(n＝10，x±SD)热不稳定性ALP组别 剂量(g/kg) StrACP(U/L)(U/dl)正常对照组 22.7±5.6 5.0±2.1模型对照组 39.1±8.9***8.2±1.6**阳性药组 43.7±8.4 5.8±2.2#本发明药物组1.5 46.3±8.4 7.1±3.23.0 43.6±7.2 9.7±2.26.0 43.7±11.0 7.7±1.7与正常组比较**p＜0.01，***p＜0.001；与模型对照组比较#P＜0.05实验2、本发明药物对摘除卵巢诱导大鼠骨质疏松症的影响将老年雌性大鼠随机分为2批，一批为预防给药，另一批为治疗给药。每批6组，分别为正常对照组，模型对照组，阳性药组及本发明药物低、中、高三个剂量(1.5、3.0、6.0g生药/kg)组。所有大鼠腹腔注射0.7％戊巴比妥钠35mg/kg麻醉，俯位固定，在背部脊柱两侧切口，于无菌条件下正常对照组不摘除卵巢，仅去除部分脂肪；造模大鼠则摘除双侧卵巢。预防给药大鼠在手术三天后以灌胃途径开始预防给药其中正常对照组及模型对照组给予蒸馏水5ml/kg；阳性药组灌胃尼尔雌醇1.0mg/kg；本发明药物低、中、高剂量组分别给予本发明药物1.5、3.0、6.0g生药/kg。除阳性药组大鼠隔天给药外，其余大鼠均每天给药，连续90天。治疗给药大鼠在手术45天后随机选取正常鼠及造模鼠各10只，戊巴比妥钠麻醉后进行活体骨密度测量，统计结果表明模型对照组大鼠骨密度与正常对照组比较明显降低。此时开始给药，分组、给药途径、给药剂量及给药期限同预防给药。
所有大鼠给药80、87天时两次腹腔注射四环素20mg/kg进行骨荧光标记，给药末日股动脉放血，收集血液分离出血清测定热不稳定性ALP及StrACP。另取出大鼠股骨及第四腰椎骨，分离周围结缔组织后分别进行股骨骨形态计量学测定、股骨骨密度测量、股骨三点弯曲实验及椎骨压缩实验。
2、实验结果1)去卵巢45天后，模型对照组骨密度与正常对照组比较明显降低，表明造模成功，见表4。
表4.摘除卵巢造模后股骨双能X线骨密度测定组别动物数(只)BMD(g/cm2)(x±SD)正常对照组 10 0.374±0.010模型对照组 10 0.363±0.007*与正常对照组比较*p＜0.052)与模型组相比，正常组及预防给药各给药组骨密度都有一定程度的增加，见表5。
表5.本发明预防给药对去势大鼠股骨密度的影响(n＝10，x±SD)组别 骨密度(BMD)g/cm2正常对照组 0.1920±0.0201模型对照组 0.1773±0.0113阳性药(尼尔雌醇)组 0.1854±0.0144本发明药物(低)组0.1878±0.0105本发明药物(中)组0.1783±0.0149本发明药物(高)组0.1863±0.01293)与模型对照组相比，正常对照组及各治疗给药组骨密度都有一定增加，本发明药品高剂量组表现出明显差异。见表6。
表6.本发明药物治疗给药对去势大鼠股骨密度的影响(n＝10，x±SD)分组骨密度(BMD)g/cm2正常对照组 0.1817±0.0141模型对照组 0.1778±0.0107阳性药(尼尔雌醇)组 0.1829±0.0124本发明药物(低)组 0.1802±0.0114本发明药物(中)组 0.1739±0.0053本发明药物(高)组 0.1963±0.0156*
与模型对照组比较*p＜0.05在老龄大鼠卵巢摘除去势模型中，本发明药物预防及治疗给药均能显著降低血清抗酒石酸酸磷酸酶活性，明显提高骨小梁体积百分比、校正矿化率，降低骨吸收表面百分比及矿化时间，对其它多项检测指标亦有不同程度的改善，从总体水平提高模型鼠的骨质量。综合数据显示本发明药物6.0g生药/kg组给药疗效相对更好，且改善某些指标程度与尼尔雌醇相当。
本发明的毒理学试验1、急性毒性试验本发明药物的急性毒性试验结果表明在最大给药容量和最大给药浓度条件下，小鼠口服灌胃本发明药物剂量相当于116g生药/kg后活动减少，常匍卧不动，易惊，动物无死亡。给药后约24小时后，行为、活动基本恢复正常。在以后的观察期内，未见明显异常症状。该用药剂量相当于人临床用药量的232倍。
2、长期毒性试验对本发明药物进行了大鼠口服灌胃的长期毒性试验研究。Sprague-Dawley大鼠160只，试验分为高剂量组(29g生药/kg)、中剂量组(14.5g生药/kg)、低剂量组(5.8生药/kg)及空白对照组(蒸馏水)，每组动物40只，雌雄各半。给药途径为灌胃给药，每天一次，每周给药6天，试验周期为27周。各试验组留1/3动物以观察4周恢复期变化。按中药(新药)临床前指导原则的长期毒性试验要求观察了动物的一般状况、体重增长变化、血液细胞学及生化学指标、大体解剖及组织病理学检查。
结果表明，各剂量组动物和对照组给药后行为活动如常，一般情况良好。高剂量组动物及中剂量组雌性动物在第4-10周时体重与对照组比较增长较为缓慢，该变化的原因一方面是在给药初期在大剂量下动物不适应，另一方面是由于高剂量组给药量(浸膏重量)比较大从而可能影响了动物对饲料的利用，因此高剂量组动物的体重增长缓慢并不是药物自身的毒性所致。其余组动物体重增长值与对照组相比无显著差异，对动物的摄食量没有显著影响。血液学实验表明，给药6月及恢复期高剂量组动物的凝血时间延长，是由于处方中含有活血化瘀类中药的缘故。其余各项指标均在正常范围内波动。血液生化学实验表明，高剂量组雌性动物连续给药3月、高中剂量组动物及低剂量组雌性动物连续给药6月时血清ALP明显高于同时期的对照组，是本发明药物进成骨细胞增殖、提高ALP活性，与本发明药效学试验具有提高血清热不稳定性ALP的趋势，能在体外增加成骨细胞数目、提高ALP活性相一致。高剂量组雌性动物的脾脏系数在统计学上显著高于对照组，主要原因是由于高剂量组动物体重增长缓慢而同时其脏器重量与对照组比较未见显著性差异，从而使得高剂量组雌性动物脾脏系数显著增高，但是根据病理检查结果上述器官中还未发生明显的病理改变。恢复期后，高剂量组动物的脾脏脏器系数已正常，说明这些变化可以恢复。高中剂量组在连续给药3月及恢复期时给药组的子宫(卵巢)系数明显高于对照组，是由于本发明药物促进性器官生长的作用。病理切片结果显示，给药15周和27周后，高剂量组和对照组各主要脏器均未见明显的病理改变。本发明药物在高剂量对体重增长以及脾脏器系数有一些影响，而中、低剂量下的各项检测指标基本正常。综上所述，本发明药物连续灌胃给药27周，对大鼠的无毒剂量为14.5生药g/kg。若人以60kg计，对大鼠的无毒剂量约相当于人用剂量的29倍。
具体实施例方式
下面通过实施例进一步对本发明加以说明，所列实施例中每份的量均以100克计。
实施例1按配方取淫羊藿10份、骨碎补5份、炒杜仲5份、制首乌5份、怀牛膝4份用15倍量的50％乙醇回流提取三次，每次2小时，滤过，滤液合并得滤液a；药渣与土鳖虫3份合并加8倍量水煎煮2次，每次1.5小时，滤过，滤液合并，浓缩至密度为1.2，加乙醇至醇浓度达到50％，静置冷藏24小时，离心，滤过得滤液b；滤液a与滤液b合并，回收乙醇至无醇味，加水至生药量的6倍，冷藏36小时，离心，滤除沉淀后加入矫味剂，混匀，加水至每毫升含生药1.07克，滤过，灌封，灭菌，制成液体制剂。
实施例2按配方取淫羊藿12份、骨碎补4份、炒杜仲4份、制首乌4份、怀牛膝5份用15倍量的60％乙醇回流提取三次，每次3小时，滤过，滤液合并得滤液a；药渣与土鳖虫4份合并加10倍量水煎煮3次，每次1小时，滤过，滤液合并，浓缩至密度为1.3，加乙醇至醇浓度达到60％，静置冷藏24小时，离心，滤过得滤液b；滤液a与滤液b合并，回收乙醇至无醇味，加水至生药量的5倍，冷藏24小时，离心，滤除沉淀后加入矫味剂，混匀，加水至每毫升含生药1.2克，滤过，灌封，灭菌，制成液体制剂。
实施例3按配方取淫羊藿8份、骨碎补6份、炒杜仲5份、制首乌5份、怀牛膝4份用15倍量的55％乙醇回流提取三次，每次2小时，滤过，滤液合并得滤液a；药渣与土鳖虫2份合并加6倍量水煎煮3次，每次2小时，滤过，滤液合并，浓缩至密度为1.1，加乙醇至醇浓度达到70％，静置冷藏36小时，离心，滤过得滤液b；滤液a与滤液b合并，回收乙醇至无醇味，加水至生药量的7倍，冷藏48小时，离心，滤过，滤液浓缩，减压干燥，干燥物混匀，加入羧甲基淀粉钠适量，混匀，打成细粉。95％乙醇溶液适量制粒，干燥，整粒，分装，包装即得。
权利要求
1.一种治疗和预防骨质疏松症的中药，其特征在于它是主要由下列重量份的原料药制成淫羊藿8-12份、骨碎补4-6份、炒杜仲4-6份、制首乌4-6份、怀牛膝3-5份、土鳖虫2-4份。
2.根据权利要求1所述的中药，其特征在于各重量份的原料药优选淫羊藿10份、骨碎补5份、炒杜仲5份、制首乌5份、怀牛膝4份、土鳖虫3份。
3.根据权利要求1或2所述中药，其特征在于所说的药剂是任何一种药剂学上所说的剂型。
4.根据权利要求3所述中药，其特征在于所说的药剂可以是丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、滴丸剂、糖浆剂、酒剂、口服液剂、气雾剂。
5.一种治疗和预防骨质疏松症的中药的制备工艺，其特征是包含下列步骤a.按配方取原料药淫羊藿、骨碎补、炒杜仲、制首乌、怀牛膝用10-15倍量的50-60％乙醇回流提取3次，每次1-3小时，滤过，滤液合并；b.药渣与土鳖虫合并加6-10倍量水煎煮1-3次，每次1-2小时，滤过，滤液合并；c.将步骤b所得的滤液浓缩至密度为1.1至1.3；d.加乙醇至醇浓度达到50～70％，静置冷藏24-48小时，离心，滤过；e.a的滤液与d的滤液合并，回收乙醇至无醇味，加水至生药量的5-7倍，冷藏24-48小时，离心，滤除沉淀后加入矫味剂，混匀，加水至每毫升含生药1.0-1.2克，滤过，灌封，灭菌，制成液体制剂。
6.根据权利要求5所述的制备工艺，其特征是步骤e是将合并后的滤液浓缩，干燥，粉碎，加入常用辅料混和均匀，制成固体制剂。
全文摘要
本发明公开了一种治疗和预防骨质疏松症的中药及其制备工艺，该中药由重量份的淫羊藿8－12份、骨碎补4－6份、炒杜仲4－6份、制首乌4－6份、怀牛膝3－5份、土鳖虫2－4份组成。该中药的制备工艺为按配方取原料药淫羊藿、骨碎补、炒杜仲、制首乌、怀牛膝通过醇提，滤过，合并滤液；药渣与土鳖虫合并用水煎煮，滤过，合并滤液，滤液浓缩，加乙醇至醇浓度达到50～70％，静置冷藏，离心，滤过；滤液合并，收醇，制成所需剂型。本发明提供的中药组方精当，标本兼治，疗效好，且中药为天然产物，毒副作用小，用药更加安全，更能为患者所接受。
文档编号A61P19/00GK1634167SQ20031011278
公开日2005年7月6日 申请日期2003年12月26日 优先权日2003年12月26日
发明者祝璇, 郭立中, 唐海英, 王冬春, 檀爱民, 杨玲 申请人:江苏先声药业有限公司